Banca de DEFESA: LEYLLANE RAFAEL MOREIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LEYLLANE RAFAEL MOREIRA
DATA : 25/08/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Sala 01 do NESC
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DO TECIDO ADIPOSO HUMANO COMO RESERVATÓRIO PARA O TRYPANOSOMA CRUZI DURANTE TRATAMENTO IN VITRO COM BENZONIDAZOL

PALAVRAS-CHAVES:

Tecido adiposo; Imunomodulação; Trypanosoma cruzi; Benzonidazol.

PÁGINAS: 160
RESUMO:

O tecido adiposo (AT) além de exercer um papel crucial na homeostase energética, também está associado à resposta imunológica e atua como reservatório de infecção para parasitas. O Trypanosoma cruzi pode utilizar o AT como um possível mecanismo de evasão da resposta imune do hospedeiro. O Benzonidazol (BZ), droga usada para tratamento da doença de Chagas pode ter sua eficácia reduzida se o AT funcionar como barreira. Diante disso, avaliamos inicialmente a imunomodulação provocada pela infecção do T. cruzi em AT e o tratamento com BZ. Para isso, utilizamos células-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC) humano que foram diferenciadas em adipócitos. O AT foi infectado pelo T. cruzi e submetido ao tratamento com BZ. Cerca de 72h pós- tratamento, o sobrenadante de cultura foi coletado para dosagem das citocinas, quimiocinas e adipocinas e o AT infectado removido para quantificação da carga parasitária. Verificamos elevada carga parasitária no AT infectado, no entanto no grupo tratado a carga parasitária diminuiu. Observamos elevada secreção de IL-6 nas condições de cultivo infectadas, no entanto na condição tratada com BZ (AT+T+BZ) também ocorreu diminuição da citocina. Nas quimiocinas e adipocinas, verificamos elevação de IP-10/CXCL10, MCP-1/CCL2, RANTES/CCL5 e de leptina nas condições de cultivo infectadas pelo T. cruzi. Posteriormente, propomos um modelo de co-cultivo indireto que avaliou a imunomodulação no microambiente do AT humano infectado pelo T. cruzi em contato indireto com células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e tratamento com BZ. Após a diferenciação adipogênica das ADSC infectamos com T. cruzi. Em seguida, adicionamos no inserto superior da placa de cultura o PBMC de indivíduos voluntários (n=5) e após 48 horas as células foram tratadas com BZ. Após 72 horas de tratamento, da mesma forma, coletamos os sobrenadantes de cultura para dosagem de citocinas, quimiocinas e adipocinas. Além disso, os adipócitos infectados foram quantificados para avaliação da carga parasitária e as PBMC removidas para realização da imunofenotipagem dos marcadores de ativação e inibição celular. Nossos resultados verificaram elevada carga parasitária nas condições de cultivo infectadas, entretanto para  BMC+AT+T+BZ ocorreu diminuição quando comparada à PBMC+AT+T. Observamos níveis mais elevados de IL-2 e IL-6, na condição PBMC+AT, quando comparada à PBMC. Em contrapartida, verificamos diminuição da produção de TNF e IL-8 nas condições de cultivo em que há a presença do AT (PBMC+AT) quando comparado à PBMC. Também observamos que ocorreu elevação de MCP-1 na condição PBMC+AT comparada às condições de cultivo PBMC+AT+T. Verificamos ainda que a secreção de adipsina decai na condição PBMC+AT+T+BZ quando comparada à PBMC+AT+T. Contudo, a frequência das células CD14 + CD80 + diminuiu nas condições infectadas, independente do tratamento, quando comparada aos controles. Portanto, verificamos que BZ quando em contato apenas com o AT, consegue promover imunomodulação das condições infectadas. No entanto, o mesmo não acontece quando em contato com o PBMC, o que pode ser benéfico para o parasita e servir como mecanismo de escape da resposta imune do hopedeiro. 

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ELISA DE ALMEIDA NEVES AZEVEDO - Fiocruz - PE
Externa à Instituição - MICHELLE CHRISTIANE DA S. RABELLO
Externa à Instituição - SUENIA DA CUNHA GONÇALVES
Interna - 1465404 - VALDENIA MARIA OLIVEIRA DE SOUZA
Presidente - ***.943.324-** - VIRGINIA MARIA BARROS DE LORENA - Fiocruz - PE