Banca de DEFESA: JOÃO PAULO BARBOSA DE ALMEIDA
Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : JOÃO PAULO BARBOSA DE ALMEIDA
DATA : 02/08/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Defesa remota
TÍTULO:
Desenvolvimento de Biossensores Fluorescentes a base de Pontos Quânticos de Carbono para detecção de doenças e questões de saúde pública
PALAVRAS-CHAVES:
Pontos quânticos de carbono, Hipoclorito de sódio; Método baseado em imagem digital fluorescente, Biossensores; L-Cisteína; Sonda da Zika
PÁGINAS: 134
RESUMO:
Pontos Quânticos de Carbono (CQD) foram sintetizados via pirólise utilizando ácido cítrico, etilenodiamina e glicerol como precursores, para aplicações biológicas como a detecção do aminoácido L-Cisteína e desenvolvimento de um biossensor para identificação do vírus da Zika e aplicações em tapetes sanitizantes para análise da eficácia da ação microbiocida do NaClO no combate aos patógenos, incluindo o vírus do SARS-CoV-2 (COVID-19). Foram realizadas caracterizações dos CQDs por FTIR, UV-Vis, espectrofluorimetria, TG, MEV, DRX, EDS, AFM e Potencial Zeta. Para fins analítico, a análise da fluorescência foi realizado pelo método FDIB (Método Baseado em Imagem Digital de Fluorescência) irradiada com LED-UV com emissão máxima em 350 nm. Foram realizados diversos testes com as nanopartículas de carbono como o pH, concentração dos CQDs e estabilidade da fluorescência emitida. O efeito quenching da fluorescência dos CQDs foi empregado para quantificar a concentração do hipoclorito, bem como verificar presença de interações covalentes entre os grupos -COOH dos CQDs e -NH2 das moléculas biológicas de L-Cisteína e o primer do vírus da Zika. Para o monitoramento do hipoclorito, o método FDIB resultou em uma faixa linear de 17,44 µmol L-1 a 90,0 µmol L-1 com um LD de 3,30 µmol L-1. Após 5 h de monitoramento foi evidenciado que após 2,5 h, fazia-se necessário a troca da solução de NaClO no tapete sanitizante para que o mesmo ainda tenha efeito biocida sob patógenos. O espectrofluorímetro foi empregado como o método padrão de referência para o monitoramento de hipoclorito com os dados sendo submetidos aos Teste-T e F para um nível de confiança de 95% com n = 2. Após análise dos dados, não foram obervados diferenças significativas o que comprova a exatidão do método desenvolvido. Quanto aso resultados da aplicação para identificação de L-Cisteína, observou-se formações de ligações covalente entre a L-Cisteína e os CQDs por meio dos resultados com FTIR, cujas bandas vibracionais evidenciam a presença da ligação C-N (amida) formada e principalmente os deslocamentos do espectro para bandas com menores números de onda, característico da presença de enxofre na estrutura dos CQD passivados. Os resultados das análises de fluorescência através do método FDIB demonstram um pequeno efeito quenching que deve ser ainda melhor explorado. Para o desenvolvimento do biossensor com a sonda da Zika acoplada aos CQDs por ligações covalentes foi realizado um estudo da otimização de parâmetros como o pH, concentração da sonda, tempo da reação de ativação dos CQDs com os crosslinkers, e o tempo de reação de bioconjugação dos CQDs com a própria sonda. Ao final desse processo foram realizados testes do biossensor desenvolvido com amostras de soro contento trecho do ssRNA viral, onde foi verificado uma queda na fluorescência de 15,00% ± 4,95% que é uma boa indicação do reconhecimento viral e assim, do funcionamento do biossensor. Com isso, pode-se concluir que os pontos quânticos sintetizados e funcionalizados permitiram uma aplicação sensível, seletiva, principalmente para a aplicação com agentes sanitizantes, e como potencial biossensor para aplicações biológicas, demandando mais estudos para sua completa aplicação, contudo com resultados promissores.
MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - POLIANA MACEDO DOS SANTOS
Presidente - 1314469 - VAGNER BEZERRA DOS SANTOS
Externo à Instituição - WILLIAN TOITO SUAREZ