O câncer de pâncreas é um problema mundial, é um tumor com sinais e sintomas silenciosos em seus estágios
iniciais. Ele é subdividido de acordo com sua origem em tumores mucinares ou, mais comum, carcinomas acinares.
Os fatores que contribuem para sua alta letalidade é o diagnóstico tardio com metástases em órgãos distantes. O
tratamento é ineficiente para o quadro avançado, pois a ressecção cirúrgica é a única alternativa curativa. Além
disso, as células cancerígenas apresentam seu metabolismo alterado e em consequência disso possuem uma
glicosilação aberrante. As técnicas para o diagnóstico do PDAC existentes são baseadas em exames de imagens,
sangue e biópsia tecidual. Elas são ferramentas com uma relativa sensibilidade, contudo a saúde necessita de
metodologias mais simples, rápidas, de baixo custo e com alta especificidade e seletividade. Logo, para sanar este
obstáculo, há a necessidade do desenvolvimento de biossensores. Os biossensores são dispositivos que utilizam uma
molécula biológica acoplados a um transdutor físico-químico, os quais são capazes de gerar um sinal mensurável,
para o reconhecimento do analito alvo. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um biodispositivo
capaz de detectar as células do câncer pancreático. Para isso, foram empregadas para análise da interação
biomolecular e topográfica, as técnicas eletroquímicas de espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE),
voltametria cíclica (VC), voltametria de pulso diferencial (DPV), espectroscopia no infravermelho com
transformada de Fourier (FTIR), espectroscopia na região do ultravioleta visível (UV-VIS) e microscopia de força
atômica (AFM). Estas metodologias foram úteis para caracterizar cada camada de biorreconhecimento adsorvida no
eletrodo. Os estudos revelaram a formação eficaz de filmes nanoestruturados de polipirrol (PPY) e nanotubos de
carbono de paredes múltiplas (MWCNTs), bem como a correta imobilização das lectinas (ConA e WGA) na
superfície do eletrodo de ouro, através de alterações na corrente e no fluxo de elétrons na superfície. Após a
formação do filme nanoestrurado PPY-MWCNTs e obtenção do sistema sensor PPY-MWCNTs-ConA/WGA foi
observada variação nas respostas amperométrica e impedimétrica do sistema, sendo refletido pelo decremento das
correntes de pico anódica (ipa) e e catódica (ipc) e aumento na resistência de transferência de carga (RCT).
Alterações na rugosidade média das diferentes superfícies eletródicas avaliadas confirmaram as modificações da
superfície de ouro. Em adição, a partir do FTIR foi comprovado a obtenção de ligação covalente do tipo amida
como reflexo do acoplamento das lectinas na superfície nanoestruturada. O sistema PPY-MWCNTs-ConA/WGA foi
capaz de detectar células cancerígenas da linhagem BXPC3 e MIA Paca-2 em diferentes concentrações. O sistema
PPY-MWCNTs-ConA demonstrou um limite de detecção (LOD) de 4,15 células mL-1 para a linhagem MIA Paca-2
e de 6,03 células mL-1 para a linhagem BXPC3. Já o sistema PPY-MWCNTs-WGA revelou um LOD de 3,54
células mL-1 para MIA Paca-2 e de 19,87 células mL-1 para BXPC3. As plataformas exibiram capacidade de
biodetecção, boa reprodutibilidade, alta seletividade e especificidade quando comparado a outros analitos presentes
no plasma sanguíneo. Os sistemas desenvolvidos demonstram ser úteis no processo de avaliação clínica de células
de câncer de pâncreas.

A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é a forma mais frequente de câncer infantil. A anomalia
cromossômica conhecida como translocação (1;19)(q23;p13) ocorre em 3% a 12% dos casos de
LLA. O presente estudo tem como objetivo principal a concepção de um nanodispositivo
inovador, sem a necessidade de marcadores de sinal, visando o diagnóstico ultrassensível do
oncogene quimérico TCF3-PBX1. O biossensor foi desenvolvido com uma plataforma
nanoestruturada composta por polipirrol (PPy) e um compósito híbrido formado por
nanopartículas de dióxido de titânio e nanosferas de platina (TiO2@Pt). Para possibilitar a
detecção bioespecífica, oligonucleotídeos de cadeia simples foram quimicamente imobilizados
no transdutor nanoestruturado. A caracterização das diferentes etapas de construção do
dispositivo biotecnológico foi realizada utilizando técnicas como voltametria cíclica (VC),
espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE), espectroscopia ultravioleta-visível (UV-Vis)
e microscopia de força atômica (AFM). A avaliação das propriedades analíticas do dispositivo de
detecção foi feita com plasmídeos recombinantes que contêm a sequência oncogênica TCF3-
PBX1 e amostras clínicas de pacientes pediátricos com LLA de células B. Após a exposição do
sistema de monitoramento molecular ao alvo genético, foram observadas variações significativas
na corrente de oxidação voltamétrica e na resistência à transferência de carga. A análise dos
dados revelou alta reprodutibilidade, com um desvio padrão relativo de 3,66%, um intervalo de
resposta linear que varia de 3,58 aM a 357,67 fM, um limite de detecção de 0,41 aM e um limite
de quantificação de 1,24 aM. Assim, pela primeira vez, foi descrita uma tecnologia de baixo
custo para triagem eletroquímica multiparamétrica do oncogene quimérico TCF3-PBX1, o que
pode ajudar a melhorar a qualidade de vida dos pacientes com leucemia.

O vírus Chikungunya (CHIKV) representa um desafio significativo para a saúde pública, devido à sua capacidade de causar uma doença aguda e limitante, cujos principais sintomas incluem
febre, erupção cutânea, mialgia, cefaleia e principalmente artralgia debilitante. Além destas manifestações clínicas típicas, ocorrem manifestações atípicas que incluem o comprometimento das
funções renais, com uma incidência variável entre 0,6% a 79% dos pacientes. Estas disfunções podem agravar o quadro clínico dos indivíduos, conferindo um pior prognóstico. Diante disso, este
trabalho tem como objetivo investigar o impacto da infecção por Chikungunya na função renal, utilizando biomarcadores específicos para monitorar possíveis alterações nas fases aguda e
subaguda. Foram coletadas amostras de soro e urina de 65 indivíduos diagnosticados para Chikungunya durante a fase aguda, atendidos no Setor de Reumatologia do Hospital das Clínicas da
Universidade Federal de Pernambuco (HC-UFPE). Os indivíduos foram agrupados em 3 grupos: Pacientes sem comorbidades (n=42), pacientes com comorbidades (n=19) e pacientes com
doença renal crônica prévia (n=4). A avaliação da carga viral urinária por RT-qPCR foi realizada apenas em 12 indivíduos do grupo sem comorbidades. Avaliação do sedimento urinário,
avaliação química e física pela tira reagente, dosagem dos níveis séricos de Ureia, Creatinina, Osteopontina, Uromodulina, Igfbp7, tff3, Cistatina C, Ngal e Timp2 e a taxa de filtração glomerular
foram realizadas em todos os participantes. As análises estatísticas foram realizadas através dos softwares GraphPad Prism (versão 9.0) e IBM® SPSS® Statistics, com significância considerada
quando o valor de p < 0,05. A média de idade dos pacientes foi de 48 anos (DP = 14,6 com idades variando entre 19 e 79 anos, os quais 47 participantes (72%) são representantes do sexo
feminino e 18 (27%), são representantes do sexo masculino. A carga viral urinária foi detectada em apenas 1 de 12 amostras avaliadas (CT~39). D Na fase aguda, entre os 42 participantes sem
comorbidades de risco renal, o pH urinário variou de 6,0 a 7,0, sem detecção de urobilinogênio, glicose ou outras alterações relevantes. Proteinúria foi observada em 4,76% dos casos. Na fase
subaguda, a única alteração foi proteinúria em 2,38%. No grupo com comorbidades renais (n=19), o pH variou de 6,5 a 7,0, com proteinúria em 10,53%, sem outras alterações. No grupo com
doença renal crônica, o pH urinário foi de 6,5 a 7,0, e 50% apresentaram proteinúria e albuminuria, principais achados desse grupo. Nenhum dos parâmetros foi confirmado após análise na
sedimentoscopia. A creatinina aumentou significativamente na fase subaguda em todos os grupos, tanto em homens quanto em mulheres. Nos homens sem comorbidades renais (n=14), a
mediana passou de 0,59 mg/dL para 0,65 mg/dL (p=0,0433), e nas mulheres (n=28), de 0,50 mg/dL para 0,64 mg/dL (p=0,0004). Nos demais grupos, a creatinina também se elevou, com maior
variação no grupo com doença renal crônica (homens: 0,72 - 1,47 mg/dL; mulheres: 0,59 - 0,85 mg/dL). Os níveis de ureia permaneceram dentro da faixa normal (10-50 mg/dL) em todas as
fases e grupos, sem diferenças estatisticamente significativas. Entre os demais biomarcadores analisados, apenas o Igfbp7 apresentou diferença estatisticamente significativa entre a fase aguda e
subaguda nos valores de MFI. As alterações observadas sugerem que pacientes com DRC prévia apresentam maior susceptibilidade a alterações renais durante a infecção por CHIKV, destacando
a importância do monitoramento renal nesses indivíduos. A presença de comorbidades, como diabetes e hipertensão, não resultou em alterações significativas nos biomarcadores renais,
sugerindo que o impacto renal pode depender mais da resposta inflamatória do que das comorbidades isoladas.

A doença de Chagas é uma parasitose causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, com grande impacto global, que afeta aproximadamente 70 milhões de pessoas no mundo, a qual é considerada endêmica na América Latina. Apenas dois fármacos, benzonidazol e nifurtimox, são utilizados como tratamento de referência contra a doença. No entanto, a variedade de efeitos adversos desses medicamentos, associados à baixa eficácia na fase crônica da doença, dificultam o processo de cura. A evidente necessidade de novos tratamentos enfrenta desafios relacionados ao método convencional de triagem de novos fármacos. Seria oportuno, assim, a utilização de uma abordagem que auxilie a superar esses desafios. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi desenvolver e avaliar o uso de cepas transgênicas de T. cruzi que expressam o gene da GFP e da luciferase, visando sua aplicação em ensaios préclínicos. Para isso, foi construído o plasmídeo pROCK_LUC_NEO derivado do pROCK_GFP_NEO e ambos foram utilizados para transfecção por eletroporação de epimastigotas das cepas Y e Colombiana. A transgenia dos organismos foi confirmada por análise de microscopia de fluorescência. Também foi realizada citometria de fluxo para definir o percentual de organismos mutantes expressando GFP. Os resultados desta análise apresentaram percentuais de fluorescência próximos de 96% para a cepa Y-GFP e 66% para a cepa Colombiana-GFP. Quanto aos micro-organismos transgênicos que expressam o gene da luciferase, três condições distintas foram avaliadas para verificar a intensidade de luminescência. A comparação entre as cepas, apresentou resultados que demostram níveis muito mais elevados de luminescência nas cepas transgênicas em relação às respectivas cepas selvagens. A intensidade de luminescência detectada apresentou valores superiores a 4 x 107 e 3 x 107 RLU, para as cepas Colombiana-Luc e Y-Luc, respectivamente. A análise do IC50 do benzonidazol sobre as formas epimastigotas indica a necessidade de realização de mais réplicas do ensaio para uma análise mais robusta. A partir desses resultados, é possível avançar para testes in vitro adicionais, bem como a avaliação da infectividade das cepas, antes de prosseguir para os estudos in vivo. Esses dados preliminares indicam o potencial das cepas desenvolvidas para utilização em ensaios pré-clínicos.

As leishmanioses são doenças tropicais negligenciadas, causadas por protozoários do gênero
Leishmania, que afetam principalmente populações com menos recursos socioeconômicos. A
espécie mais comum e responsável pela disseminação da Leishmaniose Tegumentar (LT) no país
é a Leishmania Viannia) braziliensis. Diante do exposto, e devido à importância das
Imunoglobulinas G no processo imunológico do hospedeiro frente às infecções por Leishmania
braziliensis, este projeto tem o objetivo de avaliar, para fins de diagnóstico, as interações de
anticorpos IgG com 10 antígenos derivados de Leishmania braziliensis. Estes antígenos foram
previamente selecionados por abordagens in silico usadas em vacinologia reversa, em trabalhos
anteriores do nosso grupo de pesquisa. Ao todo, foram selecionadas 125 estruturas
tridimensionais de anticorpos IgG a partir do banco de dados SAbDab. A modelagem molecular
dos anticorpos selecionados foi realizada através da ferramenta ABodyBuilder, disponível no
servidor SabPred. Os complexos Ag-Ac (Antígeno-Anticorpo) foram submetidos aos cálculos de
docking molecular, usando as ferramentas computacionais SnugDock (Servidor local) e ClusPro
(Servidor on-line). O servidor online mmCSM-AB foi utilizado para predição de múltiplas
mutações em cada um dos complexos Ag-Ac. Os ensaios de ELISA foram realizados com o
objetivo de avaliar a eficácia desses peptídeos para a detecção de pacientes com LT ativa. Os
resultados de modelagem por homologia da estrutura dos anticorpos indicaram alta similaridade
estrutural entre os anticorpos modelados e suas estruturas experimentais. Os peptídeos Pep VII,
Pep I e Pep VIII destacaram-se nas duas ferramentas de docking molecular utilizadas,
apresentando-se entre as cinco pontuações (score) melhor ranqueadas, tanto nos resultados do
SnugDock quanto do ClusPro. Esses resultados indicam uma afinidade predita elevada com os
anticorpos analisados. O mapeamento das interações mostrou a presença de diversas interações
relevantes, incluindo contatos hidrofóbicos e ligações de hidrogênio. Foram identificadas
mutações preferenciais nos loops CDR (especialmente nos loops CDR-H3 e CDR-L3), sendo
aminoácidos com alto peso molecular e grupos laterais volumosos associados a mutações
desestabilizadoras, enquanto aminoácidos com menor peso molecular e sem grupos laterais
volumosos foram frequentemente preditos em mutações estabilizadoras. Nos ensaios de ELISA,
a sensibilidade e especificidade variaram de 0% a 96% e de 29% a 86%, respectivamente. Os
peptídeos III, IV e V apresentaram as maiores sensibilidades, com valores de 96, 96 e 94%,
respectivamente. Considerando os resultados in silico e in vitro, os peptídeos IV e V
demonstraram uma boa convergência, sendo capazes de apresentar uma afinidade predita mais
elevada (valores de score de docking mais negativos) para o conjunto de anticorpos utilizados
nos cálculos, destacando-os como candidatos promissores para pesquisas futuras e aplicações
clínicas, especialmente no âmbito do diagnóstico da leishmaniose.

O adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) é um tumor altamente agressivo, cuja
progressão e resistência terapêutica são influenciadas pelo microambiente tumoral e pela
interação das células neoplásicas com macrófagos associados ao tumor. Este estudo
investigou os efeitos da comunicação entre células neoplásicas de PDAC e macrófagos
M0 por meio de fatores solúveis (meio condicionado- MC) no contexto do tratamento
com Folfirinox e Gencitabina. O MC das linhagens celulares BxPC-3, PANC-1 e MIA
PaCa-2 em diferentes densidades celulares (1x e 5x) foram obtidos após tratamentos com
Folfirinox e Gencitabina na concentração de 10 μM (F10 e G10, respectivamente) e
analisado quanto à presença de citocinas (CBA) e, aos efeitos sobre marcadores de
superfície celular (imunofenotipagem) e a atividade fagocitária dos macrófagos M0
obtidos de voluntários saudáveis, além da análise de arranjo de proteínas do MC
proveniente de macrófagos em contato com MC de PANC-1. Dados provenientes de
coorte de indivíduos diagnosticados com PDAC foram utilizados para análises da
associação entre o perfil de expressão gênica e o desfecho clínico após tratamento

quimioterápico. RANTES foi regulado negativamente após incubação com MC – BxPC-
3 G10 5x comparado ao MC–CTL e, regulado positivamente após exposição ao MC–

CTL 5x e MC-F10 5x. O MC- PANC-1 G10 5x regulou positivamente os níveis de IP-
10. O MC da linhagem MIA PaCa-2 demonstrou maiores níveis de IL-8 no MC- G10 5x,

ainda demonstrou que níveis de IL-4 estiveram aumentados no MC- CTL 5x comparado
ao MC-CTL 1x, F10 5x e G10 5x. A normalização dos níveis das citocinas e quimiocinas,
demonstrou maior detecção de RANTES após MC- BxPC-3 F10 e MC – PANC-1 G10
na densidade 5x, predomínio de IL-8 no MC – BxPC-3 e MC- MIA PaCa-2 para o
tratamento com G10 5x, e IL-4 no MC – BxPC-3 G10 5x. Os dados in sílico revelaram
que maiores níveis de RANTES, IL-8 e IL-6 em pacientes com PDAC após tratamento
quimioterápico estão associados a menor probabilidade de sobrevivência. O MC de
linhagens do PDAC expostas ao tratamento não induziu alterações imunofenotípicas
significativas em macrófagos M0. Com relação a atividade funcional, o MC- BxPC-3 na
presença G10 5x comparado aos MC- G10 1x e MC- CTL 1x reduziu a atividade
fagocítica de macrófagos. O MC – PANC-1 F10 e G10 reduziu a fagocitose independente
da densidade celular avaliada. O MC- PANC-1 F10 regulou positivamente a secreção de
IL-8 e MCP-1, enquanto o MC – PANC-1 para ambos quimioterápicos e regulou
negativamente a secreção de GRO, GROα, osteopontina, osteoprotegerina, TIMP-1 e
TIMP-2 em macrófagos M0. Em conjunto, os resultados do presente estudo revelam que,
em resposta ao tratamento com Folfirinox e Gencitabina, as células tumorais pancreáticas
regulam a atividade fagocítica e imunomoduladora de macrófagos M0 através de uma
série de fatores solúveis condicionados por características microambientais e genéticas
das linhagens tumorais avaliadas.

A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença negligenciada que afeta milhares de pessoas globalmente, com repercussões significativas no campo econômico e psicossocial. Uma imunidade protetora contra a Leishmania envolve ativação e expansão de clones de linfócitos T CD4+ que reconhecem epítopos do parasita e produzem citocinas do perfil Th1. Em contrapartida, a ativação do sistema imunológico também induz a expressão de moléculas co-inibitórias em linfócitos e células apresentadoras de antígeno que podem caracterizar o fenótipo de exaustão, no qual as células T apresentam um estado disfuncional e redução da capacidade proliferativa e efetora. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar marcadores de exaustão celular em linfócitos T na leishmaniose cutânea. Fizeram parte do estudo 49 pacientes, divididos em grupos com a LC ativa antes do tratamento e pós-tratamento. Além disso, também participaram do estudo 33 indivíduos controles. Foram realizados ensaios de imunofenotipagem, dosagem de citocinas e análise de expressão gênica. Os resultados da imunofenotipagem dos pacientes com LC ativa mostraram elevada expressão de receptores de exaustão em células T CD4conv, como PD-1 e TIGIT, sugerindo um estado de exaustão que compromete a eliminação do parasita e, consequentemente, resolução da doença. Em contraste, as células T CD8+ no grupo pós-tratamento, com a expressão elevada de receptores como 2B4 e CD160, sugerem uma recuperação de sistema imune e restabelecimento da homeostase, enquanto no grupo antes do tratamento observou-se alta expressão de Granzima B, o que pode estar contribuindo para a formação das lesões. As células T reguladoras exibiram alterações, apresentando aumento de TIGIT e diminuição de TIM-3 no grupo antes do tratamento, um perfil que aponta para um perfil imunológico desequilibrado. Já as células T duplo-negativas mostraram o aumento de CD160, principalmente no grupo pós-tratamento, sugerindo a tentativa de restabelecer a homeostase. Os ensaios de citocina revelaram uma resposta inflamatória robusta, com elevação de TNF, IL-6, IL-10 e IL-1β em amostras estimuladas com antígeno de Leishmania que podem estar contribuindo para o estado de exaustão celular na fase ativa da doença. A análise transcriptômica corroborou os achados imunofenotípicos, demonstrando a sobre-expressão de genes relacionados à exaustão, como PDCD1, TIGIT e TOX, em lesão de pacientes com LC. Em conjunto, nossos dados sugerem que a LC ativa pode apresentar um estado imunológico desregulado e exausto, contribuindo para a persistência do parasita e cronicidade da doença. Estudos como este auxiliam aidentificar potenciais alvos terapêuticos para intervenções imunorreguladoras que visem reverter a exaustão de células T e contribuir na eliminação do parasita de forma eficaz, minimizando os danos teciduais.

O biofilme antimicrobiano representa um risco significativo à saúde de pacientes hospitalizados, especialmente devido ao surgimento e à proliferação de patógenos resistentes a antibióticos. Para enfrentar esse desafio, novos materiais estão sendo desenvolvidos. Nesse contexto, odesenvolvimento de nanofibras poliméricas por meio da eletrofiação destaca-se por sua alta biocompatibilidade e grande área de superfície específica. O recobrimento dessas nanofibras com nanopartículas magnéticas de Fe3O4NPs e quitosana melhora suas propriedades antimicrobianas. Além disso, a incorporação de ftalocianina (ZnPcF16) potencializa  ua aplicação na terapia fotodinâmica (TFD), aumentando a eficácia no combate aos biofilmes por meio da geração de espécies reativas de oxigênio (EROs), que destroem células microbianas. Essa combinação oferece uma abordagem terapêutica inovadora. O presente projeto visou o desenvolvimento de nanofibras contendo Fe3O4NPs e ZnPcF16 para aplicação contra biofilmes. A síntese das nanopartículas de Fe3O4NPs foram preparadas pelo método de co-precipitação com Fe2+ /Fe3+,seguida do revestimento com quitosana e ZnPcF16 . Foram preparadas nanofibras de PVA 10% contendo Fe3O4NPs-Quitosana sintetizadas pela técnica da co-precipitação e ZnPcF16 obtendo os sistemas PVA, PVA@Fe3O4Nps-Quitosana e PVA@ Fe3O4NPs-Quitosana/ZnPcF16. A eletrofiação ocorreu com vazão de 0,8 μL/min, tensão de 24 kV e distância entre a agulha (14G) e coletor de 15 cm. As nanofibras foram produzidas durante 3 horas, seguido sua reticulação, foram funcionalizadas com o Fe3O4 e ZnPcF16. As nanoparticulas foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET), difração de raio-X (DRX), UV-Vis, espectro de fluorescência, difusão dinâmica de luz (DLS) e medição de magnetização. Para a caracterização das nanofibras forem realizados estudos de MEV, MET e FTIR. Os resultados da caracterização físico-química mostraram que o compósito Fe3O4NPs-Quitosana/ZnPcF16 apresentava partículas esféricas com um tamanho médio de 15,2±2 nm, indicando uma morfologia uniforme e controlada. A análise de estabilidade coloidal evidenciou que as nanopartículas não apresentaram tendência à aglomeração, o que é crucial para a eficácia em TFD. A magnetização de saturação de 1,18 emu.g−1 sugere que as nanopartículas podem ser manipuladas por campos magnéticos, permitindo uma entrega direcionada e eficaz ao local desejado. Além disso, as propriedades ópticas do ZnPcF16 demonstraram fluorescência naregião de 675 nm, uma faixa particularmente benéfica para TFD devido à maior penetração em tecidos biológicos, o que potencializa a eficácia terapêutica. Embora a eficácia antimicrobiana tenha sido promissora contra Candida albicans, os resultados destacam a necessidade de otimizar a duração da irradiação e padronizar protocolos de tFD para potencializar os efeitos antimicrobianos contra diferentes patógenos, especialmente bactérias resistentes.

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença autoimune do tecido conjuntivo, caracterizada por alterações vasculares,
desregulação imunológica e fibrose da pele e órgãos internos. No tratamento da ES, a indicação de glicocorticoides
é restrita devido a possibilidade de desenvolvimento de crise renal esclerodérmica. No entanto, na prática clínica,
pacientes com acometimentos musculoesqueléticos ainda fazem uso, apesar da limitação nas evidências que
demonstram os efeitos destes medicamentos no tratamento da doença. Dos poucos estudos realizados, os resultados
obtidos sobre sua atividade frente a ES são controversos. Assim, o objetivo do trabalho foi avaliar a atividade
imunomoduladora e antifibrótica ex vivo da Dexametasona (Dexa) em células de pacientes com ES e in vivo em
modelo experimental da doença. Foram incluídos no estudo 20 pacientes com ES e 10 voluntários saudáveis. A partir
do sangue coletado foi realizado o isolamento das células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e em seguida
o isolamento de macrófagos por meio de aderência e dos linfócitos T CD4±

através de beads e coluna magnética. As
células foram estimuladas com 100ng/mL de lipopolissacárideo (LPS) e 300 ng/mL de anti-CD3 e 400 ng/mL de
anti-CD28, respectivamente, e expostas ou não a Dexa (1.000nM) para cultura celular. Os sobrenadantes de cultura
foram recolhidos e utilizados para dosagem de citocinas e quimiocinas por ELISA. A ES experimental foi induzida
em camundongos Balb/c através de injeções intradérmicas de ácido hipocloroso (HOCl) no dorso raspado dos
camundongos (400 μL). O grupo controle recebeu injeções intradérmicas de PBS nas mesmas condições anteriormente
descritas. Simultaneamente, os animais tratados (HOCl ou PBS) receberam injeções intraperitoneais de Dexa
(1mg/Kg), 5 dias na semana por 6 semanas. Ao fim, os animais foram sacrificados. A fibrose dérmica e pulmonar foi
avaliada por dosagem de hidroxiprolina, análise histopatológica e RT-qPCR. Os parâmetros imunológicos foram
avaliados por ELISA. Os resultados foram analisados no software GraphPad Prism,versão 8.0 (San Diego, CA). Em
sobrenadante de cultura de linfócitos T CD4± de pacientes com ES a Dexa reduziu significativamente a produção de

IL-4 (p<0,0001), IL-6 (p=0,0023), IL-13 (p<0,0001) e TNF (p=0,0005), bem comoas citocinas IL-4 (p=0,0001), IL-
13 (p=0,0003) e TNF (p=0,0009) em cultura de células de voluntários saudáveis. Ademais, a Dexa reduziu os níveis

da quimiocina IL-8 (p=0,005) em sobrenadante de cultura de macrófagos de voluntários saudáveis. Os camundongos
ES apresentaram espessamento dérmico significativamente maior que os animais do grupo controle (PBS) (p<0,0001).
A Dexa reduziu significativamente a espessura da pele dos camundongos ES+Dexa em comparação aos camundongos
ES) (p<0,0001). Foi observado aumento significativo da expressão gênica de Col1a1 (p=0,006) e Tgfβ1 (p=0,005) na
pele e de Tgfβ1 (p=0,0001) nos pulmões dos camundongos ES em comparação ao grupo controle. Verificou-se redução
significativa na expressão do mRNA de Col1a1 (p=0,002), Tgfβ1 (p<0,0001) e Acta2 (p<0,0001) na pele e de Tgfβ1
(p=0,005) nos pulmões do grupo de camundongos ES+Dexa quando comparado aos camundongos ES. In vitro, a
produção de IL-4 foi significativamente menor no sobrenadante de cultura de esplenócitos dos camundongos
ES+Dexa em comparação ao grupo de camundongos ES (p=0,001). Diante do exposto, demonstra-se que a Dexa
apresenta atividade imunomoduladora e antifibrótica frente a células de pacientes com ES e modelo experimental da
doença.

Avaliações imunológicas e o acompanhamento de vacinados contra o SARS-CoV-2 são
cruciais para obter dados sobre eficácia e segurança, otimizando estratégias de
imunização local e globalmente. A pesquisa teve como objetivo avaliar o perfil
imunológico dos Linfócitos T/B e das citocinas pró e anti-inflamatórias em resposta à
vacinação contra a COVID-19 em amostras de sangue total de profissionais de saúde do
estado de Pernambuco. De cada participante recrutado foram coletadas, inicialmente,
amostras para a investigação de infecção prévia pelo SARS-CoV-2 (anti-IgG) à primeira
dose da vacina (T0), bem como sangue total e plasma para análises por citometria e
ELISA. Linfócitos totais, TCD3, TCD4 e linfócitos B foram analisados em seis coletas
(T0 a T5), realizadas ao longo de um ano, até 15 dias após a quarta dose. A dosagem
das citocinas IL-6, IL-10 e INF-γ foi realizada em três diferentes momentos (T0, T2 e
T5). As diferenças foram consideradas significativas quando p ≤ 0,05. Informações
sociodemográficas e sobre efeitos adversos das vacinas também foram coletadas. No
total, 20 participantes recrutados seguiram até o fim do seguimento. O efeito adverso
mais relatado foi a dor local após vacinação (80%). Infecção prévia pelo SARS-CoV-2
foi observada em 25% dos voluntários em T0. O percentual dos linfócitos totais reduziu
significativamente seis meses após a 2ª coleta (T2; p = 0,0003), voltando a subir após as
doses de reforço. O mesmo foi observado para T CD3+, porém com redução mais
acentuada, e significativa em relação a T0 (p &lt; 0,0001). Linfócitos T CD4+ elevaram-se
significativamente após a quarta dose em relação à coleta após a 3ª dose (p=0.0089). Os
Linfócitos B demostraram elevação gradativa ao longo das coletas, com diferença
significativa entre T0 e T5 (p = 0,0050). Não foram observadas diferenças significativas
para as citocinas analisadas, apesar das variações individuais. Apesar das limitações
iniciais na amostragem, este estudo oferece uma visão das variações nas células que
participam da memória imunológica em resposta à vacinação, a partir de espécimes
coletados de profissionais que atuaram em um centro de testagem durante a pandemia
da COVID-19. Esta pesquisa acompanhou um número considerável de voluntários
durante um período significativo, fornecendo perspectivas úteis para futuras
investigações sobre a resposta imunológica à vacinação contra a COVID-19, neste
grupo em específico.

As microcistinas (MCs) são heptapetídeos cíclicos que são produzidos por
diferentes tipos de cianobactérias, sendo o gênero Microcystis o principal
produtor. Diversas variantes de microcistinas já foram documentadas, e suas
características estruturais influenciam seus perfis de toxicidade. As
microcistinas afetam principalmente o fígado, mas também podem causar
danos em outros órgãos. Os métodos tradicionais de detecção, como ELISA,
HPLC e LC-MS, são amplamente utilizados, porém são dispendiosos e exigem
equipamentos especializados. Nesse contexto, os biossensores surgem como
uma abordagem inovadora, oferecendo alta sensibilidade, rapidez e facilidade
de uso. Um exemplo promissor é o biossensoriamento estocástico via
nanoporo individual, que permite a detecção unitária de moléculas. O nanoporo
da α-hemolisina (α-HL) é a proteína mais comumente empregada, uma vez que
apresenta uma estrutura molecular bem elucidada e um processo de detecção
de diversos analitos já bem descritos na literatura. Experimentalmente, as
bicamadas lipídicas planas foram confeccionadas por um método de aposição
lipídica, com posterior incorporação de um único nanoporo de α-HL na
membrana. Subsequentemente, foi adicionada a microcistina LR no lado
TRANS da câmara para realizar a obtenção dos registros através de um
protocolo de voltagem. As estruturas moleculares foram obtidas do PDB,
desenhadas no Ketcher Molecular Draw e minimizadas no software Avogadro,
antes de serem submetidas ao DockThor para análise. Observou-se que a
utilização de soluções de fluoreto, resultam em menor condutância do
nanoporo devido à maior viscosidade. Notou-se um padrão de bloqueio
semelhante nas soluções de cloreto e fluoreto, sugerindo uma consistência no
comportamento das microcistinas, independentemente do tipo de sal
utilizado.As análises do comportamento de bloqueio indicam uma relação entre
a concentração de KCl na solução e a frequência de bloqueios causados pela
MC-LR, sugerindo que o aumento da concentração de solução está associado
a um aumento na frequência de bloqueios. Esse aumento na frequência de
bloqueios melhora a capacidade de detecção estocástica do nanoporo unitário
da α-HL. De modo geral, as microcistinas RR e a Nodularina apresentaram as
melhores energias quando associadas ao nanoporo da α-HL, seguidas pela LR

e YR. Houve uma similaridade entre as energias totais e quantidade total de
ligações de hidrogênio da MC-LR e Nodularina, fator que pode ser explicado
por sua semelhança estrutural. Assim, espera-se que apresentem bloqueios
característicos semelhantes em amplitude, porém, passíveis de serem
discriminados, uma vez que apresentam ligações e energia distintas.
Experimentalmente, nota-se uma prevalência no tempo de bloqueio da MC-RR
em relação a outras MCs, corroborando com os dados obtidos
computacionalmente. No entanto, variações no potencial elétrico da membrana
alteram a frequência e o tempo de bloqueio induzidos pelas microcistinas,
indicando uma relação entre o perfil de carga das moléculas e o nanoporo.
Assim, pode-se concluir que o aumento da concentração de KCl na solução
está associado a um aumento na frequência de bloqueios causados pela MC-
LR, sugerindo uma melhora na capacidade de detecção estocástica do
nanoporo unitário da α-HL.

Atualmente, grande parte do tratamento para as infecções cutâneas é realizado com
medicamentos antimicrobianos, que, devido ao seu uso irracional e a sua prescrição
indiscriminada, tem ocasionado o fenômeno da resistência bacteriana. Estudos demonstram a
importância da captação de ferro pelas bactérias ferro dependentes. Nesse sentido, o Ga 3+ surge
como alternativa, visto que apresenta mimetismo com o Fe 3+ e perturba os processos biológicos
de microrganismos, reduzindo assim, a chance de desenvolvimento de resistência terapêutica,
além de apresentar uma atividade anti-inflamatória potencial. Diante desse fator, o presente
trabalho tem como objetivo desenvolver uma alternativa para o tratamento de infecções a base
de nanopartículas de origem lipídica para encapsulação de nitrato de gálio. Os carreadores
lipídicos nanoestruturados (CLN) contendo nitrato de gálio foram produzidos por meio da
técnica de dupla emulsificação por ultrassom, onde otimizações de formulação e de processo
foram feitas através de planejamento experimental. O CLN que, através do planejamento,
possibilitou a escolha da nanopartícula com melhor tamanho, índice de polidispersão (PdI),
potencial zeta (PZ) e eficiência de encapsulamento (EE) foi caracterizado por valor de pH,
Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET),
Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), ensaio da membrana
cório-alantoide (HET-CAM), avaliação do efeito oclusivo, bem como foi realizada a
estabilidade de armazenamento. O planejamento experimental do tipo central composto resultou
em um CLN com tamanho de 41,13 nm, PdI de 0,188, PZ de -7,512 mV, EE de 80,51% e pH
5,23. O FTIR confirmou a incorporação do nitrato de gálio no CLN e o DSC mostrou redução
de cristalinidade da matriz da nanopartícula. O MET mostrou a morfologia esférica das
partículas. No ensaio de HET-CAM não foi verificada toxicidade e irritação do CLN contendo
Gálio e o efeito oclusivo foi acima de 35%. Portanto, foi possível obter CLN com propriedades
físico-químicas e estabilidade adequadas, os quais são resultados encorajadores quanto ao
potencial do sistema para uso em infecções cutâneas. Contudo, estudos de liberação e
permeação cutânea, e também de avaliação de atividade antimicrobiana deverão ser
desenvolvidos para garantir a viabilidade da formulação.

As Infecções Relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS) representam um problema de saúde global. O Hp-MAP1, um peptídeo antimicrobiano sintético derivado da Temporina PTa extraída da pele da rã de barriga de fogo Hylaranna picturata da Malásia, tem a capacidade de detectar e diferenciar entre bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Os biossensores apresentam uma ampla gama de vantagens para o diagnóstico clínico, como alta especificidade e sensibilidade, capacidade de miniaturização, necessidade de pequenas quantidades de amostra, baixo limite de detecção e baixo custo de produção. O crescente número de óbitos devido à resistência antimicrobiana aumenta exponencialmente a cada ano, sendo uma das principais razões para o desenvolvimento e aplicação de biossensores como alternativa diagnóstica. Nesta dissertação descrevemos o desenvolvimento de um biossensor eletroquímico impedimétrico baseado no peptídeo Hylaranna picturata de multiatividade antimicrobiana (Hp-MAP1) e nanotubos de carbono de paredes múltiplas (MWCNTs), com o objetivo de detectar bactérias de interesse clínico associadas as IRAS. As técnicas de espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) e voltametria cíclica (VC) foram utilizadas para avaliar o desempenho eletroquímico da plataforma sensora, com ferri-ferrocianeto sendo usado como par redox. A superfície do eletrodo de ouro foi modificada através da automontagem de monocamadas de MWCNTs, associadas ao Hp-MAP1. Os microrganismos utilizados nos ensaios foram Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Staphylococcus aureus. A técnica de microscopia de força atômica demonstrou a eficaz imobilização da plataforma sensora nanoestruturada na superfície do eletrodo de ouro. Um limite de detecção entre 101 e 106 UFC/mL foi obtido. As variações nas respostas impedimétricas dos biossensores são atribuídas principalmente à presença de peptideoglicano na parede celular bacteriana. A plataforma sensora desenvolvida demonstrou capacidade para detectar e diferenciar bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, com destaque nas respostas para o grupo das Gram-negativas. Limites de detecção excelentes foram observados para P. aeruginosa (0,60), K. pneumoniae (0,42), E. coli (0,67) e S. aureus (0,59), destacando a eficácia do biossensor MWCNTs/Hp-MAP1 na identificação microbiana. Portanto, pode ser considerada uma alternativa inovadora para auxiliar no diagnóstico bacteriano.

As altas taxas de mortalidade associadas ao câncer de pulmão (CP) representam um desafio significativo para os sistemas de saúde global. Essa dificuldade é decorrente da natureza heterogênea dos subtipos histológicos dessa neoplasia, e pelo desafio de encontrar um biomarcador padrão. É relatado que o miRNA 181a-5p (miR-181a-5p) desempenha um papel fundamental em diversas neoplasias, devido à inibição de genes responsáveis a mecanismos de sobrevivência ou morte tumoral. Diante disso, o objetivo principal do trabalho é investigar a expressão do miR-181a-5p como possível biomarcador para o CP. Para isso, foi realizada uma análise in silico do miR-181a-5p no CP para investigar a expressão do miR-181a-5p em relação às variáveis categóricas, bem como identificar os possíveis genes alvos e as vias de sinalização. Simultaneamente, a expressão do miR-181a-5p, foi avaliada nas linhagens celulares de CP (A549 e H1299) e na linhagem de pulmão controle (MRC-05). Em paralelo, 37 amostras de pacientes diagnosticados com câncer de pulmão e 19 amostras de pacientes com ausência de neoplasia foram submetidas a análise de expressão por RT-qPCR. Os resultados da análise in sílico, demonstraram uma correlação significativa em relação a associação do aumento da expressão do miR-181a-5p no sexo feminino, além de identificar 291 genes alvos, pelo qual foi observado que a maioria estão associados ao termo de processos biológicos e vias de sinalização em “transdução de sinal”, “câncer”, “crescimento celular e morte” e “transporte e catabolismo”. A análise de expressão do miR-181a-5p, demonstrou que há um aumento da expressão nas linhagens H1299 (7.6 ± 3.46; p < 0.05) e A549 (6.9 ± 1.44; p < 0.05) quando comparadas à linhagem não neoplásica MRC-05 (1.25 ± 0.02; p < 0.05). Similarmente, esse aumento de expressão foi observado nos pacientes com adenocarcinoma (4.2 ± 4.5; p<0.05) e carcinoma escamoso (1.8 ± 3.7; p<0.05) quando comparadas com os pacients com ausência de neoplasia (0.52 ± 0.56; p<0.05). Adicionalmente, as variáveis: estadiamento, histórico familiar, tumores prévios, comorbidades e alcoolismo estiveram associadas ao aumento da expressão do miR-181a-5p. Todos os coeficientes estimados foram estatisticamente significativos (p < 0,05) Portanto, embora preliminar, o estudo sugere que o miR-181a-5p está ́ aumentado no CP e pode ter relação com estadiamentos mais avançados. No entanto, a ampliação do N amostral e uma análise funcional serão importantes para confirmar o papel deste miRNA no CP.

O câncer tem sido um desafio significativo para a saúde. No Brasil, em 2022, as mortes por neoplasias malignas ficaram atrás apenas das causadas por doenças cardiovasculares, respiratórias e diabetes, com uma estimativa de 704 mil novos casos de tumores malignos entre 2023 e 2025. O câncer é uma doença multifatorial caracterizada pela proliferação desordenada de células e pela disfunção dos mecanismos apoptóticos, com a capacidade metastática aumentando significativamente a mortalidade. Os tratamentos farmacológicos atuais, conhecidos por suas propriedades carcinogênicas, teratogênicas, mutagênicas e citotóxicas, destacam a necessidade de novas estratégias terapêuticas menos tóxicas. Paralelamente à cancerologia, a antibioticoterapia revolucionou a medicina clínica, aumentando a expectativa de vida globalmente. No entanto, o uso excessivo de antibióticos tem levado ao problema crescente da resistência antimicrobiana, que pode ocasionar até 10 milhões de mortes anuais até 2050, ressaltando a urgência na descoberta de novos antibióticos. Nessa perspectiva, biomoléculas advindas de carboidratos podem ser promissoras para o desenvolvimento de novos fármacos com potencial terapêutico. Com isso, o objetivo deste trabalho foi investigar as propriedades anticâncer e antibacteriana de cinco derivados de O-glicosídicos inéditos. A citotoxicidade dos compostos foi avaliada através do método de MTT em diferentes linhagens celulares tumorais (HL-60, HT-29, MCF-7) e normal (L-929) nas concentrações de 0,781; 1,56; 3,125; 6,25; 12,5 e 25 μg/mL para determinação da IC50 no tempo de 72 horas. Adicionalmente, foram realizadas as análises das alterações morfológicas induzidas em G5 nas concentrações de IC50(9 μg/mL) e o dobro da IC50 (18 μg/mL) , por panótico rápido, e os estudos computacionais in silico para relação estrutura-atividade. As avaliações da fragmentação de DNA e do ciclo celular G5 foram realizadas por citometria de fluxo.Já a atividade antibacteriana dos os cinco derivados O-glicosídicos foi realizada pelo método de difusão em ágar frente a Staphylococcus aureus- (UFPEDA 01), Bacillus subtilis (UFPEDA 86) e Escherichia coli (UFPEDA 224) na concentração 2050 mg/mL. Selecionou-se a substância O-glicosídica com melhores parâmetros obtidos a partir do screening inicial previamente verificado no ensaio de citotoxicidade, com o fito de dar continuidade aos testes de farmacocinética e farmacodinâmica in silico. A molécula G5 inibiu mais de 80% do crescimento celular , na concentração de 25 μg/mL, frente à linhagem HL-60. As células HL-60 tratadas com o composto G5 nas concentrações de IC50 (9,00 μg/mL) e do dobro da IC50 (18 μg/mL) provocou alterações morfológicas típicas de morte apoptótica e/ou necrótica. Outrossim, os cinco derivados não apresentaram atividade antibacteriana frente aos micro-organismos testados. Os compostos O-glicosídeos foram citotóxicos para as linhagens testadas e a molécula G5 foi capaz de induzir os mecanismos de morte das células HL-60 sendo considerada promissora para dar continuidade aos estudos antineoplásicos para melhor elucidar os possíveis mecanismos de ação.

A leishmaniose cutânea, uma doença tropical negligenciada, afeta severamente regiões tropicais e subtropicais, especialmente populações de baixa renda. No Brasil, representa um desafio significativo à saúde pública, exigindo novas abordagens terapêuticas devido às limitações dos tratamentos atuais. Este estudo buscou desenvolver e otimizar formas farmacêuticas semissólidas, como hidrogéis e emulgéis para o tratamento tópico da leishmaniose cutânea, utilizando antimoniato de meglumina (AM) e nitrato de gálio (GaN) como princípios ativos. O desenvolvimento das formas farmacêuticas incluiu a seleção de excipientes e análises de compatibilidade por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), visando assegurar a estabilidade e eficácia das formulações. Foram conduzidas análises reológicas para avaliar viscosidade, além de avaliações de pH e espalhabilidade para garantir a adequação ao uso tópico. Estudos de estabilidade seguiram a RDC 318/2019 da ANVISA, avaliando a viabilidade das formulações ao longo do tempo sob diferentes condições de armazenamento. Posteriormente, foram realizados os ensaios de doseamento por espectroscopia de absorção atômica por chama para determinar as concentrações dos princípios ativos nas formulações. Os doseamentos dos fármacos revelaram concentrações adequadas: O hidrogel com GaN e AM apresentaram uma concentração média de 5,867 ± 0,132 mg/g para GaN e 12,329 ± 1,018 mg/g para AM. Enquanto os emulgéis mostraram uma concentração média de 4,212 ± 0,021 mg/g para GaN e 3,973 ± 0,783 mg/g para AM. A estabilidade das formulações foi testada, mantendo o pH dentro do intervalo seguro para aplicação na pele, embora as formulações contendo fármacos mostraram variações de pH ligeiramente maiores. Os testes de resistência à centrifugação confirmaram a estabilidade física, sem separação de fases observada, essencial para a integridade do produto. As propriedades reológicas indicaram que a viscosidade dos hidrogéis e emulgéis variou ao longo do tempo, sendo influenciada pela presença dos fármacos. As formulações contendo fármacos apresentaram menor resistência ao cisalhamento, o que facilita a aplicação e pode aumentar a adesão ao tratamento pelos pacientes. Os resultados mostraram que as formulações desenvolvidas demonstraram características promissoras para uso tópico, indicando boa estabilidade. Conclui-se que as formas farmacêuticas semissólidas desenvolvidas mostraram potencial para o tratamento tópico da leishmaniose cutânea, apesar de variações nas concentrações dos princípios ativos entre os diferentes tipos de formulação. A otimização contínua pode melhorar sua eficácia e estabilidade, tornando-as uma alternativa promissora para melhorar a qualidade de vida dos pacientes afetados por esta patologia.

A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) é caracterizada como um
importante problema de saúde pública no Brasil e no mundo, em decorrência da
morbimortalidade e do consequente impacto nas políticas públicas de saúde. De 2007
até junho de 2023, foram notificados no Sinan 489.594 casos de infecção pelo HIV no Brasil,
contudo somente 23,3 milhões de pessoas têm acesso à Terapia Antirretroviral
(TARV), tendo por consequência a morte de dezenas de milhões de pessoas por
causas relacionadas à Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) desde o início
da epidemia em 1981. O objetivo da pesquisa foi avaliar medicamentos de primeira e
segunda escolha para pacientes imunodeprimidos que iniciaram a terapia
antirretroviral em um hospital universitário no período de 2016 a 2022. A pesquisa
caracteriza-se como um estudo epidemiológico descritivo, do tipo transversal, a
amostra foi composta por 70 pacientes, que são acompanhados pelo Setor
Ambulatorial, o estudo foi realizado através da obtenção de dados secundários
fornecidos pelo Serviço de Atendimento Especializado, no qual foram analisados os
aspectos sociodemográficos e dos portadores de HIV. Durante o intervalo de
acompanhamento, que compreendeu o período de 05 anos, foi observado que o perfil
sociodemográfico de pessoas vivendo com HIV é relativamente variável entre as
populações, de acordo com as características regionais e locais, assim como seus
hábitos e estilo de vida, uma vez que estas variáveis estão diretamente relacionadas
a fatores sociais, políticos e econômicos, que interferem diretamente no tratamento e
adesão a TARV. Diante do exposto, é imprescindível destacar a importância de se
existir um acompanhamento multiprofissional para a realização do acompanhamento
integral desses pacientes, visando evolução no prognóstico da doença, assim como,
melhor aceitação do paciente de seu diagnóstico e adesão/continuidade do
tratamento. Nesta perspectiva, analisar o perfil epidemiológico destes pacientes,
assim como, sua potencial carga viral e fármacos de escolha para os respectivos
tratamentos, visam intervir diretamente em melhores prognósticos de saúde para
estes indivíduos, culminando também em significativas mudanças nos processos de
trabalho das equipes de saúde e gestão dos serviços ofertados a este público.

Introdução: O adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) representa cerca de
95% dos casos diagnosticados de câncer de pâncreas e se destaca pela baixa
taxa de sobrevida, chegando a menos de 10% em cinco anos. Apesar disso, a
ressecção cirúrgica em estágios iniciais e a quimioterapia em estágios mais
avançados representam as opções terapêuticas mais utilizadas. Em relação aos
quimioterápicos vigentes na clínica, a Gencitabina e o esquema terapêutico
FOLFIRINOX, mesmo quando utilizados em conjunto, têm limitado sucesso
terapêutico, aumentando a sobrevida livre da doença em apenas 11 meses. Esse
insucesso terapêutico se deve, principalmente, a barreira física imposta pelo
microambiente tumoral desmoplásico, o qual limita e/ou impede o acesso dos
quimioterápicos às células neoplásicas. Nesse sentido, moléculas derivadas de
galactosídeos foram sintetizadas a fim de representarem novas alternativas
terapêuticas contra o PDAC. Objetivo: O presente trabalho tem como objetivo
avaliar os efeitos dos derivados de galactosídeos em células do microambiente
tumoral de neoplasias pancreáticas. Metodologia: Nove moléculas derivadas de
galactosídeos foram utilizadas no estudo. A citotoxicidade dos derivados de
galactosídeos foi avaliada através do método MTT em PBMCs, MRC-5, MIA
PaCa-2 e PANC-1. A concentração de IC50 de cada derivado foi utilizado nos
testes seguintes. A migração celular foi avaliada pelo método Scratch e
Transwell, em períodos de 0 até 48 horas. A citometria de fluxo foi utilizada para
avaliar o ciclo celular, níveis de ROS e imunofenotipagem de linfócitos T, B e NK.
As células neoplásicas PANC-1 e MIA PaCa-2 foram tratadas com os derivados
de galactosídeos durante 48h para avaliação do ciclo celular com iodeto de
propídio (PI). Para avaliação de ROS, as células foram tratadas durante 3h, 6h,
24h e 72h e marcadas com DHE. Para a imunofenotipagem, as PBMCs foram
tratadas com os derivados de galactosídeos, durante 48h, na concentração de
50uM, e foram marcadas com os anticorpos CD3, CD4, CD8, CD19, CD14 e
CD56, além do marcador de viabilidade celular, DAPI. Por fim, plataformas de
análises in silico foram utilizadas para prever padrões
farmacocinéticos/farmacodinâmicos exercidos pelas moléculas no corpo
humano. Resultados: Quanto a citotoxicidade, os derivados GaLap e GaTzLau
apresentaram elevada toxicidade contra PBMCs (IC50=4,08±0,3 e
IC50=10,65±2,11). Quanto à migração os derivados GaTzLauD e VA02 inibiram
a migração em MIA PaCa-2 (p=0,0391 e 0,0494, respectivamente) após 48h, e
os todos os derivados mostraram inibição da migração em PANC-1, na
metodologia Scratch. Na metodologia Transwell, os derivados GaTzLap e
GaTzLauD inibiram a migração celular na linhagem MIA PaCa-2. Os derivados
GaTzLapD e GaTzLauD inibem a formação de colônias celulares na linhagem
MIA PaCa-2 (p=0,0022 e <0,0001, respectivamente). GaTzLap, GaTzLapD e
GaTzLauD apresentaram indução de ROS em MIA PaCa-2. Nenhum dos
derivados de galactosídeos possui efeito citostático ou altera as populações
celulares T, B e NK. Os derivados GaTzLapD e GaTzLauD apresentaram efeito
em modelos de cultura 3D de MIA PaCa-2. A análise do SwissADME revelou
que os derivados de galactosídeos não tem boa biodisponibilidade oral,
GaTzLap reprovou nas regras de Lipinski e todos reprovaram nas regras de
Veber. Quanto aos TargetPredictions, nove moléculas foram apontadas, dentre estas, três galectinas (Gal-3, Gal-7 e Gal-9) como possíveis ligantes dos
derivados de galactosídeos. Conclusões: Nos ensaios in vitro, verificamos que
as moléculas representam promissora atividade anticâncer, seja pela
citotoxicidade, inibição da motilidade celular, aumento de ROS, e efeito em
cultura 3D no caso dos GA’s seja pela atividade antimigratória, no caso dos VA’s.

Diante de um cenário pós-pandemia onde alavancou-se o número de vendas de suplementos alimentares que auxiliam na homeostase corporal fortalecendo o sistema imunológico. Vista a isso, o Laboratório Farmacêutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE) em parceria com o Núcleo de Controle de Qualidade de Medicamentos e correlatos (NCQMC) do Departamento de Ciências Farmacêuticas (DCFAR) da Universidade Federal de Pernambuco (UFPE), mediante Termo de Cooperação Técnica nº 001/2021, decidiu efetuar a produção de vitamina C composta (vitamina C 500 mg associada com vitamina D 400 UI e zinco 10 mg) carregando um viés social que se preocupa com o acesso da população pernambucana de menor poder aquisitivo aos suplementos alimentares. Contudo, o desenvolvimento e validação de metodologias analíticas que darão suporte a condução do estudo de estabilidade (prépeticionamento), monitorização da rotina de qualidade para liberação do produto acabado (póspeticionamento), contribuirá para segurança e qualidade desse produto, demonstrando que atende às exigências constantes dos atos normativos e consequentemente melhorando a qualidade de vida dos pernambucanos. A quantificação para Teor do Ácido Ascórbico e Colecalciferol se dará por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), o mineral Zinco através de Titulação Complexométrica, e a quantificação da Dissolução do composto majoritário (Ácido Ascórbico) da formulação por espectrofotometria UV. As técnicas utilizadas para desenvolvimento analítico garantiram através dos critérios de validação analítica que os métodos são eficazes para liberação e acompanhamento da qualidade das vitaminas e do mineral presente na formulação do comprimido.

O cajueiro (Anacardium occidentale L.), especialmente presente no Nordeste brasileiro, no qual a goma de cajueiro (GC) e um de seus produtos, sendo um biopolímero com propriedades funcionais e bioativas significativas. Sua exploração tem potencial para substituir outras gomas de relevância que são amplamente importadas, destacando-se como uma alternativa sustentável para as indústrias alimentícia, farmacêutica e cosmética. No entanto, a produção de GC é influenciada por condições ambientais e sazonais, afetando sua composição físico-química e microbiológica, o que levanta questões sobre sua estabilidade e padronização de propriedades. Este estudo visa preencher essas lacunas, realizando uma caracterização físico-química detalhada da GC coletada nas regiões do Ceará, Piauí e Pernambuco. A pesquisa utiliza um método sustentável de purificação, livre de solventes orgânicos, alinhando-se às demandas por processos menos impactantes ao meio ambiente. Avaliamos a composição físico-química e microbiológica da GC coletada em diferentes regiões do Nordeste brasileiro, investigando sua estabilidade térmica, solubilidade em diferentes temperaturas, composição mineral, teor de umidade e cinzas. Além disso, busca-se desenvolver um método sustentável de purificação da GC, eliminando solventes orgânicos e promovendo a sustentabilidade. As coletas foram realizadas nas localidades de Santana do Acaraú (CE), Ilha Grande (PI) e Yaguara (PE), considerando fatores sazonais que influenciam diretamente a exsudação da GC. Em períodos de seca, a produção de goma foi mais elevada, evidenciando uma adaptação da planta ao estresse hídrico. A solubilidade foi analisada em temperaturas de 30°C, 40°C e 50°C, indicando alta capacidade de dissolução em todas as amostras. As análises espectroscópicas (FTIR) indicaram as principais ligações funcionais da GC, com bandas características de hidroxilas (O–H) e glicosídicas (C-O), demonstrando sua estrutura polissacarídica. A Difração de Raios-X (DRX) revelou uma estrutura predominantemente amorfa. Nas análises térmicas, a Termogravimetria (TG) identificou eventos de decomposição em fases distintas, com a primeira perda de massa atribuída à evaporação da água absorvida pela goma a 105°C. Em temperaturas mais elevadas, acima de 300°C, foram observados eventos relacionados à despolimerização e à decomposição. A Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) revelou transições endotérmicas. A análise do conteúdo mineral revelou concentrações de potássio (95,14 g/L), magnésio (133,9 g/L) e cálcio (16,25 g/L). Adicionalmente, a análise microbiológica obteve resultados de <10 UFC/g para Escherichia coli, ausência de Salmonella spp., e baixos níveis de bolores e leveduras. Em testes toxicológicos de toxicidade aguda, a GC não apresentou efeitos adversos significativos. Os resultados obtidos demonstram o potencial da GC como um biopolímero sustentável e versátil, cuja composição e estabilidade são influenciadas pelas condições ambientais e sazonais da coleta. A metodologia sustentável de purificação desenvolvida, ao não utilizar solventes orgânicos, conserva as propriedades naturais da GC e reduz seu impacto ambiental. A elevada solubilidade, estabilidade térmica, a presença de minerais benéficos e a ausência de efeitos adversos em testes de toxicidade aguda tornam a GC uma opção promissora para diversas aplicações industriais. A pesquisa sugere que a coleta durante períodos secos podem otimizar a produção e padronizar suas propriedades, ressaltando a relevância da GC para a bioeconomia

O câncer é considerado um grave problema de saúde, estimativas indicam o surgimento de 625 mil novos casos a cada ano do triênio 2020-2023 no Brasil. As terapias disponíveis para o tratamento do câncer apresentam algumas limitações como falta de seletividade e indução de efeitos colaterais. Neste sentido, a busca por novas alternativas terapêuticas torna-se relevante. O DNA e a albumina sérica são biomoléculas investigadas para o tratamento do câncer, o DNA atua no controle das funções celulares, e a albumina sérica desempenha funções no transporte de substancias no organismo. Moléculas que possuem a porção tiazol têm sido amplamente investigadas, esse núcleo apresenta inúmeras atividades descritas na literatura, com promissoras atividades antitumorais. Nessa perspectiva, este trabalho propôs a síntese, caracterização estrutural, estudos de interação e avaliação da atividade antitumoral de novos derivados tiazólicos. Foram sintetizados dez derivados tiazólicos inéditos que se diferenciam pelas substituições nas porções R1 e R2 da molécula, ambas tiveram suas estruturas químicas confirmadas pelas técnicas espectroscópicas de RMN 1H, RMN C13, e infravermelho (IV). A investigação das interações com as biomoléculas foi realizada por meio de técnicas espectroscópicas de absorção UV-vis e fluorescência. Nos ensaios de interação com o ssDNA foram observados diferentes efeitos espectroscópicos como hipercrômico, hipocrômico e hipsocrômico, as constantes de afinidade (Kb) obtidas variaram entre 1.0 x 107 e 1.55 x 104, nos ensaios de fluorescência foram observados os efeitos hipocrômico, hipercrômico, hipsocrômico e batocrômico e os valores da constante de supressão fluorescente (Ksv) variaram entre 0.3 x 104 e 1.01 x 104, sugerindo que os compostos se ligam ao DNA pelos modos intercalativos e por ligação ao sulco. Na interação com a BSA no teste de absorção UV-vis foram observados os efeitos hipercrômico e hipsocrômico e os valores de Kb variaram entre 9.70 x 104 e 1.49 x 105, nos ensaios de emissão fluorescente os efeitos observados foram hipocrômico e hipsocrômico, e os valores de Ksv variaram entre 11.34 x 104 e 0.88 x 104, indicando que todos os compostos interagiram à BSA. Se destacaram nas interações os LQIT-KLT’S 01, 03 e 06 que são substituídos na porção
R1 pelos grupamentos CH3SO2, CF3 e OCF3 respectivamente e na porção R2 pelo grupamento Br (KLT’S 01 e 03). A atividade antiproliferativa foi avaliada frente a linhagem celular de câncer de mama (MCF-7) e a linhagem não transformada de macrófago (J774), por meio da técnica de MTT. Neste ensaio os derivados KLT’S 01, 03 e 06 apresentaram os melhores valores de IC50 frente a linhagem celular MCF-7 com 0,29, 0,52 e 0,60 μM respectivamente. No ensaio de citotoxicidade frente aos macrófagos, os melhores derivados foram os compostos KLT-02 e KLT-08, com valores de viabilidade celular de 100% e 60,16% respectivamente. O destaque deste estudo foi o derivado KLT-01, com valores satisfatórios de interação ao DNA e de citotoxicidade, frente a linhagem tumoral MCF-7, todavia, os resultados mostram que os derivados tiazólicos são promissores agentes antitumorais e que o padrão de substituição influência de forma positiva nos resultados.

A Leishmaniose Cutânea (LC) é um grave problema de saúde pública
mundial, sendo no Brasil as regiões norte e nordeste as que apresentam mais
casos da doença. A doença caracteriza-se pelo surgimento de lesões que pode
variar de uma a centenas, sendo 90% dos pacientes portadores de lesões com
aspecto nódulo-crostoso. O curso da infecção na LC está estritamente ligado a
resposta imune do hospedeiro, entretanto, ainda existem diversas lacunas sobre
qual o tipo de resposta imune é necessário. Dentre as diversas células que
compõem o sistema imune destaque é dado as células natural killer (NK),
conhecidas pela sua capacidade de matar células infectadas, modificadas e
autorreativas, sem a necessidade de apresentação prévia. Além disso, essas

células são conhecidas pela alta produção de citocinas, como interferon-γ (IFN-
γ), auxiliando assim no recrutamento de outras células, bem como na sua

ativação. Os linfócitos T fazem parte da resposta imune adaptativa e são
responsáveis pela resposta imune celular. Embora haja diversos avanços nos
estudos in vitro para o estudo da LC, o mesmo apresenta diversas limitações,
como a não semelhança com o ambiente in vivo. Pensando nisso, as culturas
3D tem sido fortemente recomendadas para estudos, visto que há uma
mimetização da geometria, ambientação e sinalização entre as células. Porém,
até o momento, não se tem relatos da utilização desta técnica para estudos na
LC. Diante disso, o presente trabalha tem como objetivo avaliar as células
Natural Killer e T em pacientes com lesão ativa da leishmaniose cutânea e
desenvolver e testar um modelo de esferóide dermo-epidérmico
imunocompetente em 3D para estudos com a Leishmania spp. Fizeram parte do
estudo trinta pacientes, sendo 23 pacientes com a forma ativa da doença,
denominados antes do tratamento (AT) e 7 pacientes com cura clínica,
denominados pós-tratamento (PT). Além disso, tivemos um terceiro grupo
composto por indivíduos saudáveis, denominado controle (CT), formado por 17
pessoas. Foram realizados estudos de imunofenotipagem e dosagem de
citocinas a partir de sobrenadante de cultura das células mononucleares do
sangue periférico (PBMCs). Já nos estudos em 3D, fibroblastos e macrófagos

murinos foram cultivados e para a formação dos esferóides, foi utilizada a técnica
de magnetização. Os esferóides formados foram avaliados quanto a sua
formação/compactação e através de análises histológicas. A infecção dos
esferóides e carga parasitária foi avaliada por rt-PCR. Na avaliação celular,
observamos uma menor percentual de células NK e de células NKT DN nos
pacientes com lesão ativa, enquanto, as células NKT CD4+ apresentaram um
maior percentual nesta população. Não foi observada diferença significativa no
percentual dos linfócitos T CD4+, CD8+ e DN Além disso, observamos uma
maior expressão de PD-1, Granzima b, TIGIT e CLTA-4 tanto nas células NK,

quanto nos linfócitos T dos pacientes. Também foi observada a produção de IL-
2, IL-4. IL-6, IL-10, IL-17, INF e TNF nos pacientes após estimulação com

antígeno de L. braziliensis. Nos esferóides, observamos sua formação e
compactação após 24 horas de cultivo. Além disso, observamos que a proporção
8 fibroblastos: 1macrófago apresentaram melhor compactação e por isso foi
escolhido para os demais experimentos. O entendimento da resposta imune na
LC é fundamental para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e
vacinais. Além disso, o desenvolvimento de modelos in vitro que se assemelhem
aos eventos que ocorrem no in vivo podem contribuir para o entendimento da
doença.

As lesões cutâneas de difícil cicatrização configuram um ônus ao sistema de saúde.
Assim, enquanto as feridas crônicas continuarem sendo um problema global de saúde, o
desenvolvimento de tratamentos alternativos permanecerá extremamente necessário. A
eletrofiação é uma técnica versátil e econômica que é utilizada para síntese de nanofibras com

diâmetro na faixa de nanômetros a partir de substâncias contendo polímeros como o polivinil-
álcool (PVA) e como a celulose bacteriana (CB). A celulose bacteriana é um polímero

promissor para aplicação como curativo devido a suas propriedades físico-químicas. A
prevenção da infecção bacteriana externa no local da ferida é um pré-requisito para o design de
novos curativos, devendo ser adicionadas substâncias antimicrobianas como nanopartículas de
prata (AgNps) e peptídeos antimicrobianos como a Clavanina A (ClavA). Desta forma, o
presente estudo teve como objetivo preparar e caracterizar as nanofibras eletrofiadas compostas
por PVA-AgNps-Bp-ClavA e avaliar a sua ação antimicrobiana. Inicialmente, foram sintetizadas
nanofibras eletrofiadas compostas por PVA-AgNps-Bp-ClavA, posteriormente, foi realizada a
reticulação química. Realizou-se a análise morfológica das amostras através das técnicas de
microscopia eletrônica de varredura (MEV), além da composição elementar através de
Espectroscopia de Energia Dispersiva (EDS). A termoestabilidade foi analisada por meio da
Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC). Os espectros das nanofibras foram registrados
usando a Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). O estudo
eletroquímico foi realizado aplicando-se a voltametria de onda quadra (SWV). A atividade

antimicrobiana foi avaliada através do bioensaio in vitro. As micrografias compostas por PVA-
AgNps-Bp exibiram filamentos nanométricos homogêneos em sua estrutura formando uma

matriz tridimensional com diâmetros de 555nm a 648nm. O mapeamento elementar revelou a
dispersão homogênea das AgNps na superfície das nanofibras. O espectro das amostras de PVA
puro exibiu bandas de vibrações de estiramento O-H a 3332 cm-1 além de evidenciar os picos
característicos como o pico de vibração detectado em 1366 cm-1 nas amostras contendo o
biopolímero está relacionado à vibração de flexão das ligações C-H e C-O nos anéis aromáticos
de polissacarídeos. O termograma revelou um aumento da termoestabilidade de 130,92 °C para
207,03 °C após a adição das AgNps e da CB à fibra. Constatou-se também o aumento da
transferência de elétrons após a incorporação das AgNps e da Bp as nanofibras de PVA. Houve
excelente ação inibitória para bactérias gram-positivas com halo maior que 15mm, além de
apresentar atividade antifúngica contra C.albicans com halo de inibição medindo 18mm. Os
picos expressos no espectro de FTIR confirmaram a incorporação dos compostos no filme. As
micrografias mostraram a morfologia superficial e transversal das nanofibras, que exibiu uma
distribuição uniforme de AgNps o que melhora as propriedades antimicrobianas do filme. O
termograma evidenciou aumento na estabilidade térmica das nanofibras. Estes resultados
demonstraram o potencial das nanofibras possuem características potenciais para aplicações
biotecnológicas como a regeneração tecidual.

A Organização Mundial de Saúde definiu a COVID-19 como uma pandemia, chegando ao
segundo trimestre de 2024, com mais de 775.364.261 de casos confirmados e cerca de 7.046.320
óbitos em todo o mundo. Esse cenário tem representado um desafio global para a saúde, exigindo
esforços contínuos para compreender e gerenciar a gravidade da doença. O objetivo deste estudo
foi avaliar a Galectina-9 (Gal-9) como potencial biomarcador imunológico de prognóstico e
manejo de pacientes infectados pelo SARS-CoV-2. Foram incluídos 112 pacientes com doença
leve, 57 pacientes com doença grave, 93 pacientes sintomáticos negativos e 70 indivíduos
controle. Os níveis de Gal-9 no sangue e na saliva foram quantificados utilizando a técnica
ELISA e os níveis da expressão gênica da Gal-9 foi avaliada através da RT-qPCR. Os níveis
proteicos de Gal-9 foram acompanhados durante 28 dias após o início dos sintomas e análises de
acurácia e associações com as principais comorbidades e sintomas da COVID-19 foram
destacadas. Ademais, a imunofenotipagem das células T, B e NK foi realizada para acompanhar a
flutuação das populações de células de defesa durante a fase aguda e subaguda da doença. Em
relação ao grupo com doença leve, observamos uma maior incidência entre mulheres, sendo
hipertensão e asma as comorbidades mais comuns. Os sintomas mais frequentemente relatados
pelos pacientes foram dor de cabeça, tosse seca e febre. No grupo grave, os pacientes tiveram
uma idade média mais alta em comparação com outros grupos. A doença teve uma maior
incidência entre homens, e as comorbidades mais comuns foram diabetes, hipertensão e
obesidade. Os sintomas mais frequentemente relatados foram dispneia, tosse seca e febre. A
caracterização das diferentes mutações revelou que as variantes P.2 e P.1 foram as mais
identificadas nos grupos leve e grave. Evidenciamos a expressão proteica elevada significativa da
Gal-9 em pacientes leves [4.604 (3.771 – 5.623); p &lt; 0,0001] e pacientes graves; [17.396 (7.079 –
22.143); p &lt; 0,0001] quando comparados a pacientes saudáveis [3.113 (46.88 – 3.936)]. Os níveis
de mRNA de LGAS9 também foram mais expressos em pacientes graves [0,06300 (-0,1925–
0,3543)] quando comparados aos sintomáticos negativos [-0,03800 (-0,2508– 0,1868) p= 0,0192].
Também identificamos associações significativas dos níveis séricos de Gal-9 com as principais
comorbidades e sintomas – Hipertensão (p=0,0340), anosmia (p=0,0127), tosse (p=0,0048) e
febre (p=0,0004). Os níveis séricos de Gal-9 foram acompanhados durante quatro coletas
sucessivas após a admissão da doença (D0, D14, D21 e D28) e encontramos uma diminuição
significativa desses níveis nos segmentos D14 (p=0,0404), D21 (p=0,0001) e D28 (p= 0,0001)
quando comparados com o D0. Na saliva, encontramos um aumento significativo da expressão de
Gal-9 nos pacientes do grupo leve [15.213 (6.055 – 32.763) p &lt; 0,0001] quando comparado ao
grupo saudável [4.226 (2.126 – 8.246)] e quando comparamos o grupo leve ao grupo dos
sintomáticos negativos [2.587 (1.100 – 4.355)] p &lt; 0.0001). Por meio da imunofenotipagem,
identificamos alterações no percentual de células T CD8+ quando comparamos o segmento D56
com os demais – D0 (p=0,0001), D14 (p=0,0017), D21 (p=0,0063) e D28 (p=0,0012). A
subpopulação de células NK CD16+/CD56+ também exibiu alterações quando comparadas entre
si. D0 quando comparado a D14 (p=0,0143) e D21 (p=0,0355), além de D14 comparado com
D28 (p=0,0219) e D56 (p=0,0070). Este estudo identifica a Gal-9 como um biomarcador
promissor para a gravidade da COVID-19. Níveis elevados de Gal-9 têm potencial para melhorar
a estratificação de pacientes e o manejo clínico, destacando a importância da pesquisa de
biomarcadores para entender a fisiopatologia da COVID-19.

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença degenerativa caracterizada por dano vascular,
autoimunidade e fibrose da pele e órgãos internos. A sua fisiopatologia envolve a ativação
endotelial, a produção de autoanticorpos, a secreção de citocinas e a superexpressão de genes
pró-fibróticos. O PPAR-γ é um regulador da sensibilidade à insulina e da adipogênese que
também desempenha um papel anti-inflamatório e antifibrótico quando ativado por
tiazolidinedionas (TZDs). O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial imunomodulador e
antifibrótico dos novos derivados tiazolidínicos ZKD-4 e FT-40 em um modelo in vivo de ES
induzido por HOCl. Os derivados ZKD-4 e FT-40 reduziram de forma significativa (p < 0.0001 e
p < 0.0001, respectivamente) a espessura da pele dos camundongos. O resultado foi confirmado
por cortes histológicos corados com hematoxilina/eosina e Sirius red. Os compostos ZKD-4 (p =
0.5141) e FT-40 (p = 0.8257) não reduziram significativamente a concentração de hidroxiprolina
na pele dos animais. Os derivados também não reduziram significativamente o conteúdo sérico
de proteínas oxidadas nos animais (p = 0.2503 e p = 0.9761). O ZKD-4 reduziu a secreção de IL-
4 (p = 0.0037), mas não houve diferença significa em relação ao IFN-γ (p = 0.9775). Na
quantificação de IL-6 do sobrenadante de macrófagos, observou-se que o ZKD-4 aumentou
significativamente a secreção da citocina (p = 0.0227). O FT-40 reduziu o conteúdo de IL-4 no
sobrenadante (p = 0.0118) e não alterou significativamente a dosagem de IFN-γ (p = 0.1099). Da
mesma forma, o composto parece ter estimulado a secreção de IL-6 (p = 0.0101). O derivado
ZKD-4 reduziu significativamente a expressão relativa de colágeno tipo I (p < 0.0001), α-SMA
(p < 0.0001) e TGF-β (p < 0.0001) nas biópsias de pele dos animais tratados quando comparados
ao grupo com ES. O FT-40 também foi eficaz na redução da expressão de colágeno tipo I (p <
0.0001), ⍺-SMA (p = 0.0011) e TGF-β (p < 0.0001). A injeção intraperitoneal diária do ZKD-4
nos camundongos foi capaz de reduzir significativamente a expressão do marcador de ativação
CD69 em células TCD4 (p < 0.0001), além de diminuir os marcadores de ativação de linfócitos
B, como MHCII (p < 0.0001), CD69 (p = 0.0011) e CD40 (p < 0.0001). Além disso, o composto
interferiu na polarização de macrófagos, representada pela redução do marcador CD206 (p <
0.0001) e aumento da expressão de CD86 (p = 0.0009), e pela restauração da razão M1/M2 (p <
0.0001). O FT-40 também reduziu significativamente o cluster de ativação CD69 em linfócitos
TCD4 (p < 0.0001). O FT-40 interferiu na expressão de marcadores de superfície em células B,
reduzindo significativamente o complexo MHCII (p < 0.0001), CD60 (p = 0.0004) e CD40 (p <
0.0001). A citometria de fluxo também permitiu observar que o derivado modulou os marcadores
CD206 (p < 0.0001) e CD86 (p = 0.0030) de macrófagos, restabelecendo a razão M1/M2 (p <
0.0001). Os derivados ZKD-4 e FT-40 impediram a progressão da ES em um modelo animal, e
esses resultados nos levam a uma perspectiva positiva em relação ao PPAR-γ como alvo
terapêutico na ES.

A síndrome coronariana aguda (SCA) é o espectro da doença arterial coronarina (DAC) associado a pior prognóstico. Em indivíduos com uma SCA, especialmente no infarto agudo do miocárdio com supradesnivelamento do segmento ST (IAMCSST), a realização da intervenção coronária percutânea (ICP) de emergência é mandatória. As interleucinas (ILs) atuam na sinalização e regulação das respostas imunes, sendo pontos-chave para o desenvolvimento e instabilização das placas ateroscleróticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar as associações entre os níveis séricos da IL22, IL32 e IL38 em pacientes com IAMCSST submetidos a ICP primária. É um estudo transversal, de coleta prospectiva, descritivo e analítico. Foram recrutados 280 participantes divididos em dois grupos (210 casos vs 70 controles saudáveis), conforme os critérios de elegibilidade. Foram avaliados o perfil clínico e angiográfico dos pacientes. Os níveis séricos das interleucinas foram quantificados por ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). As análises estatísticas foram realizadas pelo testes de Mann-Whitney, Fisher e Pearson, sendo considerado significativo um p< 0,05. No grupo dos casos a idade média foi 63,5 ± 11,67 anos, houve maior acometimento de homens (63,8%). Hipertensão arterial sistêmica (HAS) (76,2%), tabagismo (55,2%) e diabetes mellitus (DM) (38,1%) foram as comorbidades mais prevalentes. Nos controles a idade média foi 55,5 ± 10,51 anos, 60% foram homens e 40% mulheres. O tempo porta-balão foi > 60 minutos em 83,3% dos casos, o vaso mais acometido foi a artéria descendente anterior (ADA) (53,8%), houve sucesso angiográfico em 84,8% dos casos e a população de DAC multiarterial foi 71,4%. O nível sérico da IL-22 foi menor nos casos em relação aos controles 149,63 (84,99 - 294,56) vs 482,67 (344,33 – 641,00), p < 0,001. A avaliação dos níveis séricos das ILs de acordo com a artéria coronária culpada pelo infarto, mostrou associação entre valores mais baixos de IL-22 e a artéria coronária direita (ACD) em comparação a ADA e a artéria circunflexa (ACX). Em relação ao tempo porta-balão (≤ 60 minutos vs > 60 minutos) a comparação entre as dosagens das ILs mostrou associação entre níveis séricos mais baixos de IL-22 e menores tempos de reperfusão 106,00 (49,60 - 171,71) vs 153,00 (88,86 - 313,60), p = 0,043. Ao comparamos as dosagens das ILs e a extensão da DAC, níveis circulantes mais elevados de IL-32 associaram-se doença multiarterial 0,00 (0,00 - 385,03) vs 0,00 (0,00 – 69,20), p = 0,013. A comparação entre a dosagem das ILs e o sucesso angiográfico não mostrou associações significativas. O mesmo ocorreu quando esta análise foi feita em relação a presença do DM. Foi gerada a hipótese de que os níveis séricos de IL-22 são menores quando comparados pacientes com IAMCSST submetidos a ICP primária a controles saudáveis, enquanto os níveis séricos de IL-32 e IL-38 não diferem nesses grupos.

Inúmeros sistemas de liberação foram desenvolvidos para melhorar a taxa de dissolução de fármacos de baixa solubilidade, como o antirretroviral nevirapina (NVP), que é um fármaco classe II no Sistema de Classificação Biofarmacêutico. Dentre os sistemas de liberação conhecidos, as dispersões co-amorfas (COAs) se destacam por apresentar as vantagens do estado amorfo da molécula ao utilizar moléculas de baixo peso molecular ou um outro fármaco clinicamente relevante. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a capacidade de carreadores não poliméricos em estabilizar a forma amorfa de NVP e melhorar a sua dissolução através do planejamento de formação de COA por modelagem molecular e análises termoanalíticas. Após a escolha dos carreadores conforme suas solubilidades e pontos de interações, foram realizados testes de triagem para obtenção de COAs estáveis através de mecânica quântica e estudo térmicos que mostraram sistemas estáveis amorfos através de interações entre os componentes. Misturas físicas de NVP e carreadores foram fundidas e resfriadas para obtenção das dispersões COAs e os materiais resultantes desse processo foram caracterizados em sequência através da espectroscopia por infravermelho, calorimetria exploratória diferencial, difração por raios-X e microscopia de luz polarizada, indicando a formação de COAs amorfos através de interações intermoleculares entre o fármaco e seu carreador. A solubilidade cristalina de NVP foi investigada juntamente de sua cinética de liberação dentro dos sistemas COAs, onde se observou a interferência da presença dos coformadores na solubilidade, além do incremento de solubilidade de NVP nas misturas co-amorfas. Dispersões COAs de NVP foram obtidos com sucesso através das interações intermoleculares entre os componentes, alcançando altas concentrações do fármaco durante o ensaio de dissolução, sobretudo para o sistema contendo lamivudina em proporção equimolar.

Geo-helmintíases, um grupo de doenças parasitárias tropicais negligenciadas, afetam cerca de 1,5 bilhão de pessoas globalmente. São infecções causadas por nematoides como Ascaris lumbricoides e Trichuris trichiura. A Organização Mundial da Saúde tem intensificado esforços para erradicar essas doenças, reconhecendo a necessidade de abordagens inovadoras para eliminá-las como um problema de saúde pública. Embora os medicamentos tradicionais, como albendazol e mebendazol, sejam usados no tratamento, esses fármacos enfrentam desafios, incluindo resistência helmíntica, efeitos colaterais e contraindicações. Nesse contexto, a espécie vegetal Momordica charantia L. (melão-de-São-Caetano), tem se destacado na medicina popular e em estudos científicos por suas propriedades anti-helmínticas. Este trabalho visa desenvolver sistemas multiparticulados à base de Momordica charantia L. para o tratamento de geohelmintíases, buscando uma alternativa terapêutica viável e eficaz. O material vegetal foi coletado na região metropolitana de Recife, tratado e submetido à secagem em estufa com circulação de ar. A droga vegetal foi caracterizada farmacognosticamente. Extratos foram obtidos utilizando etanol a 70% como solvente, por meio de maceração estática durante 96 horas, resultando em um extrato fluido que foi, posteriormente, seco em estufa de circulação de ar para obtenção do extrato seco bruto e celulósico. Esses extratos foram caracterizados para avaliação de suas qualidades, incluindo análise termogravimétrica, que é fundamental para assegurar a estabilidade e a eficácia do produto final. Além disso, um perfil fitoquímico foi delineado para os extratos secos, e a quantificação de um marcador analítico foi realizada por cromatografia líquida de ultra alta eficiência. Um método para doseamento de flavonoides totais em extratos brutos, utilizando quercetina como padrão, foi desenvolvido e validado por espectrofotometria UV-vis, proporcionando uma ferramenta precisa para o controle de qualidade desses extratos. Um estudo de toxicidade aguda foi conduzido de acordo com as diretrizes da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Econômico e da Agência Nacional de Vigilância Sanitária, demonstrando que os extratos secos não apresentam toxicidade aguda significativa, o que reforça sua segurança para uso em formulações farmacêuticas. Um estudo preliminar de atividade antihelmíntica in vitro indicou que os extratos secos apresentam eficácia, embora sejam necessários testes adicionais para confirmar esses resultados. Pellets de liberação imediata foram desenvolvidos a partir do extrato celulósico. Um estudo de compatibilidade entre o extrato e os excipientes foi realizado e os resultados indicaram compatibilidade. O desenvolvimento dos pellets foi otimizado através de um planejamento fatorial completo do tipo 2³, resultando na produção de 8 lotes experimentais. Dois lotes (lote 4 e lote 8) foram selecionados com base em parâmetros predefinidos. Cápsulas foram obtidas dos dois lotes de pellets, submetidas aos controles de qualidade e ensaios de dissolução in vitro, que mostraram resultados adequados e liberações superiores a 75% do extrato de Momordica charantia L. Os extratos secos apresentaram alta higroscopicidade, baixa solubilidade aquosa, estabilidade térmica semelhante à droga vegetal e presença dos metabólitos bioativos, incluindo compostos fenólicos, taninos, alcaloides e saponinas, que são importantes para a atividade anti-helmíntica. A momordicina I foi identificada e quantificada como um marcador promissor para futuras análises. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que foi desenvolvida uma forma farmacêutica sólida à base de Momordica charantia L., que representa uma alternativa terapêutica promissora no combate às geo-helmintíases, oferecendo uma nova opção para tratamento e contribuindo para os esforços globais de erradicação dessas doenças.

A cronicidade da CHIK está associada a respostas imunológicas alteradas, no entanto, os mecanismos exatos responsáveis pela inflamação crônica e sua relação com a persistência dos sintomas musculoesqueléticos ainda não foram elucidados. Nesse contexto, a importante atuação das galectinas (Gal) na modulação das respostas imunes, em particular a sua expressão e secreção diferencial, podem estar relacionadas a variantes de nucleotídeo único (SNVs) do hospedeiro e, atuar como indicador de susceptibilidade à doença e à cronicidade dos sintomas na CHIK. O presente estudo avaliou a associação entre SNVs nos genes LGALS1, LGALS3 e LGALS9 à chance de adoecimento e à persistência da artralgia na CHIK. Para tal, dados clínicos e biológicos foram obtidos de participantes diagnosticados com CHIK (n=345). Voluntários assintomáticos, com sorologia negativa para CHIK (IgM e IgG) foram utilizados como controle. Após 90 dias do início dos sintomas, os dados da escala visual analógica (EVA) foram utilizados para classificar os participantes quanto à resolução (EVA=0 a 3) ou persistência (EVA ≥3) da artralgia na fase crônica da CHIK. A genotipagem foi realizada por RT-qPCR utilizando sondas TaqMan® alelo-específicas. Os níveis séricos das Gal 1, 3 e 9 foram mensurados por ELISA Sanduiche. As análises estatísticas foram realizadas através dos softwares GraphPad Prism (versão 9.0), SNPstats e Rstudio com significância considerada quando o valor de p ≤ 0,05. Os SNVs rs4820294 (genótipo A/A- [modelo codominante e recessivo]) e rs1009977 (genótipos G/G- [modelo codominante] e G/G [modelo recessivo]) do LGALS1 foram associados a menor chance de adoecimento por CHIK. Enquanto, rs4795835 (genótipos G/A e G/A-A/A [modelos codominantes e dominante, respectivamente], e C/T-T/T [modelo dominante]) e o rs4239242 (genótipo C/T-C/C [modelo dominante]) foram relacionados a maior chance de adoecimento. Os SNVs rs4795835 (genótipos C/T-T/T [modelo dominante]) e rs4239242 (genótipos C/T-C/C [modelo dominante]) do LGALS9 foram associados maior chance de adoecimento. O SNV rs1009977 (genótipo G/G [modelo codominante] e G/G [modelo recessivo]) do LGALS3 foi associado a maior chance de adoecimento. Os genótipos A/A [modelos codominante e recessivo] do rs4644 estão significativamente associados a menor chance de persistência da artralgia pós CHIK. Modelos de regressão logística revelaram que as variáveis sexo, idade e presença de comorbidades prévias estão significativamente associadas a maior chance de persistência da artralgia na CHIK crônica. Os SNVs de LGALS1 e LGALS9 não tiveram implicações funcionais sobre os níveis séricos das Gal1 e 9. Os SNVs rs2075601 (genótipo homozigoto alternativo) e rs4644 (genótipo homozigoto ancestral (C/C)) de LGALS3 foram associados a maiores níveis séricos da Gal 3. Os resultados evidenciam que SNVs do LGALS3 significativamente interferem nas chances de adoecimento, persistência da artralgia e nos níveis séricos da Gal3 na CHIK.

O adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) é caracterizado por seu comportamento agressivo, prognóstico reservado e resistência à quimioterapia, sendo um dos tumores com maior taxa de mortalidade no mundo. O microambiente do PDAC corresponde a 90% da massa tumoral e é formado por células imunes, células nervosas, fibroblastos, mastócitos, proteínas solúveis e uma matriz extracelular abundante. Neste microambiente, as galectinas (GAL) desempenham importantes funções para a progressão tumoral, dentre as quais estão a ativação dos fibroblastos associados ao tumor, a produção das citocinas inflamatórias, a evasão à resposta imunológica, a promoção da transição epitélio-mesênquima e a metástase. Diante das repercussões do diagnóstico tardio sobre o prognóstico, a terapêutica e a taxa de sobrevida global dos pacientes acometidos pelo PDAC, o presente estudo investigou a expressão dos transcritos LGALS1, LGALS2, LGALS3, LGALS4 e LGALS9 no PDAC e no microambiente tumoral a fim de verificar a potencial utilidade como biomarcador desfecho clínico. Para tal, o perfil transcriptômico dos LGALS1, LGALS2, LGALS3, LGALS4 e LGALS9 foi investigado in sílico em coortes de indivíduos diagnosticados com PDAC, considerando regiões do tumor primário, diferentes sítios metastáticos e, em subpopulações de células imunes e nervosas que compõem o microambiente tumoral. O perfil transcriptômico destas galectinas também foi avaliado segundo o desfecho clínico das coortes selecionadas. Análises do banco de microdissecção a laser e RT-qPCR foram utilizadas para avaliar a expressão destas galectinas no tumor e no estroma de biópsias do PDAC. Realizamos também a análise in sílico do perfil de metilação da região dos genes de LGALS1, LGALS2, LGALS3, LGALS4. Os resultados revelaram a maior expressão dos transcritos LGALS1 (p= 4.50E-21), LGALS3 (p=6.29E-27), LGALS4 (p= 3.25E-13) e LGALS9 (p= 4.13E-08) em tumores primários em comparação aos controles saudáveis .O perfil de expressão em sítios metastáticos indicam que, em comparação com o tumor primário, as metástases hepáticas mostraram níveis significativamente aumentados de expressão de LGALS1 (p=6.84E-06).O transcrito LGALS9 demonstrou redução significativa nos níveis de expressão tanto na metástase como em comparação com o tumor primário (p=6.79E-09) quanto na metástase hepática em comparação com o tumor primário (p=8.75E-05). A análise do bando de microdissecção a laser de biópsias de PDAC revelou maior expressão de LGALS1 no estroma e, a maior expressão de LGALS3 e LGALS4 nas células tumorais. Dados de RNA-seq revelaram a alta expressão de LGALS1 em diversas células imunes e miofibroblastos, enquanto LGALS3 apresentou alta expressão em células B, macrófagos M1, M0 e células T reguladoras. LGALS1 foi mais expresso em células ductais e mesenquimais, LGALS3 em células acinares, ductais e mesenquimais, e LGALS4 predominantemente nas células ductais. A menor expressão de LGALS4 e LGALS9 foi associada a uma maior sobrevida livre de doença (p=9.81E-04). A menor expressão de LGALS4 foi significativamente associada a uma maior sobrevida global (p=2.67E-03). O transcrito LGALS2 apresentou redução significativa da expressão no tumor primário (p= 8.76E-22) e na metástase em relação ao tumor primário (p= 2.75E-30). No modelo murino de progressão tumoral, houve redução progressiva da expressão de LGALS2 ao longo do tempo, evidenciando sua diminuição com o avanço da doença. O transcrito LGALS2 apresentou maior expressão no tumor em comparação com o estroma tumoral no PDAC. Análises de RNA-seq revelaram alta expressão em células dendríticas e células T CD4 no microambiente tumoral, além de expressão em células alpha, acinar e ductal no pâncreas. Em resumo, os perfis de expressão e metilação de LGALS1, LGALS2, LGALS3, LGALS4 e LGALS9 variam em diferentes estágios do PDAC e em diversos sítios metastáticos, sugerindo seu potencial utilidade como biomarcadores prognósticos e potenciais alvos terapêuticos. A redução da expressão de LGALS2 ao longo da progressão tumoral, tanto em pacientes quanto em modelos murinos, sugerindo sua importância na patogênese do PDAC.

As doenças negligenciadas constituem um conjunto de doenças infecciosas que afetam regiões tropicais e subtropicais de países com economias em desenvolvimento. Dentre esse grupo de infecções, destacam-se a doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, e a Leishmaniose, causada por parasitas do gênero Leishmania. O fármaco atualmente utilizado na quimioterapia da doença de chagas é o benzonidazol, que em estágios mais avançados da doença é ineficaz, já o tratamento para a Leishmania ainda é bastante limitado, com sérios inconvenientes em termos de segurança, resistência, estabilidade e custo. Logo, existe a necessidade do desenvolvimento de novas terapias contra essas doenças. Nesse sentido, a proposta do presente trabalho consistiu em desenvolver uma série de compostos bioativos a partir de duas estruturas privilegiadas, as piridinas e a 4-tiazolidinona. Inicialmente, foi planejado a obtenção de seis moléculas, as quais foram sintetizadas através de duas etapas e devidamente caracterizadas. Após a caracterização, os compostos foram avaliados quanto às atividades tripanocida e leishmanicida. Quanto à atividade anti-T.cruzi, foi utilizada a cepa Cepa Talahuen. Os testes anti-Leishmania foram realizados frente formas promastigotas e amastigotas da espécie L. infantum e a toxicidade avaliada em fibroblastos RAW 264.7. Dentre os compostos testados para verificação da atividade tripanocida, nenhum apresentou resultados significativos. Já em relação a sua toxicidade todos os compostos apresentaram valores de toxicidade em células normais maiores que 200 µM frente as células testadas. Com destaque para os compostos DA-1 com valor de 408,5 µM. Os compostos testados frente à forma promastigota e amastigota da L. infantun, nenhum se apresentou mais ativo que a Miltefosina, que foi utilizado como referência neste experimento. Quanto à toxicidade frente a fibroblastos da linhagem RAW 264.7, é possível notar que todos os compostos se destacaram, evidenciando menor citotoxicidade frente às células testadas. Com destaque para DA-4 com valor de citotoxicidade 402,7µM. Diante do exposto, é possível analisar que nenhum dos compostos apresentaram atividade tripanocida e leishmanicida significativa, entretanto, a maioria dos compostos desta série possuem níveis de citoxicidade satisfatórios.

Os níveis álgicos da dismenorreia primária traz implicações direta na qualidade de vida das mulheres, refletindo na adoção de medidas terapêuticas não farmacológica, como plantas medicinais, que podem comprometer a saúde, e portanto, torna-se importante o embasamento científico que respalde seu uso.

Diante disso, este trabalho buscou compreender o uso de plantas medicinais por estudantes universitárias no tratamento da dismenorreia primária, e sua aplicação a luz da literatura. A pesquisa foi desenvolvida em quatro etapas: revisão integrativa, estudo transversal, busca de evidência das plantas utilizadas e grupo focal, utilizando análise estatística descritiva e estatística inferencial não paramétrica, através do teste de Kruskal-Wallis e o teste de Mann-Whitney com nível de significância <0,05. Para os dados qualitativos foi utilizado o programa IRAMUTEQ, com análise temática segundo Minayo. Na revisão integrativa, obteve-se dez artigos de estudos clínicos com plantas medicinais apresentando ação antinociceptiva para cólicas menstruais. No estudo transversal, das 178 investigadas, 39,33% referiram uso de 15 plantas medicinais para tratamento da dismenorreia. Destas, entre estudos clínicos e pré-clínicos, doze apresentaram ação anti-inflamatória e/ou analgésica, ou antiespasmódica, sendo as mais frequentes camomila, boldo, erva cidreira e hortelã. A idade média e desvio padrão corresponderam a 22,02 anos ± 2,99. A maioria possuíam ciclo menstrual de 28 dias (35,39%), com menarca menor que doze anos (52,81%) e predominância da dor variando entre moderada (52,25%) e grave (32,02 %). A prática medicamentosa (86,52%) foi maior em relação ao uso de plantas medicinais (39,33%). A média da escala de dor foi maior e significativa em universitária cuja a idade da menarca foi menor que 12 anos (p=0,0494), na interferência nas atividades diárias (p <0,0001), na adoção entre o tratamento com plantas/ medicamentos e só medicamentos (p <0,0001; p= 0,0138, respectivamente), em relação as que não utilizaram nenhuma forma. No grupo focal, verificou-se a presenta da cultura familiar na adoção das plantas medicinais, onde a dor é compreendida como processo biológico normal, exceto na exacerbação dos estímulos álgicos, com adoção de uso por critérios do senso comum, déficit no conhecimento farmacológico e cuidado na manutenção da saúde reprodutiva.  As evidências científicas corroboraram para identificação da ação farmacológica, porém a ausência de estudos com embasamento farmacodinâmico, farmacocinético, taxológico e interação medicamentosa, podem limitar a indicação de uso generalizado sugerindo assim, a necessidade de novas pesquisas. 

A doença de chagas e a leishmaniose pertencem ao grupo das doenças negligenciadas, ocasionadas por agentes infecciosos, que afetam com maior incidencia os países com baixo indice de desenvolvimento, sendo a primeira causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi e a segunda pelo parasita do gênero Leishmania. O tratamento utilizado para ambas as doenças possuem limitações; a doença de chagas é atualmente tratada pelo fármaco Benzonidazol, tendo em vista que o mesmo não possui uma boa eficácia na fase avançada da doença, já o tratamento da Leishmaniose apresenta problemáticas como: custo, resistência e segurança. Sendo assim, observa-se a necessidade de novas formas terapêuticas para essas doenças. Desta forma, nosso trabalho tem por objetivo identificar novos protótipos a fármacos com atividade antiparasitária através do planejamento estrutural, síntese e avaliação biológica de inéditos derivados de uma série piridil-1,3-tiazol. Diante disso foi planejada a síntese da série (DS-1A – DS-1B4) com 12 moléculas inéditas de piridil-1,3-tiazol, utilizando diferentes tiossemicarbazidas, as quais foram sintetizadas e devidamente caracterizadas. A elucidação estrutural foi realizada por meio de espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear de Protón (RMN 1 H) e Carbono (RMN 13C). Após a caracterização, os compostos foram avaliados quanto às atividades anti-T. cruzi e leishmanicida. Quanto à atividade anti-T.cruzi, foi utilizada a cepa Tulahuen, e a toxicidade avaliada em fibroblastos L929. Os testes anti-Leishmania foram realizados frente às formas promastigotas e amastigotas das espécies L. amazonensis e L. infantum, e a CC50 contra macrófagos RAW. Dentre os compostos testados DS-3B se destacou para a atividade frente à forma promastigota da espécie L. infantum, com valores de IC50 2,9 μM, enquanto o composto de referência apresenta IC50 de 17,2 μM. Já os compostos DS-3B, DS-1B1 e DS-1B3 se destacaram na atividade anti-T.cruzi, com IC50 4,8 μM, 4,2 μM e 4,4 μM respectivamente.

A intoxicação alimentar representa uma grande preocupação para a saúde pública e, em sua grande maioria, é causada por agentes desconhecidos. A intoxicação alimentar por ingestão de peixe destaca-se, principalmente pela ampla variedade de substâncias potencialmente tóxicas. Neste cerne, tetrodotoxina (TTX) e maduramicina representam substâncias com elevada patogenicidade, cuja intoxicação apresenta expressivo grau de morbimortalidade. Diante desse contexto, métodos rápidos e sensíveis para a detecção e quantificação dessas substâncias tornam-se cada vez mais necessários. Portanto, o presente estudo tem como objetivo utilizar o biossensor baseado no nanoporo proteico para a detecção de maduramicina e tetrodotoxina. Foram utilizadas duas abordagens: i) experimental, utilizando o nanoporo da alfatoxina inserido em bicamada lipídica plana como elemento de reconhecimento molecular para a detecção estocástica das substâncias; seguida por uma ii) abordagem computacional visando compreender a interação entre as toxinas e o nanoporo. Os resultados experimentais apontam que, para ambas as substâncias, o perfil de bloqueio da corrente apresenta dependência de voltagem. Para o TTX, os eventos de bloqueio apresentam maior tempo de residência em comparação aos eventos induzidos pela maduramicina, como também apresentam maior variedade de amplitudes de bloqueio, com até três níveis de bloqueio. Os dados obtidos nas análises in silico, por meio de docagem molecular, indicam maior energia de interação no complexo toxina-nanoporo para a maduramicina, que pode estar relacionado ao seu elevado peso molecular, propiciando maior quantidade de interações de Van der Waals. Além disso, os dados computacionais revelam ainda que o TTX interage com o nanoporo da alfatoxina através dos mesmos tipos de interações intermoleculares que ocorrem entre o TTX e o canal de sódio. O nanoporo foi capaz de detectar concentrações na ordem de micromolar para ambas as toxinas. Também foi possível verificar a relação linear entre as concentrações e o tempo intereventos de bloqueio do nanoporo, o que faz com que este apresente-se como uma ferramenta promissora para a detecção e quantificação dessas substâncias.

O câncer de pulmão é a principal causa de morte por câncer desde 1985. Foi a principal causa de morte relacionada ao câncer nos Estados Unidos nos últimos anos. Siglec-15 e Tyro 3 possuem potencial como possíveis candidatos, como alvos terapêuticos para a imunoterapia no câncer de pulmão, com características como expressão maior em tecido tumoral; mínima expressão em tecidos normais; participação na evasão imune do tumor. O presente estudo objetivou analisar a expressão dessas moléculas in sílico, in vitro e ex vivo. Amostras séricas e de tecidos com câncer de pulmão não pequenas células foram selecionadas, submetidas a avaliação por imuno-histoquímica e as linhagens celulares foram avaliadas quanto a expressão gênica por RT-qPCR de Siglec-15 e Tyro-3. Até o momento, 51 pacientes com neoplasia pulmonar não pequenas células foram recrutados. A análise por imuno-histoquímica de 9 pacientes para Siglec-15 e 13 pacientes para Tyro 3 sugeriu marcação de maior intensidade em quadros mais avançados, em estágio metastático, tanto para Siglec-15 quanto Tyro 3, com predominância estromal. A análise in sílico para avaliação da expressão gênica mostrou menor sobrevida global para pacientes com maior expressão de Tyro-3 (p 0,045), em pacientes com subtipo escamoso. Resultado semelhante com Siglec-15 (p 0,67). Menor sobrevida global em pacientes com subtipo adenocarcinoma foi encontrada no grupo com maior expressão de Tyro 3 (p 0,11). Assim, a busca de biomarcadores com relevância diagnóstica e prognóstica no câncer de pulmão não pequenas células para promoção de melhor sobrevida do paciente é necessária, além da contribuição com dados para o desenvolvimento de possíveis alternativas de imunoterapias, marcadores prognósticos, tendo como alvos Siglec-15 e/ou Tyro 3.

As desordens musculoesqueléticas decorrentes da infecção pelo vírus Chikungunya (CHIKV) costumam ser autolimitadas as fases aguda e subaguda da doença em cerca de 60% dos casos diagnosticados. Entretanto, em cerca de 40% as dores articulares incapacitantes persistem por um período superior a 3 meses ou até por anos após a infecção. Apesar do impacto social, econômico, sobre a qualidade de vida e para a saúde pública da Chikungunya (Chika), até o presente não existem biomarcadores preditores do desfecho clínico da doença. Assim, ao considerar o relevante papel das citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento durante a progressão e resolução de quadros infecciosos, o objetivo deste estudo foi investigar a potencial utilidade de mediadores solúveis como biomarcadores séricos da artralgia persistente na Chika crônica. Para tal, amostras de soro foram coletadas de indivíduos diagnosticados com Chika (RT-qPCR positivo e/ou Elisa IgM anti-CHIKV) para verificação dos níveis de quimiocinas, citocinas e fatores de crescimento utilizando o ensaio multiplex de Luminex. Análises de componentes principais, associação, correlação e acurácia foram realizadas considerando a resolução (não-crônicos) ou a persistência (crônicos) da artralgia após 90 dias de inicio dos sintomas. Indivíduos autodeclarados saudáveis foram utilizados como grupo controle. A caracterização clínico-sociodemográfica revelou que o desfecho artralgia persistente foi significativamente associado ao sexo feminino (p=0.004), a apresentação dos sintomas cefaleia (p=0.004), parestesia (p=0.004) e turvação visual (p=0.004), a maior frequência de acometimento musculoesquelético (dor articular, fadiga, NAD, NAE, CDAI, DAS-28) e a ausência de condição reumatológica prévia (p=0.039) no momento do diagnóstico. Os níveis séricos das citocinas pró-inflamatórias INF-β, IL-2, IL-5, IL-7, IL-15, IL-17 e TNF-α, das citocinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-13, dos fatores de crescimento NGF-β e VEGF-D, e da quimiocina GRO-α foram negativamente correlacionados com indicadores clínicos do acometimento musculoesquelético, bem como se apresentaram significativamente reduzidos em indivíduos com artralgia persistente quando comparados a indivíduos recuperados na Chika crônica. Considerando o desfecho artralgia persistente, a análise de componentes principais revelou clusters definidos dos mediadores solúveis e evidenciou a contribuição das citocinas IL-4, IL-7 e IL-13 para a diferenciação dos grupos avaliados. Os dados de acurácia demonstraram que os níveis séricos das citocinas IL-4 (AUC = 0.8804; IC 0.7856 – 0.9753), IL-7 (AUC = 0.8765; IC 0.7826 – 0.9704) e IL-13 (AUC = 0.8726; IC 0.7760 – 0.9691) apresentaram relevante sensibilidade e especificidade em distinguir indivíduos recuperados e com persistência da artralgia durante a fase aguda/subaguda da Chika. A significativa variação nos níveis séricos dos mediadores EOTAXIN, HGF, IL1RA, IL-5, IP-10, NGFβ, PDGFβ, PIGF1, RANTES e VEGFD na Chika crônica sugerem sua participação na evolução da doença, no entanto análises futuras são necessárias para melhor compreender esse fenômeno. Em conjunto, foi possível concluir que existe uma assinatura de mediadores solúveis na fase aguda/subaguda em indivíduos que apresentam artralgia persistente, e que os mediadores solúveis IL-4, IL-7 e IL-13 são fortes candidatos a biomarcador de cronicidade na Chika crônica.

A descoberta de novos compostos com atividade terapêutica possibilita o desenvolvimento de novos medicamentos para tratamento de doenças já existentes ou ainda desconhecidas, permite a criação de alternativas terapêuticas mais eficazes e seguras e contribui para o tratamento de microrganismos multirresistentes. Os tiazóis e as tiossemicarbazonas têm sido objeto de pesquisas extensas devido as suas atividades farmacológicas potenciais, e atualmente várias moléculas dessas classes se encontram em diferentes fases de desenvolvimento clínico. Este trabalho tem por objetivo propor a síntese e caracterização estrutural de sete novos compostos quinolínicos-tiossemicarbazônicos (CG-1 a CG-7), a avaliação de suas propriedades ADMET in silico, atividade antioxidante e citotóxica e estudo de interação com Albumina Sérica Bovina (BSA). Eles foram obtidos em laboratório através da reação indireta com derivados tiossemicarbazida, por adição nucleofílica entre hidrazina e isotiocianatos correspondentes. Os derivados foram elucidados através de técnicas espectroscópicas (RMN ¹H e RMN ¹³C), e a acerca da previsão ADMET, no geral os compostos apresentam bons resultados, sem nenhuma violação para as regras de Lipinski e Veber. Os compostos apresentaram fraca a moderada atividade antifúngica in vitro. Quanto a atividade antioxidante o CG-1 apresentou a melhor atividade em relação aos outros compostos, com resultados de 38.9% e 99.4% nos testes de DPPH e ABTS respectivamente. Na avaliação da atividade citotóxica in vitro, os compostos apresentaram altos valores de IC₅₀ para diferentes tipos de células e atividade hemolítica >7.0%, indicando que os compostos não são citotóxicos e nem apresentam potencial de causar hemólise. O mecanismo de supressão de fluorescência promovido pelos compostos frente a albumina bovina é de natureza dinâmico e reversível, por interações hidrofóbicas e eletrostáticas, processo espontâneo e com alta probabilidade de transferência de energia.

A COVID-19, provocada pelo SARS-CoV-2, já acumula mais de 770 milhões de casos e 6
milhões de óbitos no mundo. Inicialmente, sintomas como febre, tosse e dispneia podem

progredir para síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) ou falência orgânica. A
tempestade de citocinas, desencadeada pela infecção, está ligada à gravidade da doença.
Trabalhos científicos evidenciam que citocinas como IL-37 e galectina-8 apresentam
divergências em diferentes fases da COVID-19, demandando estudos adicionais para esclarecer
seus papéis. Assim, este trabalho objetiva avaliar os níveis circulantes, correlações e associações
de mediadores inflamatórios com as características clínicas e bioquímicas dos pacientes com
COVID-19, em relação à gravidade da doença. Coletas de sangue, swab orofaríngeo e saliva
foram realizadas em indivíduos sintomáticos suspeitos para COVID-19, confirmados por RT-
qPCR. Os participantes foram categorizados em positivos leves (n=154), positivos graves (n=57)
e negativos sintomáticos (n=143) para COVID-19, enquanto o grupo controle (n=34)
compreende voluntários saudáveis. A quantificação de citocinas e marcadores bioquímicos
ocorreu por ELISA e espectrofotometria, com análise estatística via GraphPad Prism (versão
9.0), onde o valor de p &lt; 0,05 foi considerado significativo. Os marcadores bioquímicos, AST,
ALT, colesterol, creatinina, glicose e triglicerídeos, demonstraram níveis elevados significativos
em pacientes graves em comparação aos leves. Citocinas pró e anti-inflamatórias, incluindo IL-
37, IL-1β, IL-6, IL-18, IL-18BPA, IL-36, IL-38 e Gal-8, foram avaliadas em pacientes positivos
e negativos para COVID-19. Os níveis circulantes da IL-37 estavam elevados em indivíduos
saudáveis comparados aos casos leves (p&lt;0,0001) e graves (p=0,0001). IL-18, IL-18BPA e IL-6
obtiveram níveis mais elevados em casos graves em relação aos leves (p&lt;0,0001) e negativos
sintomáticos (p&lt;0,0001). Gal-8 demonstrou níveis elevados nos negativos sintomáticos em
comparação aos positivos leves (p=0,0055) e graves (p = 0,0029). Análises salivares
corroboraram os resultados plasmáticos, com níveis mais altos de IL-37 nos indivíduos saudáveis
e negativos sintomáticos para COVID-19 (p=0,0010), em comparação com grupo leves, e níveis
de IL-6 mais altos em pacientes com COVID-19, em comparação com pacientes negativos
sintomáticos e controles. Em positivos leves, IL-37 correlacionou-se moderadamente com Gal-8,
sugerindo ação anti-inflamatória em conjunto. Além de uma correlação entre IL-37 com IL-1β e
IL-38, no grupo de positivos graves. O estudo destaca níveis reduzidos da IL-37 em pacientes
leves e graves em comparação com controles saudáveis, ressaltando a necessidade de
investigações futuras sobre o papel dessas moléculas na gravidade da doença.

As malformações cardíacas constituem um amplo espectro clínico, compreendendo desde defeitos que evoluem de forma assintomática, até aqueles que determinam sintomas importantes e altas taxas de mortalidade. A SRIS e a sepse são graves problemas de saúde pública que impactam negativamente na morbimortalidade e nos resultados cirúrgicos. O TREM-1 é induzido em processos inflamatórios e infecciosos, deste modo, este marcador poderá ser uma ferramenta útil para previsão e evolução da SRIS e da sepse nos pacientes pediátricos submetidos à cirurgia cardíaca. Este estudo objetiva determinar a validade do TREM-1 na SRIS e sepse na cirurgia cardíaca pediátrica. Trata-se de um estudo de método misto. Foram feitas duas revisões (integrativa e sistemática) e o estudo original, translacional com corte transversal e comparação de grupos, com 32 pacientes pediátricos submetidos a cirurgia cardíaca. A dosagem do TREM-1 foi feita através da técnica ELISA (DuoSet^®ELISA Development System, R&D Systems^® a Bio-techne^® Brand USA), por método colorimétrico quantitativo. As revisões demonstraram que o TREM-1 mostrou-se efetivo no diagnóstico e prognóstico da SRIS e sepse em pacientes pediátricos. A cinética do TREM-1 foi avaliada em cada indivíduo, antes e após a cirurgia cardíaca. Os resultados do TREM-1 foram comparados com escalas de gravidade da cardiopatia, de gravidade clínica após a cirurgia e do risco de mortalidade (RACHS, TISS-28 e PRISM-II), com a ocorrência de complicações intra e pós-operatórias e com desfechos, como tempo de ventilação mecânica, tempo de internamento e óbito, através de medidas de associação. O TREM-1 se apresentou como um biomarcador para SRIS e sepse na população pediátrica submetida à cirurgia cardíaca.

As micotoxinas (MTXs) podem acometer grãos e cereais durante as fases de pré e pós colheita.
Essas substâncias são consideradas como metabólitos secundários produzidos por grupos de
fungos filamentosos e o acometimento dos alimentos citados acima, podem desencadear
processos tóxicos, quando consumidos por humanos e animais. Estudos mostram que 25% de
grãos que são colhidos ao longo do ano estão contaminados resultando em perdas bilionárias
para a indústria agrícola. Órgãos de controle, dada a importância de controlar as MTXs em
alimentos, estabelecem diretrizes para a vigilância dos níveis das MTXs mais tóxicas e listando
os principais alimentos que devem receber essa atenção. O padrão-ouro para determinação e
rastreio das MTXs em alimentos se concentram na utilização da cromatografia líquida, acoplada
ao detector de fluorescência ou a espectrometria de massas. No entanto, o uso de matrizes
complexas e o alto custo operacional que envolvem estas técnicas dificultam o emprego nas
rotinas de monitoramento analítico. Devido a necessidade de ampliar as possibilidades de novos
dispositivos analíticos para as MTXs, propomos utilizar o nanoporo da alfatoxina no
desenvolvimento de um sensor para detecção, quantificação e caracterização das principais
MTXs de interesse agrícola visando uma metodologia alternativa, menos onerosa e mais rápida
que as técnicas convencionais utilizadas atualmente. As bicamadas lipídicas planas livres de
solvente foram confeccionadas de acordo com a técnica adaptada de Montal & Muller, utilizando
o lipídeo diftanoil fosfatidilcolina Todos os experimentos foram realizados em condições de
fixação de voltagem (±20 a ±200 mV, Δ=20 mV), com solução banhante composta por KCl 1 M
ou 4 M, Tris 5 mM, pH 7,5 e temperatura de 25 °C. A adição de ocratoxina A, aflatoxina B1 ou
fumonisina B1 à solução de KCl no lado trans do nanoporo unitário da alfatoxina resultou em
eventos de bloqueio reversíveis e característicos da corrente iônica. Através do cálculo dos
valores de corrente residual (I/I0) foram identificados três perfis com valores de: 0.15 ± 0.001;
0.326 ± 0.025; 0.443 ± 0.025 (n=3) para ocratoxina, aflatoxina B1 e fumonisina B1,
respectivamente. Os valores médios do tempo de permanência (τoff) e os valores médios do
intervalo interbloqueio (τon) foram obtidos a partir de funções exponenciais simples, ajustadas
dos respectivos histogramas de cada parâmetro. Três valores distintos para o τoff correlacionados
para cada MTX foram identificados: 0.0311 ± 0.006 ms, 0.059 ± 0.007 ms e 0.0996 ± 0.011 ms
(n=3), respectivamente. A determinação da corrente residual associada com o τoff permitem, desta
forma, identificar e discriminar as MTXs em solução aquosa, conforme estudos prévios. Em
análises com as três MTXs simultaneamente foi possível observar a manutenção nos valores de
corrente residual e dos tempos de τoff, quando comparado com as análises individuais das MTXs
com o nanoporo, permitindo identificar na mistura cada MTX, corroborando com a capacidade
multianalítica da nossa técnica. Também evidenciamos que o fato de aumentar a concentração de
KCl de 1 M para 4 M, aumenta a sensibilidade do biossensor em até 5 vezes, corroborando com
estudos anteriores. Por fim, a técnica apresenta a capacidade de detectar as MTXs na ordem de
nanomolar. Portanto, o nanoporo da alfatoxina mostrou ser capaz de detectar as MTXs, podendo
se tornar um método analítico alternativo na quantificação e discriminação de MTXs em meio
aquoso.

Apesar de ao longo das ultimas decadas a carga global (DALY) das doenças tropicais negligenciadas (DTNs) apresentarem uma tendência de queda na América Latina e Caribe, estas doenças ainda afetam uma significante parcela da população e impactam nos sistemas de saúde. A alocação sistemática de recursos financeiros em ciência e tecnologia para o estudo destas doenças, representa uma importante medida de planejamento e gestão para garantia ao acesso de serviços e tecnologias em saúde. Considerando isto, o objetivo do presente estudo foi investigar se o financiamento destinado para pesquisas em DTNs e zika, foi equivalente ao esperado para a carga global de cada doença. Foram analisados: (i) os projetos financiados pelo CNPq, de 2006 a 2019 e (ii) as publicações dos pesquisadores associadas a temática dos respectivos projetos neste período. Os resutados encontrados mostram que o financiamento destinado ao desenvolvimento de pesquisas envolvendo tuberculose, doença de Chagas, esquistossomose e leishmaniose foi inferior a proporção do DALY. Em contrapartida, o financiamento destinado para zika, malária, hanseníase e dengue foi superior ao esperado para a carga global relativa das doenças. Este estudo mostra como os recursos financeiros foram alocados para o desenvolvimento de CT&I e combate das DTNs. Além disso, mostra a relação quantitativa dos investimentos em pesquisa com a carga global das doenças no período.

A infecção pelo Papilomavirus Humano é o principal fator responsável pela carcinogênese cervical. A oncogenicidade do HPV pode estar associada ao seu tipo viral, variantes virais e a presença de polimorfismos nos seus oncogenes, como é o caso de E6 e E7. Essas variações podem ter papel primordial no grau e velocidade da progressão a malignidade. Em alguns casos, os polimorfismos levam a mudanças na função biológica, resultando em alterações clínicas. Quando presentes em E7, os polimorfismos podem atuar alterando a expressão de genes responsáveis pelo gerenciamento do ciclo celular (pRB), além de levar a possíveis alterações na via inflamatória (NF-kB). O HPV-58 faz parte do grupo de HPVs de alto risco oncogênico, e está entre os tipos mais prevalentes na região nordeste do Brasil. No estudo aqui apresentado, foi descrito a presença das variantes do HPV-58 em pacientes atendidas em hospitais do Recife (PE) e Aracaju (SE). Foi realizada uma análise funcional dessas variantes baseadas na atividade da via NF-kB dos polimorfismos de E7 do HPV-58. Também foi avaliada a expressão de mRNA, do oncogene E7, a partir de cultura celular, utilizando células C33A. Entre as variantes do HPV-58, as linhagens A, C e D foram detectadas, sendo a linhagem A detectada em amostras de lesão cervical de alto grau. Variações de nucleotídeos presentes no oncogene E7 do HPV são importantíssimos, visto que, E7 desempenha um importante papel no desenvolvimento do câncer do colo do útero, devido à sua capacidade de inativar produtos de genes supressores de tumor. A ativação de NF-kB em grau elevado é capaz de aumentar a sobrevivência celular, inibindo a morte celular programada através do estímulo de transcrição de genes antiapoptóticos. As variantes HPV58/UFPE-58SE e HPV58/UFPE-60M apresentaram atividade de ativação da via NF-kB semelhante ao protótipo. A variante HPV58/UFPE-54PE se comportou de modo diferente das demais variantes, observando-se a diminuição da atividade da via NF-kB, quando comparada a referência E7. A variante HPV58/UFPE-54PE foi a que apresentou a menor expressão de mRNA, correlacionando com o nível de ativação da via NF-kB. Esse estudo pode fornecer dados relevantes a respeito de alterações genéticas, no oncogene E7 do HPV-58, e suas possíveis implicâncias na via NF-kB e sua relação com diferentes graus de lesão resultante.

A trombose se destaca como a principal causa subjacente do infarto agudo do
miocárdio, do acidente vascular cerebral e do tromboembolismo venoso. É
caracterizada pela formação ou desenvolvimento de um coágulo sanguíneo
responsável por causar a obstrução e inflamação na parede do vaso. Proteases
com atividades fibrinolíticas atuam na dissolução desses coágulos sanguíneos a
partir da “quebra”, por hidrólise, da molécula de fibrina. Devido a esse potencial
das enzimas fibrinolíticas, essas se tornaram alvos de diversas pesquisas. As
enzimas de origem microbianas se tornam muito interessantes, já que
proporcionam fácil manuseio, produtividade alta e menor custo de produção. O
objetivo deste trabalho foi a produção, purificação, caracterização e avaliação do
potencial fibrinolítico das proteases produzidas por Streptomyces parvulus
DPUA 1573 e produção e purificação das proteases produzidas Aspergillus
tamarii kita UCP 1279. A enzima fibrinolítica obtida do Streptomyces parvulus
DPUA 1573 foi produzida por fermentação submersa utilizando farinha de
maracujá à 0,5% como substrato, sendo verificado uma atividade proteásica de
33,70 U/mL e uma atividade fibrinolítica de 11,49 U/mL. A mesma enzima foi
extraída utilizando o sistema de duas fases aquosas (SDFA) PEG/Fosfato
obtendo-se a melhor condição de extração com 17,5% de PEG 8000 g/mol, 15%
de Fosfato (p/p) e pH 8,0. Nessa condição, a enzima particionou para a fase rica
em PEG, tendo um coeficiente de partição de 7,33, um fator de purificação na
fase PEG de 2,10 e uma recuperação de 57,49%. Já a enzima fibrinolítica obtida
do Aspergillus tamarii Kita UCP1279 foi produzida por fermentação em estado
sólido utilizando 5g de farelo de trigo umedecido à 40%, sendo verificado uma
atividade proteásica de 47,26 U/mL e uma atividade fibrinolítica de 25,49 U/mL.
A enzima também foi extraída utilizando o SDFA PEG/Fosfato obtendo-se a
melhor condição de extração com 12,5% de PEG 8000 g/mol, 15% de Fosfato
(p/p) e pH 8,0. Nesta condição, a enzima particionou para a fase rica em sal,
apresentando um coeficiente de partição de 0,06, um fator de purificação na fase
Sal de 14,1 e uma recuperação de 487,2%. Quanto a caracterização bioquímica
da protease fibrinolítica pré-purificada do Streptomyces parvulus DPUA 1573,
verificou-se um aumento da atividade enzimática na presença de Fe2+ e
diminuição na presença de β-Mercaptoetanol, fluoreto de fenilmetilsulfonila e
ácido iodoacético, sendo caracterizada como uma serinoprotease. O pH ótimo
foi de 7,0 e a temperatura ótima de 40 ºC. Em relação a atividade trombolítica,
houve uma degradação do trombo sanguíneo pela ação do extrato bruto e da
protease fibrinolítica pré-purificada de 41,47% e 52,98% respectivamente. A
protease estudada degradou as frações α, β e γ do fibrinogênio. Na realização
da atividade amidolítica, a protease fibrinolítica foi considerada uma serina
protease semelhante à quimotripsina. Na verificação da ação da enzima sobre
os tempos de coagulação, a enzima prolongou discretamente os tempos
protrombina e protrombina parcialmente ativada, não afetando o tempo de
trombina. Além disso, no ensaio realizado para avaliar a biocompatibilidade
sanguínea demostrou-se que a enzima não foi hemolítica e no ensaio de
citotoxicidade, a protease fibrinolítica produzida foi atóxica, com viabilidade
celular foi superior à 80% para as linhagens celulares testadas.

Mais de 1,5 bilhão de pessoas, ou 24% da população global, estão atualmente infectadas por uma ou mais geo-helmintíase e casos de resistência anti-helmíntica têm surgido, em detrimento dos tratamentos em massa, obsoletos. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo de desenvolvimento tecnológico de xaropes, suspensões e comprimidos de liberação imediata à base de Momordica charantia L., como alternativa a estas circunstâncias. Foram executadas caracterizações farmacognósticas para drogas vegetais de caule e folhas de M. charantia de diferentes origens (Pernambuco, Piauí e Rio de Janeiro), de acordo com a Farmacopeia Brasileira. Extratos foram obtidos com etanol a 70%, por maceração estática, durante 96 horas e estes foram secos em estufa de circulação de ar.  Foi realizado um delineamento fitoquímico destes materiais, bem como validação de metodologia analítica para quantificação de Momordicina I a partir deles, através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), visando dar suporte aos doseamentos e dissolução. Um estudo de toxicidade aguda foi conduzido seguindo as orientações da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Econômico (OECD) e Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA). Os extratos secos apresentaram elevada higroscopicidade quando secos sem adjuvantes, baixa solubilidade aquosa, estabilidade térmica semelhante à droga vegetal e presença dos metabólitos de interesse à atividade anti-helmíntica: compostos fenólicos, taninos, alcaloides e saponinas. O método analítico mostrou-se adequado para as finalidades pretendidas, sendo padronizadas corridas cromatográficas de apenas 15 minutos. Os extratos secos de PE e PI não apresentaram toxicidade aguda quando administrados em dose única em modelos murinos, representando possível comportamento similar, se ofertado a seres humanos. Dentre as formas farmacêuticas líquidas, as suspensões concederam as melhores propriedades de mascaramento de sabor. Das 10 formulações de comprimidos, a última delas apresentou as melhores características quanto à higroscopicidade, além de perfazer resultados de controles de qualidade dentro das especificações farmacopeicas. No ensaios de dissolução in vitro dos comprimidos houve liberação média de 70% do conteúdo declarado de Momordicina I, sem a necessidade de surfactantes na composição do meio empregado. Com base nos resultados alcançados, é possível inferir que o entendimento das características físico-químicas do material vegetal bem como de seus extratos, viabiliza a aplicabilidade de M. charantia sobrea produção de formas farmacêuticas líquidas e sólidas, com qualidade bem definida. Dessa forma, abre-se a oportunidade para expandir as alternativas terapêuticas no tratamento das geo-helmintíases, alinhando-se com o esforço global de combate às doenças negligenciadas.

O adenocarcinoma ductal pancreático é uma neoplasia altamente agressiva e letal, assim como a maioria dos cânceres, este não apresenta sintomas aparentes, dificultando em um diagnóstico precoce e consequentemente afetando possíveis tratamentos. Entre as opções de tratamentos quimioterápicos a gencitabina segue como fármaco de primeira linha, contudo não se tem muitas opções terapêuticas que possam contribuir para a melhor sobrevida do paciente. Dessa forma, a busca por novas moléculas antineoplásicas continua crescendo. Os derivados nitroaromáticos apresentam atividades antineoplásicas conhecidas e unidos a outros grupos farmacofóricos como tiossemicarbazonas e tiazóis podem potencializar as atividades anticâncer já descritas. Diante do exposto, esta tese buscou avaliar moléculas nitroaromáticas em modelos de neoplasias pancreáticas. Nos ensaios in sílico na verificação de ADME os derivados tiossemicarbazonas e tiazóis aparentam não serem opções para biodisponibilidade oral. Em seguida os compostos foram avaliados quanto a citotoxicidade por MTT em PBMCs e linhagens neoplásicas pancreáticas (BxPC-3, MIA PaCa-2 e PANC-1). Os dados de PBMCs mostraram que os derivados PR-16, PR-19, PR-20 e LAB -2E foram tóxicos e excluídos do estudo. Já nas células neoplásicas os derivados selecionados foram PR-12, PR-13, PR-17 e LAB-1E (três primeiros tiossemicarbazonas e quarto tiazol). Das moléculas tiossemicarbazonas, foi possível avaliar através da marcação com iodeto de propídeo, que o derivado PR-17 que obteve IC50 de 8,9 µM na linhagem MIA PaCa-2, promoveu o aumento de morte e acúmulo de células nas fases S/G2/M e o PR-12 com IC50 de 7,75 µM na linhagem PANC-1 levou apenas ao aumento de morte. Quanto a coloração com cristal violeta, para avaliar formação de colônias, apenas o PR-12 levou a uma diminuição de clones na linhagem MIA PaCa-2. Os resultados referentes ao LAB-1E mostraram que o mesmo foi citotóxico para linhagens de câncer de pâncreas BxPC-3 e MIA PaCa-2 com IC50 de 1,22µM e 5,22µM, respectivamente. Reduziu a proliferação celular verificado pela contagem de células com azul de tripan. Diminuiu a sobrevivência clonogênica, determinado pela coloração com cristal violeta e contagem de clones. Levou a morte celular por apoptose e acúmulo de células nas fases S/G2/M, por meio da marcação com caspase 3/7 e iodeto de propídio, respectivamente. Além de gerar espécies reativas de oxigênio, analisados pela marcação com DHE e H2DCFDA. Por fim o LAB-1E promoveu modificações morfológicas celulares. Assim, os derivados PR-12, PR-17 e principalmente o LAB-1E podem ser considerados como possível estratégia terapêutica no PDAC, contudo novos ensaios devem ser realizados para corroborar com os resultados apresentados.

O adenocarcinoma ductal pancreático é uma neoplasia do trato gastrointestinal maligna cujos
altos índices de mortalidade estão associados ao diagnóstico tardio e à resistência terapêutica.
Devido a desmoplasia tecidual, característica da massa tumoral pancreática, e a um
microambiente hipóxico, a maioria dos quimioterápicos são ineficazes em combater as células
transformadas. Neste contexto, os pro-fármacos que são reduzidos e ativados em condições de
baixas pressões de oxigênio, liberando sua forma ativa e citotóxica, podem ser testados como
candidatos ao tratamento deste câncer. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito
de novas drogas nitrogenadas possivelmente ativadas por hipóxia, buscando alternativas ao
tratamento do adenocarcinoma ductal pancreático. Ensaios de viabilidade celular por
citometria de fluxo foram realizados com as linhagens celulares PANC-1 e MIA PaCa-2 para
a triagem de vinte e seis moléculas nitrogenadas possivelmente ativadas por hipóxia. Uma vez
determinadas as moléculas com maior citotoxicidade, a análise das consequências do
tratamento sobre as linhagens foi executada através dos ensaios clonogênico, migração e
transição epitélio mesenquimal. A análise do percentual de morte provocada pelas moléculas
escolhidas foi realizada por citometria de fluxo através de marcação de iodeto de propídeo. Os
resultados revelaram que duas moléculas apresentaram redução do IC50 quando em condições
hipóxicas. As moléculas que foram ativadas pela atmosfera hipóxica e que consequentemente
apresentaram redução do IC50 foram os derivados EANB e o EAN 3 . As moléculas EANB e
EAN 3 foram escolhidas para participarem dos experimentos clonogênico, migração celular, e
transição epitélio mesenquimal. Ambas as moléculas mostraram boa atividade inibitória na
formação de novos clones no ensaio clonogênico, com destaque para a condição hipóxica
principalmente na concentração de 50 µM. O ensaio de migração revelou uma atividade
antimigratória da molécula EANB na linhagem de PANC principalmente em hipóxia nas duas
concentrações testadas de 25 µM e 50 µM. No ensaio de transição epitélio-mesenquimal, as
duas moléculas foram capazes de reduzir a expressão da proteína vimentina em hipoxia,
principalmente no tempo de 24 horas. As duas moléculas mostraram bons resultados nos
ensaios realizados. Estudos complementares devem ser elaborados para a comprovação da
eficácia das duas moléculas, para que possam seguir para estudos in vivo.

O câncer de mama representa a neoplasia mais comum em todo o mundo. As infecções virais estão envolvidas com a carcinogênese, especialmente aquelas causadas por genótipos oncogênicos do Papilomavírus Humano (HPV). A relação entre o HPV e diversos tipos de câncer, como de mama e de pulmão, ainda requer mais estudos. Após a infecção pelo HPV, ocorre um remodelamento do microambiente tumoral, proporcionando uma alteração pós-infecção com características imunossupressoras. Este estudo buscou avaliar a expressão dos genes JAK2, STAT3, STAT4, STAT6, FOXO4, em amostras de tumores com e sem a presença do HPV, além de analisar o papel do HPV na linhagem celular de adenocarcinoma de mama (MDA-MB-231), transfectada com os oncogenes E5, E6 e E7 do HPV16 e co-cultivada com PBMCs. Foi realizada RT-qPCR e imunofenotipagem.  Na presença do HPV houve menor expressão dos genes STAT4, JAK2, STAT3 e STAT6. Ocorreu maior expressão de STAT4, quando comparado aos demais. Houve aumento no número de células T CD4+ quando estimuladas com MDA-MB-231 não transfectadas e transfectadas, especialmente o perfil Treg. Além disso, citocinas intracelulares pró-inflamatórias, como IFN-γ, TNF-α e IL-17 foram prejudicadas pelas células transfectadas e uma diminuição na atividade citolítica dos linfócitos CD8+ e CD56+ também foi observada na presença de oncogenes do HPV, principalmente com E6 e E7 em células NK e E5 em células TCD8+. Em conclusão, a linhagem de células mamárias MDA-MB-231 transfectadas com oncogenes de HPV pode regular negativamente o número e a função de linfócitos e monócitos.

A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada que atinge milhares de pessoas ao redor do
mundo, principalmente as populações economicamente vulneráveis. Os tratamentos disponíveis
são limitados e a letalidade ainda é crescente, especialmente no Brasil com elevada ocorrência da
forma visceral da doença causada pela espécie Leishmania infantum, que também é responsável
pelo aparecimento de formas cutâneas (atípicas ou não ulceradas) em alguns países da América
Central. Logo, tem sido intensificada a busca por novos fitoterápicos com atividade
antileishmania e com baixa toxicidade através de estudos com metabólitos de plantas. A
fraxetina (6-metoxi-7,8-dihidroxicumarina) é uma cumarina simples (trissubstituída), que
apresenta atividades biológicas já estabelecidas, porém a atividade antileishmania ainda não foi
relatada. O principal objetivo deste trabalho foi estudar a atividade antileishmania da fraxetina
frente cepa de L. infantum e correlacionar com possíveis mecanismos moleculares. Formas
promastigotas de L. infantum (2 x 106 parasitas/mL) foram testadas com a fraxetina em
diferentes concentrações (0,195 a 100 μg/mL) para determinação da IC50 pelo método
colorimétrico do MTT. Anfotericina B foi utilizada como controle positivo e o DMSO como
controle negativo. Avaliou-se o efeito da fraxetina (50 μM) sobre a proliferação da linhagem de
células HeLa. A fraxetina apresentou IC50 de 6,25 μg/mL, com redução do crescimento dos
parasitos in vitro em função do tempo de cultivo e não foi citotóxica para as células HeLa.
Quanto à análise proteômica, a realização do estudo do perfil de proteínas acumuladas pelos
parasitos sob ação da fraxetina (IC50), foi realizada com a extração proteica de amostras tratadas
e não tratadas aplicadas em quintuplicata em um sistema de mini-gel de poliacrilamida (SDSPAGE)
e posteriormente coradas com azul de Coomassie. Em seguida esse gel foi cortado e
submetido a técnica de LC-MS/MS e como resultados, foi obtido um total de 1.565 proteínas,
destas 359 tiveram diferenças de expressão após o tratamento com a fraxetina, tendo-se
observado aumento de expressão em 144 proteínas e expressão reprimida em 215. Essas
proteínas foram analisadas por ontologia genética utilizando-se o programa Blast2GO e
classificadas em três níveis: componente celular, função molecular e processo biológico. A
fraxetina foi capaz de induzir importantes alterações com repercussões no metabolismo do
parasito, embora estudos subsequentes sejam necessários para que se possa considerá-la como
um potente candidato antileishmania

Polímeros são produtos promissores para aplicação industrial nas mais diversas áreas,
como alimentícia, cosmética e farmacêutica. Entre os diversos materiais existentes,
estão em destaque os polissacarídeos, que podem ser obtidos a partir de fontes vegetais
ou animais, apresentam propriedades únicas e diversas vantagens, como
biodegradabilidade, baixa toxicidade, abundância na natureza e baixo custo de
obtenção, além de serem obtidos de fontes renováveis. A árvore Sterculia foetida L. é
uma espécie nativa da Ásia, cultivada em países como Índia e Sri Lanka, introduzida no
Brasil como árvore ornamental. A partir do exsudato produzido desta árvore, é obtido o
polissacarídeo goma Sterculia foetida (GSF), que apresenta propriedades gelificantes,
espessantes, mocoadesivo, estabilizante e aplicado como matriz polimérica em sistemas
de liberação de fármacos. No entanto, é um polímero pouco explorado na literatura. O
presente estudo teve como objetivo aprimorar um método de isolamento da goma
Sterculia foetida e caracterizar o biopolímero obtido, a fim de obter informações a
respeito deste novo material. Para o isolamento e purificação do material foram
realizados 3 protocolos: iniciando com a separação do exsudato e cascas, seguido de
dissolução, agitação, filtração, precipitação e secagem (1); dissolução, agitação,
aquecimento por curto período (2 h), filtração, precipitação e secagem (2); dissolução,
agitação, aquecimento por longo período (24 h), filtração, precipitação e secagem (3). O
protocolo 3 foi o que apresentou maior rendimento (40,5%) e foi selecionado para
caracterização. O polissacarídeo obtido foi caracterizado por espectroscopia do
infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), análise de textura, determinação de
tamanho por Cromatografia de permeação em gel (GPC) e foi realizada a identificação
fitoquímica por métodos colorimétricos de determinação de alcaloides, taninos e fenóis,
ácidos orgânicos e açúcares redutores. A goma isolada apresentou resultado positivo
para ácidos orgânicos e açúcares redutores, e ausência de alcaloides, saponinas, taninos
e fenóis. A espectroscopia do infravermelho mostrou que a goma apresenta
grupamentos funcionais característicos de gomas naturais (grupos alifáticos) e de gomas
Sterculia (grupamentos carbonila e acetil). A GSF apresentou Mw de 1,20 x 107 e
índice de polidispersão (IPD) de 5,8. Na análise de textura, foram identificados dureza
(11,43 ± 0,13), consistência (136,43 ± 1,40), coesividade (- 7,18 ± 0,18) e índice de
viscosidade (-8,13 ± 0,75) em solução de 1% p/v. Desta forma, com o protocolo
utilizado no presente estudo, a goma apresentou um bom rendimento, características
presentes em gomas Sterculia (grupos funcionais, tamanho, textura) e apresenta
potencial para aplicação no isolamento do polissacarídeo Sterculia foetida L.

Adenium obesum (Forssk.) Roem. & Schult. pertencente à família Apocynaceae é popularmente conhecida como rosa do deserto. Esta espécie apresenta uso na medicina tradicional para tratar diferentes doenças venéreas como a gonorreia, feridas, infecções e rinite. O líquido isolado da raiz é utilizado para incorporar loções que tratam doenças de pele, assim como para pediculose. Além disso, é utilizada também como pesticida e o látex é utilizado no tratamento de cárie dentária. Devido a essas aplicações e diversidade de características morfológicas que a espécie apresenta, estudos que visam identificar caracteres de diagnose são necessários com o intuito de contribuir para o controle farmacobotânico da espécie. Sendo assim, este estudo teve por objetivo identificar os caracteres anatômicos da raiz, caule e folhas e histoquímicos da lâmina foliar de A. obesum. Para tal, métodos usuais em anatomia vegetal foram utilizados para o preparo e análise, em microscópio de luz e de polarização de lâminas semipermanentes contendo secções transversais e secções paradérmicas de A. obesum. Foram realizados testes histoquímicos a fim de localizar os constituintes químicos em secções transversais da lâmina foliar. A avaliação microscópica óptica de luz e de polarização viabilizou a identificação e caracterização anatômica da raiz, caule e folha da espécie, revelando caracteres de diagnose como disposição do feixe vascular na nervura central, mesofilo dorsiventral, da epiderme bem como presença de cristais do tipo drusa e prisma no caule da espécie. Por meio da técnica histoquímica evidenciou-se a presença de compostos fenólicos, compostos lipofílicos, lignina e cristais de oxalato de cálcio. Portanto, a correta caracterização fornece informações anatômicas essenciais para padronização farmacobotânica, contribuindo para descrição do gênero e da família.

A cardiomiopatia hipertrófica (CMH) é uma patologia incomum, de origem genética, que está atrelada a riscos de complicações como arritmias, progressão para forma dilatada da insuficiência cardíaca e morte súbita. O objetivo deste trabalho é avaliar, a partir de uma revisão sistemática e metanálise, a eficácia do HCM-Risk SCD como escore preditor de morte súbita cardíaca (MSC) em pacientes com CMH. Foram incluídos estudos publicados em português, inglês, espanhol e italiano das seguintes bases de dados: MEDLINE, EMBASE, Scopus, Scielo, ClinicalTrials.gov, OpenGrey e Grey Literature Report. Foram inseridos estudos observacionais, sem limite temporal de publicação. A seleção foi realizada por dois autores, e discordâncias definidas por um terceiro autor. Da pesquisa inicial (n = 1268), 53 artigos foram avaliados integralmente. Após avaliação dos critérios de inclusão e exclusão, foram selecionados 10 artigos para este estudo. Da amostra total de 13676 pacientes com CMH, 2194 (16%) recebeu cardiodesfibrilador implantável, com prevenção de MSC em 643 (29,3%) dos casos. O HCM-Risk SCD demonstra ser uma boa ferramenta para a avaliação prognóstica de pacientes com CMH, principalmente para indivíduos classificados como de alto risco, auxiliando na redução de MSC nesta população.

A Síndrome de Sjogren primária é uma exocrinopatia autoimune crônica e sistêmica, e tem na sua patogênese a participação das imunidades inata e adaptativa. Apesar dos avanços, existe ainda uma escassez de biomarcadores específicos de atividade e prognóstico da doença, além da ausência de terapia específica. Nesse contexto, um grupo de proteínas capazes de se ligar de forma reversível a glicanos chamado galectinas vem sendo estudadas, devido à sua capacidade de executar funções biológicas decorrentes dessas ligações, como adesão, proliferação e morte celular e que podem estar relacionadas à fisiopatologia de várias doenças imunomediadas. Foi realizado um corte transversal de 42 pacientes atendidos no ambulatório de Síndrome de Sjögren do HC-UFPE, dos quais foi feita uma análise, através da comparação com controles saudáveis, dos níveis de galectina-9 (gal-9) no sangue e na saliva através da metodologia ELISA, e realizada imunohistoquímica em biópsias de glândula salivar menor. O objetivo do trabalho foi avaliar os níveis de gal-9 nesses pacientes e estabelecer correlações com variáveis que envolvem atividade da doença, exames complementares, uso de medicações e manifestações extra glandulares, além de avaliar a expressão de gal-9 no tecido glandular desses pacientes. Dos 42 pacientes selecionados, 100% eram mulheres com média de idade de 45,8 anos (DP ± 11,16). A mediana da gal-9 sérica foi de 2264,24pg/ml, comparado a 3622,86pg/ml dos controles com p=0,047. Os níveis de gal-9 salivar apresentaram uma mediana maior do que controles saudáveis (613,58pg/ml x 317,59pg/ml) com p = 0,012.  A correlação entre a gal-9 no soro e na saliva foi positiva quando comparado com o escore de atividade ESSDAI e IgG sérica, e negativa para idade, porém sem significância estatística. Não houve associação estatisticamente significativa entre a gal-9 sérica e salivaras e a positividade do anticorpo Anti Ro/SSa, positividade dos testes de secura, uso ou não de medicamentos imunossupressores. Porém, destaca-se que a mediana da gal-9 na saliva dos pacientes com manifestações extra glandulares foi maior do que os que apenas sintomas glandulares (816,91pg/ml x 328,72) com p=0,002 e a mediana da gal-9 salivar foi estatisticamente diferente entre os grupos que eram Anti-La/SSb positivos (927,80pg/ml) e negativos (526,00pg/ml) com p=0,029. A análise imuno-histoquímica das biópsias de glândula salivar revelou um amento da expressão de gal-9 nas células ductais e do infiltrado inflamatório. Concluiu-se que os níveis séricos e salivares de gal-9 foram estatisticamente diferentes em relação a controles saudáveis, a mediana da gal-9 salivar foi maior na saliva de pacientes com manifestações extra glandulares e que existe a expressão de gal-9 em células ductais e do infiltrado inflamatório de pacientes com SSP. Esses achados inéditos abrem caminhos para que novos estudos com essa galectina sejam realizados em pacientes com SSj a fim de proporcionar um melhor entendimento sobre sua participação no desenvolvimento da doença e sua aplicabilidade como biomarcador.

Em 2020 tivemos início a pandemia da COVID-19, sendo esta consequência da Síndrome Respiratória Aguda Grave do Coronavírus 2, o SARS-CoV-2. Sendo uma doença bastante transmissível e com poucas opções de tratamento. A prevenção e o controle do surto são essenciais no combate a transmissão do vírus, identificando o infectado e isolando-o, evitando a propagação do vírus. O padrão-ouro no diagnóstico da COVID-19 é a técnica de RT-PCR, mas ela apresenta algumas desvantagens como insumos limitados, falso-positivos e a necessidade de recursos humanos qualificados, o que dificulta sua aplicação em escala global, gerando uma demanda por novos métodos. A nanotecnologia é uma ferramenta eficaz e inovadora para fornecer soluções para essa problemática através do uso de nanomateriais, como nanofibras e nanopartículas, que apresentam uma boa relação área/volume. Aprimoramos a detecção desses materiais para a produção de biossensores. Os biossensores terão alta sensibilidade, capacidade de miniaturização, possibilitando a criação de biossensores de baixo custo e de alta resposta. Dessa forma, o presente projeto visou a produção de uma plataforma biossensora baseada em nanofibras eletrofiadas de PVA funcionalizadas com AuNPs para o diagnóstico do cDNA do SARS-CoV-2. Para isso, produzimos nanofibras eletrofiadas de álcool polivinico e álcool polivínico com AuNPs através do método de eletrofiação, devido a sua baixa estabilidade em água, as nanofibras foram submetidas a um processo de reticulação química através de uma solução de acetona, onde as nanofibras adquiriram estabilidade em água ou em compostos com água, sendo o primeiro passo para a construção da plataforma biossensora. A construção dessa plataforma acontece através de uma ancoragem de diferentes compostos químicos como o Ácido 11-Mercaptoundecanoico, N-hidroxisuccinimida, N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida e SONDACOVID-19, sendo a plataforma submetida a avaliação eletroquímica foi realizada através da microscopia de força atômica (AFM), espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS), onde na EIS a cada composto inserido, onde pudemos comprovar a incorporação dos compostos, após isso, submetemos a plataforma a detecção de diferentes diluições de cDNACOVID-19, indo de 10¹ a 10⁵. A análise das diluições foi feita em triplicata para garantir a reprodutibilidade do experimento, onde conseguimos observar um aumento na resposta da impedância faradaíca e nos valores da resistência a transferência de elétrons a medida em que as concentrações de cDNA presentes nas diluições eram aumentadas. Demonstrando a eficácia da plataforma na detecção de diferentes diluições do cDNACOVID-19.

As manifestações neurológicas concomitantes à infecção pelo SARS-CoV-2 tem sido
comumente relatada durante a pandemia da COVID-19 e alertado a sociedade para
possibilidade de danos neurológicos associados. Para abordagens mais complexas
sobre as possíveis complicações neurológicas relacionadas à doença destaca-se a
análise de diversos biomarcadores descritos na literatura como a proteína B de ligação
ao cálcio (S100B) e enolase específica à neurônios (NSE). Frente a isso, o presente
estudo visou determinar os níveis sorológicos da S100B e NSE por ELISA em um
grupo de 141 indivíduos para COVID-19 e 36 controles saudáveis e correlacionar com
dados clínicos e demográficos dos grupos. Os grupos de estudo foram divididos entre o
grupo controle (G1), indivíduos positivos para a COVID-19 que apresentaram apenas
sintomas leves (G2) e os indivíduos positivos para COVID-19 que apresentaram um
quadro respiratório agudo com necessidade de internação na Unidade de Terapia
Intensiva (UTI) (G3). Foi realizado um estudo de seguimento com 23 pacientes do G2
após 14 (D14) e 21 (D21) após o início dos sintomas. Os níveis séricos de NSE e
S100B foram medidos usando o método de imunoensaio enzimático (ELISA). Os
resultados revelaram uma associação positiva significativa entre os pacientes G3 e a
expressão sérica de S100B (p = 0,0403). Os níveis séricos de NSE também foram
significativamente aumentados no grupo G3 em relação ao controle (p <0,0001) e ao
grupo G2 (p < 0,0001). Entretanto, nenhuma associação foi encontrada entre os
sintomas neurológicos e a expressão sérica de NSE ou S100B. Análises de associação
com o sexo demonstraram níveis séricos de NSE maiores para indivíduos do sexo
masculino quando comparados ao sexo feminino (p = 0.0473). O estudo de seguimento
demonstrou uma diminuição ao longo do tempo (21 dias) na expressão sérica de NSE
(p &lt; 0,0001). Os resultados sugeriram que o dano cerebral é seguido por exposição
aguda ao vírus, sem efeitos a longo prazo. Trabalhos futuros examinando a
recuperação do COVID-19 esclarecerão os danos neurológicos crônicos da infecção
pelo COVID-19.

As leucemias são neoplasias hematológicas que constituem um grupo heterogêneo de doenças que afetam os progenitores hematopoiéticos. A determinação da alteração genética associada a leucemia é de extrema importância para o prognóstico dos pacientes. Neste contexto, a população infanto-juvenil merece considerável atenção pois nessa faixa etária a leucemia é o tipo de câncer mais recorrente e com elevada taxa de mortalidade. Para investigação desses oncomarcadores são ultizadas técnicas da biologia molecular como FISH, RT-PCR e sua variante RTq-PCR. Essas técnicas são eficientes no rastreio entretanto ainda apresentam protocolos extensos, complexos e de alto custo. Diante disso os genossensores se destacam por serem biodispositivos que realizam quantificação de variantes genéticas de forma confiável, rápida e de baixo custo. Entretanto a implantação de biossensores DNA-sensíveis na rotina laboratorial ainda é um desafio importante devido à falta de portabilidade e miniaturização dos biodispositivos desenvolvidos sobre substratos convencionais. Quando esses biodispositivos são associados a técnicas eletroquímicas são agregadas características essenciais como detecção rápida e reversível da hibridização além da possibilidade de sistemas miniaturizados de avaliação. Diante disso o presente estudo traz o desenvolvimento de protótipos genossensores nanoestruturados com polímeros condutores e pontos quânticos para detecção de oncogenes de interesse na leucemia infantil. Duas categorias de nanodispositivos foram desenvolvidos um em formato de eletrodo de trabalho e outro em desing de célula eletroquímica com três eletrodos um eletrodo de trabalho, referência e auxiliar. Ambos dispositivos foram confeccionados em superfície de ITO flexível por meio de uma impressora de corte automatizada. Polipirrol (PPy), polianilina (PANI) e pontos quânticos de grafeno (GQDs) foram utilizados para a nanoestruturação e imobilização de sequências de fita simples de DNA (ssDNA) sobre a superfície dos biodispositivos desenvolvidos. Os nanodispositivos desenvolvidos foram voltados a detecção das translocações 1;19, 4;11; 12;21, 15;17 e 17;19. Todas as etapas de construção e ensaios de bioatividade dos dispositivos bioanalíticos foram caracterizadas por voltametria cíclica (VC), voltametria de pulso diferencial (DPV), espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) e microscopia de força atômica (AFM). Ao avaliar a performance analítica dos genossensores frente a amostras plasmideais e de pacientes com leucemia alterações eletroquímicas características de biorreconhecimento foram detectadas com diminuição das correntes de picos voltamétricas e elevação da resistência a transferência de carga (RCT) do sistema. Na avaliação de especificidade dos biossensores de DNA não foram detectadas alterações de reconhecimento. Desta forma os nanodispositivos desenvolvidos apresentam a características promissoras para o diagnóstico de oncogenes de interesse na leucemia infantil.

Os compostos bioativos, presentes em espécies vegetais, são utilizados na indústria
de cosméticos, alimentícia, bem como na indústria farmacêutica, fazendo parte de diversos
medicamentos. Croton blanchetianus é uma espécie encontrada na caatinga com o clima seco
e quente predominante do semiárido, conhecida popularmente como marmeleiro. Visando
obter mais conhecimentos sobre a espécie, o trabalho tem como objetivo avaliar o perfil
fitoquímico, propriedades físico-químicas, toxicidade e atividade gastroprotetora e
antimicrobiana de pré-formulação efervescente contendo extrato das folhas de C.
blanchetianus. O material vegetal (folhas) foi obtido em Pernambuco, foram secas em estufa
(40 °C) e em seguida trituradas em moinho de facas. As análises físico-químicas (umidade,
cinzas totais e granulometria) foram realizadas de acordo com a Farmacopeia Brasileira.
Posteriormente, o método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi validado
para a matéria-prima vegetal. O estudo de sazonalidade também foi realizado, avaliando as
propriedades fitoquimicas e físico-químicas. Os extratos foram obtidos por turbólise
utilizando planejamento de misturas, utilizando etanol, água e acetona, e, suas misturas
binárias e terciária. Os extratos foram avaliados por cromatografia camada delgada (CCD) e
CLAE, bem como o teor de polifenóis (TPT) e flavonoides (TFT) totais e o resíduo seco (RS).
Após a escolha do solvente, o processo de secagem por spray dryer foi estudado, em primeiro
momento quanto aos adjuvantes (dióxido de sílico coloidal/maltodextrina/mistura 1:1, em
relação ao RS). Em seguida, os parâmetros de secagem foram avaliados a partir de um fatorial
2 2 com ponto central, considerando o fluxo de alimentação (L/h) e temperatura de entrada
(°C) como fatores, com vazão de ar de 30 L/min. As respostas analisadas foram perfil por
CCD e CLAE, TPT, TFT, bem como as propriedades tecnológicas (densidade aparente e
compactada, ângulo de repouso e umidade). Diante da escolha do melhor ESA, foi realizado o
ensaio de toxicidade aguda, utilizando a metodologia da OECD (2001). As pré-formulações
foram obtidas em 4 formulações efervescente, utilizando o extrato seco otimizado de C.
blanchetianus, lactose, bicarbonato de sódio, ácido cítrico, ácido tartárico e PVP em
diferentes proporções. Após obtido o ESA e o G.E., o teste de atividade gastroprotetora foi
realizado, utilizando-se o álcool para indução das úlceras e três concentrações do ESA para
tratamento, realizou-se a medição das lesões, analise histopatológica dos estômagos e
estatística. Por fim, foi realizada a covalidação do método por CLAE para o ESA, EL e a
formulação efervescente escolhida. O material vegetal apresentou as análises físico-químicas
dentro dos valores recomendados pela Farmacopeia Brasileira. O método por CLAE foi
validado, apresentando-se linear, robusto, exato e preciso, estando dentro dos parâmetros da
resolução vigente. O perfil por CCD evidenciou a presença de flavonoides, derivados
cinâmicos, saponinas e taninos condensados. A amostra de junho do estudo de sazonalidade
foi a que apresentou melhores teores de flavonoides e polifenóis, bem como nas análises
físico-químicas. O melhor solvente extrativo foi a mistura água e acetona (1:1), com melhor
extração de flavonoides, e melhores respostas para o RS e o TPT, observados no
planejamento de misturas. Em relação ao processo de secagem, o adjuvante maltodextrina não
apresentou interferência na extração de flavonoides. A respeito das propriedades tecnológicas,
os extratos secos por aspersão (ESA) mostraram-se pobres em relação ao fluxo, e a utilização
de maltodextrina favoreceu alguns parâmetros. Na análise térmica, o ESA com maltodextrina
foi o que apresentou melhor estabilidade térmica. Na microscopia eletrônica, os extratos
apresentaram partículas irregulares, de tamanhos diferentes. Com a utilização de
planejamento fatorial foi possível obter um extrato seco com melhores características
reológicas, com vazão de 0,5L/h e temperatura de 150 °C, sem ocorrer prejuízo ao perfil
químico do extrato. A formulação efervescente escolhida para prosseguir com o ensaio
farmacológico apresentou melhora nas propriedades reológicas após a obtenção dos grânulos.
Por fim, a utilização de PVP nas formulações evidenciou a perda de alguns flavonoides, sendo
retirado da formulação final. No teste da gastroproteção, o ESA apresentou efeito na
concentração de 50 e 200 mg/kg. Além disso, o ESA e o G.E. apresentaram atividades
antimicrobianas para cepas de Candida spp. A covalidação do método para o ESA, EL e a
formulação efervescente foi considerada precisa e exata. Diante dos resultados, é possível
deferir que os extratos das folhas de C. blanchetianus se mostraram eficientes quanto a
extração de polifenóis, principalmente flavonoides; além de apresentar boas propriedades

reológicas, estabilidade térmica, dose segura, efeito gastroprotetor e antimicrobiano,
possibilitando a obtenção do granulado como insumo em futuras formulações farmacêuticas.

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença autoimune do tecido conjuntivo caracterizada por alterações vasculares, desregulação imunológica e fibrose progressiva da pele e de órgão internos. A fisiopatogênese da ES é complexa e incompletamente compreendida, o que reflete na heterogeneidade clínica da doença e dificulta a descoberta de terapias eficazes. Atualmente há poucas opções de tratamento para doença, e as que estão disponíveis não têm impacto significativo em sua progressão, havendo uma necessidade considerável por estudos que busquem a melhor compreensão da doença e que explorem novas alternativas terapêuticas. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o perfil de citocinas em pacientes com ES e a atividade imunomoduladora e antifibrótica de derivados tiazolidínicos (LPSF/CR-35 e LPSF/GQ-16) e do híbrido IBPA in vitro e in vivo. Na primeira etapa do estudo foram incluídos 84 pacientes com diagnóstico de ES e 84 voluntários saudáveis pareados por sexo e idade. A quantificação das citocinas no soro dos participantes foi realizada através da técnica de ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Na etapa seguinte, os efeitos imunomoduladores e antifibróticos dos derivados tiazolidínicos e do híbrido IBPA foram avaliados em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com ES e em modelo de ES induzido por ácido hipocloroso (HOCl) em camundongos BALB/c. Observou-se que pacientes com ES quando comparados com voluntários saudáveis apresentaram aumento nos níveis séricos da IL (Interleucina) -27 e da IL-18, além de diminuição da isoforma a da proteína ligadora da IL-18 (IL-18 BPa). Além disso, os pacientes com ES apresentaram aumento significativo nos níveis séricos do receptor solúvel da oncostatina M (sOSM-R) e da glicoproteína 130 solúvel (sgp130), quando comparados com voluntários saudáveis. As citocinas e receptores desregulados no soro dos pacientes com ES foram correlacionados e/ou associados com manifestações da doença. Os tratamentos com as moléculas sintéticas in vitro promoveram a modulação na secreção de diferentes citocinas em cultivos de PBMC de pacientes com ES (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-13, IL-17, IFN-γ e TNF). Os efeitos imunomoduladores in vivo também foram evidenciados em modelo de ES induzido pelo HOCl, os diferentes tratamentos reduziram a expressão de marcadores de ativação em células T CD4+ (CD69) e células B (MHC-II e CD40), e a expressão do marcador de macrófagos M2 (CD206), em células isoladas do baço dos camundongos. A expressão do marcador de macrófagos M1 (CD86) foi aumentada após os diferentes tratamentos com os derivados tiazolidínicos e com o IBPA. A ação antifibrótica das moléculas foi avaliada in vivo na pele e pulmões dos camundongos com ES induzida pelo HOCl. Observou-se que os tratamentos regularam negativamente a expressão de mRNA de marcadores fibróticos na pele e pulmões (α-SMA, TGF-β, Colágeno tipo I, IL-4 e IL-13), além de terem reduzido o acúmulo de colágeno na pele e o espessamento dérmico. Adicionalmente, o IBPA reduziu significativamente o acúmulo de colágeno nos pulmões dos animais. As análises histopatológicas de fragmentos de pele e pulmões corados com Hematoxilina & Eosina e Sirius Red evidenciaram que as moléculas atuaram impedindo o desenvolvimento da fibrose dérmica e pulmonar nos camundongos. Os resultados apresentados no presente estudo indicaram diferentes citocinas e receptores solúveis que podem estar associados com a ES e identificaram três diferentes moléculas sintéticas com potencial terapêutico para a doença.

Esta pesquisa empírica de recorte transversal fez avaliação da eficiência técnica da rede hospitalar estadual de Pernambuco. Aplicou-se a Análise Envoltória de Dados- DEA para retornos constantes e variáveis de escala,a fim de construir a fronteira de eficiência. Os dados do estudo são da rede hospitalar do estado de Pernambuco – Brasil, extraídos do Sistema de Informação Hospitalar e do Sistema de Cadastro Nacional de Estabelecimentos de Saúde para o período de 2008 a 2019. Os hospitais foram classificados segundo porte, natureza jurídica e, àqueles sob gestão estadual segundo modelo de gerência – Administração Direta e Organização Social de Saúde. Realizaram-se, também, análises segundo classificação gerencial adotada pela Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco. Foram construídos os indicadores: Taxa de Mortalidade Hospitalar, Tempo Médio de Permanência (em dias) e Taxa de Cirurgias para cada uma das unidades e para cada ano do estudo. Criou-se uma variável de agrupamento Porte, para análise da eficiência Técnica. Para estabelecer a comparação entre os modelos de gerência dos hospitais públicos e àqueles especificamente sob gestão estadual, foi aplicada a estatística descritiva através da análise de frequência, utilizando-se os testes de Shapiro Wilk e Man-Whitney. Os testes demonstraram que as variáveis selecionadas para o estudo não apresentaram distribuição normal e observou–se diferença estatisticamente significante entre as médias dos estabelecimentos gerenciados por Organizações Sociais de Saúde e Administração Direta. Os resultados obtidos a partir do desenvolvimento do Modelo DEA–CRS e VRS demonstraram que os hospitais de natureza pública foram mais eficientes, seguidos dos filantrópicos e privados. As Unidades Hospitalares gerenciadas pelas Organizações Sociais se apresentaram mais eficientes, com tendência negativa de crescimento. Já os hospitais de Administração Direta apresentaram um comportamento de busca pela eficiência, com tendência de crescimento. Os resultados da pesquisa permitem concluir que, para Pernambuco, a natureza jurídica afetou a eficiência técnica das unidades hospitalares, assim como o Modelo de gerência e o porte.

A cardiomiopatia hipertrófica (CMH) é uma doença genética caracterizada por hipertrofia ventricular esquerda (HVE) na ausência de outra condição cardíaca, sistêmica ou metabólica. A investigação molecular através dos painéis genéticos possibilita a identificação de fenocópias que cursam com HVE, dentre as quais a doença de Fabry (DF).  A forma clássica da DF, causada por mutações patogênicas, não apresenta controvérsias quanto à instituição do tratamento, porém as apresentações tardias, com variantes de significado incerto (VUS), são objeto de discussão quanto ao início da terapia e à utilização do liso-Gb3 como marcador de patogenicidade.  Novos biomarcadores estão sendo estudados, dentre os quais os microRNAs (miRNAs). O objetivo deste estudo é a pesquisa de miRNAs como marcadores de patogenicidade nos pacientes (pcts) com a variante cardíaca da DF. Foram incluídos 131 pcts com o diagnóstico ecocardiográfico de CMH submetidos à investigação genética para a DF, dos quais 76 através do sequenciamento do gene GLA e 55 pelo painel genético para CMH. Em sete pcts (5,34%) foram encontradas mutações no gene GLA e identificadas as seguintes variantes: uma c.967C>A(p.Pro323Thr), quatro  c.352C>T(p.Arg118Cys) e duas  c.937G>T(p.Asp313Tyr). Os pcts com mutações no gene GLA que haviam realizado, apenas, o sequenciamento do gene, foram submetidos ao painel para CMH (18 genes). Três pcts (todos com a variante p.Arg118Cys)  apresentaram mutações em outros genes.  Nos quatro restantes, a investigação foi ampliada através da coleta do painel para as cardiomiopatias (206 genes),  não tendo sido detectadas variantes em outros genes. A triagem familiar revelou 17 indivíduos com mutações no gene GLA, sendo identificados dois irmãos com HVE com a variante c.937G>T(p.Asp313Tyr). O painel para cardiomiopatias hereditárias foi coletado em um deles e nenhuma mutação foi detectada em outro gene. Os pcts e os portadores de variantes no gene GLA foram submetidos à dosagem do liso-Gb3 e à análise dos seguintes miRNAs: miR-1291, miR-214 e miR-505, tendo sido avaliadas as suas expressões diferenciais. Na comparação entre indivíduos com HVE e sem HVE, não houve diferença significativa para os miR-1291, miR-214 e miR-505, entretanto houve tendência a super expressão nos indivíduos que apresentam HVE, principalmente para o miR-1291. Diferentemente, a expressão do miR-214 em indivíduos com HVE foi significativamente menor do que em indivíduos sem HVE (p=0,0416), tendo a expressão relativa de indivíduos saudáveis como referência. Para o miR-505 houve uma expressão significativamente maior tanto nos portadores das variantes no gene GLA sem HVE quanto nos pcts com variantes no GLA com HVE,  quando comparados a indivíduos saudáveis (p=0,0195).  O miR-505 também apresentou uma correlação significativa e diretamente proporcional com o liso-Gb3 no grupo dos pcts com GLA com  HVE (p=0.0353; r=-0.9647). Todos os indivíduos apresentaram os níveis do liso-Gb3 normais. Neste estudo a frequência de mutação no gene GLA em pcts com CMH foi 5,34%. A coleta do painel molecular para cardiomiopatias hereditárias não detectou outras variantes que justifiquem a HVE em pcts com as mutações c.967C>A(p.Pro323Thr) e  c.937G>T(p.Asp313Tyr), até então classificadas como VUS. Tratando-se de uma doença rara este estudo contribui com evidências de que o aumento na expressão do miR-505, o aumento na expressão de miR-1291 e sub expressão de miR-214 naqueles com HVE podem ser marcadores de patogenicidade na DF. No entanto, são necessárias maiores investigações destes microRNAs com um número maior de indivíduos.

O Brasil lidera o número de casos na América Latina ao se tratar de doença de Chagas, estimando-se 2 milhões de pessoas acometidas pela doença em nosso país. O tratamento da doença ainda é baseado no benzonidazol, porém essa droga é mais efetiva na fase aguda e possui alta toxicidade. Além disso, é sabido que o envolvimento do sistema imune de hospedeiros infectados com Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença, pode desempenhar um importante papel na eficácia da quimioterapia. Diante disso, uma nova série de 1,3-tiazóis (2-17), derivados de 2,4-diclorofenil tiossemicarbazona ou 2,3,4-triclorofenil-tiossemicarbazona, foram investigados em ensaios in vitro sobre as formas evolutivas do T. cruzi, in silico e quanto ao potencial imunomodulador. Em paralelo, visando a melhoria do screening de novos compostos, o presente estudo propõe o desenvolvimento de uma linhagem transgênica de T. cruzi que expressa luciferase, reduzindo o tempo de análise em comparação aos métodos convencionais. Contra a forma tripomastigota, alguns derivados de 1,3-tiazol apresentaram valores de IC50 que foram pelo menos 10 vezes mais potentes que o benznidazol, como os compostos 8 (2,64M), 4 (3,27M), 10 (4,08 M) e 16 (4,82 M). Contra a forma amastigota, o composto 15 apresentou o melhor valor de IC50 (3,65M) sendo mais ativo que o fármaco padrão, benznidazol (5,64M). Os compostos 11 (5,96M) e 12 (4,46M) exibiram atividade equipotente quando comparados ao benzonidazol. Em relação à citotoxicidade em macrófagos, alguns dos tiazóis apresentaram baixa citotoxicidade (os compostos 6, 8, 9, 14, 16 e 17 apresentam CC50 > 44,18 M). Os resultados de docking molecular sugerem que os compostos que possuem anéis aromáticos como substituintes, como fenil (compostos 8 e 17) ou naftil (composto 9), apresentaram maior afinidade prevista para o sítio de ligação da cruzaína quando comparados com as moléculas com substituintes não aromáticos. Quanto a avaliação do perfil de morte celular por citometria de fluxo, apenas um composto induziu necrose de maneira significativa no tratamento de 2xIC50 em relação ao sem tratamento e ao benzonidazol. Até o momento, a amplificação e clonagem do gene da luciferase para obtenção da cepa transgênica está na fase inicial. Portanto, essa nova série de 1,3-tiazóis apresentou compostos com potencial promissor para o avanço de estudos pré-clínicos contra doença de Chagas