AVALIAÇÃO DA EFETIVIDADE DA TÉCNICA DE SONICAÇÃO PARA O DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE INFECÇÕES DE DISPOSITIVOS E PRÓTESES ARTICULARES ORTOPÉDICAS EXPLANTADOS
Sonicação; Diagnóstico microbiológico; Infecção; Infecção Articular.
O aumento do uso cada vez mais frequente de tecnologia implantável amplificou o risco de infecções profundas do sítio cirúrgico, frequentemente devido à ausência de função imunológica local e as condições favoráveis de acúmulo de bactérias na superfície do dispositivo gerando biofilme, esse tipo de infecções apresentam complicações adicionais ao quadro do paciente, entre elas o diagnóstico microbiológico adequado da infecção. O presente estudo tem por objetivo avaliar a efetividade do uso da técnica de sonicação para o diagnóstico microbiológico das infecções de dispositivos de próteses ortopédicas explantados dos hospitais da cidade de Recife-PE que trabalham com próteses ortopédicas (Hospital da Restauração, Hospital do Câncer de Pernambuco, Hospitais Das Clínicas e Complexo Hospitalar Unimed Recife), tendo como objetivos específicos a realizar padronização de um protocolo de sonicação tendo como base os parâmetros mais atuais disponíveis na literatura; Comparar o resultado das culturas de amostras clínicas obtidas por protocolo de sonicação de dispositivos de próteses ortopédicas explantados com culturas de tecidos periprotéticos; Avaliar o perfil bacteriano e os padrões de suscetibilidade antimicrobiana dos patógenos identificados e Avaliar por microscopia eletrônica a estrutura do biofilme das bactérias laboratoriais S. epidermidis, S. aureus, E. coli e P. aeruginosa com e sem a realização do protocolo de sonicação. Para atender os objetivos propostos, as amostras de tecidos periprotéticos serão preparadas com fórceps e bisturi sob fluxo de ar laminar, posteriormente, 100 μl (0,1 ml) das amostras serão colocadas em diferentes placas com meios de cultura para bactérias aeróbicas e anaeróbicas. Para realização do protocolo de sonicação, os explantes serão coletados em recipientes estéreis, imersos em solução salina até, pelo menos, 90% do dispositivo explantado. Em seguida, sonicado em banho de ultrassom com 40 kHz na intensidade de 0,1 Watt/cm2 por 1 minuto. 100 μl do fluido de sonicação serão inoculadas em ágar para o cultivo de bactérias aeróbicas e anaeróbicas. Ainda para testar a perfil de suscetibilidade das cepas clínicas identificadas será realizado por Microdiluição em caldo seguindo a padronização da Brazilian Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (BrCast) 2022. Para a modelagem de biofilme in vitro será utilizada mesma metodologia empregada por Karbysheva e colaboradores (2020), onde são utilizadas esferas de vidro porosas para mimetizar a superfície dos dispositivos protéticos e formar os biofilmes, utilizando as cepas laboratoriais das espécies Staphylococcus epidermidis (ATCC 35984), S. aureus (ATCC 43300) E. coli (ATCC 25922) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC 53278). A análise da ação do protocolo de sonicação será realizada por microscopia eletrônica.