Banca de DEFESA: JOÃO VICTOR ARAÚJO DE LIMA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOÃO VICTOR ARAÚJO DE LIMA
DATA : 29/02/2024
HORA: 10:00
LOCAL: Plataforma Google Meet
TÍTULO:

Desenvolvimento de nanobiossensor óptico baseado em ácido fenilborônico para detecção de carboidratos

PALAVRAS-CHAVES:

Nanofotônica; Espectroscopia; Supressão de fluorescência; Bioanalítica; Galactosemia.

PÁGINAS: 61
RESUMO:

Os pontos quânticos (PQs) podem ser utilizados como nanossondas fluorescentes com especificidade bioquímica, devido a possibilidade de conjugação com diversos tipos de biomoléculas. Dentre estas, a conjugação com o ácido 3-mercaptofenilborônico (AMFB), um organoborano que se liga à dióis, pode resultar em uma nanoferramenta capaz de reconhecer e identificar carboidratos de relevância biológica e industrial. Em razão disso, este trabalho teve como objetivo avaliar a interação de PQs@AMFB com diferentes carboidratos, bem como explorar o potencial de sensoriamento desse nanossistema. Para isto, PQs de CdTe funcionalizados com ácido mercaptosuccínico (AMS) foram sintetizados e conjugados de forma simples e direta com o AMFB. O êxito da conjugação foi avaliado por citometria de fluxo através da capacidade de ligação do PQs@AMFB ao ácido siálico (AS), presentes na superfície de eritrócitos com 0, 7, 15 e 21 dias, após coleta em EDTA e armazenados à 4 ºC. Após confirmar a conjugação, o nanosistema foi incubado com 200 mM de diferentes carboidratos (glicose, galactose, xilose e sacarose) por 30 min em pH 7.4. Em seguida, a nanoplataforma foi incubada com diferentes concentrações de galactose (100 - 600 mM). As flutuações na intensidade de fluorescência foram avaliadas por espectroscopia de emissão e por leitura da emissão em microplaca. Os eritrócitos recém coletados apresentaram marcação de 99,8 ± 0,17%, indicando que o conjugado era capaz de reconhecer o AS. Por outro lado, as células armazenadas por mais de 15 dias apresentaram uma porcentagem inferior, sugerindo que a nanoplataforma PQs@AMFB foi capaz de reconhecer e quantificar o AS. Na presença dos diferentes carboidratos, a galactose promoveu uma supressão da fluorescência maior (~25%) em relação aos outros carboidratos, indicando uma maior afinidade/especificidade da nanossonda por esse monossacarídeo. O LOD e LOQ estimado foram de 51 e 170 mM, respectivamente. Além disso, através do modelo proposto por Stern-Volmer foi possível inferir que a supressão ocorreu linearmente com o aumento da concentração de galactose, sendo considerada dinâmica e resultante das colisões entre a nanossonda fluorescente e o supressor (galactose). Portanto, o PQs@AMFB apresentam um grande potencial biotecnológico, como sondas analítica para detecção rápida e simples de galactose, bem como para outros estudos glicobiológicos.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - FRANCISCO HUMBERTO XAVIER JÚNIOR - UFPB
Externa ao Programa - 1283408 - MARIANA PAOLA CABRERA - nullPresidente - 2364049 - PAULO EUZEBIO CABRAL FILHO