Banca de QUALIFICAÇÃO: PALLOMA LIMA DE OLIVEIRA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: PALLOMA LIMA DE OLIVEIRA
DATA : 29/08/2023
LOCAL: Video Conferência
TÍTULO:

Desenvolvimento racional de peptídeos anti-SARS-CoV-2: Análise do potencial biológico e citogenotóxico

PALAVRAS-CHAVES:

RAMP. SARS-CoV-2. Antimicrobiano. MTT. CBMN.

PÁGINAS: 74
RESUMO:

Em 2020, a Organização Mundial de Saúde (OMS) declarou a pandemia do novo Coronavírus (COVID-19), cujo agente etiológico é a Síndrome Respiratória Aguda Grave 2 (SARS-CoV-2), sendo registrados mais de 760 milhões de casos e 6,9 milhões de óbitos em nível mundial. Esses dados podem ser associados à rápida disseminação da doença e à escassez de tratamentos adequados, suscitando a necessidade do desenvolvimento de novos agentes terapêuticos. Como alternativa, os Peptídeos Antimicrobianos de Plantas (P-AMPs, Plant Antimicrobial Peptides) têm sido apontados potenciais candidatos como compostos antimicrobianos. Com ênfase em uma possível atividade anti-SARS-Cov-2, o presente trabalho visou avaliar o potencial antimicrobiano e citogenotóxico de um AMP racionalmente modificado (RAMP) inspirado em uma alpha-hairpinin, que foi identificada no transcriptoma de Cenostigma pyramidale (catingueira) (Cp_hp1), modificada e sintetizada por nosso grupo de pesquisa. A atividade antibacteriana do RAMP foi investigada contra cepas de Staphylococcus aureus (ATCC 25923) (Gram positivo), Klebisiella pneumoniae (ATCC 13883) e Acinetobacter baumannii (ATCC 19606) (ambos, Gram negativos), por determinação de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bacteriana Mínima (CBM). A atividade antifúngica foi avaliada contra as cepas Candida albicans (URM 5901), Candida glabrata (URM 4246), Cryptococcus neoformans (B3501) e Cryptococcus gattii (R265). Quanto à atividade anti-SARS-Cov-2, foi analisada a citotoxicidade e efeito antiviral pós-tratamento, mediante ensaio de MTT, método TCID50 e RT-qPCR utilizando o CC20, de sete concentrações seriadas do peptídeo (16 a 1024 µM), frente a células Vero (CCL81). Por fim, a cito-genotoxicidade de sete concentrações seriadas de Cp_hp1 foi investigada mediante o teste de MTT (16 a 1024 µg/mL) e Ensaio de Micronúcleo com Bloqueio de Citocinese (CBMN) (128; 256 e 512 µg/mL), respectivamente, ambos usando linhagem celular Vero (ATCC CRL-1586). O peptídeo Cp_hp1 exibiu CIM para as cepas bacterianas S. aureus, K. pneumoniae e A. baumannii nas concentrações de 256, 1024 e 256 µg/mL, respectivamente.  Mostrou ação antifúngica contra C. albicans e C. glabrata, com ação inibitória e fungicida igual ou superior a 1024 µg/mL, bem como contra as cepas Cr. neoformans e Cr. gattii, com ação inibitória na concentração de 256 µg/mL e 64 µg/mL, respectivamente. Efeito fungicida foi notado para a concentração de 512 µg/mL para ambas as cepas de Cryptococcus. Os valores de CC50 (250,2 µM), CC20 (84,31 µM), IC50 (8,682 µM) e Índice de seletividade (28,80) indicam que Cp_hp1 apresenta uma ação anti-SARS-CoV-2, apresentando efeito inibitório contra o SARS-CoV-2 (CC20 a CC20/4) quando adicionado pós-tratamento. A redução da infecção viral foi acompanhada pela diminuição dos níveis de cópias de RNA, sugerindo que o mecanismo de inibição do SARS-Cov-2 pelo peptídeo ocorre na etapa de replicação. Adicionalmente, observou-se ausência de citotoxicidade para as concentrações igual ou menor que 256 µg/mL. Quanto à genotoxicidade, mediante o CBMN, não foi observado potencial genotóxico em 128 e 256 µg/mL. Em suma, os dados demonstraram que o Cp_hp1 apresenta atividade anti-SARS-Cov-2 e evidenciam potencial antibacteriano e antifúngico frente às cepas estudadas. Esses resultados, associados à ausência de citogenotoxicidade para o modelo estudado, sugerem um potencial promissor para este RAMP como novo agente terapêutico de amplo espectro.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - FLAVIA FIGUEIRA ABURJAILE - UFPE
Presidente - 1257300 - JACIANA DOS SANTOS AGUIAR
Interna - 2380850 - MARIA BETANIA MELO DE OLIVEIRA