Banca de QUALIFICAÇÃO: SILVANA MAGNA CAVALCANTE DO MONTE

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SILVANA MAGNA CAVALCANTE DO MONTE
DATA : 03/10/2022
LOCAL: videoconferência
TÍTULO:

ANÁLISE DE MITOGENOMAS DE AMOSTRAS FORENSES COMPLEXAS E POLIMORFISMOS DO DNA MITOCONDRIAL E Y-STR DE INDIVÍDUOS PARAIBANOS.

PALAVRAS-CHAVES:

Palavras-chave: DNA mitocondrial; sequenciamento massivo paralelo; inferência biogeográfica; aplicação forense. 

PÁGINAS: 78
RESUMO:

A Genética Forense aplica os conhecimentos da genética e biologia molecular à serviço da Justiça, incorporando robustez aos resultados de investigações criminais. Apesar dos marcadores STRs (Short Tanden Repeats) autossômicos serem os mais utilizados na rotina forense, os marcadores STR do cromossomo Y (Y-STR), bem como o DNA mitocondrial (DNAmt) são utilizados com sucesso nas análises que não produziram resultado conclusivo através dos STRs autossômicos. As análises de Y-STRs e DNAmt, permitem ainda, rastrear linhagens paternas e maternas, respectivamente, para auxiliar em investigações de pessoas desaparecidas, identificação de vítimas de desastres em massa e estudos históricos, bem como ajudar a vincular famílias por meio de genealogia genética. O DNAmt é particularmente útil em casos envolvendo amostras extremamente degradadas, exíguas, antigas ou expostas a condições ambientais adversas, bem como no estabelecimento de vínculos maternos complexos. Na genética forense, a análise de DNAmt é comumente realizada através do sequenciamento de Sanger das regiões hipervariáveis 1, 2 e 3. No entanto, a análise da região controle inteira é recomendada quando se deseja adicionar informações de haplogrupos, como nos estudos genéticos populacionais. Com o advento do Sequenciamento Massivo Paralelo (SMP), é possível recuperar com sucesso, genomas mitocondriais completos, mesmo a partir de amostras forenses altamente danificadas e degradadas e aumentar a capacidade de informação gerada, como a determinação mais precisa de haplogrupos, heteroplasmias e a diferenciação de misturas de DNA, além de simplificar o fluxo de trabalho. O objetivo deste estudo é avaliar as análises de mitogenomas por SMP, em casos reais nos quais a análise-ouro da genética forense não produziu resultados, bem como estudar os polimorfismos da região controle do DNAmt e de microssatélites do Cromossomo Y em uma amostra da população do Estado da Paraíba. Os microssatélites do cromossomo Y serão amplificados utilizando o Kit PowerPlex® Y23 System (Promega). Para análises de DNAmt, avaliaremos os fluxos de trabalho de sequenciamento pelo método de Sanger, utilizando o conjunto BigDye™ Direct/BigDye XTerminator® Purification (Termofisher) e o kit Precision ID DNAmt Whole Genome(Termofisher)na tecnologia Ion Torrent de SMP, discutindo suas vantagens, limitações e desafios para implantação na rotina dos laboratórios de DNA que compõem a Rede Integrada de Banco de Perfis Genéticos (RIBPG). As análises de SMP foram realizadas utilizando o fluxograma proposto por BOTTINO et al. (2021). Para as análises de DNAmt por SMP, obtivemos 15 haplótipos únicos que determinaram haplogrupos correspondentes as ancestralidades africana, ameríndia e europeia. A inferência da origem biogeográfica foi mais precisa considerando todo o genoma mitocondrial e não apenas a região controle, como usualmente é realizado nos exames forenses. O fluxograma de Análise testado permite a confirmação do haplótipo em várias etapas, o que dar mais segurança na produção do haplótipo final. O fluxo de trabalho automatizado utilizando o Ion Chef™/Ion S5™, pode contribuir para diminuir a carga de trabalho da equipe do laboratório, o risco de erros de pipetagem e simplificar o fluxo de trabalho diário nos laboratórios de genética forense, gerando dados confiáveis de maneira rápida e segura.

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 1134670 - ANA MARIA BENKO ISEPPON
Presidente - 1262835 - CRISTIANE MOUTINHO LAGOS DE MELO
Externo à Instituição - RONALDO CARNEIRO DA SILVA JÚNIOR