O vírus da Zika (ZIKV) foi responsável por surtos da doença nos últimos anos, principalmente no Brasil, associado aos casos de microcefalia e a síndrome de Guillain-Barré. Este cenário apontou para a  necessidade de investigar estratégias vacinais, drogas anti-virais e métodos de diagnóstico, visto que, as medidas profiláticas de controle de disseminação do mosquito- vetor são pouco efetivas, sobretudo em países subdesenvolvidos. A grande maioria das estratégias utilizadas para o vírus da Zika foram oriundas do vírus da Dengue, como por exemplo as estratégias envolvendo a proteína NS3. Esse antígeno vêm sendo estudado como um alvo interessante para diagnóstico e também para vacinas, pela presença de epítopos específicos que induzem a ativação de células T. Estudos têm apontado que esta proteína não induz efeitos de resposta exacerbada da doença, após o indivíduo ter sido contaminado previamente por outro flavívirus e já possuir anticorpos sub-neutralizantes para o mesmo. Bactérias como Escherichia coli, são muito utilizadas como biofábricas, para produção de proteínas heterólogas, com benefícios de rápido crescimento e custo baixo de manutenção. O presente trabalho visou a produção e purificação da porção protease da proteína NS3 do vírus da Zika em E. coli. O gene foi clonado no vetor de expressão pGEX-4T3 e transformado em células de E.coli BL21(DE3). SDS-PAGE e Western Blot foram utilizados para confirmar a produção. Experimentos para  purificação foram realizados através de ensaios com resina de níquel e Glutationa Sepharose, contudo, os resultados obtidos não foram suficientes para prosseguimento dos experimentos in vitro, que possibilitariam a avaliação do potencial imunoestimulatório da proteína. NS3 é apontada como importante alvo terapêutico para controle da doença, e por isso, seu uso deve continuar sendo explorado, afim de elucidar respostas acerca do seu perfil imune, visto que maioria dos estudos acerca da proteína são voltados para a sua estrutura e função.  

As geo-helmintíases são doenças negligenciadas que atingem mais de 1 bilhão de pessoas no mundo todo e, no Brasil, cerca de 70% da população em idade escolar, em que os casos podem ser ainda mais graves. O tratamento é realizado com o emprego de albendazol ou mebendazol, mas o amplo uso e distribuição estão levando à diminuição de eficácia e desenvolvimento de resistência anti-helmíntica. Novos medicamentos podem ser desenvolvidos para contornar o problema, com emprego plantas medicinais. O melão de São Caetano ou Momordica charantia L., apresenta atividades medicinais diversas, inclusive a anti-helmíntica, demonstrada em literatura. Dessa forma, o objetivo do trabalho é desenvolver formulações pediátricas para o tratamento de geo-helmintíases empregando Momordica charantia L.. Inicialmente foram obtidas e caracterizadas as drogas vegetais através de metodologias presentes na Farmacopeia Brasileira, sendo os extratos hidroalcóolicos produzidos através de maceração com etanol 70%. Os extratos secos foram obtidos por secagem em estufa e caracterizados quanto à higroscopicidade, solubilidade, perfil térmico e perfil fitoquímico. Além disso foram quantificados marcadores por CLAE-DAD e desenvolvido e validado um método colorimétrico para determinação de flavonoides totais. O extrato seco foi utilizado no desenvolvimento de formulações apresentadas como xarope para diabéticos e suspensão, sendo esta submetida a um delineamento experimental. As análises da droga vegetal apresentaram parâmetros aceitáveis, como índice de umidade e estabilidade térmica. Os extratos secos apresentaram alta higroscopicidade, baixa solubilidade, perfil térmico semelhante ao da droga vegetal e presença de metabólitos secundários de interesse, como taninos, alcaloides e saponinas. O doseamento através de CLAE-DAD apresentou baixos valores de isoquercetina e astragalina, mas a quantificação de flavonoides totais demonstrou valor superior para a classe. Os xaropes para diabéticos não apresentaram sabor agradável, enquanto uma das suspensões, sim. A suspensão passou por um processo de otimização e a formulação escolhida apresentou ótimo sabor, pH de 7,32 e viscosidade de 78,4mPa.s. Dessa forma, o produto desenvolvido apresenta-se como uma alternativa natural, economicamente viável e promissora para o tratamento de geo-helmintíases em crianças.

As espécies vegetais têm alto consumo mundial. As matrizes vegetais são complexas, contendo compostos bioativos com efeitos farmacológicos e/ou toxicológicos. O consumo de ácido oxálico ou oxalato, metabólito presente em altas concentrações em diferentes espécies vegetais, pode causar complicações renais a curto e longo prazo, principalmente se a concentração plasmática for ≥ 0,8-2,5 μmol.L^-1 e a concentração urinária for ≥ 20- 30 mg.24h-1. Algumas pessoas predispostas a complicações renais, como aquelas com doenças crônicas não transmissíveis (DCNT) como diabetes e hipertensão, apresentam uma predisposição a desenvolverem distúrbios renais em decorrência de sua condição fisiopatológica e ao mesmo tempo fazem uso de espécies de plantas medicinais como terapia adjuvante, como Artocarpus altilis (parkinson) fosberg Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar o desenvolvimento  de um método analítico para determinação do teor de ácido oxálico em Artocarpus altilis (parkinson) fosberg. A separação cromatográfica dos analitos em fase reversa foi obtida em uma coluna C18 (250 x 4,6 mm; 5 μm; 80 Å) em modo isocrático e usando água acidificada com ácido fosfórico:metanol  (99:1) a 0,6 mL.min^-1 em pH 2,0como fase móvel (25°C e detecção a 220 nm). O tempo de análise foi de 5 min. Para o preparo da amostra, lâminas foliares de Artocarpus altilis foram coletadas, secas em estufa, trituradas e acondicionadas até o momento de preparo do extrato. O extrato era preparado a cada dia de análise a partir de   1,0 g do triturado com 20 mL de HCl 2 mol.L ^-1, a 21 ° C, por 15 min (sob agitação), centrifugado e filtrado. O método apresentou intervalos linares de concentração de 5 a 45 µg.mL^-1 para ácido oxálico. O método demonstrou boa precisão e exatidão intra e intercorrida com erros relativos inferior a 15%. Ainda, o método foi aplicado em amostras de lâmina foliar de Artocarpus altilis encontrando uma concentração de 1,06 mg.g^-1 de ácido oxálico. Os resultados trouxeram dados inéditos a respeito do teor de ácido oxálico contido em Artocarpus altilis. Espera-se que esse método possa contribuir para o desenvolvimento de outros métodos com o mesmo propósito.

Selantes de fibrina são majoritariamente compostos por fibrinogênio e trombina, que quando misturados mimetizam a etapa final da cascata da coagulação, formando o coágulo de fibrina. Esses selantes são amplamente utilizados em procedimentos cirúrgicos devido a suas propriedades físicas e biológicas, que apresentam vantagens em comparação a materiais de origem sintética utilizados nas suturas tradicionais. Dentre estas vantagens, destacam-se: uma maior compatibilidade fisiológica, biodegradabilidade e uma melhor recuperação do paciente pós-cirurgia. A matriz de fibrina também vem sendo amplamente estudada como um sistema de carreamento e entrega células, fatores de crescimento, genes e fármacos. Essa característica faz com que antibióticos incorporados aos selantes de fibrina venham sendo testados para o combate das Infecções de Sítio Cirúrgico (ISC). No entanto, a produção de selantes de fibrina pela indústria farmacêutica de hemoderivados necessita de um grande aparato tecnológico, o que tende a elevar o custo de sua produção. Nesse sentido, esse trabalho tem como objetivo desenvolver uma metodologia simples e de baixo custo para obter selante de fibrina autólogo e incorporar um agente antimicrobiano à formulação. Para isso, foram fracionadas fontes de fibrinogênio (crioprecipitado) e protrombina (euglobulinas plasmáticas) de unidades individuais de plasma com sorologia negativa, utilizando métodos de precipitação proteica físico-químicos. A viabilidade da protrombina precipitada foi avaliada qualitativamente por meio do teste de Tromboplastina Parcial Ativada (TTPa). A protrombina foi convertida em trombina pela adição de 10 mL de carbonato de cálcio 0,2M. A dosagem de fibrinogênio indicou a presença de 1,5g/dL ± 0,9 dessa proteína no crioprecipitado, enquanto a trombina apresentou uma concentração de 388,66 ± 98,72 UI/mL. À solução de trombina foram incorporados diferentes volumes de agente antimicrobiano (cloridrato de vancomicina 50 mg/mL ou sulfato de gentamicina 40 mg/mL). Promoveu-se a formação do coágulo com a adição de crioprecipitado e foram verificadas suas características macroscópicas. Os coágulos formados a partir da solução de trombina com maiores concentrações de antibiótico apresentaram menores consistência e adesão a parede do tubo em comparação com o controle. Ao final, foi realizado um ensaio microbiológico automatizado BACTECTM FX para avaliação da atividade antimicrobiana do selante de fibrina enriquecido com antibióticos frente a Staphylococcus aureus, uma das principais espécies causadoras das ISC. A matriz foi capaz de inibir o crescimento bacteriano local por até 72 horas. A metodologia desenvolvida nesse trabalho mostrou-se eficaz para a produção de um selante de fibrina, a nível de hemocentro, com capacidade para prevenir ISC. O desenvolvimento de uma metodologia simples e de baixo custo para obtenção de uma matriz de fibrina possui relevância, para além da prática clínica e cirúrgica, nas mais diversas áreas de pesquisa e inovação terapêutica; dado a versatilidade desse material biológico e a grande perspectiva de utilização em estudos de tecnologia farmacêutica e medicina regenerativa.

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença autoimune do tecido conjuntivo caracterizada por alterações vasculares, desregulação imunológica e fibrose progressiva da pele e de órgão internos. A fisiopatogênese da ES é complexa e incompletamente compreendida, o que reflete na heterogeneidade clínica da doença e dificulta a descoberta de terapias eficazes. Atualmente há poucas opções de tratamento para doença, e as que estão disponíveis não têm impacto significativo em sua progressão, havendo uma necessidade considerável por estudos que busquem a melhor compreensão da doença e que explorem novas alternativas terapêuticas. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil de citocinas em pacientes com ES e a atividade imunomoduladora e antifibrótica de derivados tiazolidínicos (LPSF/CR-35 e LPSF/GQ-16) e do híbrido IBPA in vitro e in vivo. Na primeira etapa do estudo foram incluídos 84 pacientes com diagnóstico de ES e 84 voluntários saudáveis pareados por sexo e idade. A quantificação das citocinas no soro dos participantes foi realizada através da técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Na etapa seguinte, os efeitos imunomoduladores e antifibróticos dos derivados tiazolidínicos e do híbrido IBPA foram avaliados em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com ES e em modelo de ES induzido por ácido hipocloroso (HOCl) em camundongos BALB/c. Observou-se que pacientes com ES quando comparados com voluntários saudáveis apresentaram aumento nos níveis séricos da IL (Interleucina) -27 e da IL-18, além de diminuição da isoforma a da proteína ligadora da IL-18 (IL-18 BPa). Além disso, os pacientes com ES apresentaram aumento significativo nos níveis séricos do receptor solúvel da oncostatina M (sOSM-R) e da glicoproteína 130 solúvel (sgp130), quando comparados com voluntários saudáveis. As citocinas e receptores desregulados no soro dos pacientes com ES foram correlacionados e/ou associados com manifestações da doença. Os tratamentos com as moléculas sintéticas in vitro promoveram a modulação na secreção de diferentes citocinas em cultivos de PBMC de pacientes com ES (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17, IFN-γ e TNF). Os efeitos imunomoduladores in vivo também foram evidenciados em modelo de ES induzido pelo HOCl, os diferentes tratamentos reduziram a expressão de marcadores de ativação em células T CD4+ (CD69) e células B (MHC-II e CD40), e a expressão do marcador de macrófagos M2 (CD206), em células isoladas do baço dos camundongos. A expressão do marcador de macrófagos M1 (CD86) foi aumentada após os diferentes tratamentos com os derivados tiazolidínicos e com o IBPA. A ação antifibrótica das moléculas foi avaliada in vivo na pele e pulmões dos camundongos com ES induzida pelo HOCl. Observou-se que os tratamentos regularam negativamente a expressão de mRNA de marcadores fibróticos na pele e pulmões (α-SMA, TGF-β, Colágeno tipo I, IL-4 e IL-13), além de terem reduzido o acúmulo de colágeno na pele e o espessamento dérmico. Adicionalmente, o IBPA reduziu significativamente o acúmulo de colágeno nos pulmões dos animais. As análises histopatológicas de fragmentos de pele e pulmões corados com Hematoxilina & Eosina e Sirius Red evidenciaram que as moléculas atuaram impedindo o desenvolvimento da fibrose dérmica e pulmonar nos camundongos. Os resultados apresentados no presente estudo indicaram diferentes citocinas e receptores solúveis que podem estar associados com a ES e identificaram três diferentes moléculas sintéticas com potencial terapêutico para a doença.

Esta pesquisa empírica de recorte transversal fez avaliação da eficiência técnica da rede hospitalar estadual de Pernambuco. Aplicou-se a Análise Envoltória de Dados- DEA para retornos constantes e variáveis de escala,a fim de construir a fronteira de eficiência. Os dados do estudo são da rede hospitalar do estado de Pernambuco – Brasil, extraídos do Sistema de Informação Hospitalar e do Sistema de Cadastro Nacional de Estabelecimentos de Saúde para o período de 2008 a 2019. Os hospitais foram classificados segundo porte, natureza jurídica e, àqueles sob gestão estadual segundo modelo de gerência – Administração Direta e Organização Social de Saúde. Realizaram-se, também, análises segundo classificação gerencial adotada pela Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco. Foram construídos os indicadores: Taxa de Mortalidade Hospitalar, Tempo Médio de Permanência (em dias) e Taxa de Cirurgias para cada uma das unidades e para cada ano do estudo. Criou-se uma variável de agrupamento Porte, para análise da eficiência Técnica. Para estabelecer a comparação entre os modelos de gerência dos hospitais públicos e àqueles especificamente sob gestão estadual, foi aplicada a estatística descritiva através da análise de frequência, utilizando-se os testes de Shapiro Wilk e Man-Whitney. Os testes demonstraram que as variáveis selecionadas para o estudo não apresentaram distribuição normal e observou–se diferença estatisticamente significante entre as médias dos estabelecimentos gerenciados por Organizações Sociais de Saúde e Administração Direta. Os resultados obtidos a partir do desenvolvimento do Modelo DEA–CRS e VRS demonstraram que os hospitais de natureza pública foram mais eficientes, seguidos dos filantrópicos e privados. As Unidades Hospitalares gerenciadas pelas Organizações Sociais se apresentaram mais eficientes, com tendência negativa de crescimento. Já os hospitais de Administração Direta apresentaram um comportamento de busca pela eficiência, com tendência de crescimento. Os resultados da pesquisa permitem concluir que, para Pernambuco, a natureza jurídica afetou a eficiência técnica das unidades hospitalares, assim como o Modelo de gerência e o porte.

A cardiomiopatia hipertrófica (CMH) é uma doença genética caracterizada por hipertrofia ventricular esquerda (HVE) na ausência de outra condição cardíaca, sistêmica ou metabólica. A investigação molecular através dos painéis genéticos possibilita a identificação de fenocópias que cursam com HVE, dentre as quais a doença de Fabry (DF).  A forma clássica da DF, causada por mutações patogênicas, não apresenta controvérsias quanto à instituição do tratamento, porém as apresentações tardias, com variantes de significado incerto (VUS), são objeto de discussão quanto ao início da terapia e à utilização do liso-Gb3 como marcador de patogenicidade.  Novos biomarcadores estão sendo estudados, dentre os quais os microRNAs (miRNAs). O objetivo deste estudo é a pesquisa de miRNAs como marcadores de patogenicidade nos pacientes (pcts) com a variante cardíaca da DF. Foram incluídos 131 pcts com o diagnóstico ecocardiográfico de CMH submetidos à investigação genética para a DF, dos quais 76 através do sequenciamento do gene GLA e 55 pelo painel genético para CMH. Em sete pcts (5,34%) foram encontradas mutações no gene GLA e identificadas as seguintes variantes: uma c.967C>A(p.Pro323Thr), quatro  c.352C>T(p.Arg118Cys) e duas  c.937G>T(p.Asp313Tyr). Os pcts com mutações no gene GLA que haviam realizado, apenas, o sequenciamento do gene, foram submetidos ao painel para CMH (18 genes). Três pcts (todos com a variante p.Arg118Cys)  apresentaram mutações em outros genes.  Nos quatro restantes, a investigação foi ampliada através da coleta do painel para as cardiomiopatias (206 genes),  não tendo sido detectadas variantes em outros genes. A triagem familiar revelou 17 indivíduos com mutações no gene GLA, sendo identificados dois irmãos com HVE com a variante c.937G>T(p.Asp313Tyr). O painel para cardiomiopatias hereditárias foi coletado em um deles e nenhuma mutação foi detectada em outro gene. Os pcts e os portadores de variantes no gene GLA foram submetidos à dosagem do liso-Gb3 e à análise dos seguintes miRNAs: miR-1291, miR-214 e miR-505, tendo sido avaliadas as suas expressões diferenciais. Na comparação entre indivíduos com HVE e sem HVE, não houve diferença significativa para os miR-1291, miR-214 e miR-505, entretanto houve tendência a super expressão nos indivíduos que apresentam HVE, principalmente para o miR-1291. Diferentemente, a expressão do miR-214 em indivíduos com HVE foi significativamente menor do que em indivíduos sem HVE (p=0,0416), tendo a expressão relativa de indivíduos saudáveis como referência. Para o miR-505 houve uma expressão significativamente maior tanto nos portadores das variantes no gene GLA sem HVE quanto nos pcts com variantes no GLA com HVE,  quando comparados a indivíduos saudáveis (p=0,0195).  O miR-505 também apresentou uma correlação significativa e diretamente proporcional com o liso-Gb3 no grupo dos pcts com GLA com  HVE (p=0.0353; r=-0.9647). Todos os indivíduos apresentaram os níveis do liso-Gb3 normais. Neste estudo a frequência de mutação no gene GLA em pcts com CMH foi 5,34%. A coleta do painel molecular para cardiomiopatias hereditárias não detectou outras variantes que justifiquem a HVE em pcts com as mutações c.967C>A(p.Pro323Thr) e  c.937G>T(p.Asp313Tyr), até então classificadas como VUS. Tratando-se de uma doença rara este estudo contribui com evidências de que o aumento na expressão do miR-505, o aumento na expressão de miR-1291 e sub expressão de miR-214 naqueles com HVE podem ser marcadores de patogenicidade na DF. No entanto, são necessárias maiores investigações destes microRNAs com um número maior de indivíduos.

O Brasil lidera o número de casos na América Latina ao se tratar de doença de Chagas, estimando-se 2 milhões de pessoas acometidas pela doença em nosso país. O tratamento da doença ainda é baseado no benzonidazol, porém essa droga é mais efetiva na fase aguda e possui alta toxicidade. Além disso, é sabido que o envolvimento do sistema imune de hospedeiros infectados com Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença, pode desempenhar um importante papel na eficácia da quimioterapia. Diante disso, uma nova série de 1,3-tiazóis (2-17), derivados de 2,4-diclorofenil tiossemicarbazona ou 2,3,4-triclorofenil-tiossemicarbazona, foram investigados em ensaios in vitro sobre as formas evolutivas do T. cruzi, in silico e quanto ao potencial imunomodulador. Em paralelo, visando a melhoria do screening de novos compostos, o presente estudo propõe o desenvolvimento de uma linhagem transgênica de T. cruzi que expressa luciferase, reduzindo o tempo de análise em comparação aos métodos convencionais. Contra a forma tripomastigota, alguns derivados de 1,3-tiazol apresentaram valores de IC50 que foram pelo menos 10 vezes mais potentes que o benznidazol, como os compostos 8 (2,64M), 4 (3,27M), 10 (4,08 M) e 16 (4,82 M). Contra a forma amastigota, o composto 15 apresentou o melhor valor de IC50 (3,65M) sendo mais ativo que o fármaco padrão, benznidazol (5,64M). Os compostos 11 (5,96M) e 12 (4,46M) exibiram atividade equipotente quando comparados ao benzonidazol. Em relação à citotoxicidade em macrófagos, alguns dos tiazóis apresentaram baixa citotoxicidade (os compostos 6, 8, 9, 14, 16 e 17 apresentam CC50 > 44,18 M). Os resultados de docking molecular sugerem que os compostos que possuem anéis aromáticos como substituintes, como fenil (compostos 8 e 17) ou naftil (composto 9), apresentaram maior afinidade prevista para o sítio de ligação da cruzaína quando comparados com as moléculas com substituintes não aromáticos. Quanto a avaliação do perfil de morte celular por citometria de fluxo, apenas um composto induziu necrose de maneira significativa no tratamento de 2xIC50 em relação ao sem tratamento e ao benzonidazol. Até o momento, a amplificação e clonagem do gene da luciferase para obtenção da cepa transgênica está na fase inicial. Portanto, essa nova série de 1,3-tiazóis apresentou compostos com potencial promissor para o avanço de estudos pré-clínicos contra doença de Chagas

Aflatoxina B1 (AFB1), é uma micotoxina proveniente de metabolismo fúngico, sendo considerada potente agente carcinogênico, teratogênico, mutagênico e imunossupressor, que contamina principalmente o milho, amendoim, cereais antes ou após a colheita, e apresenta maior toxicidade quando comparada a outras micotoxinas. Os imunossensores eletroquímicos são biossensores que utilizam o sinal da biointeração entre antígeno e anticorpo. A construção de imunossensores é baseada em modificações químicas no eletrodo, através da formação de monocamadas automontadas (SAM), que tem por finalidade o favorecimento da transferência de elétrons, biocompatibilidade, sensibilidade e reprodutibilidade. O objetivo deste estudo foi o desenvolvimento de um imunossensor para detecção de AFB1 em alimentos, processo este caraterizado por meio da técnica eletroquímica de voltametria cíclica (VC) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE). Para o desenvolvimento deste sensor foi utilizado o aminoácido cisteína (Cys), 1-[3-(dimetilamino) propil]-3-etilcarbodiimida (EDC), N-hidroxissuccinimida (NHS), anticorpo anti-AFB1 e o soro de albumina bovina (BSA). Cada etapa de desenvolvimento do imunossensor foi caracterizada utilizando-se uma varredura de potencial de -0,2 a 0,7 V e velocidade de varredura de 50 mV.s^-1 em solução de ferro-ferricianeto de potássio a 10mM (1:1). A plataforma imunossensora foi construída sobre a superfície de um eletrodo de ouro. Nas primeiras etapas da montagem, foram realizadas a adsorção do aminoácido cisteína e imobilização das nanopartículas de óxido de zinco (NPsZnO). Posteriormente, o anticorpo monoclonal anti-aflatoxina B1 foi imobilizado quimicamente sobre o eletrodo por meio de acoplamento químico via EDC:NHS. A seguir, foram realizados ensaios de seletividade e sensibilidade com amostras de AFB1 (0,01 ng.mL^-1 a 1mg/mL^-1). Por meio das alterações no perfil voltamétrico e impedimétrico, foi possível caracterizar o comportamento eletroquímico do imunossensor. Durante os ensaios de bioatividade com amostras de AFB1, foram verificados um aumento da resposta impedimétrica e uma redução da resposta amperométrica do sistema, evidenciando o processo de formação do complexo anticorpo-antígeno. Inicialmente o eletrodo de ouro limpo demonstrou um comportamento eletroquímico limitado por difusão apresentando picos anódicos (ipa) e catódicos (ipc) bem definidos. Após a modificação do eletrodo com cisteína houve uma discreta diminuição das ipa e ipc. No entanto, a imobilização das NPsZnO, demonstraram um aumento na condutividade do eletrodo, característica essencial para visualização dos processos eletroquímicos de bioreconhecimento do biossensor. Foi comprovado o bioreconhecimento do biossensor ao seu analito através da modificação do Rct (Resistência a Transferência de Carga), refletido no aumento do diâmetro do semicírculo no EIE e queda da resposta amperométrica total do sistema. Entretanto, a resposta eletroquímica do biossensor não foi alterada após avaliação com a micotoxina ocratoxina A, indicando a seletividade do sistema. Portanto, o biodispositivo demonstra ser uma ferramenta sensível e seletiva que pode favorecer a detecção de aflatoxina B1 em alimentos contaminados.

Introdução: A Síndrome de Sjögren Primária (SSP) é uma doença autoimune complexa e heterogênea caracterizada por infiltração linfocítica principalmente em glândulas salivares e lacrimais.

Objetivos: Analisar os níveis de galectinas 1 (Gal-1) e 3 (Gal-3) séricas e salivares em SSP e sua associação com manifestações clínicas da doença.

Metodologia: Foi analisado o perfil clínico de 43 pacientes portadores de SSP do Serviço de Reumatologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco, incluindo os critérios classificatórios e índices de atividade de doença como o ESSDAI (EULAR Sjögren’s Syndrome Disease Activity Index) e o ESSPRI (Eular Sjögren’s Syndrome Patient Reported Index), além do índice de dano SSDDI (Sjogren’s Syndrome Disease Damage Index). Foram analisados os resultados de Gal-1 e Gal-3 séricas e salivares pelo ELISA e correlacionados com variáveis clínicas e laboratoriais. Além disso, as Gal-1 e Gal-3 foram avaliadas por imunohistoquímica nas 24 biópsias salivares menores.

Resultados: Das 43 pacientes selecionadas, todas foram do sexo feminino, com média de idade de 45,28 anos. O valor da mediana da Gal-1 no soro foi de 33338,30 pg/ml comparada com os controles 2002,86 pg/ml com p < 0,001 e a mediana  da Gal-3 no soro foi de 4452,50 pg/ml  e dos controles foi de 2004,00 pg/ml  com p < 0,001. O valor da mediana da Gal-1 salivar também foi mais elevada em relação ao grupo controle  (701,53 x0 pg/ml) com p =0,038, porém maiores níveis não foram encontrados nos pacientes em relação aos controles para a Gal-3 salivar.Observou-se uma maior mediana nos níveis de Gal-3 salivar nos pacientes que desenvolveram manifestações glandulares da doença ( p=0,015)  e houve correlação direta moderada (r = 0,64 com p = 0,025) entre os níveis de Gal-3 salivar e o número de linfócitos. Observou-se maior marcação da Gal-3 nos ductos de tecido glandular das biópsias de glândulas salivares menores, comparado com a pouca expressão da Gal-1. Não houve associação estatisticamente significante entre os níveis das galectinas (Gals) e provas de atividade inflamatória ( PCR , VHS e dosagem de IgG sérica).

Conclusão: Observou-se o aumento dos níveis de Gal-1 e Gal-3 séricas e de Gal-1 salivar em pacientes com SSP comparados com os indivíduos saudáveis, além de maiores níveis da Gal-3 salivar nos pacientes que pontuaram no domínio glandular do ESSDAI, como também maior expressão de Gal-3 nas biópsias de glândulas salivares menores.

As leishmanioses são doenças negligenciadas causada por diversas espécies de
protozoários flagelados do gênero Leishmania. Afetam milhões de pessoas em todo mundo,
sendo considerado um grave problema de saúde pública. O tratamento existente apresenta alta
toxicidade, diversos efeitos colaterais e casos de resistência, tornando evidente a necessidade de
novas abordagens terapêuticas. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade
leishmanicida, a citotoxicidade e a capacidade imunomoduladora de novas piridinas tiazóis.
Testes in vitro foram realizados com nove compostos, para investigar a atividade leishmanicida
sobre diferentes formas evolutivas promastigotas e amastigotas selvagens e transgênicas de
Leishmania amazonensis e L. infantum. A atividade citotóxica foi avaliada sobre esplenócitos
murinos, células HepG2 e RAW264.7. O potencial imunomodulador foi avaliado mediante a
dosagem da produção de Óxido nítrico (ON) em macrófagos J774 e a dosagem de citocinas em
sobrenadantes de culturas de cultura de esplenócitos murinos através do kit CBA. Sobre a
atividade leishmanicida para as formas promastigotas de Leishmania amazonensis e L. infantum,
os compostos que apresentaram melhores valores de IC 50 para as duas espécies, considerando as
cepas selvagens e transgênicas foram, respectivamente: PF-04 (3,28 μM / 6,25 μM) (1,67 μM,
6,80 μM), AT-07 (3,74 μM, 7,40 μM) (4,54 μM, 6,71 μM) e AT-13 (7,38 μM) (1,01 μM, 8,59
μM) quando comparado a miltefosina (15,80 μM, 8,42 μM) e (26,44 μM, 38,20 μM). Os
compostos não apresentaram inibição de crescimento quando as formas amastigotas foram
avaliadas. Foi possível observar que os compostos mostraram ser menos tóxicos frente as células
HepG2 em relação a miltefosina, droga de referência. Para as células esplênicas apenas
compostos PF-01 e PF-02 se destacaram em relação a miltefosina, enquanto para os macrófagos
RAW 264.7 apenas o AT-13 mostrou-se ser menos tóxico. Não foi observada a produção de ON
induzido pelos compostos. Quanto a produção de citocinas observou-se a indução de citocinas
relacionadas ao perfil Th1 (TNF, IFN-y e IL-6) que desempenham papel importante para
resolução da doença. De acordo com os resultados obtidos os compostos PF- 04, AT-07 E AT-13
se destacaram entre os demais como potenciais candidatos a novos fármacos, apresentando
atividades leishmanicidas relevantes frente as promastigotas, bons índices de seletividade e
pouca toxicidade. Além de induzirem citocinas importantes que compõem um perfil de resposta
imunológica que auxilia no combate da infecção. Apresentando-se como promissores nos
estudos de novas drogas para o tratamento das leishmanioses.

Infecções causadas por água contaminada por microrganismos são umas das principais causas de mortalidade em países considerados de terceiro mundo e no Brasil, principalmente nas regiões Norte e Nordeste. A rápida identificação se torna imprescindível para a aplicação da terapêutica mais apropriada. Diante dos métodos tradicionais de diagnóstico, os biossensores têm se destacado por serem dispositivos sensores de baixo custo e elevada sensibilidade, se tornando uma opção salutar por unir tais características à nanotecnologia. Visando a detecção de microrganismos em plataformas sensoras, peptídeos antimicrobianos e lectinas demonstraram ser uma inovadora opção de elementos de biorreconhecimento. Dessa forma, o presente projeto visou o desenvolvimento de plataformas biossensoras baseadas em nanopartículas magnéticas sintetizadas pelo método de co-precipitação do Fe²⁺ e Fe³⁺, o qual tiveram a superfície funcionalizada por quitosana ou nanopartículas de ouro, seguido da ancoragem dos peptídeos antimicrobianos Clavanina A (ClavA), Temporina-PTA (T-PTA) e Synoeca-MP (Syno-MP), além da lectina concanavalina A (ConA), submetendo a plataforma à detecção de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e leveduras em suspensões variando de 10¹ a 10⁶ unidades formadoras de colônias por mL (UFC mL). A avaliação eletroquímica realizada por meio da voltametria cíclica (VC) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) revelou que os sensores com peptídeos apresentaram maior afinidade frente a bactérias Gram-negativas, com destaque à Klebsiella pneumoniae, cuja interação se deu por interações via atração eletrostática seguida da inserção na parede celular. A lectina ConA indicou maior resposta eletroquímica frente espécies Gram-positivas, cuja interação se deu pela afinidade da lectina com carboidratos como a N-acetilglicosamina, D-glicose, D-manose e glicoconjugados. Tais sacarídeos estão presentes no peptidoglicano, ácido lipoteicóico e lipopolissacarídeo das bactérias Gram-positivas Gram-negativas, respectivamente. Com limite de detecção de 10¹ UFC mL apresentadas por todos os sensores desenvolvidos, eles podem se caracterizar como uma promissora opção de análise e diagnóstico laboratorial de microrganismos.

A alta incidência dos casos de câncer tornou-o evidente problema de saúde
pública em todo o mundo. Entre as formas de tratamento desta enfermidade está a
quimioterapia, que em sua totalidade possui um custo elevado. Atualmente, apenas cerca
de 30% dos brasileiros possuem convênio com planos de saúde, indicando assim a
dependência da população do Sistema Único de Saúde. Nesse contexto, o financiamento
do tratamento oncológico vem se tornando um desafio para os gestores. Este trabalho
busca avaliar a sustentabilidade financeira de um estabelecimento sob a gestão pública
direta para garantir o acesso aos medicamentos quimioterápicos e apresentar um
panorama do serviço ofertado pelo SUS na rede de atenção oncológica em Pernambuco.
Tratou-se de um estudo observacional, analítico e retrospectivo, realizado no período de
2015 a 2020, disponíveis no sistema TabWin do Ministério da Saúde. Avaliou-se o custo
dos medicamentos para o tratamento do câncer de mama em um hospital referência e
foram analisadas as incorporações de novos tratamentos pela CONITEC durante o
mesmo período. Foram realizados 343.585 procedimentos quimioterápicos nos
estabelecimentos avaliados e observou-se que o câncer de mama foi a neoplasia mais
onerosa. Observou-se ainda que o financiamento dos tratamentos oncológicos manteve-se
estável, apesar da evolução inflacionária e epidemiológica, havendo prejuízo na
incorporação de tecnologias. Verificou-se que os custos com quimioterápicos para
câncer de mama comprometeram 31,23% do valor pago pelo MS, e atualmente, com os
reajustes do período, este passou a comprometer 100,75%. Ao projetar os reajustes para
os próximos anos, verificou-se que o orçamento estaria comprometido em 121,6%,
levando em conta o mesmo cenário inflacionário. Concluiu-se que a atual forma de
financiamento do tratamento quimioterápico para o câncer de mama não se mostrou
financeiramente sustentável no cenário avaliado e que se novos investimentos não forem
aportados, os pacientes do SUS não serão beneficiados com as novas tecnologias de
tratamento.

A leishmaniose tegumentar americana (LTA) trata-se de uma doença negligenciada que acomete a pele e as mucosas dos indivíduos infectados, podendo causar deformações. Essa doença é causada por protozoários dos subgêneros Leishmania e Viannia, sendo transmitida por flebotomineos. No Brasil, são registrados cerca de 19 mil novos casos de LTA anualmente e, em Pernambuco foram registrados 1.535 novos casos dessa doença no período de 2013 a 2017, sendo assim considerada um grave problema de saúde pública. Para o tratamento de LTA, são disponibilizados os seguintes fármacos: antimoniato de N-metil-meglumina, anfotericina B (desoxicolato ou lipossomal), pentamidina e miltefosina. Além do alto custo, esses fármacos possuem graves efeitos adversos, dificuldades na administração e relatos de resistência do parasito. Devido a essa situação, existe uma necessidade de inserção de novos fármacos eficazes para o tratamento de LTA. O núcleo tiazolidin-2,4-diona, além de sua versatilidade na síntese de novos compostos, trata-se de uma estrutura privilegiada na química medicinal e na literatura, há relatos de atividade antiparasitária promissora de compostos contendo esse núcleo. A partir dessa premissa, o presente trabalho propor-se a realizar a síntese, elucidação estrutural, avaliação leishmanicida e perfil de citotoxicidade de novos derivados indol-tiazolidínicos e tioxo-tiazolidínicos. Os sete compostos da série LqIT/LYS e LqIT/MOG foram sintetizados a partir de reações simples de N-alquilação, condensação de Knoevenagel e tionação via reação de Wittig, através de uma rota de síntese bem-sucedida e de fácil purificação, apresentando rendimento reacional satisfatório (63 a 84,99%). As estruturas químicas dos sete compostos foram elucidadas com sucesso através de técnicas convencionais, tals como Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C, Espectroscopia de Absorção no Infravermelho e Espectrometria de Massas, realizadas em laboratórios parceiros. No teste in vitro de citotoxicidade em macrófagos J774, os sete compostos apresentaram valores de CC50 distintos e variaram entre 13,86 ± 0,02 a 34,78 ± 0,63 μM, nesse teste, verificamos que a adição do halogênio bromo no composto LqIT/LYS-04 e a substituição do oxigênio por enxofre no composto LqIT/MOG-06 contribuíram para a diminuição da citotoxicidade em relação aos demais. Já na avaliação leishmanicida em formas promastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis, os compostos, exceto o LqIT/MOG-06, apresentaram valores de IC50 distintos e variaram de 7,83 ± 0,6 a 133,92 ± 2,6 μM. Após a análise dos resultados e cálculo do índice de seletividade, o composto LqIT/LYS-04 apresentou atividade leishmanicida promissora, apresentando índice de seletividade igual a 3,30, sendo escolhido para avaliação leishmanicida em formas evolutivas amastigotas axênicas de L. (L) amazonensis e análise morfológica e ultraestrutural de sua ação em promastigotas metacíclicas.