DESENVOLVIMENTO DE NANOIMUNOSSENSOR ELETROQUIÍMICO POINT-OF-CARE PARA DETECÇÃO DO VÍRUS ZIKA
ZIKV, Proteína E, Azul da Prússia, Imunossensor.
A infecção pelo vírus da Zika (ZIKV) surgiu no Brasil em meados de 2015, trazendo agravantes como síndromes neurológicas e congênitas, que configuram grande problema de saúde pública visto que não há vacinas e sua disseminação é pouco controlável. A sintomatologia e estrutura do vírus se assemelham a dos demais flavivírus co-circulantes em regiões endêmicas, como o vírus da dengue (DENV), causando dificuldades no diagnóstico clínico diferencial. A presença de reações cruzadas são bem comuns nos testes disponíveis no mercado e a subnotificação decorrente da falta de um diagnóstico eficaz prejudica os estudos epidemiológicos relacionados com essa infecção. Tendo em vista que o diagnóstico diferencial é algo complexo, a procura por biomarcadores mais específicos e sensíveis se faz necessária. A proteína estrutural de envelope do ZIKV vem sendo aplicada em vacinas e em novos métodos de diagnósticos devido a sua alta atividade imunogênica e a sua composição peculiar, que diminuem a possibilidade de reações cruzadas com DENV e demais flavivírus. Ao se tratar de métodos de diagnóstico rápido, os nanoimunossensores eletroquímicos atendem bem aos requisitos demandados, uma vez que consistem numa tecnologia sensível, de fácil uso e passível de ser utilizada para diagnóstico “point-of-care”. Nesta tese foi desenvolvido um imunossensor eletroquímico com atividade redox intrínseca, formado por um nanocompósito confeccionado a partir da união de nanotubos de carbono (CNT), quitosana (CS) e azul da Prússia (PB), que foi depositado sobre um eletrodo impresso de carbono. O azul da prússia tem sido bastante usado para a construção de superfícies eletrocatalíticas, devido principalmente a sua boa estabilidade química e reversibilidade. Nos sensores eletroquímicos, os CNT aumentam a área superficial e transferência eletrônica A quitosana torna o nanocompósito mais biocompatível e estável em diferentes potenciais. Para as medidas analíticas no nanoimunossensor, foi utilizada a técnica de voltametria cíclica em ausência de sonda redox, utilizando uma janela de potencial entre - 0,4 e 0,6 V com uma taxa de varredura de 50 mV.s -1 . O nanoimunossensor foi capaz de detectar a proteína Envelope do ZIKV em uma faixa linear de 0,25 a 1,75 µg/mL (n = 8, p < 0,01), com um limiar de reação (cutoff) de 0,20 µg/mL. O imunossensor desenvolvido trouxe novas perspectivas em medidas eletroquímicas sem o uso de sonda redox (redox probe-free), e potencial ferramenta para o diagnóstico do vírus Zika, podendo ser utilizado em pronto atendimento para acompanhamento clínico e também em estudos epidemiológicos.