INFLUÊNCIA DO COLCEMID EM ANÁLISES DE DOSIMETRIA CITOGENÉTICA: OTIMIZAÇÃO METODOLÓGICA
Colcemid; dosimetria citogenética; dicêntricos; cultura prolongada
O ensaio de cromossomos dicêntricos em linfócitos do sangue periférico é a técnica padrão-ouro em dosimetria citogenética para avaliar a dose de radiação absorvida. Neste ensaio, o Colcemid é empregado para bloquear a mitose na metáfase, mas sua toxicidade torna crítica a escolha da concentração e do instante de adição na cultura. Nesse contexto, este estudo investigou a influência desses fatores nos protocolos de análise de dicêntricos em biodosimetria. As amostras de sangue periférico de voluntários foram separadas em duas alíquotas: uma não irradiada (controle) e outra irradiada com 6 Gy (Gammacell ⁶⁰Co). Posteriormente, as amostras foram cultivadas in vitro por 72h. No primeiro experimento, o Colcemid foi adicionado no início da cultura (t = 0h) em concentrações de 0,05 µg/mL e 0,10 µg/mL. No segundo, as mesmas concentrações foram testadas, mas adicionadas em instantes diferentes: 24h e 45h de cultura. Após a incubação, as células foram coradas pela técnica FPG e analisadas por microscopia óptica. Os resultados mostraram que a concentração de 0,05 µg/mL, adicionada no início da cultura, proporcionou os melhores índices mitóticos e frequência de metáfases em primeira divisão (> 90%), eliminando a necessidade da coloração FPG. Além disso, 63% das metáfases apresentaram qualidade adequada para análise. Conclui-se que essa abordagem melhora a precisão da análise dicêntrica em biodosimetria, especialmente para exposições individuais a altas doses de radiação (> 4 Gy).