A resistência antimicrobiana (RAM) continua sendo um grande problema para a saúde pública mundial. Dentre as bactérias críticas, estão as do grupo ESKAPE, que incluem as Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter cloacae Além da resistência, essas bactérias podem formar biofilme, o que dificulta o tratamento dos pacientes com os antibióticos. Dentre as alternativas terapêuticas destaca-se o estudo com Óleos Essenciais (OEs). O objetivo desse trabalho foi analisar a composição dos OEs de E. pohliana DC. de dois locais do Vale do Catimbau e avaliar suas atividades de Concentração Mínima Inibitória e Bactericida (CMI e CMB), antibiofilme e sinérgica contra isolados ESKAPEs Multidroga e Extensivamente Droga Resistentes (MDRs e XDRs). A análise da composição dos OEs foi feita por GC-MS. Os OEs apresentaram compostos majoritários diferentes: OE II - δ-cadineno (18,82%), Globulol (15,54%), Viridiflorol (11,29%); OE IV - Limoneno (10,79%), γ-cadineno (9,87%) e epi-α-muurolol (9,28%). Em ambos os OEs também foram encontrados (E)-cariofileno (OE II – 9,95% e OE IV – 9,21%) e o Biociclogermacreno (OE II – 9,47% e OE IV – 9,76%). Os OEs apresentaram ação antimicrobiana semelhante, mas com atuações diferentes. Na curva de crescimento, o destaque foi o OE IV. O OE II apresentou melhor ação inibitória para as bactérias MDRs E. faecium (512 µg/mL), S. aureus (2048 µg/mL), e P. aeruginosa (2048 µg/mL) no teste de CMI. O CMB foi de 4096 µg/mL para a maioria dos isolados; no entanto, não houve CMB para K. pneumoniae e E. claoacae. com ambos OEs. Por outro lado, o OE IV apresentou melhor atividade antibiofilme para as Gram-negativas, principalmente E. cloacae com 87,39% de inibição. Em geral, os OEs E. pohliana apresentaram melhor ação antimicrobiana para as bactérias MDRs, com destaque para P. aeruginosa, apresentando ação antimicrobiana em todos os testes realizados. Dessa forma, a E. pohliana poderia ser considera uma planta promissora para futuras aplicações medicinais. Demonstrando também, o potencial biotecnológico de plantas do vale do Catimbau e da Caatinga.

Os pontos quânticos (PQs) podem ser utilizados como nanossondas fluorescentes com especificidade bioquímica, devido a possibilidade de conjugação com diversos tipos de biomoléculas. Dentre estas, a conjugação com o ácido 3-mercaptofenilborônico (AMFB), um organoborano que se liga à dióis, pode resultar em uma nanoferramenta capaz de reconhecer e identificar carboidratos de relevância biológica e industrial. Em razão disso, este trabalho teve como objetivo avaliar a interação de PQs@AMFB com diferentes carboidratos, bem como explorar o potencial de sensoriamento desse nanossistema. Para isto, PQs de CdTe funcionalizados com ácido mercaptosuccínico (AMS) foram sintetizados e conjugados de forma simples e direta com o AMFB. O êxito da conjugação foi avaliado por citometria de fluxo através da capacidade de ligação do PQs@AMFB ao ácido siálico (AS), presentes na superfície de eritrócitos com 0, 7, 15 e 21 dias, após coleta em EDTA e armazenados à 4 ºC. Após confirmar a conjugação, o nanosistema foi incubado com 200 mM de diferentes carboidratos (glicose, galactose, xilose e sacarose) por 30 min em pH 7.4. Em seguida, a nanoplataforma foi incubada com diferentes concentrações de galactose (100 - 600 mM). As flutuações na intensidade de fluorescência foram avaliadas por espectroscopia de emissão e por leitura da emissão em microplaca. Os eritrócitos recém coletados apresentaram marcação de 99,8 ± 0,17%, indicando que o conjugado era capaz de reconhecer o AS. Por outro lado, as células armazenadas por mais de 15 dias apresentaram uma porcentagem inferior, sugerindo que a nanoplataforma PQs@AMFB foi capaz de reconhecer e quantificar o AS. Na presença dos diferentes carboidratos, a galactose promoveu uma supressão da fluorescência maior (~25%) em relação aos outros carboidratos, indicando uma maior afinidade/especificidade da nanossonda por esse monossacarídeo. O LOD e LOQ estimado foram de 51 e 170 mM, respectivamente. Além disso, através do modelo proposto por Stern-Volmer foi possível inferir que a supressão ocorreu linearmente com o aumento da concentração de galactose, sendo considerada dinâmica e resultante das colisões entre a nanossonda fluorescente e o supressor (galactose). Portanto, o PQs@AMFB apresentam um grande potencial biotecnológico, como sondas analítica para detecção rápida e simples de galactose, bem como para outros estudos glicobiológicos.

A utilização intensiva de pesticidas vem gerando impactos ambientais e toxicidade em organismo não alvos. O tiofanato-metílico é um fungicida sistêmico de amplo espectro, cujos resíduos podem ser encontrados no solo, na água e em produtos agrícolas, representando ameaças aos ecossistemas e à saúde humana. Portanto, a contaminação por tiofanato-metílico requer o desenvolvimento de alternativas para reduzir/remover contaminantes ambientais. O presente estudo visou avaliar a eficiência da microalga Tetrademus obliquus na biorremoção do fungicida tiofanato-metílico e na redução da toxicidade mediante o sistema-teste Allium cepa L. O experimento de biorremediação consistiu em cinco tratamentos acompanhados por 12 dias, visando investigar as possíveis vias de remoção do tiofanato-metílico: (1) meio de cultura + T. obliquus; (2) meio + T. obliquus + tiofanato-metílico; (3) meio + T. obliquus inativada + tiofanato-metílico; (4) meio + tiofanato-metílico (claro); (5) meio + tiofanato-metílico (escuro). O tiofanato-metílico foi utilizado na concentração inicial de 240 µg/L e T. obliquus na concentração inicial de 100 mg/L. A microalga conseguiu se adaptar e crescer mesmo na presença do tiofanato-metílico, com valores de 629,02 mg/L, na ausência do fungicida, e de 566,85 mg/L na sua presença. Em relação ao processo de remoção do tiofanato-metílico, após um dia de experimento, constatou-se uma remoção de 85,41% no tratamento com a microalga ativa; 50,41% com microalga inativa e 17,08% e 20,00%, nos tratamentos sem a presença da microalga, em condições de claro e escuro respectivamente. Após 12 dias, o tiofanato-metílico foi removido de todos os tratamentos analisados. Contudo, ao final do experimento foi observada a presença do subproduto carbendazim variando de 55 µg/L, no tratamento com a microalga ativa, a 120 e 125 µg/L, na ausência da microalga no escuro e no claro, respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que a biodegradação parece ter sido um dos mecanismos usados por T. obliquus na remoção do tiofanato-metílico. Adicionalmente, a biossorção parece ter contribuído, considerando que o tratamento com biomassa inativa foi segundo maior na remoção do carbendazim (78 µg/L). Por outro lado, a fotodegradação parece não ter influenciado na remoção do fungicida em questão, ao comparar os valores do carbendazim na ausência de microalgas no claro e no escuro (120 e 125 µg/L, respectivamente). Em seguida, o sistema-teste Allium cepa foi utilizado para avaliar a toxicidade, a citotoxicidade e a genotoxicidade do subproduto carbendazim nas concentrações 55 e 125 µg/L. As referidas concentrações foram encontradas ao final do experimento nos tratamentos com a microalga ativa e na ausência da microalga no claro, respectivamente. Ambas as concentrações apresentaram ausência de toxicidade e citotoxicidade. Por outro lado, a concentração 125 µg/L resultante do tratamento sem a presença da microalga, mostrou efeito genotóxico apenas para as células meristemáticas de A. cepa. Os dados obtidos demonstram que a microalga T. obliquus foi eficiente para remoção do fungicida tiofanato-metílico e para eliminação da genotoxicidade do subproduto carbendazim, apresentando potencial biorremediador promissor para tratamentos de locais contaminados com o referido fungicida.

O uso excessivo de fertilizantes na agricultura pode resultar em diversos impactos ambientais, incluindo eutrofização do solo, compactação e emissão de gases de efeito estufa. Uma estratégia bastante promissora é o desenvolvimento de nanofertilizantes (NFs) biodegradáveis na otimização da entrega de nutrientes às plantas e, portanto, minimizar os riscos ambientais. Este estudo teve como objetivo sintetizar e caracterizar nanofertilizantes à base de quitosana para entrega de macronutrientes NPK (nitrogênio, fósforo e potássio) às plantas, utilizando como modelo a rúcula (Eruca sativa L.). Nanopartículas de quitosana foram sintetizadas usando o método de gelificação ionotrópica, e sua caracterização foi realizada utilizando várias técnicas analíticas. Para determinar a formulação mais eficaz, foram examinadas várias concentrações de nutrientes nos nanofertilizantes (NF1, NF2, NF3 e NF4), sendo NF1 a formulação com maior teor de NPK e NF4, a menor. Análises de Espalhamento Dinâmico de Luz revelaram diâmetros hidrodinâmicos adequados de nanopartículas de quitosana, enquanto o Potencial Zeta mostrou variações nas cargas dos diferentes tratamentos. A Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) e a Análise Termogravimétrica (TGA) forneceram informações sobre grupos funcionais e estabilidade térmica dos nanofertilizantes, respectivamente. Os resultados do FTIR elucidaram os grupos funcionais da quitosana e indicaram a ligação entre quitosana e o tripolifosfato de sódio (TPP). Os termogramas indicaram que os nanofertilizantes apresentaram maior estabilidade térmica em comparação com a quitosana pura e nanopartículas de quitosana. A estrutura das nanopartículas foi investigada por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), revelando tamanhos distintos, variando de 6 nm a 1,2 µm. Essas variações foram atribuídas ao processo de síntese e concentração de quitosana/TPP. Mapas espectrais de Espectroscopia de Raios-X por Dispersão de Energia (EDS) revelaram distinções entre os tratamentos de nanofertilizantes e nanopartículas de quitosana não carregadas. Para avaliar o impacto dos nanofertilizantes no crescimento das plantas, foram analisados parâmetros fisiológicos como altura, número de folhas e teor de clorofila ao longo dos tratamentos. O conteúdo de NPK foi quantificado pelo método Kjeldahl e ICP-OES. Além disso, amostras das folhas foram examinadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para investigar possíveis diferenças na estrutura da superfície. Os nanofertilizantes demonstraram desempenho satisfatório em comparação com fertilizante químico (CF). A taxa de crescimento das plantas tratadas com fertilizante químico foi notavelmente menor em comparação com as tratadas com nanofertilizantes, diferença que foi particularmente evidente no tratamento NF1, o qual foi 92% superior ao CF. O número médio de folhas (fase final do tratamento) desenvolvidas em plantas tratadas com NFs foi de 8 folhas/ planta, sendo que as plantas tratadas com CF apresentaram cerca de 6 folhas. Todos os níveis de NFs promoveram aumentos significativos no conteúdo de clorofila, com uma faixa de 8 a 29% superior ao CF.  Em relação à absorção de NPK, plantas tratadas com NFs mostraram resultados muito semelhantes às tratadas com CF. No entanto, CF apresentou conteúdo superior de N e K. A análise de fósforo revelou que tanto NF1 quanto CF apresentaram resultados inferiores em comparação com os tratamentos de NF2, NF3 e NF4. As nanopartículas de quitosana se destacaram como o tratamento mais eficaz em relação ao teor de fósforo nas plantas, registrando aproximadamente 30 mg/L de P. O estudo destaca a importância da aplicação equilibrada de NPK e sugere que as plantas não necessitam de quantidades excessivas de nutrientes para o seu desenvolvimento.

A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, ocorre principalmente na América Latina e é potencialmente letal. Estima-se que 6 a 7 milhões de indivíduos estejam infectados por T. cruzi em todo o mundo. Por sua vez, a leishmaniose é uma doença infecciosa causada por mais de 20 espécies de protozoários do gênero Leishmania. Cerca de 1 milhão de novos casos ocorrem anualmente, com 26.000 a 65.000 mortes. A busca por novos antiparasitários mais seletivos e que causem menos efeitos adversos é urgente. Este trabalho avaliou o inibidor de tripsina (MoFTI) e frações ricas em metabólitos secundários obtidas de flores de Moringa oleifera quanto ao potencial antiparasitário contra T. cruzi, Leishmaniabraziliensis e Leishmaniainfantum, bem como quanto ao efeito imunomodulador sobre células mononucleares de sangue periférico humanas (PBMCs) infectadas pelos parasitas. Flores frescas foram homogeneizadas com água destilada para obtenção do extrato aquoso (EA), a partir do qual MoFTI foi isolado por cromatografia de afinidade em coluna Tripsina-Agarose. Já as frações ricas em metabólitos (F1 a F4) foram obtidas a partir de EA por extração em fase sólida SPE-C18, utilizando soluções com diferentes polaridades. Análise por HPLC revelou a presença de flavonoides apenas em F3 e F4. Dessa forma, MoFTI, F3 e F4 foram avaliados quanto ao efeito na sobrevivência de tripomastigotas de T. cruzi, acarretando lise com CL50 (concentração letal para 50% dos parasitas) de 43,5, 358,38 e 248,73 µg/mL, respectivamente.  Não foi detectada citotoxicidade para PBMCs de MoFTI (CC50 >500 µg/mL), F3 e F4 (CC50 > 2000 µg/mL), sendo obtidos, respectivamente, índices de seletividade (IS) de >11,48, >5,58 e >8,04 para tripomastigotas de T. cruzi. PBMCs infectadas por T. cruzi tratadas com MoFTI (43,5 ou 87,0 µg/mL), F3 (358 ou 716 µg/mL) e F4 (248 ou 497 µg/mL) mostraram secreção aumentada das citocinas pró-inflamatórias TNF-α e IFN-γ. Adicionalmente, houve estímulo da liberação de IL-10 por células tratadas com MoFTI, de IL-17 por células tratadas com F3 ou F4, e de IL-2 por células tratadas com F4. Ação leishmanicida foi detectada para promastigotas de L. braziliensis com CL50 de 138,82 (IS= >3,60), 177,77 (IS= > 11,25) e 175,75 µg/mL (IS= >11,37) para MoFTI, F3 e F4, respectivamente. Para promastigotas de L. infantum, MoFTI e F3 apresentaram ação leishmanicida com CL50 de 268,6 µg/mL (IS>1,86) e 1347,61 µg/mL (>1,48), respectivamente, enquanto F4 (2000 µg/mL) não afetou a sobrevivência dos parasitas. PBMCs infectadas por L. brasiliensis tratadas com MoFTI (138,82 µg/mL) apresentaram aumento na liberação de IFN-γ, enquanto F3 (177,77 µg/mL) e F4 (175,75 µg/mL) não alteraram os níveis de liberação das citocinas. Os dados revelados neste trabalho apontam MoFTI, F3 e F4 como agentes antiparasitários contra T. cruzi, L. braziliensis e L. infantum com baixa toxicidade para células humanas, bem como potencial imunomodulador sobre a infecção de PBMCs por T. cruzi e por L. braziliensis.

A oncocalixona (oncoA) é uma quinona isolada principalmente do cerne do caule da Cordia oncocalyx que apresenta propriedades terapêuticas, como atividades citotóxicas, antioxidantes, antiplaquetária, analgésica e anti-inflamatória, porém apresenta efeitos toxicológicos a nível renal, pulmonar e cardíaco. Buscando aprimorar a estabilidade de moléculas em meio biológico e reduzir sua toxicidade, a encapsulação de fármacos em nanocarreadores tem sido cada vez mais frequente, possibilitando a liberação controlada do fármaco, com seu direcionamento a sítios-alvo, aumentando a sua atividade terapêutico e consequentemente reduzindo a sua toxicidade. Apesar dos benefícios, entender o comportamento dos nanossistema no organismo permite assegurar que o nanocarreador irá permanecer por tempo apropriado para liberação controlada do fármaco, melhorando seu perfil farmacocinético, sem ativar o sistema complemento. Com isso, este estudo teve como objetivo avaliar o comportamento biológico das nanopartículas de PIBCA revestidas com fucana contendo oncoA (oncoA-NP-Fuc) encapsulada. Para isso, avaliamos a atividade citotóxica, inibição da migração celular e captura celular das nanopartículas frente a células MDA-MB-231, como também foi avaliado a toxicidade in vitro frente a macrófagos J774A.1. Avaliamos também o perfil de interação das nanopartículas de fucana (NP-Fuc) com a albumina, assim como investigamos a autofluorescência da oncoA. Além disso, avaliamos a ativação do sistema complemento de nanopartículas de PIBCA obtidas por técnica de polimerização por emulsão aniônica (AEP) e polimerização por emulsão em radicais redox (RREP) revestidas com diferentes polissacarídeos (fucana, quitosana e levana). Como resultados, observamos que as NP-fuc e oncoA-NP-Fuc apresentaram tamanhos de 316 ± 1.33 nm e 305 ± 6.49 nm respectivamente, com ambas as nanoparticulas com carga negativa (-38.50 ± 1.95 mV e -38.90 ± 2.00 mV respectivamente). As nanopartículas apresentaram atividade antiproliferativa contra células MDA-MB-231, sendo capturas pelas células cancerígenas nos primeiros 15 minutos após exposição, e inibindo a migração celular, destacando a atividade da oncoA, assim como também de uma possível atuação sinérgica com a fucana. A oncoA também demonstrou ser uma molécula que apresenta autofluorescência, podendo ser utilizada como um marcador fluorescente em estudos de captura celular. Quanto a interação com a albumina, as NP-Fuc interagem com a albumina através dos grupos sulfatos presentes na fucana com a porção amina e amida da albumina, mostrando que a interação ocorre de forma imediata. Com relação a ativação do sistema complemento, as nanoparticulas contendo fucana e levana na superfície ativam o sistema complemento, enquanto as nanopartículas de quitosana não são fortes ativadoras do sistema complemento. Em que a adsorção da albumina na superfície das nanopartículas reduz a ativação do sistema complemento, provavelmente por inibir a presença de grupos químicos que tem afinidade com as proteínas opsoninas C3 e C3b. Esses dados são importantes, pois podem servir como base para uma futura aplicação clínica dessas nanopartículas.

As queratinases são um grupo de proteases capazes de reduzir a queratina em oligopeptídeos assimiláveis. Streptomyces sp. 8F um endófito das folhas de Bauhinia monandra produziu proteases com capacidade queratinolítica. Os ensaios de otimização mostraram 48 horas como melhor tempo de incubação e 7,5% como o mais adequado volume de inóculo para a produção de queratinases. Vários fatores como: temperatura, concentração de penas de frango e aeração por agitação orbital foram investigados por planejamento fatorial 23. A temperatura demonstrou ser o fator dentre as variáveis com efeitos significativos na produção de queratinases. Além disso, os ensaios de caracterização apresentaram o pH 7,0 como pH ótimo e temperatura ótima em 70ºC, para a queratinase. A atividade enzimática foi fortemente inibida na presença de EDTA e íons metálicos Cu2+, Hg2+, Fe3+, Cob2+ e Zn2+, sugerindo a classificação da queratinase como uma metaloprotease. Comparativamente, a atividade enzimática não foi afetada pelos tensoativos Tween-80 e Triton X-100, além do aumento da atividade na presença dos solventes orgânicos H2O2, metanol, propanol e etanol. A compatibilidade das queratinases com detergentes para roupas foi avaliada e retornou atividade residual de 96,48% para o detergente Ariel e 74,62% para o Guarani. A queratinase foi purificada por coluna cromatográfica Sephadex A-50 sendo o peso molecular estimado entre 50 e 55 KDa por SDS-PAGE e Zimograma de Azocaseína. A aplicação da enzima purificada revelou potencial de degradação de biofilmes e penas de galinha. Em relação a degradação das penas, os hidrolisados apresentaram atividade antioxidante revelando uma possível atratividade para aplicação industrial. 

As microalgas são microrganismos foto autotróficos, e destacam-se devido a biomassa rica em proteínas e peptídeos bioativos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi analisar peptídeos obtidos de microalgas após extração e avaliar seu potencial anti-hipertensivo, antioxidante e antimicrobiano. Foi realizado o cultivo autotrófico das microalgas Chlorella vulgaris, Tetradesmus obliquus e Dunaliella tertiolecta que ao atingir a fase estacionária de crescimento, tiveram as biomassas liofilizadas e submetidas à hidrolise enzimática, física e química. O extrato resultante foi ultrafiltrado em membranas de 3 kDa e os peptídeos permeados foram analisados frente a inibição da enzima conversora de angiotensina (iECA). Adicionalmente foram realizadas o ensaio antioxidante, determinada pelos métodos ABTS, DPPH, O2 e OH e o ensaio antimicrobiana por meio do método CIM (concentração inibitória mínima) frente às bactérias patogênicas Gram positivas e negativas. Os peptídeos com melhor bioatividade foram analisados por LC-MS/MS. Dentre os métodos utilizados a os peptídeos obtidos através do método enzimático apresentou melhores resultados. Os peptídeos da C. vulgaris demonstraram melhor atividade de inibição da ECA com 88,18±0,16% com 1 mg/mL. Comprovado pela IC50 da Chlorella vulgaris 0.563± 0,29. Para atividade antioxidante, pelo método ABTS, a C. vulgaris apresentou atividade antioxidante com menores concentrações peptídicas IC50 0.477 ± 0,07, enquanto o T. obliquus registra IC50 0.618 ± 0,11, seguido da D. tertiolecta com necessidade de maior quantidade de peptídeos.  O DPPH, peptídeos obtidos da T. obliquus apresenta a menor IC50 0.511 ± 0,09, seguido da C. vulgaris 0.783 ± 0,23, e D. tertiolecta IC50 1.551 ± 0,05. Em relação aos radicais OH e O2-, a C. vulgaris mostrou uma menor IC50 para o radical OH IC501.092 ± 0,02, enquanto o radical O2-, tanto C. vulgaris quanto T. obliquus apresentaram valores próximos, e para a D. tertiolecta sendo necessário concentrações mais elevada de peptídeos. A microalga C. vulgaris destacou-se, mediante sua estabilidade e baixa redução na atividade mediante sua concentração. No contexto da atividade antimicrobiana, as microalgas inibiram cepas patogênicas, com destaque para T. obliquus, que apresentou consistentemente resultados elevados em diferentes concentrações e frente a diferentes bactérias gram-positivas. A C. vulgaris mostrou eficácia, principalmente em concentrações contendo 2mg/mL. Em contrapartida, D. tertiolecta exibiu atividade antimicrobiana moderada, com melhor inibição para L. monocitogenes.Para o perfil químico, utilizou-se as amostras com melhor bioatividade, referentes a C. vulgaris. De acordo com a análise via LC-MS/MS, tanto no modo positivo quanto negativo, pode-se inferir em 2 picos principais referentes à peptídeos nas amostras menor que 3 kDa. Os resultados demonstram que as os peptídeos < 3 kDa obtidos das microalgas após a hidrólise enzimática, podem ser consideradas uma fonte em potencial de peptídeos bioativos com propriedades antimicrobiana, antioxidante e anti-hipertensivo. Tais descobertas permitem agregar valor aos peptídeos de microalgas com perspectivas promissoras referentes ao seu uso na indústria alimentícia e farmacêutica, visando à promoção da saúde.

O óleo extraído da Syagrus coronata, espécie de palmeira popularmente conhecida como licuri, é amplamente empregado na medicina tradicional devido às suas variadas propriedades terapêuticas. Sua composição rica em ácidos graxos de cadeia média tem sido associada a efeitos biológicos benéficos, incluindo o relaxamento vascular. Este estudo teve como objetivo principal investigar os efeitos desse óleo na resposta dos vasos sanguíneos, na pressão arterial e na estrutura das artérias em ratos, além de elucidar os mecanismos subjacentes e eventuais mudanças no perfil bioquímico do sangue. Utilizando a técnica de Docking molecular, analisou-se a interação entre os ácidos graxos do óleo e os canais de cálcio presentes nos vasos sanguíneos. Experimentos com anéis de aorta de ratos Wistar e ratos SHR foram conduzidos para avaliar a resposta dos vasos sanguíneos, enquanto análises morfométricas das camadas das artérias foram realizadas para investigar possíveis alterações estruturais. Além disso, o perfil bioquímico do sangue foi examinado para avaliar os efeitos do óleo sobre os parâmetros metabólicos dos animais. Os resultados indicaram que o óleo de S. coronata tem a capacidade de dilatar os vasos sanguíneos de forma independente do endotélio, influenciando nos canais de potássio e cálcio das células vasculares, sendo sua participação nesses processos possivelmente mediada pelos receptores IP3. Embora não tenham sido observadas mudanças significativas na pressão arterial, o óleo demonstrou reduzir os níveis de glicose no sangue e aumentar a espessura da túnica média das artérias, sugerindo efeitos metabólicos e estruturais. Portanto, o óleo de licuri exibe propriedades vasorrelaxantes que podem ser mediadas por canais de potássio e cálcio, mostrando potencial terapêutico em condições cardiovasculares. Contudo, a ausência de efeito na pressão arterial pode ser atribuída à dosagem utilizada nos animais a qual novos estudos são encorajados. Esses achados contribuem significativamente para a compreensão dos benefícios e dos mecanismos de ação do óleo de licuri, destacando sua importância na medicina alternativa e justificando pesquisas futuras para aprimorar sua aplicação clínica e farmacológica.

O câncer cervical é classificado como a quarta principal causa de morte relacionada ao câncer na população feminina global e o segundo tumor maligno mais comum em mulheres em idade reprodutiva. Apesar de prevenível e passível à erradicação, as limitações nos métodos de diagnóstico atuais, consistem em importante barreira para redução de casos da doença. Onde as dificuldade no acesso aos serviços de saúde de alta complexidade impulsiona o diagnóstico tardio e complicações associadas. Desta forma, o conceito de diagnóstico tardio se tornou um tema central na prevenção e tratamento do CC onde a elaboração de estratégias de diagnóstico rápido pode promover uma abordagem satisfatória de enfrentamento ao CC, colaborando para redução de 30% do número de casos da doença, como estabelecido pela OMS na agenda 2030. Os biossensores surgem como uma alternativa viável para cumprir com as exigências de demanda elevada de testes de diagnóstico rápidos, simples e com custos compatíveis a ampla disseminação, com redução da necessidade do prazo para liberação dos resultados, assim como dispensando equipamentos, infraestrutura sofisticada e equipe técnica especializada; compatível com as necessidades para detecção do CC. Desta forma, é apresentado aqui um novo sensor eletroquímico exibindo atividade eletrocatalítica para a detecção do peptídeo p16INK4A, um biomarcador precoce do câncer cervical. Neste estudo, um novo imunossensor eletroquímico empregando fulereno de Buckminster (C60) foi desenvolvido para a detecção do peptídeo p16INK4A em células cervicovaginais. A montagem do imunossensor foi meticulosamente caracterizada através de técnicas de voltametria cíclica, FTIR-ATR e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Curvas analíticas foram construídas via voltametria de onda quadrada (SWV) na presença de sonda redox de ferri/ferrocianeto. Este imunossensor exibiu a capacidade de discernir amostras de células de câncer cervical com lesões cervicais distintas, afirmando assim sua confiabilidade e especificidade na detecção de p16 em amostras do mundo real. Esta inovação é promissora para facilitar avaliações diagnósticas in situ do câncer cervical. A mudança na corrente foi facilitada por espécies eletroativas confinadas à superfície de uma plataforma composta por um nanofilme de PEI@TCNQ modificado com fulereno C60, juntamente com anticorpos monoclonais anti-p16 servindo como biorreceptor. A imobilização dos anticorpos anti-p16 ocorreu através da porção Fc, formando uma ligação covalente com o grupo amino do PEI e C60, garantindo parâmetros aceitáveis de sensibilidade e reprodutibilidade. Todas as etapas de modificação do sensor foram caracterizadas utilizando técnicas eletroquímicas. A Microscopia Eletrônica de Varredura confirmou a adesão PEI@TCNQ e adição de C60 na superfície do eletrodo. A plataforma C60/PEI@TCNQ apresentou faixa linear de 10 e 100 ng·mL−1. Esta plataforma apresenta-se como uma testagem rápida, de passos mínimos e de utilização simples, características compatíveis com as necessidades de diagnóstico no local de atendimento. Desta forma, o imunossensor PEI/TCNQ@C60 pode contribuir para a detecção precoce do cancro do colo do útero, um problema de saúde pública global com elevada incidência na população feminina e que acarreta custos económicos e custos humanos.

Hidromel é uma bebida alcoólica milenar, obtida através da fermentação de uma solução de mel de abelha. O ressurgimento da procura pela bebida impulsionado principalmente devido as recentes aparições na indústria cinematográfica, tem se mostrado cada mais crescente. No Brasil, a bebida apresenta um grande potencial de produção por apresentar uma produção de mel, principal matéria-prima, expressa e um consumo per capita desse mel relativamente baixo, fazendo com que o escoamento desse mel seja principalmente realizado através da exportação. Portanto, a necessidade de fontes alternativa vem se tornando cada vez mais necessária. Nesse contexto, a produção de hidromel tem se mostrado cada vez mais atraente, não apenas para dar destino a produção de mel, mas também como forma de agregar valor a matéria-prima. Porém apesar de simples, a produção de hidromel enfrenta alguns gargalos que vão desde as características intrínsecas do mel, quem podem variar drasticamente de acordo com a região, espécie de abelha e origem botânica, como também a ausência de um protocolo adequado de produção, a inexistência de uma linhagem de levedura adequada, entre outros fatores. O que ocasiona fermentações muito longas e muitas vezes incompletas. Portanto, o presente trabalho teve como principal objetivo desenvolver um protocolo de produção adequado de hidromel, avaliando as necessidades inerentes ao processo e também avaliando as diferentes linhagens comerciais vendidas como produtoras de hidromel para pôr fim otimizar o processo.

Desde os primórdios a humanidade faz o uso de plantas com fins alucinógenos, ritualísticos e terapêuticos, sempre atravessando a linha tênue entre os benefícios e os riscos tóxicologicos que os vegetais podem oferecer. Com o intuito de abranger mais espécies de um gênero promissor ao desenvolvimento de fármacos, esse trabalho propôs elucidar o perfil toxicológico do óleo fixo das amêndoas de Syagrus werdermannii Burret por meio de testes in vitro e in vivo. Foi realizada uma análise cromatográfica dos ésteres metílicos de ácidos graxos. A citotoxicidade de diferentes concentrações do óleo (12,5, 25, 50, 100 e 200 μg/mL) foi avaliada usando o ensaio de redução MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina] em duas linhagens celulares: Macrófagos J774.A1 e Adenocarcinoma Humano da Glândula Mamária (MDA-MB-231). Foram realizados testes de toxicidade oral aguda, genotoxicidade e mutagenicidade em camundongos, aos quais foi administrada uma dose única de 2.000 mg/kg de óleo via gavagem. Para a toxicidade aguda, foram analisadas alterações nos parâmetros bioquímicos do sangue, comportamento, peso e consumo de ração, assim como também foram realizadas análises histomorfométricas do fígado, rim e baço. O ensaio cometa e o teste do micronúcleo (MN) foram executados para analisar o perfil genotóxico e mutagênico desse produto. Os resultados apontam para um produto com baixa toxicidade para os modelos testados. O óleo de S. werdermannii é composto predominantemente por ácidos graxos saturados, sendo o ácido láurico o composto em maior proporção. Em relação aos níveis de viabilidade celular houve uma redução significativa apenas para a maior concentração do óleo 200 µg/mL na linhagem de macrófagos J774.A1. O estudo de toxicidade aguda não revelou nenhuma evidência de efeitos comportamentais adversos, além de demonstrar que a DL50 é superior à dosagem que foi utilizada. A análise bioquímica do sangue mostrou um aumento nas concentrações de alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), gamma-glutamil transferase (GGT) e bilirubina quando comparado ao grupo controle. Dos parâmetros histológicos avaliados houve alteração apenas na redução da área nuclear dos hepatócitos, enquanto que o rim e o baço não apresentaram indicações morfológicas de processo patológico. Não foi detectada atividade mutagênica ou genotóxica tanto pelo ensaio cometa quanto pelo teste de micronucleo. O óleo de S. werdermannii mostrou-se viável ao uso e promissor ao desenvolvimento de novos fármacos devido à sua rica composição lipídica e seus baixos índices de toxicidade. Não obstante, faz-se necessário a realização de novos estudos que ampliem a investigação acerca dos potenciais envolvendo esse produto.

A esquistossomose é uma enfermidade causada pelo helminto Schistosoma mansoni, sendo de grande importância no contexto da saúde pública. Esta infecção pode causar importantes alterações vasculares no sistema porta do aparelho digestivo gastrointestinal ou apresentar formas ectópicas que ocorrem quando os ovos do parasita ou formas adultas estão localizados longe do seu local normal, como o sistema urogenital e sistema nervoso central. Para o diagnóstico da esquistossomose em geral, o método utilizado é o exame parasitológico de fezes pela técnica de Kato-Katz. Outros exames subsidiários podem auxiliar na investigação diagnóstica. Sendo assim, o emprego de novas metodologias diagnósticas poderá contribuir para o controle desta doença. A determinação eletroquímica tem atraído bastante atenção, pois os métodos eletroquímicos têm as vantagens de baixo custo, alta sensibilidade e ser de fácil manuseio. Diante disto, o trabalho possui como objetivo a avaliação do processo de interação do filme de poli (ácido-3-tiofeno acético) (PTAA) na superfície do eletrodo de ouro com a sonda de S. mansoni no desenvolvimento de um genossensor para o uso na detecção de diferentes concentrações do genoma do S. mansoni e de amostras de pacientes infectados. Técnicas eletroquímicas como a espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) e voltametria cíclica (VC) são ferramentas úteis para o desenvolvimento destes dispositivos. Foram avaliadas as perturbações amperométricas e impedimétricas do dispositivo desenvolvido através de VC e EIE, respectivamente. O filme de PTAA foi obtido após eletrodeposição, em seguida os grupos funcionais foram ativados após a formação do filme de PTAA, foi ativado por ação de EDC (1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida) e NHS (N-hidroxissuccinimida) (EDC/NHS) para promover a imobilização covalente da sonda de DNA. Após ativação a sonda foi imobilizada e o sistema sensor PTAA-ssonda_S.mansoni foi obtido. A bioatividade e a sensibilidade do sistema sensor PTAA-sonda_S.mansoni foram testados através da exposição inicial ao DNA genômico do Schistosoma nas concentrações de 0.65pg.μL^-1, 2.6pg.μL^-1, 5.2pg.μL^-1, 10.4pg.μL^-1, 20.9pg.μL^-1, 41pg.μL^-1 e 83,95pg.μL^-1. Posteriormente, foram realizados testes frente a diferentes diluições de 1:10, 1:20, 1:30, 1:40 e 1:50 para detecção de Schistosoma em amostras de plasma, urina e líquido cefalorraquidiano (LCR) que foram previamente aquecidas em uma temperatura de 90°C. O sistema sensor foi capaz de detectar o genoma de S. mansoni em diferentes concentrações, processo este identificado pela diminuição gradativa das correntes de pico anódicas e catódicas, assim como pelo aumento na resistência à transferência de carga (R_CT).  Em adição, o sistema mostrou-se ser útil na identificação genômica do verme seja em plasma, urina ou LCR. O processo de hibridização foi mais proemimente na avaliação da amostra de plasma, refletindo um elevado RCT para a diluição de 1:10. O genossensor aqui exposto apresenta-se como uma ferramenta promissora para o diagnostico clínico eficiente da esquistossomose.

Nativa da América tropical, Psidium guineense Sw. (Myrtaceae) é um arbusto ou pequena árvore com propriedades medicinais, incluindo tratamento de infecções, feridas, diarreia e ação diurética. Devido a ausência de estudos de toxicidade de extrato aquoso de folhas de P. guineense, o presente estudo teve como objetivo avaliar a segurança de uso em camundongos. Folhas de P. guineense foram pulverizadas e homogeneizada com água destilada (1:10 p/v) e obtendo um extrato aquoso a 10% por turbólise (EAPg). O extrato foi caracterizado por cromatografia em camada delgada e por cromatografia líquida de alta eficiência. Eritrócitos murinos foram usados para avaliar a citotoxicidade, enquanto camundongos Swiss albinos foram utilizados para avaliar a toxicidade aguda, genotoxicidade (ensaio do cometa) e mutagenicidade (teste do micronúcleo). Os resultados do ensaio de citotoxicidade revelaram a baixa capacidade do EAPg em causar lise celular com uma taxa de hemólise variando de 0,35% a 13%. No estudo de toxicidade oral aguda em camundongos, nenhum camundongo apresentou qualquer alteração comportamental ou mortalidade após a administração de 2.000 mg/kg de EAPg por 14 dias. Os parâmetros hematológicos não apresentaram diferença significativa em relação aos animais do grupo controle. Já na avaliação dos parâmetros bioquímicos o tratamento com EAPg promoveu uma redução dos parâmetros lipídicos (p<0.05). O teste do micronúcleo e o índice de danos (DI) da avaliação genotóxica não indicou diferença significativa quando comparado ao controle.  Porém, foi observada um aumento na frequência de dano (DF) dos animais tratados com 2000 mg/k de EAPg. Com isso, foi evidenciado que o extrato apresenta flavonoides, taninos hidrolisáveis, terpenos, esteroides e açúcares redutores. Na avaliação de toxicidade, o tratamento com 2000 mg/kg de EAPg reduziu parâmetros lipídicos e mostrou-se ser bem tolerado sem apresentar alterações comportamentais, bem como não promoveu dano ao DNA.

As tartarugas marinhas são dependentes de suas rotas migratórias e de ambientes costeiros para alimentação e reprodução, mantendo contato frequente com diversos organismos fúngicos. No entanto, a escassez de estudos micológicos ressalta a necessidade de pesquisas adicionais para a compreensão dessas interações e a conservação das espécies ameaçadas. Este estudo possui duas abordagens: 1. Levantamento bibliográfico sobre a interação de fungos em tartarugas marinhas em escala global e 2. Investigação da diversidade fúngica em ninhos e ovos de tartarugas da espécie Carettacaretta ao longo da costa litorânea do município de Ipojuca-PE, nordeste do Brasil. Para atender a primeira abordagem foram realizadas buscas na literatura por meio de bases de dados como BVS, SciELO, Periódicos CAPES e Google Acadêmico. De acordo com os critérios estabelecidos, foram selecionados 27 artigos, os quais revelaram a ocorrência de 29 gêneros fungicos nas tartarugas marinhas, sendo os gêneros: Fusarium (21%), Aspergillus (11%) e Cladosporium (11%) os mais frequentes presentes em todas as fases de desenvolvimento, desde ovos até animais adultos. Apesar de esclarecedores, esses dados ainda são insuficientes para compreender a interação destas comunidades com estes animais marinhos. Sendo assim, esta dissertação realizou sua segunda abordagem com coletas de ovos e areia em ninhos de tartaruga da espécie C. caretta ocorrente nas praias de Porto de Galinhas, Muro Alto e Maracaípe, localizadas no litoral pernambucano. Os fungos foram isolados por meio de diluição das amostras em meios de cultura específicos e identificados morfologica e molecularmente por meio do sequenciamento do gene β-tubulina. No total foram obtidos 207 isolados, 104 (50,2%) pertencentes aos gêneros Aspergillus, Penicillium e Talaromyces. O mais prevalente foi Penicillium representado por 11 espécies (P. allii-sativi, P. brocae, P. citreosulfuratum, P. citrinum, P. coffae, P. mallochii, P. meliponae, P. oxalicum, P. steckii, P. sp. Nov. 1 e P. sp. Nov. 2.); seguido do Aspergillus  oito espécies (A. flavus, A. hortae, A. insulicola, A. niger, A. sidowii, A. tamarii, A. terreus e A. unguis)e Talaromyces quatro espécies (T. albobiverticillius, T. alveolaris, T. pigmentosus e T. wortmannii).  A. sidowii e P. citrinum foram encontradas em abundância tanto dentro dos ovos quanto na areia, enquanto os isolados de Talaromyces foram identificados exclusivamente no conteúdo interno dos ovos. Esses resultados sugerem a existência de interações ecológicas específicas ainda não completamente compreendidas e contribuem para ampliar nosso conhecimento sobre a ecologia das tartarugas marinhas e o potencial impacto dos fungos em sua reprodução. Dessa forma, são necessários estudos adicionais para aprofundar nosso entendimento em relação ao potencial benéfico, neutro ou maléfico das espécies encontradas.

As resinas de geoprópolis são produzidas por abelhas sem ferrão (Meliponinae), desenvolvidas a partir da coleta de materiais resinosos, ceras e exsudatos, da flora da região onde estas abelhas estão presentes, além da adição de argila ou terra em sua composição. Várias atividades biológicas são atribuídas aos Extratos Etanol de Geoprópolis (EEGP). As propriedades bioativas estão associadas a composição química complexa que estas possuem. Este trabalho apresenta duas abordagens: 1. Revisao bibliográfica sobre as Propriedades Antibacterianas e Antioxidantes de Extratos de Geoprópolis de Abelhas Sem Ferrão (Meliponinae) ocorrentes no território brasileiro e 2. Avaliação das atividades biológicas do EEGP, como uma alternativa terapêutica natural para o enfrentamento de infecções causadas por cepas resistentes de Staphylococcus aures. Em relação a primeira abordagem o estudo revelou que a busca pelos produtos naturais (EEGP), sua composição química e potencial bioativo aumentou substancialmente nos últimos anos e que a geoprópolis produzidas no Brasil possuem uma elevada variabilidade de constituintes químicos em sua composição, em consequência da diversidade vegetal encontrada no território brasileiro.Já em relação a segunda abordagem, os testes demostraram que o EEGP apresenta atividade antibacteriana e bacteriostática nos isolados de S. aureus testados. Adicionalmente, foi observado inibição do biofilme destes patogenos com valor médio superior a 65% na concentração mais alta e potencial antioxidante (CI50) de 11,05 ± 1,55 µg/mL. Os teste de citotoxicidade, revelaram que o EEGP reduziu significativamente a viabilidade celular nas três concentrações testadas (550 µg/mL: 81,68 ± 3,79%; 1100 µg/mL: 67,10 ± 3,76 %; 2200 µg/mL: 67,40 ± 1,86%). Diante do exposto, o uso seguro do EEGP proveniente do Nordeste brasileiro, pôde ser comprovado pelo teste de citotoxicidade, e seu uso como agente antioxidante e antibacteriano mostrou-se eficaz, sendo este uma alternativa viável no combate ao estresse oxidativo e na disseminação e evolução contínua da resistência em S. aureus.

O Arranjo Produtivo Local de Confecções do Agreste Pernambucano (APLCAPE) tem se destacado nacionalmente no setor têxtil. No entanto, o desenvolvimento têxtil na região tem causado impactos ambientais, devido à geração e lançamento de efluentes sem tratamento adequado, afetando a qualidade da água do rio Ipojuca. Dentre os constituintes dos efluentes lançados, destacam-se os corantes tipo azo e seus subprodutos, os quais são considerados tóxicos para o meio ambiente. Visando encontrar tratamentos alternativos para os efluentes têxteis, presente trabalho objetivou avaliar a eficiência da cianobactéria Arthrospira platensis na remoção do corante azo Reactive Black 5 (RB5) e na redução de sua toxicidade. Foram analisados cinco tratamentos durante 15 dias, visando investigar possíveis vias de remoção do corante: (1) A. platensis (300 mg/L) e meio de cultura Schlösser (AM; controle); (2) A. platensis, meio de cultura Schlösser e corante RB5 (32,5 mg/L) (AMR; via de biodegradação); (3) A. platensis inativada, meio de cultura Schlösser e RB5 (AiMR; via de adsorção); (4) meio de cultura Schlösser e RB5, em condições de claro (MRc; via de fotodegradação); (5) meio de cultura Schlösser e RB5, em condições de escuro (MRe; possível adsorção ao frasco e influência do meio de cultura). Em relação ao crescimento de A. platensis, nos tratamentos contendo a cianobactéria, foi notado um crescimento máximo de 509,89 mg/L na presença do corante (AMR), comparado a 1060,14 mg/L na ausência de RB5 (AM), ambos no dia 13. No tratamento AiMR, foi comprovada a eficiência da inativação de A. platensis. O dia 12 foi o último dia de crescimento da fase exponencial. Por esta razão, foi utilizado para as análises de remoção, observando-se valores de remoção de RB5: 33,13% (AMR); 60,7% (AiMR); 35,6% (MRc), e 25,51% (MRe). Os dados do dia 12 indicam que houve uma remoção de 25,51% relacionada à adsorção ao frasco ou devido a constituintes do meio de cultura, considerando MRe; de 10,09% de remoção por fotodegradação, comparando MRc e MRe; e 25,10% por adsorção à cianobactéria, comparando AiMR e MRc. Por outro lado, os valores indicam ausência de biodegradação pela cianobactéria, considerando AMR e MRc, que foi corroborada pela ausência dos subprodutos de biodegradação anilina e catecol nas amostras analisadas. A atenuação da toxicidade de RB5 nos diferentes tratamentos foi investigada usando o sistema teste Allium cepa L., mediante o índice da germinação de sementes e comprimento médio das raízes. Com relação à toxicidade, observou-se que RB5 foi altamente tóxico no tratamento controle (RB5 em água), com apenas 1,5% de germinação. De modo geral, houve uma atenuação da toxicidade em todos os tratamentos analisados no dia 12 do experimento de remoção, porém considerada baixa, com valores de germinação variando de 10,5% a 14,5%. Dessa forma, conclui-se que A. platensis contribui para a remoção de RB5 pelo processo de adsorção e para uma baixa atenuação da toxicidade.  

O desenho de novos derivados da  β-lapachona pode levar ao desenvolvimento de moléculas menos tóxicas, com atividade anticâncer e alta seletividade. Neste sentido, este trabalho objetivou investigar a atividade anticâncer, mecanismo de ação e seguridade toxicogenética dos derivados naftoquinônicos 2-(2,2-dimetill-5oxo-3,4-dihidro-2H-benzo[h]cromo-6(5H)-ilideno)-N-(4ntrofenil)hidrazinacarbotio- amida (BV3) e 2-(2,2-dimetil-5-oxo-3,4-dihidro-2H-benzo[h]cromo-6(5H)-ilideno)-N-(p-toluiu)hidrazinacarbotioamida (BV5). A pesquisa foi aprovada pelo comitê de ética para uso de animais sob o protocolo de nº 004/2023. Para isso, foi verificada a citotoxicidade dos compostos em L-929 (fibroblasto murino), HeLa (adenocarcinoma cervical humano), HCT-116 (carcinoma colorretal humano), HepG2 (carcinoma hepatocelular humano) e MDA (adenocarcinoma de glândula mamária) pelo método do MTT (3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-brometo de difeniltetrazólio). As alterações morfológicas e o mecanismo de morte celular causados pelo tratamento com BV3 e BV5 foram realizadas na linhagem HeLa. Além disso, foi analisada a segurança biológica pelo teste cometa e o ensaio de micronúcleo. Os resultados obtidos apontam que os derivados BV3 e BV5 apresentam atividade anticâncer frente às linhagens HCT-116, HepG2 e MDA, com valores de IC50 menores que 15 μg/mL. A IC50 da BV3 para a linhagem L-929 foi de 19,19 μg/mL com índice de seletividade de 15. Para a linhagem HeLa, os compostos BV3 e BV5 apresentaram IC50 de 1,21 μg/mL e 7,21 μg/mL, respectivamente. A partir da IC50, foi observado através de microscopia óptica que estes derivados causam alterações morfológicas típicas de apoptose. Nas análises por citometria de fluxo, foi confirmada a ação destes derivados sobre as células HeLa na indução de morte por apoptose/necrose. Ademais, o composto BV3 não causou danos mutagênicos e genotóxicos, entretanto, o derivado BV5 na concentração de 2000 mg/kg apresentou um leve aumento no dano indexado em relação ao controle negativo. Em conclusão, o derivado BV3 apresentou atividade antineoplásica para as linhagens testadas, com alta seletividade para linhagem HeLa e foi considerado de uso seguro para a continuidade dos estudos não clínicos direcionados a tumores cervicais.

A germinação é um dos estágios mais críticos para o desenvolvimento inicial de plântulas, uma vez que estas estão sob constante exposição à múltiplos estresses ambientais. Em ambientes semiáridos, como a Caatinga, a escassez hídrica recorrente é prejudicial para algumas espécies, ao passo que para outras, ciclos intermitentes de seca favorecem tanto os parâmetros de germinação, como estabelecem uma “memória hídrica”, resultando em maior tolerância. Tal fenômeno promove modificações fisiológicas, bioquímicos e moleculares na planta. Estas últimas, por sua vez, envolvem respostas transcricionais e/ou epigenéticas associadas ao mecanismo de memória do estresse anterior.O presente estudo avaliou os efeitos de memória hídrica nos ciclos HD e ciclos intermitentes de seca, assim como seus efeitos, sobre aspectos fisiológicos, bioquímicos e moleculares em Cenostigma Pyramidale, umaespécie nativa da Caatinga, com considerável tolerância à seca e salinidade. Sementes de C. pyramidale foram submetidas a diferentes ciclos de HD com germinação subsequente em condições de déficit hídrico simulado (PEG 6000) em 6 potenciais osmóticos (0,0 -0,2; -0,4; -0,6; -0,8 e -1,0 Mpa). Os parâmetros de germinação avaliados foram: porcentagem (%), Sincronia, Tempo Médio de Germinação (TMG) e Velocidade Média de Germinação (VMG). Para a análise de planta jovem, sementes foram divididas em dois grupos, sendo: GI_SCIS (sem HD e sem CIS); GI_CIS (sem HD e com CIS); GII_SCIS (com HD e sem CIS); GII_CIS (com HD e com CIS). Após 6 meses de cultivo, um grupo de plantas foi submetido à 4 ciclos intermitentes de seca, contendo grupo controle (com irrigação). Aos 7 meses, as plantas foram avaliadas quanto ao conteúdo hídrico relativo foliar (CRA) e acúmulo de carboidratos não estruturais (CNEs) na folha, caule e raiz. As sementes não condicionadas de C. Pyramidale mostraram tolerância a seca em potenciais de até -0,6 MPa. Aos serem expostas aos ciclos de HD todos os parâmetros de germinação foram favorecidos, além de aumentar a tolerância ao déficit hídrico. Na fase jovem, em ambos os grupos (GI e GII), as plantas que receberam ciclos intermitentes de seca apresentaram maior acúmulo (29-32 %) de açúcares solúveis na folha. Plantas do grupo GII_CCIS também mostraram aumento na concentração de amido (76 %) nas raízes, quando comparadas ao GI_SCIS. Sob seca contínua, todos os tratamentos apresentaram uma eficiente distribuição dos CNEs, em ambos os tecidos analisados. Esses dados sugerem que as plantas submetidas à ciclos intermitentes de secaapresentam uma adaptação em sua arquitetura fotossintética, provavelmente devido à imposição dos estresses subsequentes (adquirindo memória ao referido estresse). Além disso, a raiz de C. pyramidale mostrou ser o órgão predominante no armazenamento de amido desta espécie, o que corrobora com a eficiência do condicionamento no processo de memória hídrica nos tratamentos GII_CCIS, contribuindo para sua “tolerância” à futuros enfrentamentos à estresses por secas eminentes. Desta forma, os ciclos de HD, além de contribuir na eficiência da germinação de sementes, quando combinados com os CIS parecem potencializar também as respostas bioquímicas da catingueira, a qual adquire certa “plasticidade” para enfrentar períodos de HD. Para uma melhor elucidação das respostas moleculares da memória à seca, faz-se necessária uma análise do perfil de expressão de genes comprovadamente identificados como responsivos à memória a esse tipo de estresse.

As plantas desenvolveram múltiplos e complexos mecanismos de defesa contra patógenos. Dentre esses, a família gênica Pathogenesis-related Protein 1 (PR-1), pertencente a superfamília das PRs, destaca-se pela sua atuação na resposta de defesa vegetal contra fitopatógenos, especialmente organismos fúngicos. Apesar de sua importância, estudos que caracterizem tal família e investiguem sua participação na resposta de defesa do feijão-comum (Phaseolus vulgaris) são inexistentes. Dessa forma, o presente estudo visou realizar a mineração e caracterização genômica estrutural da família gênica PR-1 em feijão-comum, além de avaliar, em tecidos foliares de uma variedade sensível e de uma variedade resistente, o perfil de expressão de suas isoformas transcricionais durante a infecção pelo fungo Colletotrichum lindemuthianum – em períodos de 24hpi (hours post inoculation), 48hpi e 96hpi. Ao total, foram identificados 13 genes PvPR-1 associados ao genoma de referência de P. vulgaris, os quais clusterizaram em dois diferentes grupos fenéticos, compartilhando padrões de motivos em comum. A maioria das proteínas PvPR-1 apresentaram o caráter básico e majoritariamente hidrofílico. Foi reportado que os genes PvPR-1 apresentaram em seus promotores elementos cis-regulatórios responsivos a diferentes hormônios vegetais envolvidos na reposta a estresses bióticos e abióticos. Dados da plataforma STRING sugeriram co-expressão e elevada interação entre os produtos proteicos de alguns genes PvPR-1 – encontrados induzidos em ao menos um dos tratamentos adotados no ensaio de expressão realizado – e enzimas do tipo Chitinase II (pertencentes ao grupo PR-3 e com forte atividade antimicrobiana). Foram encontradas diferenças temporais no perfil de expressão dos genes PvPR-1 nas variedades resistente e sensível de feijão-comum a C. lindemuthianum. A variedade sensível (Rosinha) apresentou a indução de poucos transcritos PvPR-1, em especial a partir do período de 48h após a aplicação do estresse. Em contraste, a variedade resistente (Africano 4), apresentou maior número de transcritos induzidos no período de 48hpi e 96hpi. Nossos resultados contribuem para a melhor compreensão dos genes PvPR-1, sugerindo seu potencial envolvimento na resposta de defesa do feijão-comum, além de auxiliar na identificação de genes PR-1 candidatos para o desenvolvimento de linhagens de feijão-comum transgênicas potencialmente resistentes a estresses bióticos.

A pancreatite aguda é um processo inflamatório no pâncreas com crescente aumentou no número de casos e taxa de mortalidade em casos graves que pode chegar até 17%. Por não possui nenhum tratamento específico para a doença, nos últimos anos foi observado uma demanda de pesquisas que se concentraram principalmente na busca por novas estratégias terapêuticas. Os modelos experimentais para pancreatite aguda usualmente são roedores,
contudo apresentam respostas fisiológicas divergentes entre si, após o estabelecimento da PA. Dessa forma, é imprescindível estudar o comportamento e evolução da PA em modelos animais alternativos como o zebrafish, que vem se destacando na comunidade científica. Os experimentos realizados objetivaram padronizar um novo modelo da pancreatite aguda em zebrafish e validá-lo.

Os produtos naturais são tradicionalmente utilizados pela população no controle de doenças e pragas. O surgimento de fungos dermatófitos resistentes à tratamentos convencionais, como os do gênero Tricophyton estimula a busca por novos agentes anti-tricophyton. As sementes de Moringa oleifera são dotadas de moléculas bioativas tais como proteínas e ácidos graxos que já foram descritos por apresentarem potencial antimicrobiano. Sitophilus zeamais e Nasutitermes corniger são insetos pragas cujo controle tem sido bastante estudado. O fruto da Punica granatum, conhecido como Romã, é utilizado na alimentação e na medicina popular, e estudos recentes têm identificado moléculas com propriedades inseticidas presentes nesse fruto. Este determinou o potencial antifúngico da fração protéica (FP) e do óleo fixo (OF) obtidos das sementes de M. oleifera contra T. tonsurans. O potencial sinérgico das duas preparações e sua sinergia com antifúngicos comerciais também foram avaliados. Os possíveis mecanismos de ação foram avaliados através do ensaio de proteção do sorbitol e citometria de fluxo usando sondas para determinar a morte celular, integridade lisossômica e potencial de membrana mitocondrial. O trabalho também avaliou extrato do pericarpo da P. granatum (EP) quanto ao efeito inseticida do contra S. zeamais e N. corniger, toxicidade oral aguda e genoxicidade in vivo. FP contém 72,24 mg/mL de proteínas e lectinas (atividade hemaglutinante específica de 113,24). Além disso, OF contém ácidos oleico (66%), palmítico (9,25%) e elaídico (9,06%) como compostos principais. FP e OF foram identificados como agentes fungistáticos (concentração mínima inibitória de 1024 mg/mL), mas não eram fungicidas. Um efeito aditivo foi encontrado para as combinações FP+OF e FP+cetoconazol, enquanto um efeito sinérgico foi detectado para FP+itraconazol e OF+itraconazol. Ao avaliar o crescimento de T. tonsurans na presença de sorbitol, verificou-se um impedimento na ação fungistática do OF, indicando que o óleo interfere em vias de biossíntese da parede celular. O número de células em apoptose e necrose aumentou quando os fungos foram tratados com FP e OF. Além disso, a hiperpolarização mitocondrial aumentou nas células expostas ao óleo. Não houve alterações na integridade lisossômica.  EP contém flavonóides, derivados cinâmicos, taninos hidrolisáveis e açúcares. O efeito de EP na sobrevivência de adultos de S. zeamais e operários e soldados de N. corniger,bem como o efeito dele nas enzimas digestivas dos insetos foi avaliado.  EP apresentou fraco efeito deterrente e foi tóxico para S. zeamais na concentração de 7,5% e 10% ao induzir mortalidade em 36%, e reduzir a taxa de ganho de biomassa e de consumo relativo. EP foi termiticida para soldados (CL50 5,9%) e operários (CL50 2,1%) Todas as concentrações de EP estimularam a atividade da amilase em S. zeamais, porém, menores concentrações de EP (0,31% e 0,62%) reduziram a atividade de endoglucanase e exoglucanase enquanto maiores concentrações apresentaram efeito contrário para as duas enzimas. EP também promoveu mortalidade de N. corniger e estimulou a atividade de  exoglucanase e endoglucanase do inseto. Os ensaios in vivo revelaram que EP na dose de 2.000 mg/kg não promoveu toxicidade e genotoxicidade. Em conclusão, FP e OF de sementes de M. oleifera foram identificados como agentes fungistáticos contra T. tonsurans, sendo assim promissores no combate às dermatofitoses causadas por esse fungo. EPfoi inseticida e interferiu na digestão de nutrientes de S. zeamais e N. corniger. A ausência de toxicidade e promoção de redução da sobrevivência dos insetos indicam que EP tem potencial uso inseticida.

A candidíase, doença causada por fungos do gênero Candida spp., tem sido relatada como um grave problema de saúde pública, ocasionando até mesmo infecções sistêmicas em indivíduos. Os fármacos utilizados no tratamento da candidíase são escassos e possuem elevada toxicidade, o que leva a busca por substâncias advindas de produtos naturais, com destaque para os terpenos. O objetivo do presente estudo foi investigar a atividade antifúngica de um monoterpeno, o α- pineno, frente cepas de Candida albicans. Os ensaios utilizados para o referido estudo foram: teste de determinação concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM), através da técnica de microdiluição em caldo do terpeno isolado; Ensaio de associação (checkerboard) entre o o α- pineno e os antifúngicos fluconazol e anfotericina B; Ensaio de cinética de morte (time kill); Mecanismo de ação usando testes in silico e in vitro; Atividade antibiofilme contra Candida albicans e toxicidade contra células humanas (HaCat). O α- pineno apresentou uma CIM entre 128 e 512 ug/mL e a CFM teve os mesmos valores de CIM frente às 8 cepas ensaiadas. As demais concentrações não foram possíveis de determinar a CFM, devido ao crescimento ser maior ou igual a CIMx4 (limite do teste). No ensaio de associação, a interação do α- pineno e fluconazol foi indiferente, já combinações entre α- pineno com a anfotericina B e a nistatina obtiveram efeitos sinérgicos.  Os resultados da simulação de docking molecular demonstraram que a timidilato sintase (−52 kcal mol−1) e a δ-14-sterol redutase (−44 kcal mol−1) apresentaram as melhores interações. Os resultados in vitro sugerem que a atividade antifúngica do α-pineno envolve a ligação ao ergosterol na membrana celular. No ensaio de time kill, a atividade antifúngica não foi dependente do tempo e também inibiu a formação de biofilme ao romper até 88% do biofilme existente. Não foi citotóxico para os queratinócitos humanos. Assim sendo, o presente estudo apóia o α-pineno como um candidato para tratar infecções fúngicas causadas por C. albicans.

A pandemia de Covid-19 intensificou as buscas por novos agentes terapêuticos para doenças respiratórias visto o aumento da lesão pulmonar aguda (LPA) e síndrome respiratória aguda grave (SRAG). Laguncularia racemosa (L.) C. F. Gaertn é uma planta da família Combretaceae, conhecida popularmente como “mangue branco”, amplamente distribuída no ecossistema manguezal e usada na medicina popular para o tratamento de diarréia, feridas bucais e febre. Neste contexo, o objetivo desse trabalho foi avaliar a segurança de uso e as atividades antioxidante e anti-inflamatória dos extratos hexânico (EHLr), acetato de etila (EALr) e etanólico (EELr) das folhas de L. racemosa relacionadas a síndrome respiratória aguda grave induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em camundongos. Os extratos foram preparados pelo método de maceração e o seu perfil fitoquímico analisado por cromatografia em camada delgada (CCD), cromatogragia gasosa acoplada à espectrofotômetro de massas (GC-MS) e cromatografia líquida de alta eficiêcia acoplada à detector de arranjo fotodiodo (CLAE-DAD). A atividade antioxidante in vitro foi avaliada pelos métodos de DPPH, ABTS e fosfomolibdênio, e foi determinado o teor de fenóis totais, flavonóis e protoantocianidinas. A toxicidade in vitro dos extratos foi avaliada frente a células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e pela atividade hemolítica. A atividade anti-inflamatória in vitro dos extratos foi avaliada pela quantificação de óxido nítrico (NO) produzido por macrófagos intraperitoneais. Os testes in vivo foram realizados com o extrato mais ativo de acordo com o perfil fitoquímico e os testes antioxidantes. Foi realizado o ensaio toxicológico agudo em camundongos com o EELr na dose de 2.000 mg/kg. O ensaio de LPA induzida por LPS foi realizado com o EELr nas doses de 50, 100 e 200 mg/kg e foram analisados a quantidade de leucóticos totais e diferenciada, além da atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), níveis de óxido nítrico e citocinas, e análise histopatológica e histoquímica do colágeno nos pulmões. Foi identificado um maior teor de fenóis totais no EELr (241,77 ± 3,6 mg EAG/g) quando comparado aos demais extratos, enquanto que as proantocianidinas foram indicadas em maior quantidade no EHLr (39,88 ± 12,57 mg EC/g). Na atividade antioxidante, do EELr apresentou uma concentração necessária para inibir 50% do radical DPPH (CE50) de 178,8 ± 0,8 µg/mL e 275,5 ± 0,9 µg/mL para ABTS em relação ao padrão trolox (56,56 ± 0,5 µg/mL e 36,7 ± 0,6 µg/mL, respectivamente), enquanto que os demais extratos nesses métodos e do fosfomolibdênio não apresentaram atividade. Na avaliação da viabilidade em PBMC os extratos apresenteraram CI50 superior a 100 µg/mL e na atividade hemolítica os não foram capazes de induzir hemólise. O EELr não causou alterações comportamentais, nas massas corporais, no consumo de água e ração nos camundongos, e sua DL50 foi superior a 2.000 mg/kg de massa corporal. No ensaio de LPA, o EELr reduziu significativamente o número de leucócitos totais, neutrófilos, eosinófilos, macrófagos e células mononucleares sanguíneas presentes no lavado broncoalveolar dos camundongos inflamados. Reduziu, ainda, a atividade da MPO, os níveis de NO, IL-6, TNF-α e INF-γ, além das análises histológicas revelarem a manutenção da integridade pulmonar e a diminuição da fibrose. A partir dos resultados obtidos nesse trabalho, pode-se concluir que os extratos de L. racemosa apresentaram baixa toxicidade, in vitro e in vivo, além de atividade antioxidante e anti-inflamatória relevante do EELr, provavelmente associadas ao teor de compostos fenólicos em sua composição.

O Diabetes Mellitus (DM) é um dos principais problemas de saúde em todo o mundo, segundo a Organização Mundial da Saúde. Devido ao processo inflamatório crônico subagudo, o DM está associado com diversas comorbidades, dentre elas o Transtorno Depressivo Maior (TDM). Estudos clínicos indicam uma ligação bidirecional entre DM e TDM, sendo a resistência à insulina cerebral o principal elo para a estimulação de processos inflamatórios e, consequentemente, de sintomas depressivos. O tratamento medicamentoso do TDM, atualmente, se dá através do uso de medicamentos que agem modulando neurotransmissores, chamados antidepressivos. No entanto, aproximadamente um terço dos indivíduos que fazem uso dessa classe de medicamentos não apresentam remissão dos sintomas. Atualmente, não existem drogas seguras e eficazes que atuem no tratamento dessa comorbidade, de forma que sejam capazes de melhorar o quadro clínico dos pacientes refratários. Neste estudo, avaliamos os efeitos da metformina, do escitaloram e da associação dessas drogas no comportamento depressivo. O DM foi induzido em camundongos C57BL/6 com estreptozotocina (STZ) (150 mg/kg) em dose única e os animais foram tratados com metformina (200 mg/kg/dia), escitalopram (4 mg/kg/dia) e metformina associada com escitalopram, na mesma dosagem, por 21 dias, a partir do quarto dia de indução do modelo. Os animais passaram por teste de suspensão da cauda (TST) e pelo teste de labirinto em cruz elevado (EPM, do inglês elevated plus maze). Após a eutanásia, o giro dentiado (GD) do hipocampo e o córtex pré- frontal (CPF) foram dissecados para análise da expressão de proteínas de vias de inflamatórias e de neuroplasticidade, utilizando as técnicas de Imuno-histoquímica, Imunofluorescência e Western blot. A análise estatística foi realizada por meio do programa Graphpad Prism na versão 9. O STZ foi capaz de induzir o modelo DM, mantendo glicemia ≤ 250mg/dL e baixo peso durante as três semanas de tratamento. A metformina isolada e associada ao escitalopram mostrou capacidade de reverter sintomas depressivos, com a redução no tempo de imobilidade dos animais tratados no TST e maior número de entradas nos braços abertos do EPM. A melhora pode ser explicada pela redução significativa na expressão de marcadores inflamatórios na DG e PFC, como Interleucina (IL) 1β, fator de necrose tumoral (TNF-α), receptor de glicocorticóide (GR) fosforilado, proteína glial  fibrilar ácida (GFAP), molécula 1 adaptadora de ligação ao cálcio ionizado (Iba-1) associada ao aumento da expressão de fatores neurotróficos, como proteína de ligação do elemento de resposta cAMP (CREB), fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) e proteínas associadas à sinapse 102 (SAP 102). A metformina também foi capaz de modular a via de sinalização da insulina na GD e CPF, para reduzir a inflamação, através da redução da fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) e c-Jun N- terminal quinase fosforilada 1 (JKN-p) e aumento de PI3K-p, fósforo SerinaTreonina Quinase (AKT-p) e JNK, em GD e CPF. Assim, concluímos que a  metformina possui ação neuroprotetora e antidepressiva, devido ao seu efeito anti-inflamatório, neuroprotetor e  neuroplástico.

As plantas interagem com uma série de microrganismos em seus habitats naturais. Membros benéficos do 

O microbioma vegetal representa um importante componente no estabelecimento e desenvolvimento vegetal, desempenhando atividades capazes de influenciar a sobrevivência e aptidão das plantas. Calotropis procera (Aiton) W. T. Aiton ocorreem regiões áridas e semiáridas do mundo. No Brasil é considerada como exótica invasora, ocorrendo em várias formações fitogeográficas, incluindo a Caatinga, Restinga, Cerrado, e áreas urbanas degradadas. Apesar de sua impressionante capacidade de tolerância a ambientes salinos e a baixa disponibilidade hídrica e nutricional, o conhecimento acerca do microbioma associado a esta espécie é pouco explorado. Nesse sentido, o presente estudo objetivou analisar a diversidade do microbioma das raízes e rizosfera de C. procera em dois ecossistemas do Nordeste brasileiro: Caatinga e Restinga, visando investigar sua composição frente a ambientes adversos e contrastantes. Para tanto, foram aplicadas duas abordagens metagenômicas: sequenciamento de amplicon 16S rRNA e shotgun para amostras da rizosfera e das raízes, respectivamente. Com relação à análise metagenômica de amplicon foi observado que, apesar das diferenças significativas encontradas em parâmetros químicos dos solos, a composição e diversidade da comunidade bacteriana do solo rizosférico de C. procera e solo adjacente não diferiu significativamente entre os dois ecossistemas. Em consistência com este resultado, por meio da metagenômica de shotgun, identificou-se o mesmo padrão na estrutura taxonômica do microbioma da endosfera radicular de C. procera, indicando forte influência da planta na determinação do perfil microbiano associado aos dois nichos. Baixos índices de uniformidade no microbioma das raízes sugerem que a colonização neste nicho é limitada a dominância de poucos táxons, inclusive alguns deles ainda não reportados como endofíticos em plantas. Além disso, redes bacterianas foram mais complexas na rizosfera comparada ao solo adjacente e táxons identificados com abundância no solo rizosférico e raízes de C. procera são descritos como habitantes dos mesmos nichos em outras plantas. Parte destes são relatados com contribuições benéficas em diferentes hospedeiros vegetais, sugerindo uma possível seleção de comunidades potencialmente benéficas no estabelecimento bem-sucedido de C. procera em ambientes adversos. O presente estudo fornece uma análise abrangente das comunidades microbianas associadas a C. procera em ambientes contrastantes e disponibiliza informações que podem contribuir para o conhecimento acerca das interações planta-microbioma em condições adversas.

As leishmanioses é uma parasitose de importante espectro clínico, causada por protozoário do gênero Leishmania, que por muito tempo esteve no grupo de doenças tropical negligenciadas e necessita de novas alternativas para o seu tratamento, pois, ainda não possui vacinas disponíveis para humanosos, os medicamentos empregados possuem uma elevada toxicidade, apresentam vários efeitos colaterais, requerem longos períodos de administração e são administrados em sua maioria por via parenteral. Nessa perspectiva, os produtos naturais são uma fonte rica de substâncias bioativas e a Caatinga é um bioma exclusivo do Brasil com grande diversidade de espécies vegetais e muitas delas utilizadas na medicina popular, o que configura um grande potencial para a descoberta e formulação de novos medicamentos. Neste trabalho, investigou-se a atividade antileishmania In vitro de extratos de plantas da Caatinga frente à Leishamania infatum e Leishmania amazonensis. As espécies vegetais foram coletadas na área de reserva da Caatinga localizada no Instituto nacional do Semi-árido (INSA) em Campina Grande. Os extratos foram obtidos por meio do Extrator Acelerado por Solvente (ASE) e a atividade antileishamnia foi realizada a partir do método colorimétrico do MTT (brometo de 3-metil [4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difeniltetrazólio). Foi investigada a atividade antileishmania de 13 espécies de planta e da maioria foram obtidos extratos das folhas e do caule, totalizando 20 extratos avaliados. Sete espécies apresentaram atividade: três, baixa atividade (Ocotea duckei, Commphora Leptoleos e Hymeneae cangaceira); quatro, moderada atividade (Hymeneae rinoflora, Mimosa tenuiflora, Ziziphus joazeiro) eu uma, alta atividade (Croton  sonderianus). O extrato com alta atividade antileishmania foi obtido do caule de Croton sonderianus e apresentou ICs50 de 7,5 e 8,8 µg/mL para L. infantum e L. amazonensis, respectivamente. Os extratos das espécies com moderada e alta atividade antileishmania tiveram sua atividade citotóxica avaliada em linhagens de células Vero, macrófago RAW 264. e fibroblastos de linhagem 2979. Apenas os extratos do caule de Z. joazeiro e de C. sonderianus mostrou atividade citotóxica, contudo o índice de seletividade dos dois extratos foi maior que o dos fármacos padrões utilizados para o tratamento da leishmaniose. A análise por Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET) e varredura (MEV) revelou alterações causadas nos promastigotas de L. infantum e L. amazonensis após tratamento com a IC50 do extrato etanólico do caule de C. sonderianus, como: surgimento de vacúolos e desintegração das membranas celular e nuclear, bem como aglutinação celular e perda do material citoplasmático. Esses resultados apontam diferentes espécies vegetais cujos metabólitos possuem efeito leishmanicida promissor, especialmente a espécie Croton sonderianus. É necessário o fracionamento do extrato e isolamento de metabólitos secundários a fim identificar os componentes ativos responsáveis pela ação encontradas.

O presente trabalho teve como objetivos avaliar atividades biológicas e a toxicidade de extratos salinos de folhas e caule de Portulaca elatior, bem como de uma lectina (PeLL) isolada de suas folhas. As folhas ou caules de P. elatior foram secos, triturados e homogeneizados em NaCl 0,15 M para obtenção dos extratos, os quais foram submetidos à caracterização química por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os extratos salinos foram avaliados quanto à atividade antioxidante e fotoprotetora in vitro. Por fim, o extrato de folhas, com atividades biológicas mais significativas, foi selecionado para os testes de toxicidade in vivo (toxicidade aguda oral e toxicidade dérmica; 1000 e 2000 mg/kg) e in vitro (atividade hemolítica; 7,81–1.000 µg/mL). Para purificação de PeLL, o extrato de folhas foi submetido à cromatografia em coluna de quitina. PeLL foi então submetida a avaliações de sua atividade hemaglutinante (AH) na presença de íons, carboidratos e diferentes valores de pH e temperatura. Foram determinados ainda ponto isoelétrico (pI), massa molecular e estabilidade frente à agentes desnaturantes (por análises fluorimétricas). PeLL foi avaliada quanto à atividade antimicrobiana contra espécies de Pectobacterium e Candida, toxicidade oral aguda in vivo (5 e 10 mg/kg) e atividade hemolítica. Os resultados mostraram que os extratos de folhas e caules de P. elatior possuem em sua composição fenóis, flavonoides, açúcares redutores, terpenos e esteroides. Na atividade antioxidante, o extrato de folhas demonstrou maior eficácia em capturar os radicais livres ABTS+ (CI50: 34,15 µg/mL) e DPPH (CI50: 55,44 µg/mL), bem como maior CAT (CI50: 413,3 µg/mL) quando comparado ao extrato de caule. O extrato de folhas apresentou fator de proteção solar (FPS) > 6 nas concentrações de 50 e 100 µg/mL, enquanto o extrato de caule apresentou FPS < 6 em todas as concentrações testadas. Os ensaios de toxicidade in vivo e in vitro apontaram que o extrato de folhas não causou alterações nos parâmetros fisiológicos, hematológicos e bioquímicos dos camundongos, bem como apresentou baixa ação hemolítica. No que concerne à purificação de PeLL, a cromatografia do extrato de folhas em coluna de quitina resultou em um único pico de proteínas adsorvidas e eluídas com ácido acético. PeLL apresentou AH específica de 744,2 (fator de purificação de 1.695 vezes), uma única banda polipeptídica em eletroforerse para proteínas nativas ácidas, pI 5,4 e massa molecular de 20 kDa. A lectina teve sua AH inibida por manose, galactose, Ca2+, Mg2+ e Mn2+. A AH de PeLL se manteve estável mesmo diante do aquecimento a 100 °C, embora tenham sido detectadas alterações conformacionais através das análises fluorimétricas das amostras após aquecimento. PeLL apresentou AH mais expressiva na faixa de pH ácido (3,0–6,0). A lectina apresentou concentração mínima inibitória (CMI) e concentração mínima bactericida (CMB) de 0,185 e 0,74 μg/mL, respectivamente, para todas as cepas de Pectobacterium avaliadas. Além disso, PeLL apresentou CMI e concentração mínima fungicida (CMF) de 1,48 μg/mL para C. albicans, C. tropicalis e C. krusei; e CMI e CMF de 0,74 e 2,96 μg/mL, respectivamente, para C. parapsilosis. Nenhuma atividade hemolítica in vitro ou sinais de toxicidade aguda in vivo em camundongos foram observados. 

O forame magno (FM) tem um importante papel no diagnóstico radiológico e tratamento cirúrgico na invaginação basilar (IB) e Chiari I (MCI). Além disso, o FM dá passagem para importantes estruturas neurovasculares e o líquido cerebrospinal. Este estudo teve como objetivo analisar as alterações que ocorrem no FM na IB, MCI e ambas. A amostra foi composta por 161 ressonâncias magnéticas (RM) de adultos, sendo 37 controles selecionados de forma aleatória e doentes (IB=31; MCI=37 e MCI+IB=56) por conveniência. As RMs foram analisadas no software de visualização Osirix versão 3.8.2. Foram realizadas mensurações lineares, angulares e área no FM. Utilizamos Anova univariada seguida do teste post-hoc de Tukey para avaliar a diferença entre médias das variáveis quantitativas entre os agrupamentos. O grupo MCI+IB feminino teve maiores dimensões de comprimento (p=0,02) e largura (p<0,001) do FM. Na IB e MCI+IB de ambos os sexos tiveram um FM com anteriorização e obliquidade da margem anterior (p<0,001). Os ângulos do FM na IB e MCI+IB em ambos os sexos apresentam uma maior abertura (inclinação) do FM (p<0,001). Na MCI e MCI+IB de ambos os sexos foi observado um FM com área superlotada e consequente redução do espaço liquórico (p<0,001). A obliquidade e inclinação do FM são características da presença da IB evidenciadas pela perda óssea e elevação da margem anterior do FM. A MCI reduz o espaço liquórico pela superlotação das estruturas nervosas no FM. Na MCI+IB ambos os eventos estão presentes de forma acentuada comprometendo ainda mais o espaço do FM.

A primeira barreira entre os anfíbios e o ambiente é o tegumento, envolvido com funções como proteção mecânica, defesa contra patógenos, controle da passagem de água, respiração, percepção sensorial, coloração e camuflagem. Este tegumento é composto por epiderme e derme, onde há presença de glândulas que secretam diferentes compostos bioativos. Leptodactylus vastus é uma rã endêmica do Brasil que ocupa diferentes biomas e pode ser encontrada em toda a região Nordeste brasileira. A presente tese teve como objetivo investigar o perfil proteico e peptídico da secreção de glândulas cutâneas de L. vastus (SLV) e avaliá-la quanto às atividades hemolítica e antimicrobiana, bem como efeitos sobre a coagulação sanguínea. SLV foi coletada por meio de eletroestimulação manual. Para avaliar o perfil proteico, foram realizadas as seguintes etapas: dosagem de proteínas; eletroforese em gel de poliacrilamida em condições desnaturantes (SDS-PAGE) seguida po espectrometria de massas (EM); avaliação da presença de proteases similares à tripsina; ensaio de hemaglutinação; teste de nibição de tripsina. SLV foi avaliada quanto à atividade hemolítica sobre eritrócitos humanos, atividade antimicrobiana contra bactérias (Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis , Escherichia coli e Salmonella enterica serovar. Enteritidis) e fungos (Candida albicans,  Candida parapsilosis, Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii) e influência em parâmetros da coagulação sanguínea (tempo de protrombina, TP, e tempo de tromboplastina parcialmente ativada, TTPA). Na caracterização do perfil peptídico, SLV foi submetida à cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (RP-HPLC) e as frações foram testadas quanto à à capacidade de inibir o crescimento de Staphylococcus aureus e Escherichia coli. A fração mais ativa foi submetida a EM e sequenciamento de aminoácidos por degradação de Edman. SLV apresentou uma concentração de proteínas de 2,25 mg/mL. Em SDS-PAGE, foi possível observar a presença de sete bandas polipeptídicas. EM revelou similaridade das proteínas presentes nas bandas 3, 4 e 5 com a enzima metanotiol oxidase (uma proteína ligadora de selênio) das espécies de rãs aquáticas Xenopus tropicalis e Xenopus laevis. SLV contém diferentes proteases, porém não foi detectada a presença lectinas (atividade hemaglutinante) e inibidores de tripsina. SLV apresentou baixa atividade hemolítica (máximo de 8,6%) e não apresentou atividade antibacteriana nem antifúngica contra os isolados testados. Quanto aos efeitos na cascata de coagulação foi observado que a SLV prolongou significativamente o TP, chegando a 90 segundos nas maiores concentrações da amostra (50 e 100 µg/mL) e o TTPA, atingindo até 54 segundos no ensaio com 100 µg/mL da secreção. O perfil de SLV em RP-HPLC indicou 26 picos (frações) de peptídeos (absorbância a 216 nm), dos quais 7 foram capazes de inibir o crescimento de S. aureus e/ou E. coli em até 25% e apenas 1 (fração 25) inibiu o crescimento de E. coli em 25% e de S. aureus em 50%. Recromatografia da fração 25 resultou em 2 picos, sendo que o primeiro apresentou uma massa molecular de 2510.7 Da e sequência GLLDVLKGAA KNVVGGLASK VMEKL, indicando se tratar de uma ocelatina. Quando isolado, esse peptídeo foi capaz de inibir em quase 100% o crescimento das bactérias E. coli, K. pneumoniae e P. aeruginosa a partir das concentrações de 16, 32 e 128 µM, respectivamente. Em conclusão, a secreção cutânea de L. vastus contém uma proteína ligadora de selênio já detectada na pele de outros anuros, porém sem função totalmente esclarecida, bem como moléculas capazes de inibir o processo de coagulação sanguínea e peptídeo antimicrobiano da classes das ocelatinas. Os resultados estimulam a continuidade de estudos de bioprospecção dessa secreção e identificação de outras proteínas e peptídeos bioativos.

Euphorbia hirta L. (Euphorbiaceae), é utilizada devido às suas propriedades antimicrobianas, antidiabéticas, antitumorais e anti-inflamatórias. A presente tese avaliou constituintes e atividades biológicas do extrato salino (ES) de folhas de E. hirta. ES obtido após extração da farinha de folhas com PBS 0,1 M, pH 7,5 contendo NaCl 0,15 M (10%, p/v) foi avaliado quanto a presença de constituintes e ensaios in vitro determinaram a atividade antioxidante e citotoxicidade em células de sarcoma 180. Ensaios in vivo utilizando camundongos foram realizados para a determinação de toxicidade oral aguda e genotoxicidade do ES usando a dose de 2000 mg/kg enquanto para a determinação das atividades antitumoral, antinociceptiva e anti-inflamatória as doses de 50, 100 e 200 mg/kg foram investigadas. A atividade antitumoral foi avaliada em camundongos com sarcoma 180, a determinação da atividade antinociceptiva foi realizada usando o teste de contorções abdominais induzida por ácido acético e o teste da formalina, enquanto para a avaliação da atividade anti-inflamatória foram usados os testes de edema de pata e peritonite induzido por carragenina. Cromatografia líquida de alta eficiência detectou a presença de ácido gálico (0,239 ± 0,0021 g% (0,86%)) e ácido elágico (0,482 ± 0,0018 g% (0,37%)). Os teores de fenóis e flavonoides no ES foram de 107,3 ± 0,7 mg EAG/g e 22,9 ± 0,4 mg EQ/g, respectivamente. ES exibiu atividade antioxidante moderada com IC50 (µg/mL) de 490,8 ± 0,2 (DPPH), 569,6 ± 0,5 (ABTS) e 3246,1 ± 0,5 (CAT). ES foi citotóxico para sarcoma 180 com IC50 de 10,0 e 10,6 µg/mL em 48 e 72 h de incubação, respectivamente. ES (2000 mg/kg) não produziu mortalidade ou sinais de intoxicação, contudo promoveu diminuição no consumo de ração em comparação ao controle não tratado. Os parâmetros hematológicos dos animais tratados não foram alterados enquanto a análise do perfil lipídico revelou redução de triglicerídeos, LDL-c e VLDL. Análise dos órgãos não detectou alteração no peso relativo e no padrão histológico. ES não promoveu danos ou mutações no DNA. ES foi antitumoral contra sarcoma 180 causando redução no peso do tumor de 72,32 %, 70,25% e 70,89% nas doses de 50, 100 e 200 mg/kg. ES inibiu significativamente o número de contorções nas doses de 50 (84,0 ± 4,0%), 100 (78,4 ± 9,4%) e 200 mg/kg (62,4 ± 10,6%). Também reduziu o tempo de lambida na primeira fase (69,7 ± 7,8%, 50 mg/kg; 84,6 ± 6,4%, 100 mg/kg e 72,0 ± 8,6%, 200mg/kg) e na segunda fase (99,8 ± 0,1%, 87,4 ± 7,4% e 95,9 ±% nas doses de 50, 100 e 200 mg/kg, respectivamente. ES reduziu a migração leucocitária para a cavidade peritoneal dos camundongos em 52%, 54% e 63% (células/mL). Em conclusão, ES contendo metabólitos secundários é antioxidante, não apresenta toxicidade oral aguda, não é genotóxico, é citotóxico para células de sarcoma 180 e tem atividade antitumoral, antinociceptiva e anti-inflamatória.

O câncer é uma ameaça crescente à saúde pública, sendo, portanto, uma das principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo. A busca por novos compostos bioativos para a terapia do câncer é motivada pela necessidade de se obter resultados terapêuticos mais eficazes e que atuem de forma seletiva minimizando os efeitos colaterais. Neste contexto, produtos obtidos de algas marinhas têm-se mostrado uma excelente fonte de compostos bioativos com uma variedade de atividades biológicas e potenciais aplicações medicinais no tratamento do câncer. Neste trabalho o óleo de laurencia dendroidea (OLd) foi submetido à Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas. Além disso, a atividade citotóxica (0,78 - 25 μg/mL) usando diferentes linhagens de células tumorais humanas HeLa, HL-60, HCT-16, K562, MCF-7 e a linhagem saudável Vero, foram realizadas usando o ensaio colorimétrico MTT. O índice de seletividade (IS) foi calculado em relação aos valores de IC50 obtidos para as células HL-60 e as células Vero. Ainda foram avaliados os mecanismos de ação do Old nas células de leucemia promielocítica aguda. Os compostos silfiperfolan-7-β-ol e (-) -7-epi-silfiperfolan-6 β-ol foram identificados como sendo majoritários no óleo. O Old mostrou citotóxicidade significativa para todas as células cancerígenas (IC50 - 0.06 - 3.78 µg/mL), destacando uma notável citotoxicidade seletiva contra células HL-60 (0.06 µg/mL). O OLd provocou alterações morfológicas e induziu apoptose e necrose de células HL-60, e uma significativa despolarização mitocondrial foi observada. A evidente elevação da população celular na fase sub-G1 sugere influência direta na progressão do ciclo celular. Os resultados obtidos evidenciam o potencial promissor do OLd como agente terapêutico no âmbito oncológico, estabelecendo um alicerce robusto para investigações clínicas futuras, com foco no desenvolvimento de abordagens de tratamento direcionado ao câncer.

Jatropha curcas é uma espécie que apresenta multipla aplicabilidade, com ênfase no seu potencial para redução de danos ambientais, com aplicação na industria de biocombustível e no setor ambiental, visando a fitorremediação, prevenção e controle de erosão do solo. Os trabalhos aqui apresentados tiveram como objetivo, analisar os transcriptomas de acessos contrastantes de J. curcas em resposta ao estímulo salino, visando a mineração de quinases com potencial para aplicação no melhoramento genético da cultura. O estudo sobre o quinoma de J. curcas, teve como foco analisar a diversidade, classificação, estrutura genética, elementos cis-reguladores (ECRs) e fatores de transcrição (TFs). Também prospectamos domínios conservados, atributos físico-químicos e localização subcelular das proteínas quinase (PK). A pesquisa inclui uma análise de RNA-Seq de JcPKs de dois acessos expostos a NaCl (150mM/3h). O quinoma de J. curcas compreende 1.350 PKs codificadas por 872 genes únicos (aproximadamente 3% dos genes codificadores de proteínas da espécie). A análise fenética revelou 20 grupos distintos e 121 famílias/subfamílias. As famílias PK exibem diversidade estrutural significativa, com números variados de íntrons, comprimentos de proteínas, valores de pI e massa molecular. Comparações ortológicas com outras espécies de plantas sugerem forte conservação dos genes PK, variando de 51% (Arabidopsis thaliana) a 78% (Hevea brasiliensis). Os ECRs enriquecidos nos promotores do gene PK estão ligados a TFs como Dof, MIKC_MADS e ERF, o que poderia melhorar as vias de sinalização e os genes responsivos ao estresse. Os dois acessos, Jc171 e Jc183, exibiram estratégias diferentes em resposta ao NaCl, com Jc171 mostrando mais modulação em genes PK, principalmente regulação negativa, do que Jc183. A validação através de ensaios qPCR confirmou candidatos PK específicos. Em outro trabalho, exploramos a diversidade estrutural e características físico-químicas das quinases semelhantes a receptores ricos em leucina (LRR), além disso, uma rede de interação proteína-proteína (PPI) foi construída com base nos genes diferencialmente expressos. O quinoma de J. curcas é composto por 259 proteínas LRR, codificadas por 200 genes únicos. A análise fenética revelou 23 subfamílias LRR, sendo essa a maior e mais diversa família do grupo RLK-Pelle. A estrutura gênica e a disposição dos ECRs apresentaram variação intra e interfamiliar. A maioria das subfamílias encontra-se localizadas na membrana plasmática, reforçando a atuação dessas quinases na percepção de estímulos e mediação da cascata de sinalização. As subfamílias ancoradas na membrana apresentaram similaridade das propriedades proteicas. A rede PPI de Jc171 mostrou que as LRR reprimidasestão associadas a processos metabólicos, de crescimento e desenvolvimento da planta, além da resposta a estímulos. Em Jc183, a rede PPI associou as LRR a regulação de processos biológicos, resposta ao estímulo e regulação negativa da morte celular. Os dados apontam para uma divergência na resposta dos acessos ao estímulo salino, sugerindo que o mecanismo de resposta ao estresse é dependente do genótipo. Esta pesquisa fornece uma base sólida para estudos futuros sobre o papel das proteínas quinases de J. curcas no aumento da adaptabilidade das plantas aos estresses abióticos, contribuindo para o desenvolvimento de culturas tolerantes a condições ambientais adversas.

As investigações acerca das propriedades terapêuticas de plantas medicinais desvendam fontes promissoras de moléculas com expressivo potencial curativo. No cenário específico das espécies Eugenia pohliana e Verbesina macrophylla, ambas encontradas da Caatinga brasileira, apresentam uso popular para o tratamento de diversos quadros patológicos. Além disso, estudos anteriores já demonstraram o potencial farmacológico dessas espécies. E. pohliana conhecida como maçã do mato demonstrou notável atividade antileishmania contra diferentes espécies, incluindo Leishmania amazonensis, L. infantum, L. braziliensis e L. guyanensis, com valores de IC50 entre 14,47 µg/mL e 44,60 µg/mL. Embora não tenha apresentado atividade significativa nos ensaios DPPH e ABTS, o óleo essencial revelou uma notável inibição de 82,08% no ensaio CAT. Além disso, a análise do perfil citotóxico do óleo essencial de E. pohliana contra células cancerígenas revelou uma expressiva atividade inibitória em linhagens como MCF-7, NCI-H292, K-562 e HL-60. O óleo essencial de V. macrophylla, popularmente conhecida como assa-peixe evidenciou uma notável redução na multiplicação dos parasitas, indicando seu potencial como agente leishmanicida com IC50 entre 36,09 e 178,40 µg/mL. Além disso, destacou-se por sua marcante atividade antioxidante, superando o padrão utilizado como referência. A presença de citotoxicidade em linhagens tumorais aponta para um potencial terapêutico multifacetado destes óleos essenciais. Para além desses aspectos farmacológicos, o estudo estendeu-se à avaliação dos potenciais efeitos embriotóxicos. Mediante o uso de ovos fertilizados de Gallus gallus domesticus como modelo experimental, a pesquisa destacou variações significativas na largura do tubo neural e evidenciou impactos na vasculogênese e angiogênese, particularmente no grupo tratado com V. macrophylla. Consequentemente, estas investigações ressaltam não apenas a relevância da exploração das propriedades terapêuticas das plantas medicinais para o desenvolvimento de tratamentos eficazes e acessíveis, mas também sublinham a indispensabilidade de avaliações toxicológicas abrangentes. Essa necessidade ganha ainda mais destaque quando consideramos contextos delicados, como o desenvolvimento embrionário, reforçando a importância da segurança desses compostos no panorama da saúde humana.

Os pontos quânticos (PQs) são nanocristais fluorescentes de semicondutores com propriedades ópticas singulares. Os quelatos de Gd(III) são utilizados como agentes contraste (ACs) na técnica de imagem por ressonância nuclear magnética (IRM). Combinando-se PQs a quelatos de Gd(III) é possível aliar a especificidade e a sensibilidade dos métodos baseados em fluorescência e proporcionar um sinal paramagnético otimizado para IRM. Assim, o objetivo dessa dissertação foi desenvolver uma nanoplataforma multimodal formada por PQs de CdTe carboxilados, quelatos do tipo DOTA-Gd(III) e a transferrina (Tf), uma vez que receptores de transferrina (RTfs) podem estar superexpressos em células de câncer, sendo então alvos interessantes para estudos sobre a biologia do câncer. Para tanto, os PQs foram conjugados de forma covalente com os ACs na proporção 1:30 (PQs:ACs), via etilenodiamina. Conjugou-se então covalentemente o nanossistema obtido com a Tf. As nanossondas foram caracterizadas por espectroscopias de absorção e emissão e relaxometria. A conjugação com a Tf foi analisada por ensaio fluorescente em microplaca (EFM). Para avaliar a efetividade do nanossistema multimodal e sua especificidade por RTfs, ensaios de marcação fluorescente com células HeLa foram também realizados. A nanossonda multimodal exibiu uma relaxividade longitudinal T1 nominal ca. 5× menor que a do quelato molecular (a 37 oC e 60 MHz) e manteve a fluorescência. Observou-se uma efetiva conjugação com a Tf, obtendo-se um sinal de fluorescência relativa de ca. 1.130% pelo EFM. Na citometria de fluxo observou-se uma marcação de ca. 88% das células HeLa, reduzida para ca. 39% após saturação prévia dos RTfs com Tf, sugerindo especificidade para o nanossistema. Uma captação celular eficiente foi observada pela microscopia de fluorescência. Portanto, a nanoplataforma multimodal óptica-magnética desenvolvida apresentou potencial para ser aplicada em estudos biológicos associados ao câncer tendo como alvo os RTfs.

A espécie vegetal Bauhinia monandraKurz., pertencente a família Fabaceae e amplamente distribuída no território brasileiro é conhecida popularmente como “pata de vaca” e utilizada principalmente na medicina pelo uso no tratamento de inflamação e Diabetes. Bactérias endofíticas podem promover inúmeras vantagens a suas plantas hospedeiras, como indução do crescimento e defesa contra agentes patogênicos. Lectinas são proteínas reconhecedoras e ligantes de carboidratos e promovem inúmeras atividades biológicas. E em alguns estudos foram demonstrados a capacidade de lectinas aglutinar células bacterianas endofíticas sem promover atividade antimicrobiana. Processos de caracterização de lectinas são fundamentais para definição de sua estrutura e função, sendo empregados métodos convencionais e diferenciados para este processo, como a técnica eletroquímica de Voltametria Cíclica. O objetivo do presente estudo foi avaliar a interação entre bactérias endofíticas e a lectina galactose específica BmoLL isolados de folhas de B. monandra com técnicas de aglutinação e eletroquímica como estrtégia de caracterização da lectina. Nos ensaios de aglutinação BmoLL  foi testada para três estírpes bacterianas Bacillus sp. , Burkholderia sp. e Enterobacter sp., onde a lectina promoveu  maior atividade aglutinante em células de Enterobacter sp. em títulos de 1.024¹. E em ensaios de inibição por galactose, ainda manteve atividade aglutinante para Enterobacter sp. em títulos de 8¹. Nos ensaios eletroquímicos com Voltametria cíclica, as diminuições das correntes de pico catódica e anódica de  BmoLL imobilizada em eletrodo de ouro na presenção de carboidratos redutores Glicose e Galactose, foi possível perceber a interação eletroquímica específica da lectina por galactose. Nos ensaios com as bactérias endofíticas, BmoLL imobilizada em eletrodo de Ouro promoveu interação com as três estípes endofíticas testadas, sendo detectado uma diminuição dos processos de oxidação e redução na interface eletrodo/solução a medida que aumentava a concentração de bactérias. Diante dos resultados foi possível perceber a possibilidade de caracterização eletroquímica da lectina BmoLL na interação com bactérias endofíticas.

A Síndrome Respiratória Aguda Grave coronavírus 2 (SARS-CoV-2) é responsável pela pandemia da doença do coronavírus-2019 (COVID-19), a qual levou à notificação de mais de 200 milhões de casos em todo o mundo. Desde então, a vigilância genômica tem sido uma ferramenta fundamental para rastrear a disseminação viral. Neste estudo fornecemos uma análise detalhada da dinâmica temporal de mutações e linhagens de SARS-CoV-2 durante a primeira onda da pandemia no estado de Pernambuco, Brasil. Para isso, realizamos a caracterização de 67 genomas de 22 municípios, os quais foram combinados com 293 sequências de Pernambuco disponíveis no GISAID. Detectamos um total de 962 SNPs em regiões codificantes, a maioria deles localizados na ORF1ab. Observamos padrões dinâmicos de mutações correlacionados a propagação de linhagens ao longo da primeira onda. Observamos a presença de mutações com frequências relativas constantes em Pernambuco durante todo o período de amostragem C241T, C3037T (F924F), C14408T (P4715L/P323L), A23403G (D614G), G28881A (R203K), G28882A (R203R) e G28883C (G204R). Foi detectada a circulação simultânea de 18 linhagens em Pernambuco, sendo as mais prevalentes B.1.1, B.1.1.28, B.1.1.33 e P.2, respectivamente. A rede de haplótipos e a análise filogenômica mostraram que as sequências se agruparam em 4 clados principais de acordo com a dinâmica evolutiva de SARS-CoV-2, tendo havido importações iniciais de linhagens, seguida por expansão e transmissão local de linhagens nacionais, contribuindo para o crescimento acelerado da epidemia regional. Esses resultados evidenciam elevados níveis de diversidade genômica em Pernambuco e destacam a importância de investigações contínuas em vigilância genômica para rastreamento de variantes virais.

A prospecção por novos padrões moleculares visando o tratamento de doenças causadas por microrganismos patogênicos tem aumentado nas últimas décadas, em decorrência do surgimento de cepas resistentes às terapias vigentes, mas também devido aos seus efeitos tóxicos. Bactérias e fungos apresentam vasto repertório de moléculas como as proteases, enzimas catalisadoras de ligações peptídicas, essenciais para infectividade e virulência. Estudos mostraram que compostos como aqueles oriundos de fontes biológicas, reduziram a infectividade e proteção de diversos microrganismos pela ação inibitória sobre proteases específicas. De posse dessas informações, os inibidores derivados de plantas podem ser pleiteados como potenciais fármacos para atenuar complicações clínicas provocadas por patógenos como Staphylococcuss aureus e Candida albicans. Ensaios in vitro revelaram a capacidade de um Inibidor de Tripsina de Enterolobium contortisiliquum (EcTI) em promover ação antivirulência contra esses patógenos oportunistas, dificultando a produção do pigmento estafiloxantina da S. aureus, que uma vez ausente torna a bactéria suscetível à defesa imunológica do hospedeiro. A capacidade de S. aureus em causar hemólise e de produzir biofilme também foi reduzida na presença desse composto natural. O EcTI ainda prejudicou a formação do biofilme de C. albicans, promovendo inclusive a quebra dessa barreira protetora. Diante desse cenário, esse estudo oportuniza discussões sobre os mecanismos virulentos relacionados às proteases e aos efeitos provocados por inibidores. Além disso, as atividades in vitro realizadas concedem o primeiro relato sobre os efeitos do EcTI na antivirulência contra S. aureus e C. albicans.

A osteoartrite (OA) é uma doença sem tratamento claro e eficaz que afeta mais de 237 milhões de pessoas no mundo. Devido a ineficácia dos tratamentos atuais, novas alternativas terapêutica mais eficazes e com menos efeitos colaterais tem sido necessárias. O condroitim sulfato (CS) é um polissacarídeo sulfatado (PS) bastante recomendado para o tratamento de pacientes com OA de joelho, apesar de sua eficácia terapêutica ainda não estar bem estabelecida. O condroitim sulfato fucosilado (CSF) é um PS extraído de organismos marinhos e que possui uma estrutura análoga ao CS de mamíferos, e que por apresentarem excelentes propriedade anti-inflamatórias, é um candidato promissor para o tratamento da OA. Devido ao potencial terapêutico desses PSs, este trabalho visou avaliar o efeito terapêutico do CS de traqueia bovina (CS-A), da cartilagem de tubarão (CS-C) e do CSF da parede corporal do pepino-do-mar Holothuria grisea em modelo in vivo de OA induzido por monoiodoacetato de sódio na articulação femoropatelar de camundongos C57BL/6. Após indução da OA, os camundongos foram divididos aleatoriamente em grupos (n = 5) de acordo com o tratamento oral diário durante 28 dias: (1) SHAM (falso operado, salina 0,9 % v.o.); (2) controle negativo (doente, salina 0,9% v.o); (3) CS-A (doente, 100mg/kg v.o); (4) CS-C (doente, 100mg/kg v.o) e (5) CSF (doente, 100mg/kg v.o). A eficácia dos tratamentos foi avaliada através da mensuração da alodinia (50% do limiar de nocicepção), atividade motora, migração de leucócitos, atividade anti-inflamatória (dosagem de IL-10), análise morfométrica e escore histopatológico OARSI. Durante 28 dias de experimentação, o CS-A (100 mg/kg), CS-C (100 mg/kg) e CSF (100 mg/kg) conseguiram induzir analgesia, aumentar a atividade motora e reduzir a migração de leucócitos de camundongos osteoartriticos de forma significativa em relação ao controle negativo (salina 0,9 %). Além disso, a morfometria revelou um aumento significativo da cartilagem sobre a tíbia para os animais tratado com CS-A e CSF, cujos resultados foram confirmados pela análise histopatológica OARSI, mostrando uma redução da gravidade da OA em relação ao controle negativo. Contudo, apenas CS-A (100 mg/kg) aumentou significativamente os níveis de IL-10, sugerindo que esta molécula possui uma atividade protetora contra a degeneração da cartilagem através da regulação da inflamação. Apesar de preliminares, os mecanismos envolvidos no tratamento com CSF precisam ser melhores investigados, visto que seu efeito protetor na OA foi semelhante ao apresentado para o CS-A.

O uso desordenado de antibióticos tem aumentado e vem se tornando, nos últimos anos, um grande problema de acordo com a Organização Mundial da Saúde, gerando microrganismos resistentes aos medicamentos tradicionais. Em contrapartida a este problema de saúde pública, novos antibióticos com diferentes vias de ação têm sido pesquisados. Muitos destes antimicrobianos têm sido descobertos a partir da primeira linha de defesa de vegetais, onde os peptídeos antimicrobianos destacam-se como agentes promissores. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver e avaliar pelo menos um peptídeo vegetal bioinspirado em thaumatin-like (TLPs) identificadas no feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] fornecendo conhecimentos sobre suas principais características funcionais e toxicidade. No intuito de encontrar novos compostos com atividade antimicrobiana, foram utilizadas como template sequências de TLP obtidas do transcriptoma do feijão caupi. A predição da atividade antimicrobiana e a identificação dessas regiões com atividade foi realizada no servidor CAMPr3 e a toxicidade, no Toxipred. O desenho racional do peptídeo foi conduzido com objetivo de manter a atividade antimicrobiana predita e minimizar a toxicidade dessa molécula. A modelagem tridimensional foi realizada por threading e a estabilidade do modelo foi avaliado pela simulação em dinâmica molecular (DM) pelo pacote GROMACS 2019.4. A síntese do peptídeo foi realizada comercialmente. Por fim, foram realizadas as análises da atividade antimicrobiana contra cepas bacterianas (Staphylococcus aureus ATCC-25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853, Klebsiella pneumoniae ATCC-13883 e Acinetobacter baumannii ATCC-19606) e o potencial citotóxico e genotóxico foram avaliados através do ensaio de MTT (Brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2, 5- difeniltetrazólio) e teste do micronúcleo, utilizando cultura de células de fibroblastos de camundongo (células L929). Os resultados revelaram que o Peptídeo PVu_LTP_Seq1 apresentou potencial de 90% nas predições de atividade antimicrobiana e não apresentou toxicidade e alergenicidade predita, além disso, mostrou-se estável nas análises de desvio da raiz média quadrática (RMSD) e flutuação da raiz quadrática média (RMSF). O peptídeo desenvolvido conseguiu inibir o crescimento bacteriano das quatro cepas testadas, exibindo MIC (Concentração inibitória mínima) de 256 µg/mL (Staphylococcus aureus ATCC-25923), 256 µg/mL (Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853), 128 µg/mL (Klebsiella pneumoniae ATCC-13883) e 32 µg/mL (Acinetobacter baumannii ATCC-19606).  PVu_LTP_Seq1 não apresentou danos a linhagem celular nos ensaios citotóxicos e genotóxicos realizados. Dessa forma, o presente trabalho desenvolveu um peptídeo com potencial antimicrobiano e livre de toxicidade nas concentrações e linhagem celular testada, fornecendo informações sobre suas principais características funcionais, ainda podendo ser aproveitado para o uso em terapias alternativas de interesse à saúde humana. 

A pandemia da COVID-19 há dois anos tem causado muitos transtornos mundiais em termos de saúde pública, economia e política. O número de casos e óbitos tem aumentado em oscilações denominadas ondas e mesmo após o processo de vacinação ter iniciado, ainda não existe um medicamento direcionado ao combate ao vírus. Este estudo visa fornecer mais conhecimento a respeito da patogênese da COVID-19, nos aspectos laboratoriais e clínicos, confrontando a evolução da doença em pacientes de Enfermaria e de UTI. Amostras biológicas de 85 pacientes foram coletadas para investigação hematológica, bioquímica, imunológica, microbiológica e clínica. Os resultados demonstraram que os principais sintomas apresentados pelos pacientes de Enfermaria e UTI foram dispineia (74,41% e 45,45%) e febre (55,17% e 27,27%). As principais comorbidades observadas foram hipertensão (34,48% e 70%) e obesidade (17,24 e 20%) dados para Enfermaria e UTI, respectivamente. Os exames de Tomografia computadorizada demonstraram a prevalência dos achados clássicos como as opacidades em vidro fosco. Além disso, os pacientes de UTI apresentaram os graus moderado e grave da doença como os mais prevalentes. Os principais fármacos utilizados na Enfermaria foram os anti-inflamatórios, antibióticos e anticoagulantes. Para a UTI, além dos descritos acima, destacaram-se os antirretrovirais e os ansiolíticos. Nos pacientes de UTI houve redução de hemácias, de hematócrito e de linfócitos (inclusive todas as sublinhagens T (CD3+, CD4+, CD8+ e CD19+), associada com aumento de neutrófilos, DHL, ferritina, D-Dímero, fibrinogênio e Proteína C reativa (PCR). Os microrganismos mais prevalentes foram Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, Enterococcus feacalis e Klebsiella pneumoniae. Os antibióticos Ampicilina-Sulbactam, Estreptomicina,Eritromicina, Oxaciclina, Rifampicina, Ceftriaxoma, Imipenem e Meropenem foram os menos responsivos nos testes de resistência antimicrobiana. Exames laboratoriais na COVID-19, são importantes ferramentas no diagnóstico da condição clínica do paciente. A interrelação entre dados hematológicos, bioquímicos e imunológicos, pode ser um fator preditivo da conduta médica e permanência do paciente na enfermaria ou UTI. Além disso, o longo tempo de internamento na UTI associado ao uso de dispositivos invasivos, também são fatores predisponentes para o favorecimento das coinfecções nosocomiais. Por fim, investigar e controlar as condições pré-clínicas, ou seja, possíveis comorbidades, parece ser essencial na prevenção do agravamento da doença.

O lúpus eritematoso sistêmico é uma doença autoimune crônica com períodos de exacerbação e remissão que pode afetar vários órgãos ou sistemas, levando a um amplo espectro de manifestações clínicas. Infecções bacterianas, virais e oportunistas são comuns no LES e representam a segunda causa de morte nesse grupo em países desenvolvidos, variando de 25% a 50% dos casos de mortalidade. Evidências sugerem que a Covid-19 tem um efeito sensível em causar danos aos órgãos e outras complicações em portadores de LES, representando um fator de risco significativo. Dessa forma, é crucial entender as interações biológicas e moleculares subjacentes entre o LES e a Covid-19, que ainda são poucos compreendidas. Logo, o objetivo deste trabalho foi identificar o perfil metabólico do LES, desde o seu delineamento imunológico até a sua associação genética, correlacionando os achados bioquímicos nesta condição com os encontrados na Covid-19. Assim, os resultados obtidos identificaram vias de interesse e que podem estar associadas com o processo inflamatório desencadeado pelas doenças, com destaque para duas vias imunológicas e uma via relacionada à terapêutica inicial do SARS-CoV-2.

Os arbovírus são vírus de RNA transmitidos principalmente por mosquitos hematófagos aos hospedeiros vertebrados. O mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) é responsável pela transmissão de algumas das principais arboviroses em todo o mundo, como a dengue, a doença causada pelo Zika vírus, chikungunya e febre amarela. O desenvolvimento de novos inseticidas, preferencialmente naturais, é importante para ampliar essa lista de alternativas disponíveis, visando o uso em estratégias de manejo integrado e rotatividade. Lectinas são proteínas que se ligam especificamente a carboidratos e são amplamente distribuídas nas plantas. Lectinas isoladas de sementes de Moringa oleifera (WSMoL) e folhas de Myracrodruon urundeuva apresentaram atividade larvicida contra A. aegypti. O objetivo geral do trabalho é avaliar efeitos das lectinas MuLL e WSMoL no comportamento larval e investigar mecanismos envolvidos na ação larvicida das mesmas a níveis histológico, celular e molecular. WSMoL e MuLL foram isoladas de acordo com protocolos previamente estabelecidos e a eficácia das amostras obtidas foi avaliada através de ensaio de atividade larvicida. Também foram avaliados os efeitos das lectinas na organização histológica do intestino médio das larvas. Por fim, extratos de intestino de larvas do controle e tratadas com as lectinas foram submetidas a análises metabolômicas. Quando testados nos valores de CL₅₀ previamente determinados, os extratos de sementes de M. oleifera e folhas de M. urundeuva, bem como as lectinas WSMoL e MuLL isoladas, foram capazes de matar as larvas, conformando a atividade das preparações. WSMoL promoveu redução na capacidade natatória das larvas e causou inibição da atividade de acetilcolinesterase. WSMoL e MuLL foram capazes de alterar a estrutura do intestino médio das larvas, causando desorganização e formação de vacúolos no epitélio. O tratamento com WSMoL reduziu a quantidade de células proliferativas e aumentou o número de células em apoptose, em comparação com o controle. Os ensaios de análise metabolômica estão sendo finalizados.

As folhas da Moringa oleifera possuem alto valor nutricional, sendo ricas em proteínas. As folhas são bastante utilizadas como remédio e na alimentação. No entanto, há necessidade de mais estudos sobre a segurança de uso de preparações de folhas. Este trabalho analisou preparações ricas em proteína das folhas de M. oleifera. O extrato salino (LE) e a fração rica em proteínas (PRF) de folhas de M. oleifera foram investigados quanto a presença de metabólitos secundários e proteínas antinutricionais (inibidor de tripsina e lectina), citotoxicidade para linfócitos humanos, atividade hemolítica, toxicidade oral aguda em camundongos e genotoxicidade. Adicionalmente, PRF foi investigada quanto à toxicidade oral subaguda em ratos. Os flavonoides rutina e vixetina e inibidor de tripsina foram detectados em LE (0,12g%, 0,01g% e 55,38U/mg, respectivamente) e em PRF (0,04g%, 0,05g% e 87,89U/mg, respectivamente), enquanto lectina foi detectada apenas em PRF (2,5 título -1 /proteína mg/mL). LE e PRF não foram tóxicas para os linfócitos e não apresentaram atividade hemolítica. Os animais tratados com LE e PRF (2.000 mg/kg) apresentaram mudança comportamental apenas na primeira hora após os tratamentos e parâmetros hematológicos semelhantes aos animais do grupo não tratado. Aumento significativo nos níveis séricos de alanina aminotransferase (ALT) e discreta infiltração leucocitária com vacuolização citoplasmática nos hepatócitos foram detectados apenas nos animais tratados com LE. As preparações não foram genotóxicas ou mutagênicas. O ensaio de toxicidade oral subaguda revelou que os animais tratados com PRF nas concentrações de 20 mg/kg/dia, 40 mg/kg/dia e 80 mg/kg/dia não apresentaram alterações comportamentais. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos, assim como hemostasia e eletrólitos, foram semelhantes aos do grupo não tratado. Não foram observadas alteração histopatológicas no fígado, rins, baço, pulmão e coração. PRF alterou o biomarcador de estresse oxidativo TBARS em relação ao grupo não tratado, enquanto os níveis de Carbonil não foram alterados. Os tratamentos nas concentrações de 40 e 80 mg/kg/dia resultaram em aumento da atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa-S-transferase (GST) enquanto o tratamento na concentração de 20 mg/kg/dia levou a aumento nos níveis de sufídrilas. PFR também modulou a concentração de moléculas antioxidantes não enzimáticas (glutationa e glutationa dissulfeto) em todas as concentrações testadas. Análise de metabolômica por RMN- 1 H revelou a presença de 43 metabólitos polares em animais tratados e não tratados com PRF e que PRF promoveu diminuição de glicose e aumento de xantina e aminoácidos essenciais no fígado. Os estudos revelaram que as preparações proteicas testadas contem inibidor de tripsina, lectina e flavonoides. LE e PRF não foram citotóxicas, hemolíticas ou genotóxicas e não apresentaram toxicidade oral aguda. Adicionalmente, PRF não apresentou toxicidade subaguda, elevou a atividade de enzimas antioxidantes hepáticas, promoveu dano oxidativo, diminuiu o balanço redox, apresentou efeito hipoglicemiante e elevou a quantidade de intermediários do ciclo de Krebs. 

Cryptococcus é um gênero de fungos leveduriformes que possuem como principal característica fenotípica a presença de uma cápsula polissacarídica que envolve sua estrutura celular. Dentre as espécies desse gênero, Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são patógenos oportunistas capazes de causar a criptococose, doença infecciosa invasiva que atinge o sistema nervoso central, causando uma meningoencefalite fúngica com alta mortalidade. Biofilmes são comunidades microbianas que causam diversos problemas a saúde pública, tanto por sua alta capacidade de aderência aos tecidos vivos e dispositivos médicos, quanto por sua alta resistência a antibióticos usados na clinica medica. Lectinas são proteínas que se ligam reversivelmente a carboidratos, possuindo um amplo espectro de aplicações biológicas, incluindo ação antimicrobiana. As lectinas da sarcotesta de Punica granatum (PgTeL) e de folíololos de Calliandra surinamensis (CasuL) apresentaram potencial antimicrobiano e antibiofilme em estudos anteriores. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antifúngico e antibiofilme de PgTeL e CasuL contra Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, bem como seu potencial de inibir e erradicar biofilmes multiespécie e multicepas de isolados de Staphylococcus aureus e Staphylococcus saprophyticus. CasuL não apresentou atividade antifúngica e nem antibiofilme frente às cepas de Cryptococcus, porém PgTeL apresentou atividade fungistática contra a cepa B3501 de C. neoformans (Sorotipo D), com uma concentração mínima inibitória de 172 μg/mL. PgTeL também foi capaz de inibir a formação de biofilme por B3501, reduzindo significativamente a biomassa e a atividade metabolica no biofilme. PgTeL também foi capaz de erradicar significativamente o biofilme pré-formado da cepa B3501. A ação fungistática e antibiofilme de PgTeL sobre B3501 puderam ser também observadas por microscopia eletrônica de varredura. PgTeL, contudo, não foi capaz de alterar o tamanho relativo da cápsula de B3501 de C. neoformans. Em relação aos biofilmes multiespécie e multicepas de Staphylococcus, CasuL isoladamente não apresentou capacidade de inibir a formação de biofilme por nenhuma das testadas; porém, quando em conjunto com o antibiótico ceftazidima, CasuL inibiu significativamente a formação de biofilme multicepa por S. aureus UFPEDA-670 + MRSA, e por S. aureus UFPEDA-670 + 8325-4. Em conclusão, foram identificados o potencial antifúngico de PgTeL contra a cepa B3501 de C. neoformans sobre a replicação dessa levedura e a formação e manutenção de biofilmes, bem como o potencial de CasuL em conjunto com antibióticos em inibir a formação de biofilme multicepas de S. aureus.

A peste é uma zoonose de roedores silvestres, transmitida por pulgas, que pode infectar outros mamíferos, inclusive humanos. Pela gravidade da doença e sua rápida evolução a peste pode gerar emergências de saúde pública de interesse internacional. Os avanços tecnológicos e científicos ainda não foram suficientes para eliminar os focos naturais persistentes em numerosos países. Os períodos de silêncio, caracterizados por ausência ou ocorrência de raros casos humanos, podem gerar a falsa impressão da sua eliminação ou erradicação, mas ela pode reaparecer após décadas de aparente controle. Globalmente os fatores que mantêm a enzootia e determinam o desencadeamento das epizootias ainda não estão suficientemente esclarecidos. No estado de Pernambuco a zoonose introduzida em 1902 apresenta-se silente desde a década de 1980. Para definição da dinâmica da infecção pestosa e construção dos cenários futuros de risco para sua transmissão foram construídos bancos de dados contendo informações sobre os casos humanos, reservatórios, vetores e dados ambientais utilizando dados primários e secundários disponíveis no Serviço de Referencia Nacional de Peste da FIOCRUZ PE que foram analisados utilizando ferramentas de geoprocessamento. O uso dessas ferramentas aplicado aos casos humanos usando o município de Exu, localizado no foco de peste da Chapada do Araripe (Pernambuco), como área de estudo de caso no período de 1945-1976 permitiu evidenciar a transição da infecção da área urbana para a silvestre e o ressurgimento dos casos após um período de quiescência, independente da reintrodução a partir de outros focos ativos. Os resultados das análises sobre a ocorrência e distribuição geográfica de roedores hospedeiros e de pulgas vetores nas áreas de peste brasileiras revelaram diferenças na composição das faunas rodentia e sifonapteriana no foco da Serra dos Órgãos (RJ) região sudeste, e no nordeste do Brasil que são atribuídas aos diferentes biomas nas duas regiões. Importante flutuação nas populações de roedores foi observada após um período epidêmico no município de Exu, com redução da fauna silvestre representada principalmente por Necromys lasiurus e aumento da espécie comensal Rattus rattus. Os resultados confirmam a espécie N. lasiurus como responsável por epidemias de peste n área focal de transmissão no nordeste do Brasil, uma vez que a redução na abundância desta espécie ao longo do tempo coincide com o período de quiescência da doença. Além disso, o aumento da abundância de R. rattus diretamente relacionado ao processo de urbanização de pequenas localidades rurais não produziu epidemias de peste como se poderia esperar, especialmente considerando sua proximidade com os humanos favorecendo a propagação da peste e outras doenças transmitidas por esses roedores. Nossa análise contribuiu para confirmar o papel das espécies silvestres como hospedeiros amplificadores da peste e dos ratos comensais (Rattus rattus) como hospedeiros preservadores no período quiescente naquela área de infecção de transmissão. A ocorrência de reservatórios naturais e vetores competentes evidencia o potencial de manutenção e transmissão da bactéria e, consequentemente, a necessidade de manutenção e aprimoramento do programa de vigilância da peste.

A levedura Dekkera bruxellensis, embora ainda fortemente associada a eventos de contaminação nos processos de produção de etanol combustível e de vinho, tem sido apresentada recentemente com grande potencial industrial. Vários estudos caracterizaram metabolicamente esta levedura e observaram fatores relacionados a esse papel como contaminante, bem como sua benéfica função em outros processos industriais, como é o caso da fermentação espontânea para produção da cerveja Belga Lambic. Essa levedura adquiriu características primordiais para seu estabelecimento e manutenção nas dornas de fermentação alcoólica, como a capacidade em suportar o elevado teor alcoólico do processo e a habilidade diferencial em assimilar o nitrato como fonte de nitrogênio. Para seguir caracterizando o metabolismo respiro-fermentativo de D. bruxellensis, o objetivo do presente estudo foi investigar fatores fisiogenômicos associados à produção de acetato e etanol, com ênfase no desvio da produção de acetil-CoA citosólico (o chamado Pdh bypass). Os resultados foram obtidos a partir de medidas fisiológicas e de expressão gênica em cultivos em meio sintético definido com diferentes combinações de fontes de carbono e nitrogênio, e na presença ou ausência do inibidor bioquímico da acetaldeído desidrogenase, chamado dissulfiram (DSF). Em geral, a presença de DSF diminuiu o crescimento da levedura em várias condições de cultivo, enquanto promoveu aumento na eficiência fermentativa da levedura. A eficiência na conversão em etanol na presença do inibidor ultrapassou 96% em alguns casos, representando incremento de 33% em relação à condição de referência. Esse resultado fisiológico foi acompanhado por um nível geral de aumento da expressão gênica relativa dos genes alvos (PFK1, FBP1, PDC1, ADH1, ALD3, ALD5, IDH1, SDH1 e ATP1). Os dados indicam, por exemplo, que o acetato pode fluir da mitocôndria e restabelecer as necessidades citosólicas quando a enzima acetaldeído desidrogenase (Ald3p) é bloqueada. Diferente do seu epímero glicose, a galactose foi metabolizada exclusivamente pela via respiratória em D. bruxellensis GDB 248 e a utilização dessa fonte de carbono na presença de nitrato indica que o desvio metabólico da produção de acetil-CoA (Pdh bypass) é o principal caminho nesta levedura para o aporte de equivalentes redutores NAPDH para a redução do nitrato a amônio. Além disso, também foi identificado que o antioxidante N-acetilcisteína restaura os crescimentos de D. bruxellensis frente aos efeitos metabólicos exercidos pelo DSF. Adicionalmente, a eficiência fermentativa de D. bruxellensis aumenta quando a sacarose é utilizada como fonte única de carbono, independentemente da fonte de nitrogênio. Possivelmente a frutose liberada de sua hidrólise deve estar exercendo um efeito regulatório importante no metabolismo da levedura, principalmente no desvio do carbono pela via das pentoses fosfato. Outros aspectos genéticos e fisiológicos de D. bruxellensis são discutidos e contribuem para o entendimento de fatores diferenciais para a manutenção industrial e capacidade fermentativa desse microrganismo

O presente trabalho caracterizou os efeitos da superexperessão de dois genes WRKY de Vigna unguiculata, VuWRKY21 e VuWRKY87, sob condições de estresse salino em plantas transgências de Arabisopsis, eos efeitos da superexpressão do gene VuWRKY21 em Arabidopsis após déficit hídrico (DH). Após estresse salino, as linhagens VuWRKY21-OE ou VuWRKY87-OE apresentaram modulação positiva por qPCR de seis genes envolvidos nas vias de sinalização em resposta ao estress em Arabidopsis, incluindo AtP5CS1, AtNHX1, AtRD29A, AtSOS3, AtSOS2 e AtSOS1. Adicionalmente, as linhagens transgênicas apresentaram menor teor de H2O2 e maiores teores de SOD e CAT nos tempos iniciais do estresse. Plantas VuWRKY21-OE e plantas selvagens (WT), foram submetidas ao estresse por DH, considerando-se três grupos: i) controle, ii) reidratado, ii) tratado. Foram avaliados parâmetros fisiológicos e bioquímicos. As plantas transformadas apresentaram maiores médias de NF, DR e PR, assim como maior atividade de CAT (60 % e 120%, nos grupos DH e reidratado, respectivamente) e da SOD (70%, após reidratação) em relação às plantas WT. Plantas transformadas também mostraram um teor de proteínas totais duas vezes maior na condição DH. Por outro lado, os teores de H2O2 foram 20% superiores nas plantas WT em ambas as condições. Esses resultados sugerem que a superexpressão de ambos os genes VuWRKY em Arabidopsis ativou a expressão de genes envolvidos em mecanismos de tolerância à salinidade. Além disso, os resultados demonstraram uma melhoria nos parâmetros fisiológicos e bioquímicos de Arabidopsis superexpressando o gene VuWRKY21, constatando a importância desse gene nos mecanismos de tolerância ao déficit hídrico.

O crescente desenvolvimento industrial e a rápida urbanização em regiões próximas de recursos hídricos têm contribuído de maneira alarmante com a introdução de compostos químicos prejudiciais à saúde ambiental e das espécies. Nas últimas décadas, os ecossistemas aquáticos têm sido alterados de maneira significativa em função de múltiplos impactos ambientais advindos do lançamento de grandes quantidades de efluentes sem tratamento adequado e/ou com intensidade, em concentração e características discordantes dos padrões estabelecidos em legislação. No nordeste do Brasil, os grandes centros urbanos localizam-se nas regiões costeiras próximos a ambientes estuarinos. Como consequência, estes ambientes têm sofrido uma grande intervenção ambiental, decorrente da descarga de efluentes produzidos pela intensa atividade humana. Esses compostos podem induzir nas espécies que utilizam os estuários de forma transitória ou definitiva uma série de alterações genéticas, bioquímicas e histológicas, podendo assim comprometer a adaptabilidade e sobrevivência dessas espécies neste ecossistema. O objetivo deste trabalho foi realizar o biomonitoramento de seis sistemas estuarinos da região nordeste do Brasil, por meio de marcadores enzimáticos, histológicos e genotóxicos da espécie M. curema. As coletas ocorreram de forma semestral (Inverno – Verão) durante os anos de 2019 e 2020 em seis sistemas estuarinos distribuídos nos estados da Paraíba, Pernambuco e Alagoas. Para os dados de genotoxicidade amostra controle foi utilizada da estação ecológica da Juréia-Itatins (Litoral Sul do Estado de São Paulo) conforme dados da literatura. Em cada um dos estuários uma média de 8 espécimes de M. curema foram capturados, das quais foi coletado sangue para realização dos ensaios genotóxicos (Teste do Micronúcleo – MN e Ensaio Cometa – EC). Em seguida foram retirados tecidos (cérebro) para análise das atividades das enzimas colinesterases (ChEs). Concomitantemente tecidos das brânquias e fígado foram retirados para analise histológica. Os resultados das atividades realizadas demonstram que os estuários do Nordeste do Brasil encontram-se fortemente impactados e que as Áreas de Proteção Ambiental tem sido pouco efetivas na proteção da biodiversidade do ecossistema estuarino. Foi observado efeito da sazonalidade nos padrões de contaminação dos estuários, indicando que as diferentes dinâmicas de fluxo hídrico entre o inverno e o verão exercem efeito direto na expressão dos biomarcadores.  

A migrânea, doença neurológica mais prevalente no mundo, é caracterizada por crises de dor de cabeça unilateral e latejante, com sensibilidade visual, auditiva e ao movimento. Uma das principais causas de incapacidade em todo o mundo, a migrânea gera gastos sanitários anuais estimados em mais de US$ 20 bilhões. Várias moléculas estão envolvidas nas crises de migrânea, gerando a ativação de algumas estruturas, particularmente da dura-máter. As moléculas que estão envolvidas nas crises de migrânea podem estar circulando no LCR, dada sua circulação por todas as estruturas do sistema nervoso central. Com isso, objetivou-se mensurar as concentrações de CGRP, ocitocina e óxido nítrico no LCR de pacientes que iriam passar pela punção de lombar para procedimentos de rotina. Os grupos foram divididos em pacientes com migrânea e do grupo controle, de ambos os sexos. As amostras foram coletadas no Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco. A quantificação das moléculas foi realizada através de Elisa, radioimunoensaio e quimiluminescência. Não foram observadas diferenças significativas nos níveis das moléculas analisadas entre homens e mulheres com migrânea. Vários fatores estão envolvidos na migrânea, embora o NO e CGRP estejam envolvidos no mecanismo de ativação da migrânea, os níveis dessas moléculas não foram significativamente diferentes no LCR, assim como os níveis de ocitocina, que atua como modulador da dor.

Microrganismos causadores de doenças zoonóticas, infecções humanas e síndromes alimentares, estão entre os principais alvos de estudos que utilizam a abordagem One health. A alta prevalência de cepas de Escherichia coli como agente colonizador ou patogênico no ambiente em geral e o impacto dessa espécie bacteriana na saúde humana, estão associados à importância desse microrganismo como biomarcador da disseminação da Resistência Antimicrobiana (RAM). Além disso, este microrganismo possui alta eficiência na regulação e aquisição de genes que codificam mecanismos de resistência aos antimicrobianos, principalmente sob a pressão seletiva desencadeada pelo uso de antimicrobianos, bem como alta prevalência de resistência aos betalactâmicos e polimixinas. O presente estudo apresentou duas abordagens: 1. revisão do estado-da-arte sobre a disseminação de cepas resistentes à polimixina em diferentes espécimes biológicos e a emergência do gene mcr no Brasil; e 2. análise experimental que avaliou a dinâmica de dispersão de bactérias resistentes de E. coli no ambiente (amostras de leite bovino cru), na saúde humana (isolados clínicos de infecções hospitalares) e em animais (aves da espécie Caracara plancus), e caracterização do fenótipo e genótipo desses microrganismos. Neste estudo foram obtidos 188 isolados bacterianos provenientes de 87 swabs obtidos da cloaca de C. plancus e de 20 amostras de leite cru, além de 26 isolados clínicos de origem hospitalar. Os microrganismos foram obtidos dos estados da Bahia (amostras de C. plancus) e Paraíba (amostras de leite e isolados clínicos) durante os anos de 2019, 2021 e 2022. As bactérias foram caracterizadas quanto a fermentação de lactose e morfologia das colônias em meio MacConkey e identificadas molecularmente pela Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time Of Flight (MALDI-TOF). Após esta triagem, colônias da espécie foram submetidas ao teste de disco-difusão em ágar, de acordo com o protocolo do Clinical Laboratory and Stanrd Institute (CLSI). Posteriormente foi realizada a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para detecção de 26 genes de betalactamases e do gene de resistência à colistina mediada por plásmideo. A Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus – PCR (ERIC-PCR) foi utilizada para determinar o perfil clonal dos isolados. Por fim, foram aplicados e comparados os métodos de coloração com Cristal Violenta (CV) e crescimento em meio vermelho-congo para analisar a capacidade de produção de biofilme. Como primeiro resultado, foram obtidos dois
artigos de revisão contemplando os temas: “Disseminação da resistência à polimixina no ambiente” e “Bacilos Gram-Negativos carreando o gene mcr no Brasil”. Como resultados experimentais iniciais foram obtidos 104 microrganismos de C. plancus e 84 nas amostras de leite cru, nos quais E. coli representou 37,5% (n=39) e 13,4% (n=11), respectivamente. Entre as cepas de E. coli de aves 15,4% (6/39) foram produtoras de Betalactamases de Espectro Estendido (ESBL), em leite 36,3% (4/11) e nos isolados clínicos 23.1% (6/26). O gene bla CTX-M-1/2 foi o mais prevalente entre as amostras de diferentes origens, apresentando incidência de 18% (7/39), 18,1% (2/11) e 23,1% (6/26) nas amostras de C. plancus, leite cru e clínicas, respectivamente. É importante destacar que o estudo reporta o primeiro caso de E. coli portadora de bla KPC com susceptibilidade
aos carbapenéns em amostras de origem animal e do determinante genético bla NDM em isolados do estado da Paraíba, Brasil. Não foram detectadas cepas portadoras do gene mcr-1 em nenhuma das amostras investigadas. A proporção de cepas produtora de biofilme foi semelhante entre os isolados clínicos (73,1%, n=19) e de aves (74,3%, n=39), no entanto apresentou incidência menor entre as cepas de leite cru (45,4%, n=5). O resultado da genotipagem demonstrou a disseminação de cepas portadoras de genes de resistência aos betalactâmicos em diferentes aves, em diferentes amostras de leite (provenientes de tanques distintos) e em diferentes pacientes no ambiente hospitalar. Este estudo identificou a dispersão de alguns determinantes de resistência em populações de E. coli nos estados da Bahia e Paraíba, e revelou a importância do monitoramento dessa bactéria na disseminação da RAM nos locais investigados. Os dados obtidos são preocupantes e demonstram a necessidade de pesquisas adicionais baseadas nessa perspectiva One Health para o enfrentamento a RAM, principalmente, relacionada à disseminação de cepas de E. coli produtoras de CTX-M em animais, alimentos e isolados clínicos humanos.

A compreensão sobre a constituição e organização dos cariótipos de plantas têm auxiliado estudos evolutivos, sistemáticos e filogenéticos desses organismos. O gênero Vigna Savi (Leguminosae) reúne, em cinco subgêneros (Vigna, Haydonia, Plectrotropis, Lasiospron e Ceratotropis), cerca de 150 espécies, entre as quais destacam-se V. unguiculata subsp. unguiculata (feijão-caupi) e V. angularis (feijão- azuki) com grande importância socioeconômica mundial e número cromossômico constante (2n = 22) na maioria das espécies. O presente trabalho visou compreender a evolução cariotípica de representantes dos cinco subgêneros de Vigna, observando-se a macrossintenia cromossômica e a dinâmica de seus genomas. Para isso, foram usadas abordagens citomoleculares, tais como: medição do conteúdo de DNA (13 taxa), bandeamento por fluorocromos CMA/DAPI, FISH para localização do DNAr 35S e 5S (oito taxa), BAC-FISH (três taxa), além de oligo-FISH barcode (oito taxa) para identificação individual dos cromossomos, utilizando sondas desenhadas a partir de V. unguiculata subsp. unguiculata. Adicionalmente, foi realizada pintura cromossômica (oligopainting), utilizando sondas cromossomo-específicas de Phaseolus vulgaris (cromossomso Pv2 e Pv3, seis espécies) bem como análise de blocos genômicos do cariótipo ancestral da tribo Phaseoleae (APK) em espécies de três espécies de Vigna com genomas sequenciados e montados. Dados do tamanho do genoma por citometria de fluxo, e um compilado de dados de 25 espécies, disponível na literatura, de número e posição de sítios de DNAr e conteúdo de DNA foram utilizados em uma análise filogenética. Nossos resultados demonstraram que a maioria das bandas CMA+ corresponderam aos sítios de DNAr 35S. Enquanto os sítios de DNAr 5S permaneceram conservados (um a dois pares), os de DNAr 35S variaram em número (um a sete pares) e posição (proximal e terminal) e essa variação esteve correlacionada positivamente com o conteúdo de DNA (1C). A abordagem filogenética desses dados indicou uma distribuição aleatória do DNAr, porém suportou a hipótese do cromossomo 6 (identificado por BAC-FISH) como ancestral para o DNAr 35S, no gênero. Adicionalmente, o barcode de V. unguiculata permitiu identificar os 11 pares ortólogos nas espécies analisadas, exceto em V. vexillata, bem como confirmou rearranjos previamente identificados por BAC-FISH e identificou quebras de sintenia e de colinearidade nos ortólogos, confirmadas pelas análises dos blocos genômicos. A pintura cromossômica revelou macrossintenia com os ortólogos 2 e 3 sobretudo entre as espécies dos subgêneros Vigna e Ceratotropis. As quebras na sintenia identificadas entre os diferentes subgêneros podem estar relacionadas à origem parafilética do gênero, tendo as espécies dentro dos subgêneros características mais conservadas entre si. Vigna vexillata foi a espécie mais divergente, apresentando quebras de macrossintenia não observadas nas demais espécies de Vigna, não sendo possível identificar todos os ortólogos, o que pode estar relacionado ao fato de ela ser pantropical e pertencer a um complexo de espécies. Análises mais detalhadas são necessárias para identificar o cariótipo de V. vexillata.

O linfedema de membro inferior é uma doença que afeta milhares de pessoas em todo o mundo. Seu estabelecimento nos indivíduos afetados consiste no mau funcionamento do sistema linfático no processo de regulação e homeostase do líquido intersticial, o que causa o desequilíbrio de todo o sistema circulatório, promovendo o extravasamento e acúmulo nos tecidos superficiais dos membros inferiores. E suas complicações clínicas vão desde problemas bioquímicos até físicos, e os sintomas podem ser agravados pelo desenvolvimento de outras doenças oportunistas e comorbidades graves como hipertensão, diabetes, obesidade e depressão, potencializando o agravamento da doença. Com o comprometimento da deambulação e dificuldade para realizar atividades básicas do dia a dia, os afetados pela doença também sofrem com o isolamento social que é dificultado pelo comprometimento da qualidade de vida. A Terapia Complexa Descongestiva é um tipo de tratamento considerado padrão ouro pela Sociedade Internacional e Linfologia, para o tratamento de membros afetados pelo linfedema. Inicialmente utilizada em mulheres pós mastectomizadas acometidas com linfedema de membro superior, a terapia passou a ser adaptada para os membros inferiores, na intenção de promover uma melhora significativa na reabilitação de pacientes nessa condição. Como uma proposta de tratamento bastante difundida atualmente e que tem apresentado efeitos físicos significativos na qualidade de vida dos pacientes, a TCD está sendo proposta como alvo de avaliação dos seus efeitos bioquímicos e celulares, uma vez que os estudos associados à investigação dessa proposta de intervenção ainda são muito escassos na comunidade científica. Pensando na necessidade de intervenções terapêuticas economicamente acessíveis às pessoas afetadas pela doença, a Sociedade Internacional de Linfologia sugeriu em 2018, que a comunidade científica investigasse os aspectos celulares e moleculares promovidos pela TCD, nos pacientes afetados com a doença. Diante disso, esse estudo propôs uma investigação a fim de confirmar os efeitos e benefícios gerados pela TCD a nível celular e molecular em pacientes atendidos pelo SRNF/FIOCRUZ-PE. Foram feitas análises microbiológicas das lesões e feridas dos membros inferiores afetados, bem como a coleta e análise hematológica, bioquímica e celular (imunofenotipagem e dosagem de citocinas) antes, durante e após as 22 (vinte e duas) sessões da TCD em todos os pacientes incluídos no programa. Os resultados demonstraram que houve melhora na cicatrização das lesões ao longo da TCD e uma importante redução dos microrganismos isolados antes da terapia, que já não foram mais isolados ao final dela. Houve também redução importante da população de células TCD4+, acompanhados de resposta pró-inflamatórias, com o aumento de IFN-γ+. Além da redução do edema nos membros inferiores, a Terapia Complexa Descongestiva demonstrou melhora significativa das lesões e a redução da resposta inflamatória nos pacientes tratados.

A cana-de-açúcar (Saccharum spp.) é uma das plantas mais cultivadas no mundo devido ao seu elevado rendimento em biomassa e concentração de sacarose nos colmos, sendo o Brasil o maior produtor. Entretanto, diversos fatores bióticos afetam sua produtividade, entre eles a bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), agente causal do raquitismo-da-soqueira (RSD). Portanto, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil proteômico caulinar diferencial de cana-de-açúcar (var. RB867515) infectada com Lxx. As proteínas totais dos colmos inoculados ou não com Lxx foram extraídas utilizando o método fenólico, quantificadas pelo método de Bradford e submetidas à eletroforese uni e bidimensional, seguindo-se a análise por espectrometria de massas. Um total de 76 proteínas diferencialmente acumuladas (DAPs) de ambos os tratamentos foram identificadas, presumivelmente, permitindo associá-las a diversos processos funcionais, tais como modificação de proteínas, resposta ao estresse, processamento de mRNA, biossíntese, desenvolvimento, metabolismo de nitrogênio, metabolismo de carboidratos, transporte e outros. Os dados proteômicos demonstraram um maior acúmulo de proteínas relacionadas à defesa nas plantas infectadas, incluindo uma proteína com domínio NB-ARC que está envolvida no reconhecimento de efetores do fitopatógeno e que desencadeia uma resposta hipersensitiva (HR) no hospedeiro. A infecção com Lxx promove o acúmulo de danos ao DNA, porém, algumas proteínas envolvidas na resposta a esses danos, tais como a PARP1 e a AGO10b são induzidas, e parecem integrar mecanismos de defesa ativados. Por outro lado, a indução da TPX2 e inibição da MAP3Kε1 na cana-de-açúcar em interação com Lxx sugerem que a presença da bactéria interfere no ciclo celular vegetal. Os resultados apresentados contribuem para o entendimento dos mecanismos moleculares envolvidos nesse patossistema e podem auxiliar os programas de melhoramento genético para resistência ao RSD.

O transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) trouxe avanços significativos para o tratamento de certas patologias hematológicas, mais notadamente as leucemias e as síndromes mielodisplásicas, possibilitando desde a remissão de casos até a cura. Este procedimento tem como finalidade a substituição da hematopoiese do receptor a partir de células do doador, proporcionando uma medula óssea saudável que irá desenvolver células sanguíneas livres de células tumorais. Imediatamente após a realização do TCTH ocorre um quimerismo misto, isto é, coexistência de células sanguíneas características do doador e do receptor do transplante. Análises precoces dos padrões de quimerismo doador/receptor após o TCTH permitem avaliar o grau de sucesso do transplante. A análise quimérica pode ser realizada em amostras de sangue total ou medula óssea ou sangue, usualmente coletadas em tubo contendo ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA). O STR-PCR é considerada a técnica-ouro para seguimento para Quimerismo de Medula Óssea (QMO). O objeto principal do estudo foi validar metodologia técnico-científica para análise e seguimento do TCTH a partir da coleta de amostras sanguíneas em cartões FTA® e do uso de técnicas de PCR-STR e, em paralelo, desenvolver Plataforma de Análise do Quimerismo da Medula Óssea. Inicialmente, os cartões FTA® foram idealizados para coletar amostras biológicas de referência de criminosos por permitir que o DNA seja armazenado em temperatura ambiente por anos, sem comprometimento da sua qualidade. Foram confrontados os resultados do TCTH obtidos a partir da extração de DNA de amostras de sangue total coletadas em tubo contendo anticoagulante EDTA e da amplificação direta do DNA de discos circulares de Cartões FTA®. De acordo com os resultados obtidos, a partir de 12 dias após o TCTH, não houve diferença estatisticamente significativa entre as metodologias. Desta forma, a coleta de sangue total em cartões FTA® pode ser usada para análises de seguimento de Quimerismo de Medula Óssea A Plataforma de Análise e Cálculo de Quimerismo de Medula Óssea (KimerCalcBR), desenvolvida e validada no presente trabalho, contribui para a reduzir o tempo de entrega do exame genético quimérico e fornece cálculos quiméricos precisos, podendo servir como ferramenta diagnóstica auxiliar para tomada de decisões de condutas terapêuticas.

O mosquito Aedes aegypti é altamente antropofílico presente no ambiente domiciliar, sendo um dos principais vetores de arboviroses graves como dengue, chikungunya e zika. O controle desse vetor é baseado no uso de inseticidas formulados com substâncias de origem natural ou sintética que são utilizadas para diminuir a incidência de insetos em diferentes fases do seu ciclo de vida. Na literatura, os óleos essenciais e fungos entomopatogênicos são descritos como alternativas naturais para o controle do Ae. aegypti. Nesta Dissertação investigamos a susceptibilidade das larvas do Ae. aegypti a formulações contendo o OE da Eugenia brejoensis e conídios do Metarhizium anisopliae. A E. brejoensis é uma planta da Caatinga e seu OE foi caracterizado por GC/MS, apresentando o δ-cadinene (17,6%), E-caryophyllene (16,3%), Epi-α-muurolol (9,3%), bicyclogermacrene (8,1%), α-cadinol (7,3%) e Spathulenol (6,6%) como compostos majoritários. O OE apresenta LC50 de 200,4±0,4 ppm e LC90 662,6±0,5 ppm contra as larvas de Ae. aegypti. Todas as linhagens de M. anisopliae testadas apresentaram atividade larvicida nos mosquitos, com destaque para a Linhagem E6 com TL50 1,5 dias (Concentração 1X108). Já nos ensaios de atividade larvicida com formulações contento ambos o OE e o fungo (Eb+Ma) (100 ppm de OE da E. brejoensis e 1X106 de conídios de M.anisopliae) atingem TL50 1,5 dias. As formulações Eb+Ma apresentaram menores curvas de sobrevivência e tempo letal em relação aos dois componentes isoladamente.Portanto, propomos formulações Eb+Ma para o desenvolvimento de controle biológico integrado de larvas de Ae. aegypti.