O presente estudo teve como objetivo co-encapsular quercetina (QUER) e ceftazidima (CAZ) em nanopartículas de zeína (ZNPs), caracterizar suas propriedades físico-químicas e avaliar a atividade antibacteriana e antibiofilme frente Klebsiella pneumoniae resistente a antibióticos. As ZNPs foram sintetizadas pelo método de nanoprecipitação e apresentaram tamanho de partícula (Ø) variando entre 181 e 201 nm, índice de polidispersão (PDI) inferior a 0,1, potencial zeta (ζ) entre -46,4 e -45,2 mV e pH de 7,1. As imagens obtidas por microscopia eletrônica de varredura (MEV) evidenciaram morfologia esférica e distribuição homogênea das nanopartículas, enquanto as curvas termogravimétricas indicaram perda de massa progressiva com aumento da temperatura, sendo mais acentuada entre 230 e 320 °C. A estabilidade das nanopartículas foi confirmada por análises realizadas ao longo de 365 dias, que demonstraram ausência de alterações significativas no Ø, PDI, ζ, pH e doseamento, mesmo após liofilização e armazenamento. Os testes de atividade antibacteriana, baseados na concentração inibitória mínima (CIM) e na concentração bactericida mínima (CBM), confirmaram a eficácia antibacteriana frente à K. pneumoniae. Além disso, ensaios antibiofilme, realizados pelo método do cristal violeta e microscopia eletrônica de varredura, demonstraram a capacidade das ZNPs em inibir e erradicar biofilmes bacterianos. A formulação nanoparticulada, QUER–CAZ–ZNP apresentou características físico-químicas ideais para aplicações in vivo, assim como demonstrou potencial antibacteriano e antibiofilme, destacando-se como uma estratégia promissora para o tratamento de infecções causadas por K. pneumoniae resistente a antibióticos e produtora de biofilme.

A leishmaniose visceral (LV) é uma grave zoonose causada por protozoários do gênero Leishmania spp., que afeta principalmente as populações mais pobres das áreas endêmicas. No Brasil, a região Nordeste registra o maior número de casos de LV, com destaque para o Maranhão, que apresenta a maior prevalência da doença, e o Piauí, que detém o maior índice de letalidade. Pernambuco ocupa a quinta posição em número de casos registrados. Nesse cenário, políticas públicas têm sido implementadas para fortalecer as ações de combate à LV. O município de Goiana, em Pernambuco, é um dos 11 municípios do estado afetados pela leishmaniose visceral, mas ainda há escassez de estudos específicos sobre a doença na região. Diante disso, foi realizado um estudo transversal, observacional, descritivo, quantitativo e prospectivo, com o objetivo de determinar a prevalência de Leishmaniose visceral em humanos e descrever variáveis biológicos, socioeconômicos e ambientais relacionadas com a transmissão da doença em áreas endêmicas, no município de Goiana/PE. Dez distritos foram incluídos no estudo, sendo encontrados casos assintomáticos positivos para LV em cinco deles. Todos os indivíduos diagnosticados residiam em áreas rurais próximas a fragmentos florestais. A prevalência de infectados assintomáticos foi de 2,8%. O distrito com maior concentração de casos foi Atapuz, com três casos positivos, seguido por Gambá, São Lourenço, Carrapicho e Carne de Vaca, com um caso cada. Todos os indivíduos positivos apresentavam baixa escolaridade, e em 85,71% das residências foi registrado a presença de fatores de isco no peridomicílio, como galinheiros e cães. Os resultados evidenciam que as áreas de maior risco estão localizadas em regiões rurais próximas a matas, com presença de animais no peridomicílio. Esse cenário reforça a necessidade de intensificar ações de educação e saúde voltadas ao controle da LV, com foco nas áreas de maior risco identificadas na região.

A artrite reumatoide (AR) é uma condição autoimune inflamatória crônica, caracterizada por intensa dor, inchaço e rigidez nas articulações. Essa patologia pode acometer qualquer articulação sinovial do corpo, em ambos os sexos. Além disso, o processo inflamatório desencadeado em pacientes com AR estar associado a múltiplos fatores, sendo um deles a microbiota intestinal (MI). A MI desempenha um papel crucial na regulação de processos metabólicos que contribuem para a homeostase e ações imunológicas do hospedeiro. Esse processo desempenhado pela MI, consiste na fermentação de componentes obtidos através da dieta, como os polissacarídeos. Nesse contexto, o objetivo do trabalho é avaliar a atividade anti-inflamatória do polissacarídeo sulfatado extraído da túnica de Styela plicata e sua modulação na microbiota intestinal. O extrato polissacarídico sulfatado (EPS) foi obtido da túnica de S. plicata por ciclos de desproteinização usando papaína e precipitação etanólica (95 %; 1:3 v/v) e purificado por cromatografia de troca iônica. As frações polissacarídicas obtidas (FI, FII e FIII) foram caracterizadas quimicamente quanto ao teor de carboidratos totais (CT), proteínas e sulfato (TS) e para a que apresentasse maior rendimento em extração e pureza seriam realizados os testes de atividade prebiótica in vitro e a atividade anti-inflamatória in vivo. Além disso, foi avaliado o perfil de segurança do EPS através de um teste de toxicidade in vivo, o qual não apresentou efeitos tóxicos (alterações hematológicas, bioquímicas e histopatológicas) nos camundongos tratados com doses de 2.000 mg/Kg. A atividade anti-inflamatória in vivo foi desenvolvida segundo um modelo de artrite agudo induzido por Adjuvante Completo de Freund (CFA) utilizando camundongos C57BL/6 e avaliada através de testes de hipernocicepção mecânica, quantificação de edema, dosagem de citocinas, modulação da microbiota intestinal e análise histopatológica. Após precipitação etanólica, o EPS apresentou um rendimento de 2,3%. As frações FI, FII e FII foram obtidas com rendimento de 6,75% (CT = 17,56%; TS = 6,30%), 9,05% (CT = 27,57%; TS = 5,40%) e 4,32% (CT = 20,91%; TS = 7,32%), respectivamente, e todas apresentaram traços de proteínas (< 1%). No ensaio da atividade prebiótica in vitro, a FII não foi utilizada como fonte de carbono para o crescimento de Lactobacillus rhamnosus e Bifidobacterium longum. No modelo anti-inflamatório in vivo, a administração oral diária de FII em doses de 10 mg/Kg e 100 mg/Kg, durante 14 dias, não apresentou efeitos sistêmicos adversos, e foi capaz de reduzir o edema de pata (10 e 30%, respectivamente) e aumentar significativamente o limiar de hipernocicepção dos animais em aproximadamente 80% a partir do sexto dia, quando comparados ao controle negativo. Na dose de 10 mg/Kg, FII foi capaz de aumentar a concentração da citocina anti-inflamatória IL-10 e reduzir a concentração de citocinas pró-inflamatórias IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-17A e IL-2, na pata artrítica, que pela análise histopatológica, apresentou redução de infiltrado inflamatório e região dorsal integra. Além disso, o tratamento com FII (10 e 100 mg/kg) modulou a microbiota intestinal dos animais, promovendo o crescimento de gêneros bacterianos associados à saúde e homeostase intestinal como Lactobacillus e Bifidobacterium. Pelos resultados apresentados, a FII apresentou um potencial efeito anti-inflamatório no tratamento de doenças agudas como a artrite, e cujo efeito pode estar associado à modulação da microbiota intestinal, sugerindo, assim, novas estratégias terapêuticas para patologias inflamatórias.

Um bom cuidado ginecológico é vital para a saúde da mulher As infecções sexualmente transmissíveis (ISTs) estão entre as condições agudas mais incidentes, sendo a infecção pelo papilomavírus humano (HPV) a mais comum em todo o mundo. Os HPVs de alto risco (hrHPVs) estão associados ao desenvolvimento de lesões cervicais e ao câncer do colo do útero (CCU). O método de rastreio do CCU com o exame de Papanicolaou é bem estabelecido, no entanto, apresenta desvantagens nas análises de resultados. A citologia em meio líquido foi introduzida como método alternativo à citologia convencional. A associação entre o HPV e câncer levou ao desenvolvimento de testes moleculares.Ao contrário da citologia que identifica as lesões, os testes moleculares detectam o DNA do HPV e permitem a genotipagem do vírus, sendo considerados também mais sensíveis. A adesão populacional é fundamental para o sucesso da implementação do rastreio do CCU. Existem várias razões pelas quais as mulheres participam da triagem. A autocoleta se mostra como opção para reduzir algumas barreiras e aumentar o número de participação das mulheres. Desta forma, o objetivo do trabalho foi determinar o perfil de prevalência dos genótipos de HPVs de alto risco, identificar os resultados citológicos e avaliar a aceitabilidade da autocoleta quanto a sua realização em uma população de triagem. Mulheres entre 25 e 64 anos foram recrutadas para participarem do rastreio do CCU em sete unidades de saúde na cidade de Recife.As unidades foram divididas em duas quanto a forma de coleta: a autocoleta e a coleta realizada por um profissional de saúde. Em todas as amostras foram realizados o teste de DNA-hrHPV e o exame citológico. Nas mulheres que realizaram a autocoleta , a citologia foi realizada de forma convencional enquanto que no outro grupo, a citologia em base líquida foi o método escolhido. Para as que realizaram a própria coleta foi questionado quanto a viabilidade de realização. No total, 959 mulheres aceitaram participar dos testes, 484 realizaram a própria coleta e 475 tiveram amostras coletadas por um profissional. Houve um total de 143 pacientes (15%) positivas para hrHPV. Dessas amostras, 95 (66,40%) foram caracterizadas como positivas para hrHPV. O HPV16 (16,80%) foi o segundo subtipo mais comum, seguido pelo HPV45 (7%) e pelo HPV18 (3,50%). Os resultados citológicos mostraram uma participante com adenocarcinoma invasivo e uma com carcinoma escamoso.No total, 82,79% apresentaram citológico sem alterações malignas, no entanto, 9,20% dessas apresentaram positividade para algum tipo de hrHPV. As alterações citológicas mais frequentes foram as lesões de alto grau (4,38%) ASC-H (2,60%), ASCUS (2,50%), seguidas de lesões de baixo grau (1,46%). Das mulheres que realizaram a autocoleta, 280/484 responderam quanto à viabilidade do método e 87,15% afirmaram que o teste é fácil de realizar. A sensibilidade do teste molecular permite uma atenção maior à mulher antes dela apresentar algum sintoma, isso é importante para os programas de saúde voltados para a mulher. A identificação dos genótipos mais frequentes na população permite um planejamento adequado quanto ao programa de vacinação. Nosso trabalho mostra uma maior frequência de resultados positivos para hrHPV, sem especifidades quanto aos genótipos seguido do HPV16, HPV45 E HPV18, que também são frequentes em todo o mundo. Além disso, a autocoleta se mostra como uma boa alternativa de método de coleta, quanto a realização e resultados.

Infecções bacterianas representam um dos maiores problemas de saúde pública mundial. A resistência bacteriana aos aminoglicosídeos, como a tobramicina (TOBRA), pode ocorrer devido à dificuldade de penetração do antibiótico nas bactérias, baixa afinidade com o ribossomo bacteriano ou inativação por enzimas microbianas. Embora eficaz contra Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii, há um aumento na resistência à TOBRA em cepas hospitalares, impulsionado pelo uso indiscriminado de antimicrobianos e fatores de virulência como o biofilme. A pandemia de COVID-19, iniciada em 2019, exacerbou esse problema. Houve um aumento significativo de infecções por bactérias multidroga-resistentes ao comparar os períodos pré-pandêmico e pandêmico. Além disso, a pressão sobre os sistemas de saúde levou ao uso mais frequente e, por vezes, inadequado de antimicrobianos, contribuindo para o aumento da resistência bacteriana. Estima-se que microrganismos resistentes a antibióticos causem 1,27 milhões de mortes anualmente, e esse número tende a aumentar devido à falha terapêutica associada aos antibióticos atualmente disponíveis. A busca por novas estratégias terapêuticas é crucial diante desse cenário, sobretudo compostos naturais, como o ácido úsnico (AU). Este composto natural tem demonstrado um amplo potencial antibacteriano e antibiofilme em numerosos estudos científicos, tornando-se uma alternativa promissora para o combate a infecções resistentes e a formação de biofilmes bacterianos. Nesse sentido, uma abordagem terapêutica inovadora é necessária e a associação da TOBRA e do AU é uma alternativa. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana e antibiofilme do AU isolado e em combinação com a TOBRA frente a isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii. A avaliação da atividade antibacteriana de TOBRA e AU foi realizada pela determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) utilizando os métodos de microdiluição em caldo de acordo com o CLSI. A interação entre as moléculas foi verificada através do método do Checkerboard. A atividade antibiofilme das moléculas foi realizada através do método do cristal violeta para a determinação da Concentração Inibitória Mínima do Biofilme (CIMB). O AU demonstrou CIMs acima de 1000 μg/mL frente as cepas de Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii, sendo ineficazes contra as cepas testadas, enquanto a TOBRA apresentou eficácia variável com CIMs entre 15,62 e >1000 μg/mL e CBMs entre 31,25 e >1000 μg/mL para P. aeruginosa e CIMs entre 7,81 e 1000 μg/mL e CBMs entre 31,25 e 1000 μg/mL para A. baumannii. A ação de AU+TOBRA indicou uma interação variada (aditiva, indiferente e antagonista). No entanto, sobre a atividade antibiofilme, a combinação AU+TOBRA se mostrou significativamente mais eficaz do que os tratamentos isolados. A combinação reduziu os valores de CIMB em até 32 vezes para AU e 16 vezes para TOBRA, destacando uma potencialização na capacidade de inibição do biofilme. Esses resultados destacam o potencial da combinação de AU+TOBRA como uma estratégia promissora contra bactérias patogênicas de importância médica, em especial produtoras de biofilme.

O vírus chikungunya (CHIKV) é um Alphavirus da família Togaviridae endêmico no Brasil. A arbovirose associada a ele, a febre chikungunya (FCHIK), é uma das mais recorrentes no mundo e amplamente conhecida pelo seu principal sintoma: a artralgia. O manejo de tratamento da doença é realizado com medicamentos voltados para a sintomatologia. Ainda não há medicamentos aprovados para uso na clínica, que sejam específicos para a contenção da evolução do vírus. Em contrapartida, o óleo de Copaíba é um oleoresina derivado da árvore Copaifera sp., característica dos biomas da Amazônia e cerrado. Esse óleo é amplamente utilizado na medicina popular com finalidade antimicrobiana, anti inflamatória e analgésica, além de estudos científicos que investigam outra propriedade, a de antiviral. Melhores formas de entrega para fármacos e bioativos são atrelados a nanotecnologia, sendo um desses métodos o desenvolvimento de nanoemulsões para fins de otimização. Dessa forma, o objetivo geral deste trabalho foi analisar as características de uma nanoemulsão de óleo de Copaíba e avaliar sua atividade antiviral in vitro contra o CHIKV. A metodologia do trabalho consistiu na realização do controle de qualidade das nanoformulações, avaliando seus parâmetros de tamanho, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta, e caracterização do óleo e nanoemulsão por CG-EM para determinação dos seus componentes. Além disso, realizou-se docking molecular com os componentes do óleo de Copaíba descritos em literatura e as proteínas estruturais (capsídeo, E1, E2 e E3) e não estruturais (nsP1-4) do CHIKV, Posteriormente, realizou-se ensaio de citotoxicidade da nanoemulsão de óleo de Copaíba em célula Vero CCL-81, e, por fim, avaliação da atividade antiviral por protocolo de pós infecção. As análises estatísticas foram realizadas no GraphPad Prism v.8.0.2 considerando p < 0,005. Os resultados apontaram uma conservação dos parâmetros de PDI e potencial zeta quando comparados com o estudo anterior desenvolvido no grupo de pesquisa. O parâmetro do tamanho apresentou variações, porém, após a padronização, comprovamos o efeito da sonicação na modificação deste parâmetro na nanoemulsão, e alcançou o tamanho de 216 nm. Em relação às caracterizações por CG-EM, foi demonstrado que o Cariofileno é o composto majoritário presente no óleo, e o processo de formulação o conserva também na NO. Os componentes β-Bisaboleno, β-Copaeno e α-Copaeno demonstraram promissoras interações in silico com as proteínas nsP3, spC e spP1,2 do CHIKV. Através do ensaio da citotoxicidade, além de demonstrar a ausência de interferência do tamanho da partícula e citotoxicidade, determinou-se o valor de 15 μg/ml como CC50. Além disso, no ensaio antiviral, por análise observacional, pode-se destacar a redução do título viral no grupo da nanoemulsão com o óleo (NO), contudo é necessário o aumento no n amostral. Nesse contexto, faz-se necessário retornar ao processo de caracterização da nanoemulsão para esclarecimentos mais aprofundados acerca da oscilação do parâmetro de tamanho e uma possível correlação com a atividade biológica.

O câncer é uma das principais causas de mortalidade global, impulsionando a busca por novos agentes terapêuticos eficazes e com baixa toxicidade. Proteínas extraídas de plantas, como o Inibidor de Tripsina de Enterolobium contortisiliquum (EcTI), têm mostrado potencial antitumoral ao interferirem em vias relacionadas à adesão, invasão e migração celular cancerígena. As características das células tumorais podem ser estudadas em Caenorhabditis elegans, um modelo experimental relevante devido à sua simplicidade e conservação de vias e proteínas com os mamíferos. O presente estudo, teve como objetivo, avaliar a toxicidade e o potencial antineoplásico do EcTI utilizando o C. elegans. Os vermes foram tratados na fase larval L1 por 44 horas com EcTI em diferentes concentrações de EcTI 10; 50; 100; 500 e 1000 μmol.L-1 e água Milli-Q® para análises de sobrevivência, comportamento, proteômica e corpos apoptóticos. Para a análise de produção de ovos, a exposição foi de 72 horas. Foi realizada uma análise de docking molecular para avaliar a interação proteína-proteína entre o EcTI e as proteínas da via de sinalização da apoptose em C. elegans. Nossos resultados mostram que o EcTI não impacta significativamente na sobrevivência e nos processos fisiológicos dos nematoides. Na análise de docking, o EcTI demonstrou maior afinidade pelo CED-4. A cepa MD701 apresentou um aumento no número de corpos apoptóticos na linhagem germinativa. Além disso, foram identificadas proteínas diferencialmente expressas, que estão envolvidas em vários tipos de cânceres, indicando resposta ao tratamento com EcTI. Este trabalho contribui para o entendimento dos mecanismos de ação do EcTI e sugere seu potencial como agente terapêutico no tratamento do câncer

A colostroterapia, que envolve a administração orofaríngea de colostro humano em recém-nascidos prematuros de baixo peso (RNPBP), tem sido investigada como uma estratégia para melhorar a saúde desses neonatos, especialmente em unidades de cuidados intensivos neonatais (UTIN). O colostro é rico em imunoglobulinas, lactoferrina e outros fatores imunológicos que podem auxiliar na maturação do sistema imunológico e na prevenção de infecções em RNPBP, um grupo particularmente vulnerável a complicações graves e infecções. O objetivo deste estudo foi analisar o impacto das características maternas, comorbidades e intervenções sobre os desfechos neonatais em RNPBP hospitalizados em unidades de cuidados intensivos e intermediários do Instituto de Medicina Integral Professor Fernando Figueira (IMIP), em Pernambuco, submetidos à colostroterapia versus placebo. Assim, tratou-se de um estudo clínico randomizado, cego e placebo controlado, realizado no IMIP, em Recife, Pernambuco. Foram incluídos 49 recém-nascidos prematuros e de baixo peso, nascidos com idade gestacional ≤ 37 semanas e peso menor ou igual a 2 kg, entre outubro de 2023 e fevereiro de 2024. Os neonatos foram randomizados em dois grupos: grupo A (n = 29), submetido à administração orofaríngea de colostro, e grupo B (n = 20), que recebeu placebo. A colostroterapia foi realizada e as variáveis maternas e neonatais foram coletadas a partir de prontuários eletrônicos. A análise das características maternas revelou que a maioria das mães era jovem, solteira e com nível de escolaridade de ensino médio. Ademais, a prevalência de comorbidades maternas, como hipertensão, diabetes e infecções, foi baixa. Os resultados mostraram que a colostroterapia teve um impacto positivo na estabilização de parâmetros vitais como a frequência cardíaca e a saturação de oxigênio dos neonatos. Além disso, como produto do presente estudo, foram criados um protocolo operacional padrão de colostroterapia para implantação em serviços que prestam assistência à saúde com foco em prematuros e uma cartilha educativa para as puérperas. Sugere-se que a colostroterapia pode ser uma intervenção eficaz e segura para melhorar os desfechos clínicos em recém-nascidos prematuros de baixo peso, contribuindo para a redução de complicações e mortalidade neonatal. A implementação de um protocolo operacional padrão para colostroterapia nas UTIN pode representar um avanço significativo na assistência neonatal em unidades de saúde pública, especialmente em regiões com altos índices de prematuridade, como o Nordeste do Brasil.

A resistência aos antimicrobianos é um problema grave, que implica em elevada taxa de morbi-mortalidade. Alternativas aos antibióticos convencionais devem ser ações prioritárias da ciencia. A Curcuma longa L, conhecida popularmente como curcuma, turmeric ou açafrão, apresenta potencial medicinal antimicrobiano validado. Entretanto, os curcuminoides, incluíndo a curcumina – principal fitoconstituinte, são hidrofóbicos, fotossensíveis e apresentam dificuldade em transpor a membrana plasmática. A nanotecnologia e suas ferramenteas de otimização da entrega de substâncias bioativas, são extensivamente estudadas para contrapor essas caractristicas de baixa biodisponibilidade, destacando-se as nanoemulsões (NEs), uma vez que esses sistemas apresentam alta eficiência de carregamento, maior superficie de contato, estabilidade de diluição e podem ser usadas para melhorar a eficácia terapêutica e reduzir efeitos tóxicos, além de aumentar a solubilidade dos bioativos. Nesse sentido, o presente trabalho objetivou desenvolver, caracterizar e avaliar a atividade antibacteriana de nanoemulsões de óleo natural contendo curcumina da Curcuma longa (CUR). As NEs foram preparadas pelo método de emulsificação espontânea seguida de sonicação e a formulação foi desenhada tendo em observância os valores de HBL dos tensoativos e do óleo. Inicialmente, várias formulações foram elaboradas e comparadas, sendo selecionadas 2, de acordo com as propriedades fisico-químicas obtidas, para a produção das NEs com curcumina encapsulada. Dessa forma, obteve-se duas NEs contendo 500µg/mL de CUR, produzidas com aquecimento a aproximadamente 40°C, contendo óleo de oliva (5%) e os tensoativos tween 80 (5%) e span 80 (2,5%), sendo adicionados 87,5% de água. A NE-CUR-1 apresentou tamanho de partícula (Ø) de 165,40± 2,56, PDI de 0,254, potencial zeta (ζ) de -33,20± 1,35, pH de 6,49 e eficiência de encapsulação de 99%, enquanto a NE-CUR-2 apresentou tamanho de partícula (Ø) de 105,70± 4,13, PDI de 0,459, potencial zeta (ζ) de -32,10± 1,45, pH de 6,40 e eficiência de encapsulação de 99,29%. A determinação da concentração inibitória mínima (CIM) foi realizada pelo método de microdiluição em caldo seguindo protocolo do Clinical and Laboratory Standards Institute, para as bactérias Acinetobacter baumannii ATCC 19606, Escherichia coli ATCC 13846, Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli H10406, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 33591. As NEs mostraram-se com perfil bacteriostático para a maioria das bactérias avaliadas. A CIM variou entre 125 e 250 µg/mL. As bactérias mais sensíveis foram as S. aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 33591 e E. faecalis ATCC 29212, para as quais a NE-CUR-1 apresentou inibição do crescimento em uma dose de 125 µg/mL. Foi realizada ainda a avaliação, pelo método Checkerboard, da interação das NEs com a ceftazidima frente aos isolados clínicos resistentes de K. pneumoniae (K. pneumoniae ATCC 13883 e os isolados clínicos K25-A2, K26-A2, K29-A2, K31-A2 produtores de bomba de efluxo). As NE-CUR-1 e NE-CUR-2 mostraram-se capazes de reduzir a dose da ceftazidima frente a essas cepas resistentes, observando-se que as NEs contendo CUR apresentam predominantemente um perfil sinérgico com a ceftazidima. Para a K25-A2, foi possível verificar uma redução de 128 vezes na CIM da ceftazidima (de 512 para 4 µg/mL) quando associada com a NE-CUR-1 e de 16 vezes na CIM da ceftazidima (de 512 para 32 µg/mL) quando associada com a NE-CUR-2. Assim, as nanoemulsões desenvolvidas apresentam características físico-químicas ideiais para futuros estudos in vivo, potencializando a atividade antibacteriana da ceftazidima, tornando-se uma estratégia promissora para o tratamento de infecções bacterianas resistentes causadas por K. pneumoniae.

Introdução: A pandemia da COVID-19 ocasionou um grande impacto nos serviços de saúde levando a milhões de mortes em todo o mundo. De modo geral, alguns questionamentos ainda não foram totalmente elucidados. A relação das taxas de mortalidade em pacientes graves e o desenvolvimento de infecções secundárias parecem variar de acordo com a área geográfica, sendo até hoje, não totalmente compreendida. Outro fator observado, é que alguns pacientes com a forma grave da doença apresentam alterações em diversos mediadores circulatórios e um processo hiperinflamatório que, em muitos casos, culmina em desfechos adversos. Objetivos: Avaliar o perfil clínico, inflamatório e a prevalência de microrganismos causadores de infecções secundárias em pacientes com COVID-19 grave. Métodos: Foi realizado um estudo retrospectivo unicêntrico com 1.364 pacientes com COVID-19 grave na UTI durante o período de 2020 a 2022. Foram analisadas características clínicas e resultados das culturas microbiológicas. Posteriormente, foi realizado um estudo prospectivo para avaliar o perfil de gravidade de pacientes adultos, diagnosticados com SRAG por COVID-19 na UTI. Amostras de swabs nasofaríngeos e orofaríngeos foram coletadas para diagnóstico por meio da extração do RNA viral e RT-qPCR em tempo real. Biomarcadores hematológicos e bioquímicos de rotina foram analisados e amostras de sangue total foram coletadas para dosagem dos níveis séricos de citocinas (IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IFN-γ e TNF) e quimiocinas (CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, CXCL8/IL-8, CXCL9/MIG, e CXCL10/IP-10). Resultados: Fungos patogênicos foram isolados em 327 culturas sendo encontradas espécies de Candida, dessas 56,98% (186/327) foram C. albicans, 19,6% (64/327) C. tropicalis, 14,4% (47/327) C. parapsilosis, 1,5% (05/327) Nakaseomyces glabrata e 0,3% (01/327) Pichia kudriavzevii. Foram isolados fungos em amostras respiratórias 40,4% (132/327), hemoculturas 21,4% (70/327) e urina 37,9% (124/327). Bactérias patogênicas foram isoladas em 1.086 culturas provenientes de diferentes sítios anatômicos. Staphylococcus spp. foram isolados e identificados em 30,8% (335/1.086) dos espécimes clínicos. 32 (2,9%) isolados de enterococos foram identificados, sendo Enterococcus faecalis a espécie mais prevalente 65,6% (21/32), seguida de Enterococcus faecium 31,3% (10/32). Bacilos gram-negativos não fermentadores foi o grupo mais prevalente, sendo 50,5% (548/1.086) dos isolados. Dentre os bacilos gram-negativos da ordem Enterobacterales 15,7% (171/1.086), Klebsiella pneumoniae foi a principal espécie isolada 43,9% (75/171), seguida por Enterobacter cloacae 25,1% (43/171) e Escherichia coli 15,8% (27/171). Posteriormente, dentre as alterações encontradas nos 60 pacientes com SRAG por COVID-19 incluídos no estudo, a linfopenia, neutrofilia e trombocitopenia foram mais significativas nos pacientes não sobreviventes, enquanto os níveis de PCR, AST, creatinina, ferritina, AST, troponina I, ureia, magnésio e potássio também foram maiores nos pacientes não sobreviventes comparados aos sobreviventes. Os níveis séricos de IL-10, CCL2, CXCL9 e CXCL10 estavam significativamente aumentados nos pacientes não sobreviventes, enquanto CCL5 apresentou redução significativa nesse mesmo grupo. Conclusão: A presença de infecções secundárias bacterianas ou fúngicas prejudicam o prognóstico de pacientes com COVID-19 grave, e isso está associado ao aumento da morbidade e mortalidade nesses pacientes. Em paralelo, alterações nos biomarcadores hematológicos e bioquímicos e alterações nos níveis séricos de citocinas e quimiocinas são preditores de gravidade e mortalidade em pacientes com COVID-19 grave.

Introdução: O câncer de mama representa um desafio significativo de saúde pública globalmente, com
estimativas alarmantes de incidência e mortalidade. Avanços recentes na compreensão dos
mecanismos moleculares e imunológicos do câncer de mama têm alimentado a busca por marcadores
prognósticos e terapêuticos mais precisos. Entre esses marcadores, a interleucina-33 (IL-33), uma
citocina com função dual, emergiu como uma molécula de interesse devido ao seu potencial papel na
progressão tumoral e na resposta imunológica antitumoral.Objetivo: Este estudo teve como objetivo
investigar o papel da IL-33 como um potencial marcador prognóstico nos diferentes subtipos de câncer
de mama, considerando o estágio tumoral e as opções terapêuticas disponíveis. Por meio da análise da
expressão de IL-33 em amostras de tecido tumoral e correlação com dados clínicos, buscamos elucidar
sua associação com a progressão da doença e a resposta ao tratamento, especialmente em relação à
quimioterapia adjuvante e neoadjuvante. Metodologia: A expressão de IL-33 foi quantificada medindo os
níveis de mRNA usando reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR). Um total de 06 amostras
de tecido saudável e 68 amostras de câncer de mama foram analisadas e as amostras foram
agrupadas de acordo com subtipos moleculares, presença de metástase, estadiamento e esquemas
quimioterápicos. Resultados: A quantificação da expressão de IL-33 revelou um aumento significativo
nos tecidos de câncer de mama em relação aos tecidos mamários saudáveis. Observou-se uma
associação positiva entre a expressão de IL-33 e subtipos mais agressivos, como Luminal B e tumores
metastáticos. Além disso, a expressão de IL-33 mostrou-se correlacionada com o estágio tumoral e a
resposta à quimioterapia, destacando seu potencial como marcador prognóstico. Conclusão: Nossos
achados sugerem que a IL-33 pode desempenhar um papel crucial na progressão do câncer de mama,
oferecendo insights valiosos para a personalização do tratamento. A identificação da IL-33 como um
potencial biomarcador prognóstico pode orientar estratégias terapêuticas mais eficazes e contribuir
para uma melhor gestão clínica dos pacientes com câncer de mama.

Esta tese aborda os desafios atuais enfrentados pela vigilância da saúde global diante da interação complexa entre fatores ambientais, sociais e demográficos. A complexidade do cenário epidemiológico é amplificada pelo aumento da densidade populacional em áreas urbanas, mudanças climáticas e alterações ambientais significativas. A complexidade na analise desses elementos destacam a necessidade urgente de abordagens inovadoras para o monitoramento e controle de doenças, adaptadas à natureza dinâmica e interconectada dos sistemas complexos que regem a saúde pública. Um dos principais obstáculos identificados é a limitação das abordagens convencionais de vigilância epidemiológica em capturar de forma abrangente as interações entre fatores de risco e a propagação de doenças. Essas metodologias muitas vezes falham em antecipar surtos, identificar padrões de disseminação e avaliar o impacto das variáveis ambientais na saúde da população, sublinhando a necessidade de uma abordagem mais integrada e abrangente. Para superar essas limitações, propõe-se uma sistematização no desenvolvimento de uma plataforma avançada de vigilância em saúde que integre tecnologias multiespectrais e de múltiplas camadas. Essa plataforma promete fornecer uma visão mais profunda e dinâmica dos dados relacionados aos eventos de saúde, permitindo uma melhor análise e uma resposta mais eficaz às ameaças globais à saúde. Ao conectar diferentes tipos de dados e camadas de informações, a plataforma visa melhorar a eficiência das intervenções preventivas e otimizar o direcionamento dos recursos de saúde, contribuindo assim para promover equidade e justiça social na saúde pública. São apresentados quatro trabalhos em diferentes vertentes com o objetivo de estruturar uma Arquitetura robusta, flexível e modular capaz de se adequar as mais diferentes formar de analises de dados, principalmente analise geométricas. Cada um dos trabalhos apresentados trazem contribuições para a proposta de integração final em uma única plataforma capaz de integrar dados multiespectrais e acoplar diversos módulos de analise de dados.

Filmes de polissacarídeos são veículos promissores para a entrega de agentes bioativos, como colagenases, pois fornecem liberação controlada no local da ferida, facilitando a regeneração do tecido. Esta pesquisa teve como objetivo investigar as propriedades físico-químicas de filmes de polissacarídeos de Cassia grandis com colagenase imobilizada de Streptomyces parvulus (DPUA/1573). A Galactomanana foi extraída de sementes de Cassia grandis para produção de filmes com 0,8% (p/v) de galactomanana e 0,2% (v/v) de glicerol com ou sem a incorporação de colagenases. A colagenase de Streptomyces parvulus (DPUA/1573) (0,2%) (m/v) e a colagenase comercial (0,2%) (m/v) foram adicionadas às soluções foramadoras de filmes, e deixadas em agitação magnética (500 rpm) por 5h, em temperatura ambiente (20 ± 2◦C). Os filmes foram submetidos a análises físico-químicas: espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), microscopia eletrônica de varredura, análise termogravimétrica, cor e opacidade, teor de umidade, permeabilidade ao vapor de água, espessura, ângulo de contato e propriedades mecânicas. Os resultados mostraram espectros de FTIR semelhantes à literatura, indicando grupos funcionais hidroxila (O-H), carbonila (C-O), hidrocarbonetos (C-H), ligações glicosidicas, presença de carboidratos e amidas, além da confirmação da existência de proteínas imobilizadas no filme de polissacarídeo. A imobilização da colagenase obtida de Streptomyces parvulus (DPUA/1573) aumentou a rugosidade da superfície observada na microscopia eletrônica de varredura e indicou uma melhor viabilidade, mediante a análise termogavimétrica. Todos os filmes exibiram uma cor amarelada brilhante e com leve opacidade. Testes mecânicos revelaram diminuição da rigidez em filme de polissacarídeo com colagenase comercial em relação ao filme de polissacarídeo com colagenase obtida do Streptomyces parvulus (DPUA/1573), e houve aumento da deformabilidade em ambos os filmes. Filmes à base de polissacarídeos são biomateriais promissores para composição controlada, por sua biocompatibilidade, biodegradabilidade e por apresentarem potencial para aplicações farmacológicas, em especial para a cicatrização de feridas.

Introdução: A nefrite lúpica (NL) é uma manifestação comum do lúpus eritematoso sistêmico (LES), podendo acometer até 60% dos pacientes durante o curso da doença. Além de comum, é uma manifestação grave, responsável por maior morbidade e mortalidade comparados a pacientes sem NL. O inflamassoma NLRP3 é um complexo multiproteico que vem sendo extensivamente estudado na patogênese da NL, no entanto, sua atuação como preditor de resposta ao tratamento imunossupressor não é bem estabelecido. Este estudo teve como objetivo avaliar o papel do inflamassoma NLRP3 como preditor de resposta ao tratamento imunossupressor em pacientes com NL ativa. Metodologia: Estudo de coorte prospectivo com 20 pacientes adultos diagnosticados com LES (EULAR/ACR 2019), SLEDAI ≥ 5 e NL ativa confirmada por biópsia renal com classes III ou IV ± V. O estudo foi realizado de janeiro de 2021 a setembro de 2023 e os pacientes foram acompanhados na biópsia (T0), 6 meses (T6) e 12 meses (T12). Após 12 meses de tratamento imunossupressor, os pacientes foram classificados de acordo com a resposta renal de eficácia primária, em grupo RREP e não-RREP. A expressão gênica foi avaliada para NLRP3, CARD8, CASP1, IL1B e IL18 por RT-qPCR em PBMC. Foi realizada imunohistoquímica (IHQ) para NLRP3 no tecido renal. A concentração da citocina IL-1β foi medida usando o BD™ Cytometric Bead Array (CBA). Resultados: Os pacientes tinham idade média de 31,9 ± 8,3 anos, sendo 19 mulheres e 1 homem. Após 12 meses, 13 (65%) pacientes atingiram RREP. A intensidade de NLRP3 em células inflamatórias na IHQ foi maior em pacientes do grupo não-RREP comparados ao grupo de RREP (p=0.0426). Pacientes com IHQ positiva forte de NLRP3 em células inflamatórias tiveram um risco maior de não responder ao tratamento, comparados aos pacientes com IHQ positiva fraca (RR 3,0 – IC 1,4-10,3; p=0,0210). No grupo não-RREP, a expressão gênica de IL1B mostrou aumento significativo em T6 (FC = 2,22: p=0,0037) e T12 (FC = 2,91; p=0,0001) em comparação com T0. A expressão relativa dos genes estudados não mostrou diferenças significativas entre os grupos ao longo dos 12 meses de tratamento, exceto para IL1B, que foi maior em pacientes não-RREP em T12 (p=0,0477). No grupo não-RREP, a expressão de NLRP3 e IL18 em T0 se correlacionou fortemente com proteinúria em T12 (r=0,8441, p=0,0164) e creatinina sérica em T12 (r=0,8152; p=0,0255), respectivamente. Conclusão: Em nosso estudo, a IL-1β aumentou durante o tratamento imunossupressor no grupo sem resposta, apontando para um possível biomarcador de atividade da doença. Além disso, a marcação forte da IHQ para NLRP3 foi associada a uma maior probabilidade de não resposta ao tratamento, destacando o potencial do inflamassoma NLRP3 como preditor de pior desfecho clínico.

Após lesão na pele, indivíduos saudáveis previsivelmente curam-se através de uma cascata de eventos moleculares e celulares inter-relacionados. No entanto, o trauma de pele de espessura total é de difícil epitelização devido à ausência da derme, formando cicatrizes fibrosas e menos elásticas que a pele original. Nesse sentido, os materiais biomédicos apresentam excelentes propriedades como boa biocompatibilidade e baixa imunogenicidade, tornando-os superiores aos materiais convencionais utilizados como curativos primários, substitui e preenche temporariamente tecidos ou órgãos danificados, induzindo a infiltração e proliferação celular, promovendo assim a reparação e cicatrização de feridas. Neste trabalho, uma análise proteômica qualitativa foi realizada para avaliar o mecanismo molecular envolvido no processo de cicatrização de feridas induzida por matrizes de colágeno extraídas da pele de tilápia do Nilo com glicosaminoglicanos (M_GAG) e sem (M) glicosaminoglicanos. A performance foi avaliada em um estudo in vivo utilizando modelo murino imunocompetente após 14 e 21 dias após lesão de pele de espessura total. Os Peptídeos trípticos de cada grupo foram analisados em um sistema M-Class ACQUITY UPLC® (Waters Corporation, Milford, MA) acoplado a um espectrômetro de massas Synapt XS quadrupolo Q-ToF (Waters Corporation, Wilmslow, Reino Unido). Antologia gênica e vias metabólitas foram analisadas via DAVID para avaliar as mudanças na dinâmica molecular no processo de cicatrização de feridas. A espectrometria de massa sem rótulo detectou 1.399 grupos de proteínas com uma taxa de falsa descoberta (FDR) de 1% nos níveis de peptídeos e proteínas. Comparado com o grupo controle, em 14 dias pós-lesão um total de 73 proteínas (38 Up e 35 Down) diferencialmente expressas (DEPs) foram identificadas no grupo da pele tratado com a matriz M. Por outro lado, 35 DEPs (18 Up e 17 Down) foram encontrados na pele tratada com a matriz M_GAG. Da mesma forma, em 21 dias após a lesão, foi identificado um total de 142 DEPs (66 Up e 76 Down) no grupo tratado com a matriz M contra 65 DEPs (30 Up e 35 Down) no grupo tratado com a matriz M_GAG. Além disso, 361 e 551 proteínas foram diferencialmente expressas nos grupos analisados em 14 e 21 dias pós-lesão, respectivamente, por uma abordagem de one-way ANOVA. A análise de ontologia gênica e de vias moleculares revelou que as peles tratadas com as matrizes M e M_GAG apresentaram um perfil de reinervação característico que pode sugerir recuperação sensorial, pelo menos parcial, do local da ferida. Ambas as peles foram marcadamente representadas pela modulação do sistema imunológico, com ênfase no controle da resposta aguda da inflamação aos 14 e 21 dias pós-lesão. Em adição, ambos os grupos apresentaram enriquecimento significativo de vias relacionadas ao metabolismo de RNA e Proteína, sugerindo um aumento na síntese proteica necessária para o reparo tecidual e fechamento adequado da ferida. Entretanto, no grupo tratado com a matriz M, processos biologicos como queratinização, metabolismo da vitamina D3, apoptose e macroautofagia, sugerem um fenótipo mais favorável ao reparo tecidual. Esses dados também podem estar relacionados à regulação negativa de proteínas associadas a um fenótipo fibrótico nas fases tardias da cicatrização de feridas desse grupo, como a PCPE1, e à regulação positiva de enzimas envolvidas no remodelamento da matriz extracelular.

A artrite reumatóide (AR) apresenta-se como a doença mais prevalente e debilitante conhecida entre as doenças autoimunes crônicas. A qualidade de vida dos indivíduos que possuem essa doença é comprometida, devido aos fatores genéticos e ambientais, que também contribuem para que eles se tornem mais susceptíveis a outras enfermidades como as infecções virais. Em 2020 a Organização Mundial de Saúde (OMS) declarou a pandemia da COVID-19. No Brasil, milhões foram infectados, gerando altos números de mortes e pessoas com sequelas após infecção. Um dos principais sintomas da infecção pelo coronavírus é a tempestade de citocinas. Inflamações exacerbadas podem desencadear o agravamento da AR e prejudicar o desfecho desses indivíduos com COVID-19. Além disso, podem ocasionar as alterações na expressão de proteínas, microRNAs e genes alvos, que são moléculas com papéis importantes que contribuem nas respostas do sistema imunológico e nas modificações epigenéticas. OBJETIVO: avaliar o impacto da COVID-19 na expressão de proteínas e dos miRNAs e seus genes alvos em pacientes com artrite reumatóide. METODOLOGIA: amostras de sangue periférico foram coletadas de 36 indivíduos atendidos em 3 hospitais da Região Metropolitana do Redife. Os voluntários formam divididos em 4 grupos: 6 pacientes com AR e com histórico de COVID-19, 11 pacientes com AR e sem histórico de COVID-19, 8 indivíduos sem AR e com histórico de COVID-19, e 11 indivíduos sem AR e sem histórico de COVID-19. A partir do plasma de cada invividuo, foram preparados pools de trabalho e as amostras injetadas no espectômetro de massa SYNAPT XS. Os dados foram analisados através de enriquecimento funcional e ontologia gênica foram reralizadas através do STRING e do METASCAPE, respectivamente. Buscas bibliográficas foram realizadas para determinar o papel das moléculas identificadas, além da busca por miRNAs e genes alvos. RESULTADOS: foram encontradas 186 proteínas diferencialmente expressas e com as análises de enriquecimento funcional e ontologia gênica foi possível observar envolvimento das mesmas em eventos imunológicos: regulação do sistema imune inato e adaptativo, ativação da via clássica do sistema complemento, produção de imunoglobulinas, mapa das vias de sinalização do SARS-CoV-2; eventos metabólicos: metabolismo do selênio, metabolismo de hormônios peptídeos e da vitamina B12; Processos biológicos como apoptose, cascatas de coagulação, regulação de atividade enzimática, degranulação de plaquetas e neutrófilos. Com relação a determinação das redes de interação dos genes alvos, apenas BRWD3 e KIAA2022 apresentaram interação direta, mas todos eles também possuem funções biológicas essenciais envolvidas em eventos imunológicos, metabólicos e celulares. CONCLUSÃO: A compreensão do papel das proteínas, miRNAs e genes alvos ajudou a entender a epigenética da COVID-19 e seus impactos em pacientes com AR. Por isso foi desenvolvida essa estrutura baseada em proteínas e conexões entre miRNAs e genes alvos que forneceram informações sobre seus papéis no desenvolvimento das doenças e as consequências. A avaliação da expressão gênica foi eficiente para mostrar alguns mecanismos biológicos que influenciam no desenvolvimento das doenças e na descoberta de possíveis biomarcadores promissores.

Proteases são enzimas que hidrolisam ligações peptídicas e apresentam grande interesse industrial por catalisarem reações e consequentemente acelerarem a obtenção de produtos nas áreas Têxtil, alimentícia e farmacêutica. Devido a essa importância, faz-se necessário a utilização de novas fontes de obtenção e métodos em reduzir o custo de produção dessas enzimas. Pensando nisso, a utilização de resíduo agroindustrial em associação com processos fermentativos pode ser uma forma de obtenção de novas enzimas. O presente trabalho teve como objetivo utilizar linhagens do fungo Aspergillus (A. sydowii e o A. serratalhadensis) para a produção de proteases através da técnica de fermentação em estado sólido (FES), bem como, purificar proteases através de processos cromatográficos e determinar as suas características físico-químicas. O processo de produção foi analisado através da análise dos parâmetros tempo, umidade e a concentração de substrato. A técnica de purificação utilizada incluiu precipitação cetônica e colunas cromatográficas contendo resina de DEAE-Sephadex e Superdex 75. Os resultados da fermentação com o A. sydowii demonstraram que o extrato bruto apresentou atividade proteolítica de 412 U/mL, sendo fortemente inibida por PMSF, cerca de 85%, e ativada pelo o íon Fe+3 (cerca de 69%). A atividade ótima foi observada em pH 8 a 45°C, com estabilidade térmica do extrato entre 25°C e 45°C, mantendo 85% de sua atividade inicial. Após caracterização do extrato bruto (EB), uma protease foi purificada com rendimento de 5,9 vezes maior que o EB, recuperação de 53% e a atividade proteolítica de 256 U/mL. A enzima apresentou tamanho de aproximadamente 48 KDa e apresentou inibição por PMSF (60%), porém com ativação enzimática através do íon Cu+2 (56,5%). A atividade ótima foi observada em pH 8,0 a 45°C, com estabilidade da enzima entre 35°C e 50°C, mantendo 70% de sua atividade inicial. Com o A. serratalhadensis o EB apresentou atividade proteolítica de 1066 U/mL, tendo uma inibição de pelo íon Zn+2 (ZnSO4) de 49,5% e o íon Na+ (NaCl) e K+ (KCl) aumentaram a atividade em 11,9% e 19,1% respectivamente. A atividade ótima foi encontrada em pH 6 a 35°C, com estabilidade térmica do extrato entre 25 °C e 55°C, mantendo 75 % de sua atividade inicial. A protease purificada apresentou atividade proteolítica de 211 U/mL e atividade específica de 347 U/mg. As linhagens isoladas de A. sydowii e de A. serratalhadensis foram eficazes para a produção de protease com potencial biotecnológico através da FES utilizando o substrato café, além de uma possível solução para o dano ambiental provocado pelo resíduo utilizado.

As alterações tumorais na próstata estão associadas ao envelhecimento, sendo a Hiperplasia Prostática Benigna (HPB) a alteração proliferativa mais frequentemente observada. Já o câncer próstático (CaP) é o segundo mais comum em homens em todo o mundo. Esse estudo objetivou quantificar através da detecção imunoquimiluminescente biomoléculas em tecido prostático em busca de possíveis marcadores prognósticos. Foram utilizados anticorpos para os antígenos da calprotectina, ADAM10, CD3 e CD20. Eles foram submetidos à conjugação com éster de acridina para detecção imunoquimiluminescente e avaliação da matriz extracelular em biópsias de pacientes com HPB (n = 90), CaP (n = 30) e controle (n=20). A média de idade dos pacientes foi de 67,4 anos (± 7,2 anos), sendo a faixa etária entre 60 e 69 a que apresentou o maior número de casos tanto de CaP (53,3%) quanto de HPB (57%). Em relação ao escore de Gleason (classificação padrão para tumores de próstata) foi observado uma ocorrência significante do escore 7 (86,2%), sendo o escore 7 (3+4) o de maior frequência 56,66%. A quimioluminescência emitida como uma expressão das proteínas calprotectina, ADAM10, CD20 e CD3 foi estatisticamente significativamente maior em CaP do que HPB e controle. Além disso, também foram observados valores mais altos de expressão em amostras que apresentaram escore de Gleason mais alto. Os resultados quantitativos deste estudo sustentam a hipótese de que o aumento da expressão da ADAM10, calprotectina e CD20 e CD3 seja resultado da migração de neutrófilos e células plasmocitárias para os tecidos alterados aumentando a probabilidade de desenvolvimento e agravamento de processos neoplásicos.

Introdução: A COVID-19 é uma doença infecciosa causada pelo vírus SARS-CoV-2, que induz uma alta liberação de quimiocinas e citocinas pró-inflamatórias, levando a distúrbios sistêmicos graves. Além disso, as evidências mostraram que os pacientes com COVID-19 recuperados ainda apresentam alguns sintomas e distúrbios do COVID-19. O exercício físico pode trazer muitos benefícios para a saúde. É conhecido por ser um potente regulador do sistema imunológico, que inclui frequência, intensidade, duração e supervisão de um profissional. Face ao confinamento e isolamento social ou internamento dos doentes com COVID-19, a população tornou-se sedentária ou optou pelo exercício físico em casa, assumindo a garantia dos efeitos benéficos do exercício físico e reduzindo a exposição ao SARS-CoV-2.Objetivo: Elucidar os efeitos da atividade física na defesa imunológica e resposta inflamatória mediada pelo SARS-CoV-2. Além disso, investigar os efeitos de um protocolo de exercício supervisionado e um protocolo de exercício não supervisionado em casa sobre os níveis séricos de quimiocinas e citocinas em pacientes com COVID-19 recuperados. Métodos: Este estudo foi um ensaio clínico prospectivo, paralelo e de dois braços. Vinte e quatro pacientes com COVID-19 moderado a grave concluíram os protocolos de intervenção deste estudo. Os participantes foram submetidos a um protocolo de exercício supervisionado no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco ou a exercícios domiciliares não supervisionados por 12 semanas. Analisamos os níveis séricos de quimiocinas (CXCL8/IL-8, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CCL2/MCP-1 e CXCL10/IP-10) e citocinas (IL-2, IL-4, IL-6, IL -10, IL-17A, TNF-α e IFN-γ). Resultados: Antes das intervenções, não foram observadas diferenças significativas nos níveis séricos de quimiocinas e citocinas entre os grupos de exercícios supervisionados e não supervisionados em casa. Os níveis de CXCL8/IL-8 (p = 0,04), CCL2/MCP-1 (p = 0,03) e IFN-γ (p = 0,004) diminuíram após 12 semanas de exercício supervisionado. Paralelamente, foi observado aumento de IL-2 (p = 0,02), IL-6 (p = 0,03), IL-4 (p = 0,006) e IL-10 (p = 0,04) após o protocolo supervisionado em comparação com níveis pré-intervenção. Nenhuma diferença significativa em todas as quimiocinas e citocinas foi encontrada após 12 semanas do protocolo de exercícios não supervisionados em casa. Conclusão: Diante dos resultados, o presente estudo observou que o exercício supervisionado foi capaz de modular a resposta imune em indivíduos com pós-COVID-19, sugerindo que o exercício supervisionado pode atenuar o processo inflamatório associado ao COVID-19 e seus distúrbios.

Dentre as estratégias de ventilação mecânica invasiva (VM), o recrutamento alveolar e a titulação da pressão positiva expiratória final (PEEP) são utilizados para melhorar a oxigenação em pacientes com insuficiência respiratória hipoxêmica por COVID-19. Considerando a existência de diferentes métodos de titulação da PEEP, sem evidências de superioridade entre estes, o objetivo geral desta tese foi comparar três métodos de titulação da PEEP em pacientes com insuficiência respiratória hipoxêmica aguda associada a COVID-19 quanto aos desfechos clínicos e fisiológicos. Foi conduzido um ensaio clínico randomizado (NCT 05024500) envolvendo adultos com COVID-19 sob VM randomizados nos grupos de titulação da PEEP pela: 1) tomografia de impedância elétrica (PEEP-TIE), 2) driving pressure (PEEP-DP) ou 1) estratégia ARDSNet (PEEP-ARDSNet). Uma manobra de recrutamento alveolar parcial antecedeu a titulação da PEEP nos grupos DP e TIE. O desfecho primário foi lesão pulmonar aguda (escore de Murray) e os desfechos secundários incluíram oxigenação, driving pressure, complacência estática do sistema respiratório (Crs) e ventilação pulmonar regional monitoradas até 4 horas após as intervenções. Também foram avaliadas efeitos adversos relacionados a estabilidade clínica. Os resultados são apresentados em dois manuscritos originais e um artigo. MANUSCRITO 1: envolveu 75 sujeitos (25 em cada grupo) e detectou superioridade da TIE em relação a ARDSNet em reduzir o escore de lesão pulmonar (OR ponderado pela PaO2/FiO2 de 4,96, IC95% 1,06 – 23,16; p=0,04). Secundariamente, também houve efeito de redução da DP (OR 6.6, 2.6-17.07 e OR 7.02, 2.7-18.2) e de aumento de Crs (OR 7.02, 2.7-18.2 e OR 5.94, 2.28-15.5) pela EIT (p< 0.001) e DP (p< 0.001), respectivamente, comparados à estratégia ARDSNet. O grupo TIE apresentou aumento na resposta à oxigenação (PaO2/FiO2 > 20 mmHg) perante à outras estratégias. MANUSCRITO 2: descreve uma análise secundária dos efeitos adversos e alterações hemodinâmicas e respiratórias associadas ao recrutamento parcial, manobras de titulação de PEEP e no follow-up. Os efeitos adversos foram categorizados como sérios e em não-sérios relacionados a frequência cardíaca, pressão arterial, vasopressores e análise gasométrica. Nenhum efeito adverso sério foi observado e dos não-sérios, o recrutamento parcial induziu uma redução na pressão arterial média (≤ 60 mmHg) e dessaturação (SpO2 < 88%) em 26% e 12% da amostra, respectivamente. No follow-up ocorreu bradicardia (14%), hipotensão (10%) e acidose respiratória (18%), de curta duração. ARTIGO: é um relato de caso que descreve o risco de barotrauma em tempo real pelo padrão de ventilação regional entre pulmões durante incremento de PEEP em um paciente com COVID-19 e tuberculose, publicado na revista "Acute and Critical Care" (10.4266/acc.2022.00920). Em conclusão, os resultados desta tese sugerem que a titulação da PEEP pela TIE reduziu o escore de lesão pulmonar comparados com a estratégia ARDSNet, considerando o grau de hipoxemia. As titulações pela TIE e DP superaram a titulação pela ARDSNet para os efeitos de resposta à oxigenação, driving pressure e complacência. O recrutamento parcial precedente à titulação por DP ou TIE não resultou efeitos adversos sérios e em relação aos não-sérios foram transitórios.

INTRODUÇÃO: O câncer gástrico continua sendo um problema de saúde mundial, que ainda carece de melhor compreensão de sua biologia. Suas taxas de incidência e prognóstico em diferentes regiões geográficas, bem como sua patogênese, apresentação clínica, expressões genéticas e a presença de mutações distintas tiveram impacto nos comportamentos heterogêneos dos pacientes. Infelizmente, as taxas de sobrevida e controle da doença têm sido modestas, quando comparadas com a melhora em outras neoplasias. MÉTODOS: Foram realizadas endoscopias com exame histológico padrão de biópsias e análises experimentais com amostras de tecido para perfil proteômico. Os indivíduos foram agrupados na coorte da seguinte forma: um grupo controle de seis indivíduos com achados histológicos benignos e um grupo principal de 14 indivíduos diagnosticados com câncer gástrico. Este grupo de pacientes foi dividido em três subconjuntos de acordo com seu grau histopatológico de diferenciação: cinco adenocarcinomas bem diferenciados; três como adenocarcinoma moderadamente diferenciado; e seis como adenocarcinoma pouco diferenciado. RESULTADOS: Um número total de 1.103 proteínas foi identificado entre o grupo controle e os três graus histológicos de amostras de câncer gástrico. O teste ANOVA de amostras múltiplas encontrou um conjunto de 356 proteínas diferencialmente expressas em pelo menos um dos grupos. Entre os 10 principais genes super regulados, a teneurina-4 foi encontrada em todos os estágios histológicos, os quais foram relacionados ao grau histopatológico de diferenciação. Os dados de diferenciação tumoral revelaram que a teneurina-4 foi significativamente maior (p<0,0001) em tumores pouco e indiferenciados em comparação com tumores bem (p<0,01) e moderadamente (p<0,002) diferenciados. CONCLUSÕES: Os níveis de teneurina-4 foram regulados positivamente em todos os graus de diferenciação tumoral, sugerindo que a teneurina-4 pode ser um candidato a biomarcador de câncer gástrico.

O vírus Chikungunya (CHIKV) é um arbovírus que ressurgiu em todo mundo e por conseguinte elevou o impacto global para a saúde pública. Esse vírus é transmitido principalmente pelos vetores: Aedes aegypti e Ae. Albopictus. Para estudo das manifestações clínicas, é preciso produzir modelos in vitro e in vivo com o objetivo de estudar os mecanismos da patogênese e transmissão viral, a fim de auxiliar no desenvolvimento de vacinas e antivirais. Com isso, este estudo teve como objetivo desenvolver e caracterizar um modelo animal imunocompetente para avaliar a patogênese e a eficácia vacinal contra a Chikungunya. Primeiramente, foi realizada a caracterização da infecção, utilizando camundongos selvagens (WT). Os animais foram divididos em 3 grupos, sendo 9 animais por grupo, um grupo controle inoculado somente com anticorpo, um infectado com CHIKV e outro grupo inoculado com o anticorpo associado ao CHIKV pela via intracraniana através do forame pós-glenoide. Os animais foram identificados e observados diariamente por 14 dias, sendo anotados todos os parâmetros clínicos. Foi coletado sangue em dias alternados para detecção da curva viremica por meio da utilização do Kit comercial BIOMOL ZDC. Os camundongos infectados mostraram sinais de doença caracterizado por postura curvada e pelo arrepiado em ambos grupos de infecção. Apesar dos animais dos grupos CHIKV e CHIKV+AC não apresentarem letalidade, o pico viremico foi detectado no D2 p.i. com valor do Ct mais alto para o grupo associado ao anticorpo, sugerindo uma potencialização da infecção. Após o estabelecimento do modelo, um segundo experimento foi realizado no qual se utilizou animais imunizados no intervalo de 15 dias (D0, D15, D30) e desafiado 5 dias após a ultima imunização. Os animais foram divididos em 4 grupos, sendo 5 animais por grupo, um grupo imunizado com a vacina teste (G1), outro imunizado com a vacina sem o C-LAMP (G2), um controle negativo, imunizado com PBS (G3); e um controle positivo, imunizado com o vírus inativado (G4).  Somente o G2 não houve viremia, sugerindo tanto a efetividade do modelo frente a infecção quanto a eficiência vacinal em proteger contra a viremia. Portanto, esse novo modelo resultou em viremia robusta, ausência de morte e em suposta proteção da vacina de DNA, sendo útil em trabalhos com CHIKV.

Os primeiros relatos indicam que a Lesão Renal Aguda (LRA) é comum durante a infecção por COVID-19. Diferentes taxas de mortalidade de LRA por SARS-CoV-2 têm sido relatadas, com base no grau de disfunção orgânica e variando de hospitais públicos a privados. No entanto, faltam dados sobre LRA em pacientes gravemente enfermos com COVID-19. Realizamos um estudo de coorte multicêntrico com 424 adultos gravemente enfermos com síndrome respiratória aguda grave (SARS) e LRA, ambas associadas à SARS-CoV-2, internados em seis UTIs públicas no Brasil. Usamos regressão logística multivariável para identificar os fatores de risco para gravidade da LRA e mortalidade intra-hospitalar. Evidenciamos uma média de idade de 66,42 ± 13,79 anos, 90,3% estavam em ventilação mecânica (VM), 76,6% estavam no estágio 3 do KDIGO e 79% realizavam hemodiálise. A mortalidade geral foi de 90,1%. Encontramos maior frequência de diálise (82,7% versus 45,2%), VM (95% versus 47,6%), vasopressores (81,2% versus 35,7%) (p < 0,001) e LRA grave (79,3% versus 52,4%; p = 0,002) em não sobreviventes. VM, vasopressores, diálise, LRA associada à sepse e óbito (p < 0,001) foram mais frequentes no KDIGO 3. A regressão logística para óbito demonstrou associação com VM (OR = 8,44; IC 3,43–20,74) e vasopressores (OR = 2,93; IC 1,28–6,71; p < 0,001). LRA grave e necessidade de diálise não foram fatores de risco independentes para óbito. VM (OR = 2,60; IC 1,23–5,45) e vasopressores (OR = 1,95; IC 1,12–3,99) também foram fatores de risco independentes para KDIGO 3 (p < 0,001). Concluímos que pacientes criticamente enfermos com SARS e LRA por COVID-19 tiveram alta mortalidade nesta coorte. A mortalidade foi amplamente determinada pela necessidade de ventilação mecânica e vasopressores, e não pela gravidade da LRA.

A tuberculose continua sendo um problema grave de saúde pública mundial e uma das principais causas de morte por agente infeccioso. Junto a isso, o crescente surgimento de estirpes resistentes e multidroga resistente (MDR e XRD) dificultam ainda mais a contenção da doença. Novas estratégias como melhoramento farmacológico, podendo até mesmo direcionar uma droga a um alvo especifico, capaz de agir contra cepas MDR , facilitar e encurtar o tempo de tratamento são essenciais para os programas de contenção desta epidemia. Desta forma, o objetivo deste estudo é desenvolver, caracterizar e analisar o potencial in vitro de nanopartículas revestidas com fucana, contra cepa de Mycobacterium tuberculosis sensível e resistente como estratégia para o melhoramento do tratamento da doença. Foram desenvolvidas nanopartículas poliméricas de fucana contendo Rifampicina, antimicrobiano utilizado no esquema terapêutico da tuberculose sensível. As nanopartículas apresentaram tamanho entre 300 e 400 nanômetros, com morfologia arredonda e esférica. O potencial antimicrobiano demonstrou concentração inibitória mínima (CIM) de 0,412µg/ml e 1,238µg/ml contra cepas sensível e MDR respectivamente, onde o CIM da MDR foi melhor que a própria Rifampicina. A toxicidade (CC50) do nanopartículado manteve viabilidade celular entre 70% e 90%. Quando combinado com alguns fármacos utilizados no tratamento da doença (Rifampicina, Etambutol, Amicacina e Levofloxacino) demostrou Indicie de Concentração Inibitória Fracionada indiferente (FIC = 0,5 a 4) contra M. tuberculosis sensível e resistente. Expressou ainda efeito bactericida dependente de tempo em M. tuberculosis. Através destes achados demostramos o potencial da nanopartícula revestida fucana, a ser um nanopartículado candidato a otimização e continuação de ensaios pré-clínicos como proposta a um agente antitubercular.

A Demência de Alzheimer (DA) é considerada uma doença neurodegenerativa crônica, cuja etiologia ainda não é clara, mas estudiosos relatam a fisiopatologia associada a resistência à insulina. Atualmente os tratamentos farmacológicos utilizados para a DA não são considerados modificadores da doença, apenas desaceleram a sua progressão. Neste contexto, o fármaco pioglitazona (PGZ), com atividade hipoglicemiante para o tratamento da Diabetes Mellitus tipo II, tem demonstrado, em estudos recentes, potencial atividade modificadora contra a demência de Alzheimer, entretanto, apresenta cardiotóxicicidade. Com o intuito de utilizar a nanotecnologia farmacêutica para melhorar a eficiência e reduzir a toxicidade da PGZ, o presente estudo teve como objetivo desenvolver nanopartículas (NPs) de Zeína contendo PGZ. Inicialmente, foi realizado o planejamento fatorial Box-Behnken a fim de otimizar a formulação com a variação de dois parâmetros: a proporção zeína/lisina e o volume da fase aquosa. As NPs obtidas foram caracterizadas em relação ao tamanho, índice de polidispersão, potencial zeta e taxa de encapsulação da PGZ. A formulação contendo PGZ (PGZ-ZNP) selecionada pela análise fatorial, apresentou as seguintes características físico-químicas: diâmetro médio de partículas de 200,6 ± 1,4 nm com índice de polidispersão (PDI) de 0,102; potencial zeta de -45,5 ± 3,2 mV e taxa de encapsulação do fármaco de 103,84 ± 28 %. Posteriormente, as NPs foram analisadas através das técnicas de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR) e Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC). As referidas análises comprovam a formação das nanopartículas e sugerirem a encapsulação da PGZ. PGZ-ZNP manteve suas características iniciais após 12 meses de armazenamento a 4°C na forma liofilizada. Os resultados obtidos no presente estudo demonstram o desenvolvimento de nanopartículas estáveis de zeína contendo pioglitazona (PGZ-ZNP) com potencial para ensaios futuros do potencial terapêutico para a doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer.

Mais da metade do volume total do sangue é constituído por uma porção aquosa chamada de plasma, sendo assim, é o componente mais abundante em circulação do corpo humano, e nele podemos encontrar diversas moléculas com atividades biológicas, denominadas de fragmentos bioativos. Essas partições podem ser obtidas por métodos de extração e purificação como cromatografias ou sistemas de duas fases aquosas (SDFA). As técnicas cromatográficas utilizam solventes fortes que podem danificar a estrutura das moléculas de interesse a serem obtidas, enquanto que os SDFA, utilizam polímeros que atraem macromoléculas através de sua polaridade. Sendo assim, as metodologias por sistemas de duas fases aquosas, vem sendo bastante estudado devido ao seu baixo índice de toxicidade aos compostos extraídos, além da preservação de suas funções fisiológicas e estruturais. Com o aumento da resistência aos antibióticos, a busca por tratamentos alternativos antimicrobianos tornou-se uma prioridade no combate a cepas resistentes aos antibióticos convencionais. O estudo desses componentes plasmáticos é importante porque compreendem diversas sequências e estruturas de fragmentos que desempenham funções essenciais nos sistemas biológicos, desde que absorvidos intactos ou fracionados, podendo inibir ou eliminar microrganismos do corpo dos indivíduos. Dentre os componentes presentes no plasma sanguíneo humano, destaca-se a albumina, uma proteína que tem como principal função a regulação da pressão oncótica e transporte de metabólitos dentro dos vasos sanguíneos. Este estudo analisou a extração de fragmentos bioativos presentes no plasma sanguíneo humano, através da sua degradação trombolítica, por meio de uma patente que desenvolve uma técnica de extração de albumina sérica humana por sistema de duas fases aquosas, além de um artigo cientifico enfatizando os resultados da atividade antimicrobiana desses fragmentos em cepas de bactérias resistentes.

As imunoglobulinas (Igs) são os hemoderivados de maior consumo no mundo, sendo hoje o produto que direciona a indústria de hemoderivados. Atualmente no Brasil, a procura pelas Igs vem aumentando bastante devido ao aumento de casos de distúrbios autoimunes, principalmente os associados às infecções pelas arboviroses, sendo o uso dessas Igs fundamental ao seu tratamento. Muito embora a imunoglobulina G comercial, seja usada largamente em tratamentos, ainda apresenta um grau de impureza que corresponde em média a 2,4% da solução comercial importada. A principal metodologia de obtenção dessas proteínas plasmáticas é o método conhecido como "fracionamento do plasma com etanol frio", entretanto devido a sua alta concentração de etanol e baixo pH, essa metodologia pode provocar a desnaturação dos hemoderivados. Nesse sentido, o sistema de duas fases aquosas (SDFA) vem como uma alternativa de metodologia que permite um ambiente aquoso (85% - 99% de água) que acarreta a obtenção e purificação de biomoléculas em condições não desnaturantes. Extrair e purificar imunoglobulina G comercial por sistema de duas fases aquosas e estudar a recuperação e o particionamento da biomolécula foi um dos objetivos do estudo, além de verificar a presença de anticorpos para Dengue e Zika. As Igs utilizadas na presente pesquisa foram oriundas da Empresa Brasileira de Hemoderivados e Biotecnologia (HEMOBRÁS). Para o SDFA foi utilizado um planejamento fatorial 22 onde foram avaliadas a concentração do polietilenoglicol (PEG) de 4000g/mol e a concentração do sal (fosfato de potássio) sobre a extração das imunoglobulinas, tendo como variáveis respostas: o coeficiente de partição (K) e a recuperação (Y) das imunoglobulinas extraídas. Os resultados mostraram que o comportamento de partição das Igs dependeu diretamente da concentração de PEG e da concentração do sal utilizado. O ensaio que promoveu uma maior recuperação da biomolécula (Y=96,79%) foi obtido com o sistema PEG 4000 (12,5%) com uma concentração de fosfato de potássio à 10%, tendo as imunoglobulinas uma partição preferencial para a fase sal (K=0,15). O perfil eletroforetico das proteínas também demonstrou que após a partição, a mesma concentração de PEG e Sal de Fosfato utilizadas, conseguiu remover ainda mais a impurezas da solução comercial de Igs. Adicionalmente, o estudo conseguiu detectar presença de anticorpos contra o Zika Vírus nas soluções de IgG. Dessa forma o SDFA se mostrou uma técnica eficiente na extração e purificação de imunoglobulinas, com um baixo custo e um alto rendimento.

Um dispositivo portátil para determinação da capacidade natatória de peixes pode ser utilizado na determinação da capacidade natatória sob diferentes parâmetros físico-químicos, presença de fármacos ou outros produtos químicos com aplicação no desenvolvimento de medicamentos ou testes toxicológicos. O desenho industrial desse dispositivo foi depositado e concedido, podendo impedir que terceiros produzam, vendam ou importem artigos ou produtos que incorporem ou se assemelhem a esse desenho industrial registrado. Os efeitos tóxicos da tiroxina, levotiroxina e amiodarona foram avaliados isoladamente em concentrações dez, cem e mil vezes maiores que aquelas encontradas em ecossistemas aquáticos. Além disso, também foram avaliados os efeitos tóxicos das interações entre esses compostos, uma vez que é necessário dar atenção ao real risco ecológico na coexistência de diversos compostos no ecossistema aquático. Todos os testes toxicológicos foram realizados em zebrafish (Danio rerio) como modelo animal por representar um modelo ideal para estudos de farmacologia e toxicologia. As concentrações ambientais mostraram um baixo risco para os parâmetros estudados, mas, nas combinações foram detectados efeitos antagônicos. A monoterapia com levotiroxina é o tratamento indicado para o hipotireoidismo. Mas, uma proporção substancial de pacientes que fazem esse tratamento apresenta queixas persistentes, como sintomas de depressão e bem-estar mental prejudicado. No hipotireoidismo, há produção acelerada de radicais livres e baixa disponibilidade de antioxidantes sugerindo que uma formulação de nanoemulsões à base de produtos contendo levotiroxina associada a óleos essenciais com atividade antioxidante possivelmente pode se tornar uma boa alternativa para superar essas limitações. Um processo de obtenção de nanoemulsões óleo/água (O/A) produzidas por um processo de emulsificação sob agitação foi patenteado. As nanoemulsões foram produzidas a partir de óleos essenciais que contenham efeitos benéficos relatados na literatura para o tratamento de disfunções tireoidianas (fase oleosa), associados à levotiroxina (fase aquosa), e ambas as fases estabilizadas pelo uso de surfactantes. Todas as nanoemulsões mostraram-se ativas nos testes antioxidantes. Os resultados do teste toxicológico em Danio rerio sugerem que os surfactantes utilizados nas formulações podem estar relacionados à toxicidade observada, demonstrando a necessidade de estudos adicionais para entender os efeitos desses surfactantes em nanoemulsões contendo óleos essenciais.

A atual terapia antirretroviral (ART) tem revolucionado o tratamento contra o vírus da imunodeficiência humana (HIV) por suprimir ao máximo a replicação viral, reduzir as taxas de transmissões e de progressão da doença, e melhorar consideravelmente a qualidade de vida dos pacientes. Todavia, apesar da eficiência da ART, um número significativo de indivíduos apresenta deficiência na reconstituição de linfócitos T CD4+, mesmo em supressão viral, sendo definidos como não-respondedores imunológicos (INR). Essa deficiência na recuperação imunológica tem sido descrita como uma condição multifatorial, mas ainda não está claro quais mecanismos determinam precisamente essa condição. Sendo assim, o presente estudo objetivou avaliar o perfil imunológico fenotípico dos pacientes HIV-positivos submetidos à ART e investigar alterações genéticas em genes do sistema imune bem como diferenças no proteoma desses indivíduos. Análises imunofenotípicas e genéticas foram realizadas em amostras de pacientes HIV-positivos sob ART com prolongada supressão da carga viral. Eles foram classificados em dois grupos (respondedores imunológicos – IR e não-respondedores imunológicos – INR) de acordo com as mudanças na contagem de células T CD4+. Dados sociodemográficos e clínicos também foram avaliados a partir dos prontuários médicos. Heterozigose para o alelo CCR5Δ32, contagem baixa de células T CD4+ pré-tratamento que se manteve reduzida mesmo após início da ART, baixa razão CD4/CD8, altos níveis de células T CD4+ de memória efetora (CD45RA-CD62L-) e níveis reduzidos de células T CD4+ recentes emigradas do timo (RTE) (CD45RA+CD31+) e naïve (CD45RA+CD62L+) foram mais frequentes nos INR, sendo estatisticamente associados com deficiência na recuperação imunológica. Esses resultados evidenciam alguns dos fatores genéticos e imunológicos determinantes envolvidos na reconstituição imune dos pacientes HIV-positivos em ART.

A Doença de Parkinson é a segunda doença neurodegenerativa mais prevalente no mundo e com previsões de duplicar o seu número de portadores à medida que a população mundial em geral possui a tendência de ficar mais velha nas próximas décadas. Outro fator alarmante é a falta de um tratamento definitivo para a cura da DP, pois os medicamentos disponíveis são apenas capazes de aliviar os sintomas, não conseguem parar ou reverter o processo neurodegenerativo e ainda possuem efeitos adversos neurológicos. Associado a isto, estão os altos custos da DP que são um componente significativo nos gastos incorridos no sistema público de saúde, pacientes e sociedade em geral. No Brasil, estimou-se que o custo médio anual com a DP é de US$ 5,853.50 por pessoa (BOVOLENTA et al., 2017), enquanto nos Estados Unidos o custo se aproxima de US$ 22,800 por paciente e a carga econômica da DP ultrapassa US $ 14,4 bilhões para o país em 2010 (KOWAL et al., 2013). Diante do exposto, o presente projeto possui como objetivo a utilização de óleos essenciais de plantas medicinais nativas e não nativas para o desenvolvimento de sistemas de liberação controlada por nanoemulsão associado à levodopa, o medicamento mais utilizado para a DP, como uma alternativa de baixo custo e de alta eficiência para o tratamento da DP. Com o desenvolvimento de fármacos nacionais e com componentes fitoterápicos o custo anual do tratamento dessa doença pode ser reduzido para o sistema público de saúde brasileiro e para os particulares. Adicionalmente, é importante a realização de pesquisas que gerem entendimentos adicionais sobre os mecanismos fisiopatológicos desse distúrbio neurodegenerativo.

Colagenase (EC 3.4.24.3), enzima proteolítica capaz de degradar a tríplice hélice do colágeno foi purificada a partir de extratos brutos de vísceras do peixe (Oreochromis mossambicus) em apenas uma etapa utilizando o compósito magnético de óxido de ferro contendo o ligante azocoll adsorvido (MPs-Azocoll). A colagenase reconhece o azocoll presente no compósito e o complexo partícula-enzima é formado, sendo a seguir lavado para remover impurezas e outras proteínas que não interagiram com a partícula. Este complexo é desfeito após aumento da força iônica, obtendo a enzima purificada e a partícula magnética podendo ser reutilizada novamente. As enzimas purificadas através da MPs-Azocoll apresentaram, respectivamente, purificação de 16,6 vezes e rendimento de 33,1%. O peso molecular da enzima de O. mossambicus foi estimado em 30 kDa, corroborando com colagenases de outras espécies de peixe relatado na literatura. O reuso da MPs-Azocoll também se mostrou eficiente com purificações entre 15,9-14,9 vezes e rendimentos entre 33 a 31%. Os resultados de caracterização da MPs-Azocoll sugerem a presença do azocoll nas partículas, observado pelos picos característicos do colágeno no FTIR; através do deslocamento angular do DRX e na presença do elemento carbono na análise do EDX. Para aperfeiçoamento e otimização do processo de purificação, planejamento fatorial de 24 com análise estatística de variância (ANOVA) foi realizado. Os parâmetros analisados neste planejamento foram: (A) quantidade de partícula magnética usada na purificação, (B) quantidade de azocoll presente na partícula, (C) volume de extrato bruto e (D) tempo de incubação. O modelo estatístico se mostrou significativo de acordo com os valores de p e F. As variáveis estatisticamente significativas foram: (B) quantidade de azocoll presente na partícula e (D) tempo de incubação. A MPs-Azocoll otimizada foi testada na purificação de collagenase de vísceras do peixe (Scomber japonicus) e caldo de cultivo fúngico (Penicillium sp.) obtendo purificação de 20 e 22,2 vezes, com rendimento de 35,8% e 94,5% respectivamente. A colagenase caracterizada de S. japonicus foi determinada como uma serino-protease, alcalina, com melhor atividade no pH 8,0, e a 50°C. Estas características garantem uma alta possibilidade de aplicação da colagenase na indústria. Estes resultados demonstram que a partícula magnética contendo azocoll pode ser aplicada na purificação de colagenase em um processo de etapa única, empregando compósito de fácil síntese, baixo custo e reutilizável.

A Hidradenite Supurativa (HS) é uma condição de pele que envolve a unidade pilossebácea e é caracterizada por inflamação crônica e pela presença de nódulos e abscessos recorrentes que culminam em secreção purulenta. Em raras ocasiões, a HS pode aparecer concomitantemente com outras doenças como a Doença de Dowling Degos (DDD). A DDD é uma genodermatose autossômica dominante rara, caracterizada por lesões pigmentadas reticuladas e lentamente progressivas que envolvem áreas flexurais da pele. Mutações no gene que codifica o potenciador de presenilina (PSENEN) foram associadas à ocorrência simultânea das doenças, enquanto o papel da nicastrina (NCSTN) ainda é debatido. Neste estudo, identificamos uma família de quatro gerações com sete membros afetados por HS e/ou DDD. Os pacientes têm um fenótipo de HS grave caracterizado por nódulos inflamatórios, granuloma piogênico, fístulas e comedões simples e duplos espalhados por diferentes áreas do corpo, e um fenótipo de DDD caracterizado por pigmentações reticuladas nas axilas e região inguinal, bem como cicatrizes crateriformes / cribriformes no dorso, dorso nasal e filtro labial. O sequenciamento de exoma total (WES) em dois indivíduos afetados e um não afetado da família identificou uma nova mutação sem sentido no gene da NCSTN, c.T131A:p.L44X. A segregação dessa mutação em todos os membros afetados foi confirmada pelo sequenciamento de Sanger. Para estudar o papel dessa mutação, isolamos as células da bainha radicular externa (ORS) dos folículos pilosos dos pacientes, seguido por análises de PCR em tempo real (qPCR) e de Western Blot. Como resultado, mostramos que o códon de parada prematuro leva ao decaimento de mRNA pela degradação de RNA mediada por mutação sem sentido, causando haploinsuficiência de NCSTN nos indivíduos afetados. Além disso, observamos que esta haploinsuficiência também afeta as outras subunidades do complexo da γ-secretase (PSEN e PSENEN). Deste modo, nossas descobertas sugerem que a haploinsuficiência da NCSTN pode estar associada ao surgimento da HS e DDD nesses pacientes. No geral, este estudo fornece informações sobre a genética da HS familiar em pacientes recifenses e identifica um novo gene associado a coocorrência de HS e DDD.

Em junho de 2021, quinze meses após o reconhecimento da pandemia de COVID-19 pela OMS, o mundo ultrapassou 176 milhões de casos e quase quatro milhões de pessoas vieram a óbito. Desde então, esta doença provou ser um imenso desafio, introduzindo diferenças clínicas que demandam investigações extensas. Até o momento, não há terapias antiviral com alta eficiência e ampla aprovação, tornando o cenário ainda mais dramático, e explica a urgência em entender os mecanismos biológicos envolvidos na progressão da doença. As variações entre os pacientes e a heterogeneidade na recuperação ainda são permeadas por incertezas que precisam ser esclarecidas, exigindo pesquisas cada vez mais complexas. Contudo, foi estabelecido o papel central da inflamação como um fator agravante que leva ao quadro mais severo da COVID-19 e o envolvimento do inflamassoma foi amplamente hipotetizado. Portanto, as peculiaridades entre os indivíduos precisam ser documentadas e amplamente discutas e as moléculas que estão envolvidas nesse processo devem ser melhor caracterizadas. Para essa finalidade, as diferentes técnicas multi-omicas são uma abordagem relevante para determinar fatores genéticos do indivíduo que interferem na susceptibilidade a doença, bem como identificar alvos terapêuticos. Enquanto alguns indivíduos infectados tornam-se assintomáticos ou apresentam apenas sintomas leves, outra parcela desenvolve quadros severos. Esses pacientes graves podem apresentar distúrbios acentuados na coagulação e/ou desenvolver a síndrome da angústia respiratória aguda (ARDS), que levam à morte. Buscando determinar as diferenças entre indivíduos positivo para a COVID-19, foi utilizado dados de transcriptoma disponíveis publicamente no GEO dataset. A partir dos critérios de inclusão estabelecidos, três estudos foram selecionados para compor o presente trabalho. A partir da meta-análise, houve a quantificação dos genes diferencialmente expressos, seguido da análise de enriquecimento de tais genes através do Gene Ontology e posterior definição das vias de sinalização correspondentes aos DEGs utilizando a ferramenta Reactome. Aqui, observou-se o aumento da expressão de quimiocinas como CCL2, CCL8, e CXCL11, fundamentais para conduzir a resposta imunológica. Também foi possível perceber o aumento de genes envolvidos na sinalização do interferon como IFI27, IFI44L, e IFIT3, além de genes importantes para a resposta antiviral, como o OAS3, GBP1 e TRIM6. Adicionalmente, os termos obtidos com o GO expõe a presença interferônica acentuada em pacientes COVID-19, constatando a predominância das vias do interferon entre os processos biológicos exacerbados a partir da infecção por SARS-CoV-2. Tal resultado pode auxiliar no entendimento das peculiaridades dos pacientes COVID-19 e relata perfil desses indivíduos em uma determinada fase da doença. Com isso, é possível a racionalização de novas abordagens terapêuticas.

Lectinas são proteínas (hemaglutininas) multivalentes encontradas de forma ubíqua na natureza, as quais podem apresentar atividade catalítica, reconhecimento de modo específico de carboidratos na superfície de microrganismos, bem como atividade citoprotetora frente antígenos e/ou patógenos. O objetivo deste trabalho foi isolar, purificar e caracterizar uma lectina presente na folha de Guazuma ulmifolia LAM (GuaZuL) e avaliar sua atividade antibacteriana. As folhas foram lavadas, secas, trituradas até a forma de pó. O extrato bruto (EB) foi obtido por agitação do pó das folhas (10%, p/v) durante 4h em solução de NaCl 0,15 M, pH 6.8, seguido de centrifugação (6.000xg, 15 min). Em seguida, o EB foi submetido ao fracionamento salino com sulfato de amônio, onde a fração 0-40% apresentou maior atividade hemaglutinante (AH), sendo esta, submetida à cromatografia por troca iônica (aniônica) em DEAE-Sephadex. A amostra foi dialisada e liofilizada e submetida a SDS-PAGE, e a banda proteica visualizada foi denominada de GuazuL Após esse procedimento a proteína foi caracterizada através de análises físico-químicas (temperatura, pH e íons divalentes). A detecção da lectina foi realizada através de testes de atividade hemaglutinante (AH) utilizando eritrócitos humanos (ABO) e sangue de coelho, pelo método de diluição seriada. E os ensaios antibacterianos foram realizados por meio do método de microdiluição em caldo para obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) frente a diferentes cepas bacterianas ATCCs. GuaZuL é uma glicoproteína de aproximadamente 35 kDa, que aglutinou eritrócitos de coelho e humanos com maior especificidade para tipo sanguíneo B, e foi inibida apenas por glicoproteínas como Azoalbumina, azocaseína e caseína. Foi termoestável até 100°C, com maior estabilidade em pH 5.0-8.0, e íons divalentes não afetaram sua atividade. Na avaliação da atividade antibacteriana, GuaZuL apresentou atividade bacteriostática e bactericida (CIM: 15,62 µg/mL; CBM: 15,62-62,5 µg/mL), frente a Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii. Em conclusão, a GuazuL é uma lectina obtida a partir das folhas de G. ulmifolia, termoestável, com amplo espectro de ação antibacteriana e com características relevantes que permitem a sua possível aplicação em diferentes processos biotecnológicos.

Nowadays, the abuse of illegal drugs has become a worldwide public health problem, with various medical, social, and legal implications. Drug trafficking is the largest global illicit business, leading to $322 billion per year. Drug trafficking control at borders is carried out mainly through random approaches and the use of sniffer dogs which sometimes allow the entrance of drugs without being noticed. Seized drugs are analyzed preliminarily by spot tests following by validated methods, such as gas or liquid chromatography coupled with mass spectrometry. These techniques are time-consuming and expensive besides destroy the sample, which in many cases can not be re-analyzed. Drug testing requires continuous improvement and implementation of new technologies that accurately, quickly, and efficiently provide new types of information or corroborative evidence. Thus, an e-nose could be a low-cost, non-invasive, non-destructive portable alternative to drug testing. These devices are analogous to the human olfactory system, comprising of a matrix of partially specific electronic chemical sensors and a pattern recognition system capable of recognizing simple or complex odors. This study proposes a newly developed electronic nose (e-nose) based on commercially available gas sensors to detect marijuana samples. Electrical signals corresponding to odorant profiles of marijuana, tobacco cigarettes, and pseudo-narcotic marijuana samples were recorded by system. After preprocessing, exploratory Principal Component Analysis (PCA) was performed to verify the distribution of samples and identify natural clusters of data. Soft Independent Modelling of Class Analogies (SIMCA) and Successive Projections Algorithm—Linear Discriminant Analysis (SPA–LDA) were used to classify the samples. An architecture based on internet-of-things (IoT) cloud is implemented as an online and real-time solution, allowing faster preliminary results during measurement using an early portion of the signals. Communication between the prototype and the cloud environment occurred using the Message Queuing Telemetry Transport (MQTT). PCA results showed that only two PCs explain 100% of the data variance and allowed for discrimination between sample classes. SIMCA model obtained 100.0, 99.0 and 98.6% sensitivity, precision and specificity, respectively. Using SPA-LDA, the number of variables was reduced from 355 to 10, obtaining 100.0% sensitivity, precision and specificity. The results demonstrated that the e-nose system can be used efficiently for in situ detection of marijuana providing real-time results and can be expanded to detect other classes of illicit drugs.

Aferições da pressão arterial (PA) fora do consultório, obtidas por meio de medida residencial da PA (MRPA) ou medida ambulatorial da PA (MAPA), têm sido recomendadas para melhor diagnóstico e manuseio da hipertensão arterial. Contudo, pouco se sabe sobre o comportamento da PA fora do consultório no Brasil. O objetivo geral deste estudo foi investigar o comportamento da PA fora do consultório, assim como a prevalência e os determinantes dos fenótipos de hipertensão [normotensão verdadeira (NV), hipertensão do avental branco (HAB), hipertensão mascarada (HM) e hipertensão sustentada (HS)] em indivíduos brasileiros. Para este fim, foram desenvolvidos 7 sub-estudos que avaliaram indivíduos de 3 coortes independentes: coorte 1 = 5.778 indivíduos que realizaram MRPA em 2 centros de cardiologia pernambucanos entre 2005 e 2018; coorte 2 = 57.768 indivíduos de 719 centros brasileiros que realizaram MRPA usando a plataforma online TELEMRPA entre 2017 e 2020; e coorte 3 = 753 indivíduos de 1 Centro de Pesquisa Clínica alagoano que realizaram MAPA de 2014 a 2016. Os resultados são apresentados nos 7 artigos anexos. Em conjunto, estes dados contribuem para um melhor entendimento do comportamento da PA fora do consultório e dos fenótipos de hipertensão arterial no Brasil e podem ser úteis para o desenvolvimento de políticas públicas voltadas para o controle da hipertensão arterial no nosso país.

A integridade epitelial e da matriz extracelular é fundamental para manutenção da saúde do trato gastrintestinal. No entanto, tanto na DC quanto na RCU, a permeabilidade intestinal é prejudicada, o que resulta na invasão de numerosas bactérias, seguida por infiltração de células imunes no intestino e desencadeamento do processo inflamatório característico dessas doenças. No presente trabalho os anticorpos para os antígenos da calprotectina, ADAM10, ADAM15, colágeno XXIII e complexo β -catenina e e-caderina foram submetidos a conjugação com éster de acridina para detecção histoquimiluminescente e imunoistoquímica para avaliação da matriz extracelular em biópsias de pacientes com doença de Crohn (n = 49) e retocolite ulcerativa (n = 105). As características histopatológicas das amostras foram descritas através da aplicação das técnicas histoquímicas de hematoxilina e eosina, picrosirius red, tricrômico de Masson, ácido periódico de Shiff e azul de Alcian. O perfil epidemiológico dos pacientes foi estabelecido através de aplicação de questionário sociodemográfico e análise dos prontuários. No estudo histoquimiluminescente os valores de calprotectina, juntamente com a análise dos prontuários permitiu a categorização dos grupos com doença ativa (DC n = 33 e RCU n = 74) e em remissão (DC n = 16 e RCU n = 31). Na análise do colágeno intersticial observou-se maior percentual de colágeno nos tecidos de pacientes em remissão para ambas as formas de DII. Resultados parciais demonstraram uma maior expressão de ADAM 10 e 15 nos grupos com DC ativa e em remissão foram estatisticamente significativos quando comparados entre si e com os controles (p <0,05). Para RCU os valores das ADAMs foram estatisticamente significativos apenas quando comparados com o grupo controle. O complexo β-catenina + e-caderina mostrou alterações na imunorreatividade apenas em amostras de pacientes com ulceração da mucosa.

A dura-máter intracraniana humana é a meninge mais externa que recobre o cérebro e possui vasos sanguíneos, mastócitos e fibras nervosas que exercem um papel importante em processos neuroinflamatórios, como a migrânea. O topiramato é um medicamento profilático da migrânea, contudo sua ação na dura-máter, ainda é incerta. Neste contexto, objetivou-se avaliar os aspectos morfofisiológicos de mastócitos na dura-máter humana e a liberação in vitro de óxido nítrico (NO), de peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) e a degranulação de mastócitos sob ação do topiramato. Em uma primeira análise foram coletadas oito amostras de dura-máter intracraniana de cadáveres humanos. As amostras inteiras foram fixadas, e dois fragmentos de 1,5 cm² cada, foram cortados de quatro distintas áreas da convexidade da dura-máter, totalizando 64 fragmentos. Foram avaliados os parâmetros histomorfométricos: distância dos mastócitos aos vasos, densidade de mastócitos e porcentagem de mastócitos degranulados. Em outra análise, os espécimes de dura-máter obtida de cadáveres (n=4) foram lavadas com fluido intersticial sintético (SIF) a 25º C por 30 minutos. Posteriormente, foram divididas em fragmentos (n=7) que foram incubados por 15 minutos com SIF e em seguida por 30 minutos na presença ou não do topiramato em diferentes concentrações: 10-6 M, 10-8 M e 10-10 M. Após o tratamento, o meio de incubação foi trocado por uma solução de cloreto de potássio (KCl) a 60 mM por 30 minutos. O teor de CGRP e NO liberado foi quantificado pelo método de ELISA e Reação de Griess, respectivamente. Os fragmentos de dura-máter das duas análises foram transferidos para o formol tamponado a 10% e em seguida foi feito o processamento histológico. A degranulação dos mastócitos foi examinada por microscopia óptica. A primeira análise demonstrou um maior número de mastócitos próximos de vasos venosos foi encontrado na camada periosteal (17,01 ± 10,13) do que na camada meníngea (14,10 ± 6,95). Os mastócitos próximos ao seio sagital superior se apresentaram em maior quantidade juntos aos vasos venosos (16,71 ± 10,05) do que aos vasos arteriais (11,18 ± 7,52). A segunda análise mostrou que o tratamento com topiramato nas concentrações de 10-10M apresentou uma menor porcentagem de mastócitos degranulados por mm² (75,39% ± 0,27) quando comparado com controle positivo (KCl 60 mM) (100%). Desta forma, este estudo evidenciou que os mastócitos estão localizados próximos aos vasos venosos da camada periosteal e na região proximal do seio sagital superior. Além disso, sugere-se que o topiramato em uma menor concentração (10-10M) apresenta um efeito protetivo sobre a degranulação dos mastócitos.

O câncer do Colo do Útero é o quarto tipo em incidência nas mulheres em todo mundo, sendo responsável por mais de 700.000 casos ao ano. Desses, cerca de metade morrerão da doença, sobretudo mulheres que vivem em regiões com baixos índices de desenvolvimento. Após o agravo dessa situação no cenário da Pandemia do COVID-19, a Organização Mundial da Saúde, em novembro de 2020, passa a considerar esse tumor como um problema da saúde pública mundial, e lança estratégias para sua eliminação nestas populações até 2030. Neste enfrentamento reduzir mortes de quem já está com a doença é um desafio urgente. Uma das causas dessas mortes é a falha do tratamento, notadamente a existência de tumores radiorresistentes. Diferentes moléculas podem estar envolvidas nesta resistência, sendo algumas delas parte da regulação epigenética da célula. As sirtuínas são uma família de enzimas que atuam em diversos processos celulares, como no apoptose. Sua participação na tumorigênese chama atenção por serem apontadas como potencial alvo molecular terapêutico. Este trabalho teve por objetivo estudar a radiorresistência através das alterações moleculares, com foco no papel das SIRT1 e SIRT5 neste processo. Amostras de biópsia de tecido tumoral, obtidas de pacientes tratadas no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco, de 2018 e 2019, foram coletadas e avaliadas antes de serem submetidas à radioterapia associada à quimioterapia como tratamento exclusivo. Durante esse tempo foi observado e registrado os casos cujo tratamento foi ineficaz, a presença de fatores de mau prognóstico conhecidos e a expressão das sirtuinas nas amostras tumorais. Os achados reforçam o potencial das SIRT1 e SIRT5 como marcador de prognóstico, em especial da SIRT1.