A resistência antimicrobiana (RAM) continua sendo um grande problema para a saúde pública mundial. Dentre as bactérias críticas, estão as do grupo ESKAPE, que incluem as Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter cloacae Além da resistência, essas bactérias podem formar biofilme, o que dificulta o tratamento dos pacientes com os antibióticos. Dentre as alternativas terapêuticas destaca-se o estudo com Óleos Essenciais (OEs). O objetivo desse trabalho foi analisar a composição dos OEs de E. pohliana DC. de dois locais do Vale do Catimbau e avaliar suas atividades de Concentração Mínima Inibitória e Bactericida (CMI e CMB), antibiofilme e sinérgica contra isolados ESKAPEs Multidroga e Extensivamente Droga Resistentes (MDRs e XDRs). A análise da composição dos OEs foi feita por GC-MS. Os OEs apresentaram compostos majoritários diferentes: OE II - δ-cadineno (18,82%), Globulol (15,54%), Viridiflorol (11,29%); OE IV - Limoneno (10,79%), γ-cadineno (9,87%) e epi-α-muurolol (9,28%). Em ambos os OEs também foram encontrados (E)-cariofileno (OE II – 9,95% e OE IV – 9,21%) e o Biociclogermacreno (OE II – 9,47% e OE IV – 9,76%). Os OEs apresentaram ação antimicrobiana semelhante, mas com atuações diferentes. Na curva de crescimento, o destaque foi o OE IV. O OE II apresentou melhor ação inibitória para as bactérias MDRs E. faecium (512 µg/mL), S. aureus (2048 µg/mL), e P. aeruginosa (2048 µg/mL) no teste de CMI. O CMB foi de 4096 µg/mL para a maioria dos isolados; no entanto, não houve CMB para K. pneumoniae e E. claoacae. com ambos OEs. Por outro lado, o OE IV apresentou melhor atividade antibiofilme para as Gram-negativas, principalmente E. cloacae com 87,39% de inibição. Em geral, os OEs E. pohliana apresentaram melhor ação antimicrobiana para as bactérias MDRs, com destaque para P. aeruginosa, apresentando ação antimicrobiana em todos os testes realizados. Dessa forma, a E. pohliana poderia ser considera uma planta promissora para futuras aplicações medicinais. Demonstrando também, o potencial biotecnológico de plantas do vale do Catimbau e da Caatinga.

Os pontos quânticos (PQs) podem ser utilizados como nanossondas fluorescentes com especificidade bioquímica, devido a possibilidade de conjugação com diversos tipos de biomoléculas. Dentre estas, a conjugação com o ácido 3-mercaptofenilborônico (AMFB), um organoborano que se liga à dióis, pode resultar em uma nanoferramenta capaz de reconhecer e identificar carboidratos de relevância biológica e industrial. Em razão disso, este trabalho teve como objetivo avaliar a interação de PQs@AMFB com diferentes carboidratos, bem como explorar o potencial de sensoriamento desse nanossistema. Para isto, PQs de CdTe funcionalizados com ácido mercaptosuccínico (AMS) foram sintetizados e conjugados de forma simples e direta com o AMFB. O êxito da conjugação foi avaliado por citometria de fluxo através da capacidade de ligação do PQs@AMFB ao ácido siálico (AS), presentes na superfície de eritrócitos com 0, 7, 15 e 21 dias, após coleta em EDTA e armazenados à 4 ºC. Após confirmar a conjugação, o nanosistema foi incubado com 200 mM de diferentes carboidratos (glicose, galactose, xilose e sacarose) por 30 min em pH 7.4. Em seguida, a nanoplataforma foi incubada com diferentes concentrações de galactose (100 - 600 mM). As flutuações na intensidade de fluorescência foram avaliadas por espectroscopia de emissão e por leitura da emissão em microplaca. Os eritrócitos recém coletados apresentaram marcação de 99,8 ± 0,17%, indicando que o conjugado era capaz de reconhecer o AS. Por outro lado, as células armazenadas por mais de 15 dias apresentaram uma porcentagem inferior, sugerindo que a nanoplataforma PQs@AMFB foi capaz de reconhecer e quantificar o AS. Na presença dos diferentes carboidratos, a galactose promoveu uma supressão da fluorescência maior (~25%) em relação aos outros carboidratos, indicando uma maior afinidade/especificidade da nanossonda por esse monossacarídeo. O LOD e LOQ estimado foram de 51 e 170 mM, respectivamente. Além disso, através do modelo proposto por Stern-Volmer foi possível inferir que a supressão ocorreu linearmente com o aumento da concentração de galactose, sendo considerada dinâmica e resultante das colisões entre a nanossonda fluorescente e o supressor (galactose). Portanto, o PQs@AMFB apresentam um grande potencial biotecnológico, como sondas analítica para detecção rápida e simples de galactose, bem como para outros estudos glicobiológicos.

A utilização intensiva de pesticidas vem gerando impactos ambientais e toxicidade em organismo não alvos. O tiofanato-metílico é um fungicida sistêmico de amplo espectro, cujos resíduos podem ser encontrados no solo, na água e em produtos agrícolas, representando ameaças aos ecossistemas e à saúde humana. Portanto, a contaminação por tiofanato-metílico requer o desenvolvimento de alternativas para reduzir/remover contaminantes ambientais. O presente estudo visou avaliar a eficiência da microalga Tetrademus obliquus na biorremoção do fungicida tiofanato-metílico e na redução da toxicidade mediante o sistema-teste Allium cepa L. O experimento de biorremediação consistiu em cinco tratamentos acompanhados por 12 dias, visando investigar as possíveis vias de remoção do tiofanato-metílico: (1) meio de cultura + T. obliquus; (2) meio + T. obliquus + tiofanato-metílico; (3) meio + T. obliquus inativada + tiofanato-metílico; (4) meio + tiofanato-metílico (claro); (5) meio + tiofanato-metílico (escuro). O tiofanato-metílico foi utilizado na concentração inicial de 240 µg/L e T. obliquus na concentração inicial de 100 mg/L. A microalga conseguiu se adaptar e crescer mesmo na presença do tiofanato-metílico, com valores de 629,02 mg/L, na ausência do fungicida, e de 566,85 mg/L na sua presença. Em relação ao processo de remoção do tiofanato-metílico, após um dia de experimento, constatou-se uma remoção de 85,41% no tratamento com a microalga ativa; 50,41% com microalga inativa e 17,08% e 20,00%, nos tratamentos sem a presença da microalga, em condições de claro e escuro respectivamente. Após 12 dias, o tiofanato-metílico foi removido de todos os tratamentos analisados. Contudo, ao final do experimento foi observada a presença do subproduto carbendazim variando de 55 µg/L, no tratamento com a microalga ativa, a 120 e 125 µg/L, na ausência da microalga no escuro e no claro, respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que a biodegradação parece ter sido um dos mecanismos usados por T. obliquus na remoção do tiofanato-metílico. Adicionalmente, a biossorção parece ter contribuído, considerando que o tratamento com biomassa inativa foi segundo maior na remoção do carbendazim (78 µg/L). Por outro lado, a fotodegradação parece não ter influenciado na remoção do fungicida em questão, ao comparar os valores do carbendazim na ausência de microalgas no claro e no escuro (120 e 125 µg/L, respectivamente). Em seguida, o sistema-teste Allium cepa foi utilizado para avaliar a toxicidade, a citotoxicidade e a genotoxicidade do subproduto carbendazim nas concentrações 55 e 125 µg/L. As referidas concentrações foram encontradas ao final do experimento nos tratamentos com a microalga ativa e na ausência da microalga no claro, respectivamente. Ambas as concentrações apresentaram ausência de toxicidade e citotoxicidade. Por outro lado, a concentração 125 µg/L resultante do tratamento sem a presença da microalga, mostrou efeito genotóxico apenas para as células meristemáticas de A. cepa. Os dados obtidos demonstram que a microalga T. obliquus foi eficiente para remoção do fungicida tiofanato-metílico e para eliminação da genotoxicidade do subproduto carbendazim, apresentando potencial biorremediador promissor para tratamentos de locais contaminados com o referido fungicida.

O uso excessivo de fertilizantes na agricultura pode resultar em diversos impactos ambientais, incluindo eutrofização do solo, compactação e emissão de gases de efeito estufa. Uma estratégia bastante promissora é o desenvolvimento de nanofertilizantes (NFs) biodegradáveis na otimização da entrega de nutrientes às plantas e, portanto, minimizar os riscos ambientais. Este estudo teve como objetivo sintetizar e caracterizar nanofertilizantes à base de quitosana para entrega de macronutrientes NPK (nitrogênio, fósforo e potássio) às plantas, utilizando como modelo a rúcula (Eruca sativa L.). Nanopartículas de quitosana foram sintetizadas usando o método de gelificação ionotrópica, e sua caracterização foi realizada utilizando várias técnicas analíticas. Para determinar a formulação mais eficaz, foram examinadas várias concentrações de nutrientes nos nanofertilizantes (NF1, NF2, NF3 e NF4), sendo NF1 a formulação com maior teor de NPK e NF4, a menor. Análises de Espalhamento Dinâmico de Luz revelaram diâmetros hidrodinâmicos adequados de nanopartículas de quitosana, enquanto o Potencial Zeta mostrou variações nas cargas dos diferentes tratamentos. A Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR) e a Análise Termogravimétrica (TGA) forneceram informações sobre grupos funcionais e estabilidade térmica dos nanofertilizantes, respectivamente. Os resultados do FTIR elucidaram os grupos funcionais da quitosana e indicaram a ligação entre quitosana e o tripolifosfato de sódio (TPP). Os termogramas indicaram que os nanofertilizantes apresentaram maior estabilidade térmica em comparação com a quitosana pura e nanopartículas de quitosana. A estrutura das nanopartículas foi investigada por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), revelando tamanhos distintos, variando de 6 nm a 1,2 µm. Essas variações foram atribuídas ao processo de síntese e concentração de quitosana/TPP. Mapas espectrais de Espectroscopia de Raios-X por Dispersão de Energia (EDS) revelaram distinções entre os tratamentos de nanofertilizantes e nanopartículas de quitosana não carregadas. Para avaliar o impacto dos nanofertilizantes no crescimento das plantas, foram analisados parâmetros fisiológicos como altura, número de folhas e teor de clorofila ao longo dos tratamentos. O conteúdo de NPK foi quantificado pelo método Kjeldahl e ICP-OES. Além disso, amostras das folhas foram examinadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) para investigar possíveis diferenças na estrutura da superfície. Os nanofertilizantes demonstraram desempenho satisfatório em comparação com fertilizante químico (CF). A taxa de crescimento das plantas tratadas com fertilizante químico foi notavelmente menor em comparação com as tratadas com nanofertilizantes, diferença que foi particularmente evidente no tratamento NF1, o qual foi 92% superior ao CF. O número médio de folhas (fase final do tratamento) desenvolvidas em plantas tratadas com NFs foi de 8 folhas/ planta, sendo que as plantas tratadas com CF apresentaram cerca de 6 folhas. Todos os níveis de NFs promoveram aumentos significativos no conteúdo de clorofila, com uma faixa de 8 a 29% superior ao CF.  Em relação à absorção de NPK, plantas tratadas com NFs mostraram resultados muito semelhantes às tratadas com CF. No entanto, CF apresentou conteúdo superior de N e K. A análise de fósforo revelou que tanto NF1 quanto CF apresentaram resultados inferiores em comparação com os tratamentos de NF2, NF3 e NF4. As nanopartículas de quitosana se destacaram como o tratamento mais eficaz em relação ao teor de fósforo nas plantas, registrando aproximadamente 30 mg/L de P. O estudo destaca a importância da aplicação equilibrada de NPK e sugere que as plantas não necessitam de quantidades excessivas de nutrientes para o seu desenvolvimento.

As doenças tropicais negligenciadas (DTNs) são enfermidades cuja ocorrência reflete o quadro de desigualdade social nos países, destacando-se a doença de Chagas e a leishmaniose. Anualmente, os gastos com prevenção e tratamento das DTNs custam bilhões de dólares aos países em desenvolvimento. A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, ocorre principalmente na América Latina e é potencialmente letal. Estima-se que o número de infectados por T. cruzi seja 6 a 7 milhões em todo o mundo. A leishmaniose é uma doença infecciosa causada por mais de 20 espécies de protozoários do gênero Leishmania. Cerca de 1 milhão de novos casos ocorrem anualmente com 26.000 a 65.000 mortes. A busca de novos fármacos para compor o tratamento da doença de Chagas e da leishmaniose que sejam mais seletivos para os parasitas e causem menos efeitos adversos é urgente. Moringa oleifera é uma planta pantropical cujas flores contém um inibidor de tripsina proteico (MoFTI, do inglês M. oleífera flower trypsin inhibitor) e metabólitos secundários, incluindo flavonoides. O objetivo deste trabalho é avaliar MoFTI e frações ricas em metabólitos secundários (FRMS) quanto ao potencial antiparasitário contra T. cruzi e Leishmaniabraziliensis, bem como seu efeito imunomodulador sobre células mononucleares de sangue periférico humanas (PBMCs) infectadas. Flores frescas foram homogeneizadas com água destilada para obtenção do extrato, a partir do qual MoFTI foi isolado por cromatografia de afinidade em coluna Tripsina-Agarose. FRMS foram obtidas a partir do extrato de flores por extração em fase sólida SPE- C18, utilizando soluções de diferentes polaridades para obtenção das frações F1 a F4, sendo a última a menos polar. Análise das FRMS por HPLC revelou a presença de flavonoides apenas em F3 e F4. Em seguida, MoFTI, F3 e F4 foram avaliados quanto ao efeito na sobrevivência de tripomastigotas de T. cruzi e promastigotas de L. braziliensis. F3 e F4 causaram lise de tripomastigotas com valores de CL50 (Concentração letal para 50% dos parasitas) de 358,38 e 248,73 µg/mL respectivamente. As preparações de flores de M. oleifera apresentaram ação leishmanicida para promastigotas e os valores de CL50 foram 138,82, 177,77 e 175,75 µg/mL para MoFTI, F3 e F4, respectivamente. A citotoxicidade para PBMCs foi determinada como parâmetro para estimar a seletividade das preparações para os parasitas em relação a células de potenciais hospedeiros. F3 e F4 não interferiram na viabilidade de PBMCs até a concentração de 2000 µg/mL. Com base nesse resultado, os índices de seletividade (IS) para tripomastigotas de T. cruzi foram > 5,58 e > 8,04 para F3 e F4, respectivamente. Para promastigotas de L. brasiliensis,F3 e F4 mostraram IS> 11,25 e > 11,37, respectivamente. Em conclusão, os dados revelados neste trabalho apontam MoFTI, F3 e F4 como biomateriais com ação antiparasitária contra T. cruzi e L. braziliensis com baixa ou nenhuma toxicidade para células humanas. A avaliação do potencial imunomodulador das preparações sobre PBMCs infectadas por T. cruzi ou L. brasiliensis está em andamento.

A oncocalixona (oncoA) é uma quinona isolada principalmente do cerne do caule da Cordia oncocalyx que apresenta propriedades terapêuticas, como atividades citotóxicas, antioxidantes, antiplaquetária, analgésica e anti-inflamatória, porém também tem apresentado perfil toxicológico (renal, pulmonar e cardíaco). Buscando aprimorar a estabilidade de moléculas em meio biológico e reduzir sua toxicidade, a encapsulação de fármacos em nanocarreadores tem sido cada vez mais frequente, possibilitando a liberação controlada do fármaco, com seu direcionamento a sítios-alvo, aumentando a sua atividade terapêutico e consequentemente reduzindo a sua toxicidade. O avanço na área de nanotecnologia ganhou destaque recentemente no desenvolvimento de vacinas contendo material genético encapsulado para a prevenção da COVID-19, com eficácia de mais de 90%. Apesar dos benefícios da nanotecnologia farmacêutica, é de fundamental importância garantir a segurança na aplicação desses nanossistemas no organismo, com isso os estudos nanotoxicológicos vem ganhando destaque, além dos estudos que permitam entender o comportamento das nanopartículas após aplicação in vivo. Com isso, este estudo tem como objetivo avaliar a atividade antiproliferativa, os parâmetros farmacocinéticos e a toxicidade da oncoA encapsulada em nanopartículas de PIBCA revestidas com fucana. O estudo de nanotoxicologia em modelos de zebrafish irá definir o perfil de toxicidade, definição de doses da segurança, entendendo qual a janela terapêutica e qual o limite tóxico de concentração das NP-Fuc com resultados robustos que podem ser escalonados para estudos clínicos em humanos. Além disso, a técnica de avaliação da ativação do sistema complemente irá permitir identificar se as nanopartículas conseguem driblar o sistema imunológico permanecendo no organismo por mais tempo, com isso complementando os estudos de interação das nanoparticulas com proteínas, assim como os estudos farmacocinéticos e de biodisponibilidade, possibilitando o entendimento do comportamento biológico após aplicação das nanoparticulas no organismo. Como resultados obtidos até o momento, observamos que as nanoparticulas interagem com a albumina, sendo identificado pelo aumento de tamanho (349,5 ± 4,34 nm para tamanhos maiores que 2000 nm). Além disso, as nanopartículas contendo oncoA apresentaram atividade antiproliferativa frente as células MDA-MB-231, além de inibir a migração celular. A oncoA também apresentou fluorescência intrínseca, podendo ser utilizada como marcador fluorescência em estudos de captura celular. Esses dados são importantes, pois podem servir como base para uma futura aplicação clínica dessas nanopartículas.

As queratinases são um grupo de proteases capazes de reduzir a queratina em oligopeptídeos assimiláveis ou aminoácidos. Streptomyces sp. 8F um endófito das folhas de Bauhinia monandra produziu proteases com capacidade queratinolítica. O tempo de incubação com produção máxima atingida foi de 48 h. No estudo de concentração, o inóculo de 7,5% demonstrou ser o volume de inóculo adequado para a produção de queratinases. Vários fatores como: temperatura, concentração de penas de frango e aeração por agitação orbital foram investigados por planejamento fatorial 23. A temperatura a 30ºC, a concentração de penas de frango de 2% e a velocidade de agitação orbital de 180 RPM demonstraram ser as variáveis com efeitos significativos na produção de queratinases. Além disso, as queratinases apresentaram o pH 7,0 como pH ótimo e temperatura ótima em 70ºC. A atividade enzimática foi fortemente inibida na presença de EDTA e íons metálicos Cu2+, Hg2+, Fe3+, Cob2+ e Zn2+. Comparativamente, a atividade enzimática não foi afetada pelos tensoativos Tween-80 e Triton X-100, além do aumento da atividade na presença dos solventes orgânicos H2O2, metanol, propanol e etanol. Adicionalmente, não houve efeito inibitório frente aos inibidores de protease: PMSF e IAA. A compatibilidade das queratinases com detergentes para roupas foi avaliada e retornou atividade residual de 96,48% para o detergente A e 74,62% para o B. Em conjunto, esses achados sugerem que as queratinases produzidas por Streptomyces sp. 8F são promissoras para aplicações industriais e incorporação em formulações de detergentes comerciais.

A hipertensão arterial (HA) é uma doença crônica caracterizada por níveis elevados da pressão arterial sanguínea com valores iguais ou que ultrapassam 140/90 mmHg. Embora existam fármacos sintéticos que auxiliam na regulação da HA, estes apresentam efeitos colaterais havendo a necessidade em se obter novos agentes terapêuticos. As microalgas são microrganismos fotoautotróficos, e destacam-se devido a biomassa rica em bioativos. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi analisar peptídeos obtidos de microalgas durante a simulação da digestão gastrointestinal in vitro e avaliar seu potencial anti-hipertensivo, antioxidante e antimicrobiano. Foi realizado o cultivo autotrófico das microalgas Chlorella vulgaris, Tetradesmus obliquus e Dunaliella tertiolecta que ao atingir a fase estacionária de crescimento, tiveram as biomassas liofilizadas e submetidas à digestão in vitro (fase gástrica e fase gastrointestinal). O produto da digestão foi ultrafiltrado em membranas de 3 kDa e os peptídeos permeados foram analisados por LC-MS/MS. A atividade anti-hipertensiva foi mensurada através da inibição da enzima conversora de angiotensina (iECA). A estimativa dos parâmetros cinéticos Km e Vmax foi determinada pela equação de Michaelis-Menten, representado pelo gráfico de Lineweaver Burk. Além da atividade antioxidante determinada pelos métodos ABTS e DPPH. Além disso, a atividade antimicrobiana foi realizada pelo método CIM (concentração inibitória mínima) frente às bactérias patogênicas Gram positivas e negativas. Na atividade anti-hipertensiva as microalgas apresentaram inibição em ambas as fases da digestão, com melhores resultados após completa digestão, destacando a menor IC50 para microalga C. vulgaris, com valores de IC50 1.251 mg/mL e 0.563 mg/mL, respectivamente. Para cinética enzimática as três espécies atuam como inibidores não competitivos da ECA. A ação antioxidante por ABTS dos extratos peptídicos demonstraram elevada atividade na fase gastrointestinal com melhor captura do radical pelos peptídeos produzidos por C. vulgaris IC50 0.702 mg/mL, diminuindo após completa digestão para 0.477mg/mL. O mesmo comportamento foi observado nas demais microalgas com o método antioxidante por DPPH, com destaque para microalga T. obliquus durante a fase gástrica com IC50 1,557 mg/mL e 0,511 mg/mL. Seguindo da C. vulgaris e D. tertiolecta. Quanto à atividade antimicrobiana, as microalgas inibiram todas as cepas patogênicas testadas, a depender da concentração utilizada, com superior inibição frente às cepas gram positivas quando comparadas às gram negativas. Para as bactérias Gram positivas as microalgas apresentaram comportamento similar com relevância para C. vulgaris com inibição frente a E. faecalis em 0.250 mg/mL, L. monocytogenes e S. aureus a partir de 0.125 mg/mL e Bacillus cereus e Bacillus subtilis iniciando inibição a partir de 0.500 mg/mL. Para Gram negativas, houve resistência frente a inibição devido a espessa camada de peptidoglicano. A T. obliquus apresentou inibição em menores concentrações frente a Escherichia coli e Salmonella typhimurium com 0.125 mg/mL. A C. vulgarispara as mesmas cepas patogênicas apresentou inibição em 0.250mg/mL. Frente a Klebsiella pneumoniae necessitou-se de maiores concentrações entre 0.250 e 0.500 mg/mL, respectivamente utilizando peptídeos extraídos da T. obliquuse C. vulgaris. Para o perfil químico, utilizou-se as amostras com melhor bioatividade, neste caso àqueles referentes a C. vulgaris. De acordo com a análise dos cromatogramas dos íons pico base obtidos tanto no modo positivo quanto negativo, pode-se inferir em 2 picos principais peptídeos nas amostras menor que 3 kDa após digestão in vitro. Os resultados do presente trabalho indicam que as microalgas durante o processo digestivo in vitro com frações abaixo de 3 kDa, podem ser consideradas uma fonte em potencial de peptídeos bioativos com propriedades antimicrobiana, antioxidante e anti-hipertensivo. Tais descobertas permitem agregar valor aos peptídeos de microalgas trazendo perspectivas promissoras referentes à promoção da boa saúde dado seu uso pela indústria alimentícia e farmacêutica.

O óleo de Syagrus coronata comumente conhecido por licuri é amplamente utilizado na medicina popular como tratamento para diversas patologias. Contudo, estudos apontam que este óleo possui diversos efeitos biológicos importantes que vão desde atividades antimicrobianas, antifúngicas até atividades anti-inflamatória, antioxidante e cicatrizante. A composição lipídica deste óleo apresenta altas quantidades de ácidos graxos de cadeia média, sendo o ácido láurico responsável por 45% da composição deste óleo. Diversos estudos com este ácido graxo vêm sendo desenvolvidos, haja visto sua principal característica antioxidante e fácil absorção por não precisar de transportadores para transpassar as membranas. Alguns estudos evidenciaram o efeito vaso relaxador do ácido láurico em modelos de aorta de coelho e ratos, bem como, visualizaram a capacidade redutora de pressão em ratos hipertensos. Desta forma, o objetivo deste trabalho é avaliar a ação do óleo de S. coronata na proteção renal, alterações vasculares e pressão arterial de ratos Wistar, bem como elucidar seus mecanismos de ação. Para a verificação das alterações na contratilidade ou relaxamento vasculares foi utilizada a metodologia de banho de órgãos isolados, especificamente com a aorta mesentérica toráxica e bloqueadores específicos foram testados para identificação do mecanismo de ação dos óleos, também foi utilizada a metodologia de HETCAM para a verificação em tempo real da ação do óleo nos vasos da membrana corioalantóica. Foram observadas diferenças significativas na alteração vascular dos grupos testados, o óleo de licuri causa vaso dilatação na artéria aorta na presença ou ausência de endotélio, mostrando que seu mecanismo de ação é endotélio independente, em adição, o bloqueador não seletivo de canais de potássio, Tetraetilamonio (TEA) causou a inibição parcial do efeito vasodilatador dos óleos. Contudo, o óleo da amêndoa crua e torrada do licuri possuem efeito vasodilatador em artéria mesentérica toráxica de ratos Wistar e os canais iônicos de potássio (K+) podem ser os responsáveis por parte deste efeito.

O câncer do colo do útero (CCU) é um problema de saúde pública global e o quarto tipo de câncer mais incidente na população feminina mundial, com taxas de incidência ainda mais elevadas em países com recursos escassos. Esse câncer é caracterizado pela replicação desordenada das células do epitélio que reveste o colo uterino, em consequência da inativação de proteínas-chave do controle do ciclo celular, em resposta a ação das oncoproteínas virais. Dentre essas, a proteína p16INK4a envolvida na regulação negativa do ciclo celular apresenta sua expressão alterada já nos eventos iniciais do câncer, sendo um potencial biomarcador para detecção precoce do CCU e lesões malignas de alto grau. Os biossensores atendem demandas associadas a dificuldades de disseminação de testes de rastreamento ao reduzirem os volumes de amostras necessárias para obtenção de resultados, assim como a dispensa de equipamentos elaborados e equipe técnica altamente especializada, preservando a sensibilidade e a especificidade dos testes tradicionais. O desenvolvimento de plataformas eletrocatalíticas nanoestruturadas contribuem para a construção de dispositivos com respostas mais rápidas e sensíveis ao ampliarem a área eletroativa dos sistemas. Neste trabalho, filmes eletrocatalíticos baseados em nanoestruturas de carbono funcionalizadas e polímeros condutores dopados são desenvolvidos com o objetivo de contribuir para o diagnóstico específico, sensível e em tempo oportuno do CCU. A plataforma elaborada foi desenvolvida a partir da modificação de um filme baseado em polímero aminado modificado por adição de semicondutor orgânico e nanoestrutura de carbono e desenvolvida em eletrodos de carbono vítreo. O filme nanoestruturado desenvolvido apresentou estabilidade e reprodutibilidade. Anticorpos anti-p16 foram imobilizados nas plataformas e respostas específicas foram obtidas para o imunossensor quando submetido a solução onde a proteína estava presente quando comparada a solução onde p16 estava ausente. Técnicas eletroquímicas e topográficas para caracterização de plataformas estão sendo utilizadas. 

Hidromel é uma bebida alcoólica milenar, obtida através da fermentação de uma solução de mel de abelha. O ressurgimento da procura pela bebida impulsionado principalmente devido as recentes aparições na indústria cinematográfica, tem se mostrado cada mais crescente. No Brasil, a bebida apresenta um grande potencial de produção por apresentar uma produção de mel, principal matéria-prima, expressa e um consumo per capita desse mel relativamente baixo, fazendo com que o escoamento desse mel seja principalmente realizado através da exportação. Portanto, a necessidade de fontes alternativa vem se tornando cada vez mais necessária. Nesse contexto, a produção de hidromel tem se mostrado cada vez mais atraente, não apenas para dar destino a produção de mel, mas também como forma de agregar valor a matéria-prima. Porém apesar de simples, a produção de hidromel enfrenta alguns gargalos que vão desde as características intrínsecas do mel, quem podem variar drasticamente de acordo com a região, espécie de abelha e origem botânica, como também a ausência de um protocolo adequado de produção, a inexistência de uma linhagem de levedura adequada, entre outros fatores. O que ocasiona fermentações muito longas e muitas vezes incompletas. Portanto, o presente trabalho teve como principal objetivo desenvolver um protocolo de produção adequado de hidromel, avaliando as necessidades inerentes ao processo e também avaliando as diferentes linhagens comerciais vendidas como produtoras de hidromel para pôr fim otimizar o processo.

Desde os primórdios a humanidade faz o uso de plantas com fins alucinógenos, ritualísticos e terapêuticos, sempre atravessando a linha tênue entre os benefícios e os riscos tóxicologicos que os vegetais podem oferecer. Com o intuito de abranger mais espécies de um gênero promissor ao desenvolvimento de fármacos, esse trabalho propôs elucidar o perfil toxicológico do óleo fixo das amêndoas de Syagrus werdermannii Burret por meio de testes in vitro e in vivo. Foi realizada uma análise cromatográfica dos ésteres metílicos de ácidos graxos. A citotoxicidade de diferentes concentrações do óleo (12,5, 25, 50, 100 e 200 μg/mL) foi avaliada usando o ensaio de redução MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2yl)-2,5-difenil brometo de tetrazolina] em duas linhagens celulares: Macrófagos J774.A1 e Adenocarcinoma Humano da Glândula Mamária (MDA-MB-231). Foram realizados testes de toxicidade oral aguda, genotoxicidade e mutagenicidade em camundongos, aos quais foi administrada uma dose única de 2.000 mg/kg de óleo via gavagem. Para a toxicidade aguda, foram analisadas alterações nos parâmetros bioquímicos do sangue, comportamento, peso e consumo de ração, assim como também foram realizadas análises histomorfométricas do fígado, rim e baço. O ensaio cometa e o teste do micronúcleo (MN) foram executados para analisar o perfil genotóxico e mutagênico desse produto. Os resultados apontam para um produto com baixa toxicidade para os modelos testados. O óleo de S. werdermannii é composto predominantemente por ácidos graxos saturados, sendo o ácido láurico o composto em maior proporção. Em relação aos níveis de viabilidade celular houve uma redução significativa apenas para a maior concentração do óleo 200 µg/mL na linhagem de macrófagos J774.A1. O estudo de toxicidade aguda não revelou nenhuma evidência de efeitos comportamentais adversos, além de demonstrar que a DL50 é superior à dosagem que foi utilizada. A análise bioquímica do sangue mostrou um aumento nas concentrações de alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST), gamma-glutamil transferase (GGT) e bilirubina quando comparado ao grupo controle. Dos parâmetros histológicos avaliados houve alteração apenas na redução da área nuclear dos hepatócitos, enquanto que o rim e o baço não apresentaram indicações morfológicas de processo patológico. Não foi detectada atividade mutagênica ou genotóxica tanto pelo ensaio cometa quanto pelo teste de micronucleo. O óleo de S. werdermannii mostrou-se viável ao uso e promissor ao desenvolvimento de novos fármacos devido à sua rica composição lipídica e seus baixos índices de toxicidade. Não obstante, faz-se necessário a realização de novos estudos que ampliem a investigação acerca dos potenciais envolvendo esse produto.

A esquistossomose é uma enfermidade causada pelo helminto Schistosoma mansoni, sendo de grande importância no contexto da saúde pública. Esta infecção pode causar importantes alterações vasculares no sistema porta do aparelho digestivo gastrointestinal ou apresentar formas ectópicas que ocorrem quando os ovos do parasita ou formas adultas estão localizados longe do seu local normal, como o sistema urogenital e sistema nervoso central. Para o diagnóstico da esquistossomose em geral, o método utilizado é o exame parasitológico de fezes pela técnica de Kato-Katz. Outros exames subsidiários podem auxiliar na investigação diagnóstica. Sendo assim, o emprego de novas metodologias diagnósticas poderá contribuir para o controle desta doença. A determinação eletroquímica tem atraído bastante atenção, pois os métodos eletroquímicos têm as vantagens de baixo custo, alta sensibilidade e ser de fácil manuseio. Diante disto, o trabalho possui como objetivo a avaliação do processo de interação do filme de poli (ácido-3-tiofeno acético) (PTAA) na superfície do eletrodo de ouro com a sonda de S. mansoni no desenvolvimento de um genossensor para o uso na detecção de diferentes concentrações do genoma do S. mansoni e de amostras de pacientes infectados. Técnicas eletroquímicas como a espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) e voltametria cíclica (VC) são ferramentas úteis para o desenvolvimento destes dispositivos. Foram avaliadas as perturbações amperométricas e impedimétricas do dispositivo desenvolvido através de VC e EIE, respectivamente. O filme de PTAA foi obtido após eletrodeposição, em seguida os grupos funcionais foram ativados após a formação do filme de PTAA, foi ativado por ação de EDC (1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida) e NHS (N-hidroxissuccinimida) (EDC/NHS) para promover a imobilização covalente da sonda de DNA. Após ativação a sonda foi imobilizada e o sistema sensor PTAA-ssonda_S.mansoni foi obtido. A bioatividade e a sensibilidade do sistema sensor PTAA-sonda_S.mansoni foram testados através da exposição inicial ao DNA genômico do Schistosoma nas concentrações de 0.65pg.μL^-1, 2.6pg.μL^-1, 5.2pg.μL^-1, 10.4pg.μL^-1, 20.9pg.μL^-1, 41pg.μL^-1 e 83,95pg.μL^-1. Posteriormente, foram realizados testes frente a diferentes diluições de 1:10, 1:20, 1:30, 1:40 e 1:50 para detecção de Schistosoma em amostras de plasma, urina e líquido cefalorraquidiano (LCR) que foram previamente aquecidas em uma temperatura de 90°C. O sistema sensor foi capaz de detectar o genoma de S. mansoni em diferentes concentrações, processo este identificado pela diminuição gradativa das correntes de pico anódicas e catódicas, assim como pelo aumento na resistência à transferência de carga (R_CT).  Em adição, o sistema mostrou-se ser útil na identificação genômica do verme seja em plasma, urina ou LCR. O processo de hibridização foi mais proemimente na avaliação da amostra de plasma, refletindo um elevado RCT para a diluição de 1:10. O genossensor aqui exposto apresenta-se como uma ferramenta promissora para o diagnostico clínico eficiente da esquistossomose.

Nativa da América tropical, Psidium guineense Sw. (Myrtaceae) é um arbusto ou pequena árvore com propriedades medicinais, incluindo tratamento de infecções, feridas, diarreia e ação diurética. Devido a ausência de estudos de toxicidade de extrato aquoso de folhas de P. guineense, o presente estudo teve como objetivo avaliar a segurança de uso em camundongos. Folhas de P. guineense foram pulverizadas e homogeneizada com água destilada (1:10 p/v) e obtendo um extrato aquoso a 10% por turbólise (EAPg). O extrato foi caracterizado por cromatografia em camada delgada e por cromatografia líquida de alta eficiência. Eritrócitos murinos foram usados para avaliar a citotoxicidade, enquanto camundongos Swiss albinos foram utilizados para avaliar a toxicidade aguda, genotoxicidade (ensaio do cometa) e mutagenicidade (teste do micronúcleo). Os resultados do ensaio de citotoxicidade revelaram a baixa capacidade do EAPg em causar lise celular com uma taxa de hemólise variando de 0,35% a 13%. No estudo de toxicidade oral aguda em camundongos, nenhum camundongo apresentou qualquer alteração comportamental ou mortalidade após a administração de 2.000 mg/kg de EAPg por 14 dias. Os parâmetros hematológicos não apresentaram diferença significativa em relação aos animais do grupo controle. Já na avaliação dos parâmetros bioquímicos o tratamento com EAPg promoveu uma redução dos parâmetros lipídicos (p<0.05). O teste do micronúcleo e o índice de danos (DI) da avaliação genotóxica não indicou diferença significativa quando comparado ao controle.  Porém, foi observada um aumento na frequência de dano (DF) dos animais tratados com 2000 mg/k de EAPg. Com isso, foi evidenciado que o extrato apresenta flavonoides, taninos hidrolisáveis, terpenos, esteroides e açúcares redutores. Na avaliação de toxicidade, o tratamento com 2000 mg/kg de EAPg reduziu parâmetros lipídicos e mostrou-se ser bem tolerado sem apresentar alterações comportamentais, bem como não promoveu dano ao DNA.

As tartarugas marinhas são dependentes de suas rotas migratórias e de ambientes costeiros para alimentação e reprodução, mantendo contato frequente com diversos organismos fúngicos. No entanto, a escassez de estudos micológicos ressalta a necessidade de pesquisas adicionais para a compreensão dessas interações e a conservação das espécies ameaçadas. Este estudo possui duas abordagens: 1. Levantamento bibliográfico sobre a interação de fungos em tartarugas marinhas em escala global e 2. Investigação da diversidade fúngica em ninhos e ovos de tartarugas da espécie Carettacaretta ao longo da costa litorânea do município de Ipojuca-PE, nordeste do Brasil. Para atender a primeira abordagem foram realizadas buscas na literatura por meio de bases de dados como BVS, SciELO, Periódicos CAPES e Google Acadêmico. De acordo com os critérios estabelecidos, foram selecionados 27 artigos, os quais revelaram a ocorrência de 29 gêneros fungicos nas tartarugas marinhas, sendo os gêneros: Fusarium (21%), Aspergillus (11%) e Cladosporium (11%) os mais frequentes presentes em todas as fases de desenvolvimento, desde ovos até animais adultos. Apesar de esclarecedores, esses dados ainda são insuficientes para compreender a interação destas comunidades com estes animais marinhos. Sendo assim, esta dissertação realizou sua segunda abordagem com coletas de ovos e areia em ninhos de tartaruga da espécie C. caretta ocorrente nas praias de Porto de Galinhas, Muro Alto e Maracaípe, localizadas no litoral pernambucano. Os fungos foram isolados por meio de diluição das amostras em meios de cultura específicos e identificados morfologica e molecularmente por meio do sequenciamento do gene β-tubulina. No total foram obtidos 207 isolados, 104 (50,2%) pertencentes aos gêneros Aspergillus, Penicillium e Talaromyces. O mais prevalente foi Penicillium representado por 11 espécies (P. allii-sativi, P. brocae, P. citreosulfuratum, P. citrinum, P. coffae, P. mallochii, P. meliponae, P. oxalicum, P. steckii, P. sp. Nov. 1 e P. sp. Nov. 2.); seguido do Aspergillus  oito espécies (A. flavus, A. hortae, A. insulicola, A. niger, A. sidowii, A. tamarii, A. terreus e A. unguis)e Talaromyces quatro espécies (T. albobiverticillius, T. alveolaris, T. pigmentosus e T. wortmannii).  A. sidowii e P. citrinum foram encontradas em abundância tanto dentro dos ovos quanto na areia, enquanto os isolados de Talaromyces foram identificados exclusivamente no conteúdo interno dos ovos. Esses resultados sugerem a existência de interações ecológicas específicas ainda não completamente compreendidas e contribuem para ampliar nosso conhecimento sobre a ecologia das tartarugas marinhas e o potencial impacto dos fungos em sua reprodução. Dessa forma, são necessários estudos adicionais para aprofundar nosso entendimento em relação ao potencial benéfico, neutro ou maléfico das espécies encontradas.

As resinas de geoprópolis são produzidas por abelhas sem ferrão (Meliponinae), desenvolvidas a partir da coleta de materiais resinosos, ceras e exsudatos, da flora da região onde estas abelhas estão presentes, além da adição de argila ou terra em sua composição. Várias atividades biológicas são atribuídas aos Extratos Etanol de Geoprópolis (EEGP). As propriedades bioativas estão associadas a composição química complexa que estas possuem. Este trabalho apresenta duas abordagens: 1. Revisao bibliográfica sobre as Propriedades Antibacterianas e Antioxidantes de Extratos de Geoprópolis de Abelhas Sem Ferrão (Meliponinae) ocorrentes no território brasileiro e 2. Avaliação das atividades biológicas do EEGP, como uma alternativa terapêutica natural para o enfrentamento de infecções causadas por cepas resistentes de Staphylococcus aures. Em relação a primeira abordagem o estudo revelou que a busca pelos produtos naturais (EEGP), sua composição química e potencial bioativo aumentou substancialmente nos últimos anos e que a geoprópolis produzidas no Brasil possuem uma elevada variabilidade de constituintes químicos em sua composição, em consequência da diversidade vegetal encontrada no território brasileiro.Já em relação a segunda abordagem, os testes demostraram que o EEGP apresenta atividade antibacteriana e bacteriostática nos isolados de S. aureus testados. Adicionalmente, foi observado inibição do biofilme destes patogenos com valor médio superior a 65% na concentração mais alta e potencial antioxidante (CI50) de 11,05 ± 1,55 µg/mL. Os teste de citotoxicidade, revelaram que o EEGP reduziu significativamente a viabilidade celular nas três concentrações testadas (550 µg/mL: 81,68 ± 3,79%; 1100 µg/mL: 67,10 ± 3,76 %; 2200 µg/mL: 67,40 ± 1,86%). Diante do exposto, o uso seguro do EEGP proveniente do Nordeste brasileiro, pôde ser comprovado pelo teste de citotoxicidade, e seu uso como agente antioxidante e antibacteriano mostrou-se eficaz, sendo este uma alternativa viável no combate ao estresse oxidativo e na disseminação e evolução contínua da resistência em S. aureus.

O Arranjo Produtivo Local de Confecções do Agreste Pernambucano (APLCAPE) tem se destacado nacionalmente no setor têxtil. No entanto, o desenvolvimento têxtil na região tem causado impactos ambientais, devido à geração e lançamento de efluentes sem tratamento adequado, afetando a qualidade da água do rio Ipojuca. Dentre os constituintes dos efluentes lançados, destacam-se os corantes tipo azo e seus subprodutos, os quais são considerados tóxicos para o meio ambiente. Visando encontrar tratamentos alternativos para os efluentes têxteis, presente trabalho objetivou avaliar a eficiência da cianobactéria Arthrospira platensis na remoção do corante azo Reactive Black 5 (RB5) e na redução de sua toxicidade. Foram analisados cinco tratamentos durante 15 dias, visando investigar possíveis vias de remoção do corante: (1) A. platensis (300 mg/L) e meio de cultura Schlösser (AM; controle); (2) A. platensis, meio de cultura Schlösser e corante RB5 (32,5 mg/L) (AMR; via de biodegradação); (3) A. platensis inativada, meio de cultura Schlösser e RB5 (AiMR; via de adsorção); (4) meio de cultura Schlösser e RB5, em condições de claro (MRc; via de fotodegradação); (5) meio de cultura Schlösser e RB5, em condições de escuro (MRe; possível adsorção ao frasco e influência do meio de cultura). Em relação ao crescimento de A. platensis, nos tratamentos contendo a cianobactéria, foi notado um crescimento máximo de 509,89 mg/L na presença do corante (AMR), comparado a 1060,14 mg/L na ausência de RB5 (AM), ambos no dia 13. No tratamento AiMR, foi comprovada a eficiência da inativação de A. platensis. O dia 12 foi o último dia de crescimento da fase exponencial. Por esta razão, foi utilizado para as análises de remoção, observando-se valores de remoção de RB5: 33,13% (AMR); 60,7% (AiMR); 35,6% (MRc), e 25,51% (MRe). Os dados do dia 12 indicam que houve uma remoção de 25,51% relacionada à adsorção ao frasco ou devido a constituintes do meio de cultura, considerando MRe; de 10,09% de remoção por fotodegradação, comparando MRc e MRe; e 25,10% por adsorção à cianobactéria, comparando AiMR e MRc. Por outro lado, os valores indicam ausência de biodegradação pela cianobactéria, considerando AMR e MRc, que foi corroborada pela ausência dos subprodutos de biodegradação anilina e catecol nas amostras analisadas. A atenuação da toxicidade de RB5 nos diferentes tratamentos foi investigada usando o sistema teste Allium cepa L., mediante o índice da germinação de sementes e comprimento médio das raízes. Com relação à toxicidade, observou-se que RB5 foi altamente tóxico no tratamento controle (RB5 em água), com apenas 1,5% de germinação. De modo geral, houve uma atenuação da toxicidade em todos os tratamentos analisados no dia 12 do experimento de remoção, porém considerada baixa, com valores de germinação variando de 10,5% a 14,5%. Dessa forma, conclui-se que A. platensis contribui para a remoção de RB5 pelo processo de adsorção e para uma baixa atenuação da toxicidade.  

O desenho de novos derivados da  β-lapachona pode levar ao desenvolvimento de moléculas menos tóxicas, com atividade anticâncer e alta seletividade. Neste sentido, este trabalho objetivou investigar a atividade anticâncer, mecanismo de ação e seguridade toxicogenética dos derivados naftoquinônicos 2-(2,2-dimetill-5oxo-3,4-dihidro-2H-benzo[h]cromo-6(5H)-ilideno)-N-(4ntrofenil)hidrazinacarbotio- amida (BV3) e 2-(2,2-dimetil-5-oxo-3,4-dihidro-2H-benzo[h]cromo-6(5H)-ilideno)-N-(p-toluiu)hidrazinacarbotioamida (BV5). A pesquisa foi aprovada pelo comitê de ética para uso de animais sob o protocolo de nº 004/2023. Para isso, foi verificada a citotoxicidade dos compostos em L-929 (fibroblasto murino), HeLa (adenocarcinoma cervical humano), HCT-116 (carcinoma colorretal humano), HepG2 (carcinoma hepatocelular humano) e MDA (adenocarcinoma de glândula mamária) pelo método do MTT (3- (4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-brometo de difeniltetrazólio). As alterações morfológicas e o mecanismo de morte celular causados pelo tratamento com BV3 e BV5 foram realizadas na linhagem HeLa. Além disso, foi analisada a segurança biológica pelo teste cometa e o ensaio de micronúcleo. Os resultados obtidos apontam que os derivados BV3 e BV5 apresentam atividade anticâncer frente às linhagens HCT-116, HepG2 e MDA, com valores de IC50 menores que 15 μg/mL. A IC50 da BV3 para a linhagem L-929 foi de 19,19 μg/mL com índice de seletividade de 15. Para a linhagem HeLa, os compostos BV3 e BV5 apresentaram IC50 de 1,21 μg/mL e 7,21 μg/mL, respectivamente. A partir da IC50, foi observado através de microscopia óptica que estes derivados causam alterações morfológicas típicas de apoptose. Nas análises por citometria de fluxo, foi confirmada a ação destes derivados sobre as células HeLa na indução de morte por apoptose/necrose. Ademais, o composto BV3 não causou danos mutagênicos e genotóxicos, entretanto, o derivado BV5 na concentração de 2000 mg/kg apresentou um leve aumento no dano indexado em relação ao controle negativo. Em conclusão, o derivado BV3 apresentou atividade antineoplásica para as linhagens testadas, com alta seletividade para linhagem HeLa e foi considerado de uso seguro para a continuidade dos estudos não clínicos direcionados a tumores cervicais.

A germinação é um dos estágios mais críticos para o desenvolvimento inicial de plântulas, uma vez que estas estão sob constante exposição à múltiplos estresses ambientais. Em ambientes semiáridos, como a Caatinga, a escassez hídrica recorrente é prejudicial para algumas espécies, ao passo que para outras, ciclos intermitentes de seca favorecem tanto os parâmetros de germinação, como estabelecem uma “memória hídrica”, resultando em maior tolerância. Tal fenômeno promove modificações fisiológicas, bioquímicos e moleculares na planta. Estas últimas, por sua vez, envolvem respostas transcricionais e/ou epigenéticas associadas ao mecanismo de memória do estresse anterior.O presente estudo avaliou os efeitos de memória hídrica nos ciclos HD e ciclos intermitentes de seca, assim como seus efeitos, sobre aspectos fisiológicos, bioquímicos e moleculares em Cenostigma Pyramidale, umaespécie nativa da Caatinga, com considerável tolerância à seca e salinidade. Sementes de C. pyramidale foram submetidas a diferentes ciclos de HD com germinação subsequente em condições de déficit hídrico simulado (PEG 6000) em 6 potenciais osmóticos (0,0 -0,2; -0,4; -0,6; -0,8 e -1,0 Mpa). Os parâmetros de germinação avaliados foram: porcentagem (%), Sincronia, Tempo Médio de Germinação (TMG) e Velocidade Média de Germinação (VMG). Para a análise de planta jovem, sementes foram divididas em dois grupos, sendo: GI_SCIS (sem HD e sem CIS); GI_CIS (sem HD e com CIS); GII_SCIS (com HD e sem CIS); GII_CIS (com HD e com CIS). Após 6 meses de cultivo, um grupo de plantas foi submetido à 4 ciclos intermitentes de seca, contendo grupo controle (com irrigação). Aos 7 meses, as plantas foram avaliadas quanto ao conteúdo hídrico relativo foliar (CRA) e acúmulo de carboidratos não estruturais (CNEs) na folha, caule e raiz. As sementes não condicionadas de C. Pyramidale mostraram tolerância a seca em potenciais de até -0,6 MPa. Aos serem expostas aos ciclos de HD todos os parâmetros de germinação foram favorecidos, além de aumentar a tolerância ao déficit hídrico. Na fase jovem, em ambos os grupos (GI e GII), as plantas que receberam ciclos intermitentes de seca apresentaram maior acúmulo (29-32 %) de açúcares solúveis na folha. Plantas do grupo GII_CCIS também mostraram aumento na concentração de amido (76 %) nas raízes, quando comparadas ao GI_SCIS. Sob seca contínua, todos os tratamentos apresentaram uma eficiente distribuição dos CNEs, em ambos os tecidos analisados. Esses dados sugerem que as plantas submetidas à ciclos intermitentes de secaapresentam uma adaptação em sua arquitetura fotossintética, provavelmente devido à imposição dos estresses subsequentes (adquirindo memória ao referido estresse). Além disso, a raiz de C. pyramidale mostrou ser o órgão predominante no armazenamento de amido desta espécie, o que corrobora com a eficiência do condicionamento no processo de memória hídrica nos tratamentos GII_CCIS, contribuindo para sua “tolerância” à futuros enfrentamentos à estresses por secas eminentes. Desta forma, os ciclos de HD, além de contribuir na eficiência da germinação de sementes, quando combinados com os CIS parecem potencializar também as respostas bioquímicas da catingueira, a qual adquire certa “plasticidade” para enfrentar períodos de HD. Para uma melhor elucidação das respostas moleculares da memória à seca, faz-se necessária uma análise do perfil de expressão de genes comprovadamente identificados como responsivos à memória a esse tipo de estresse.

As plantas desenvolveram múltiplos e complexos mecanismos de defesa contra patógenos. Dentre esses, a família gênica Pathogenesis-related Protein 1 (PR-1), pertencente a superfamília das PRs, destaca-se pela sua atuação na resposta de defesa vegetal contra fitopatógenos, especialmente organismos fúngicos. Apesar de sua importância, estudos que caracterizem tal família e investiguem sua participação na resposta de defesa do feijão-comum (Phaseolus vulgaris) são inexistentes. Dessa forma, o presente estudo visou realizar a mineração e caracterização genômica estrutural da família gênica PR-1 em feijão-comum, além de avaliar, em tecidos foliares de uma variedade sensível e de uma variedade resistente, o perfil de expressão de suas isoformas transcricionais durante a infecção pelo fungo Colletotrichum lindemuthianum – em períodos de 24hpi (hours post inoculation), 48hpi e 96hpi. Ao total, foram identificados 13 genes PvPR-1 associados ao genoma de referência de P. vulgaris, os quais clusterizaram em dois diferentes grupos fenéticos, compartilhando padrões de motivos em comum. A maioria das proteínas PvPR-1 apresentaram o caráter básico e majoritariamente hidrofílico. Foi reportado que os genes PvPR-1 apresentaram em seus promotores elementos cis-regulatórios responsivos a diferentes hormônios vegetais envolvidos na reposta a estresses bióticos e abióticos. Dados da plataforma STRING sugeriram co-expressão e elevada interação entre os produtos proteicos de alguns genes PvPR-1 – encontrados induzidos em ao menos um dos tratamentos adotados no ensaio de expressão realizado – e enzimas do tipo Chitinase II (pertencentes ao grupo PR-3 e com forte atividade antimicrobiana). Foram encontradas diferenças temporais no perfil de expressão dos genes PvPR-1 nas variedades resistente e sensível de feijão-comum a C. lindemuthianum. A variedade sensível (Rosinha) apresentou a indução de poucos transcritos PvPR-1, em especial a partir do período de 48h após a aplicação do estresse. Em contraste, a variedade resistente (Africano 4), apresentou maior número de transcritos induzidos no período de 48hpi e 96hpi. Nossos resultados contribuem para a melhor compreensão dos genes PvPR-1, sugerindo seu potencial envolvimento na resposta de defesa do feijão-comum, além de auxiliar na identificação de genes PR-1 candidatos para o desenvolvimento de linhagens de feijão-comum transgênicas potencialmente resistentes a estresses bióticos.

A pancreatite aguda é um processo inflamatório no pâncreas com envolvimento variável de outros tecidos regionais ou sistemas orgânicos e tem sido alvo de discussões sobre o entendimento da fisiopatologia e sobre o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas. Apesar dos avanços tecnológicos em seu estudo, a pancreatite permanece como um desafio, especialmente quando se considera os mecanismos envolvidos em sua fisiopatologia. Torna-se fundamental destacar que as vias fisiológicas envolvidas na evolução e estabelecimento da pancreatite aguda variam entre os animais estudados, até mesmo no modelo consagrado como os roedores. Por isso, estudos da pancreatite aguda em novos modelos animais como zebrafish representam uma ponte entre a ciência básica e a clínica. Dessa forma, o presente trabalho pretende estabelecer o zebrafish como um novo modelo animal para estudos com pancreatite aguda induzida por caeruleína e estudar a patogênese e fisiopatologia da referida doença, além de identificar como a inflamação no pâncreas afeta a bioenergética mitocondrial e a capacidade de induzir doenças secundárias. 

As plantas são fontes de metabólitos secundários, ácidos graxos e proteínas que interferem no crescimento e sobrevivência de microrganismos e insetos. Moringa oleifera e Punica granatum são utilizadas na medicina popular e a literatura relata diversas atividades biológicas para essas plantas. Tricophyton tonsurans é um fungo dermatófito causador de doenças que afetam tecidos queratinizados como pele e couro cabeludo e o surgimento de espécies resistentes dificulta o tratamento utilizado antifúngico convencionais. Nasutitermes corniger e Sitophilus zeamaissão insetos pragas que causam prejuízos econômicos para a sociedade. O presente trabalho avaliou o potencial antifúngico de preparações de sementes de M. oleifera (fração proteica contendo lectina, proteína hemaglutinante que reconhece seletivamente carboidratos, óleo fixo e combinação fração proteica/óleo fixo) contra T. tonsurans e atividade inseticida do extrato de pericarpo de P. granatum contra N. corniger e S. zeamais. O óleo fixo foi extraído em soxhlet e caracterizado por GC-MS, apresentando como principais constituintes os ácidos oleico (66%), palmítico (9,25%) e elágico (9,06%). A fração proteica (72,24 mg de proteína/mL) foi obtida através de precipitação com sulfato de amônio e apresentou atividade hemaglutinante (8192-1). Fração proteica e óleo fixo apresentaram efeito fungiostático com concentração mínima inibitória (CMI) de 1024 μg/mL. O efeito da combinação fração proteica/óleo fixo e destes com antifúngicos comerciais revelou efeito aditivo da combinação fração proteica/óleo fixo (ICIF de 0,507) e da fração proteica com cetoconazol (ICIF de 1,0) e efeito sinérgico nas combinações de fração proteica e do óleo fixo com itraconazol (ICIF de 0,12 e 0,25, respectivamente). O crescimento de T. tonsurans tratados com fração proteica, óleo fixo e combinação fração proteica/óleo fixo em presença de sorbitol (0,8 M) revelou que o osmoprotetor não interferiu na ação da fração proteica, mas protegeu as células da ação do óleo fixo e da combinação fração proteica/óleo fixo até a concentração de 2 x CMI. Redução no crescimento fúngico e no número de células viáveis foi detectado após o tratamento do fungo com fração proteica, óleo fixo e combinação fração proteica/óleo. O extrato salino de pericarpo de P. granatum foi obtido e análise do perfil fitoquímico identificou a flavonoides, derivados cinâmicos, taninos hidrolisáveis e açúcares, onde o maior constituinte foi ácido elágico (3,66%). A atividade antioxidante do extrato contendo 315,5 mgQE/g de flavonoides foi detectada pelos métodos ABTS (IC50 de 238,5 mg/mL), DPPH (19,77 mg/mL) e fosfomolibdênio (84,41 mg/mL). O extrato de P. granatum foi termiticida contra as duas castas de N. corniger com concentração necessária para matar 50% (CL50) de 5,9% para soldados e 2,1% para operários e modulou enzimas intestinais aumentando a atividade de endoglucanase e exoglucanase. O extrato causou morte de S. zeamais após 07 dias sendo detectada redução da sobrevivência de 64±6,5% no fim do experimento. Avaliação de parâmetros nutricionais de S. zeamais mostrou redução de ganho de biomassa nas concentrações de 10% e 7,5%, na taxa de consumo relativo na concentração testada de 10% e na eficiência de conversão do alimento ingerido na concentração de 7,5%. O extrato foi deterrente (47,6%) na concentração de 10% e estimulou a atividade de amilase do intestino de S. zeamais nas concentrações de 1,25-5%. Em conclusão, a fração proteica, óleo fixo e combinação fração proteica/óleo fixo obtidas de sementes de M. oleifera foram antifúngicos contra T. tonsurans e o extrato salino de pericarpo de P. grantum foi inseticida contra N. corniger e S. zeamais. 

A candidíase, doença causada por fungos do gênero Candida spp., tem sido relatada como um grave problema de saúde pública, ocasionando até mesmo infecções sistêmicas em indivíduos. Os fármacos utilizados no tratamento da candidíase são escassos e possuem elevada toxicidade, o que leva a busca por substâncias advindas de produtos naturais, com destaque para os terpenos. O objetivo do presente estudo foi investigar a atividade antifúngica de terpenos isolados e em associação com antifúngicos convencionais frente cepas de Candida albicans. Os ensaios utilizados para o referido estudo foram: teste de determinação concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM), através da técnica de microdiluição em caldo; Estudo da ação do fitoconstituinte com menor CIM sobre a micromorfologia fúngica; Mecanismo de ação do terpeno com melhor atividade antifúngica, com ênfase nos seus efeitos sobre a parede celular e membrana plasmática fúngica; Ensaio de associação entre o terpeno de maior destaque e o antifúngico padrão (anfotericina B). Foi realizada uma triagem inicial,testando 24 terpenos frente a 8 cepas de Candida albicans, sendo elas ATCC 76485 e ATCC 90028 (cepas padrão); LM- 587 e LM- 616 (cepas sistêmicas); A- 011, A- 05, A-15 e A-20 (cepas provenientes de amostras bucais). Após realização da triagem, o α-pineno destacou-se quanto a sua atividade antifúngica, apresentando CIM a uma concentração de 32 ug/mL frente a cepa ATCC 76485 e de 64ug/ mL frente a cepa LM- 587, sendo as demais cepas inibidas em concentrações acima de 128ug/mL. Quanto ao ensaio de Concentração fungicida mínima (CFM), o terpeno causou a morte dos microrganismos na mesma concentração CIM, para todas as cepas fúngicas. A substância teste apresentou perfil relevante de inibição quando comparada à anfotericina B. Estudos futuros de análise de biofilme, efeito do terpeno teste sobre a cinética de morte microbiana (Time kill), docking molecular, método de modulação e ensaios de citotoxicidade serão conduzidos, com o intuito de aprofundar o perfil antifúngico e, desse modo, investigar e potencializar sua atividade.

A pandemia de Covid-19 apresentou o vírus Sars-Cov-2 como um grande responsável pelo aumento da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SRAG), antes relacionada as infecções hospitalares por bactérias gram-negativas. Nas últimas décadas, as atividades farmacológicas das plantas no tratamento das doenças respiratórias têm sido investigadas, e as espécies do ecossistema manguezal se mostraram promissoras por suas atividades farmacológicas comprovadas. A Laguncularia racemosa (L.) C. F. Gaertn é uma planta da família Combretaceae, conhecida popularmente como mangue branco, amplamente distribuída no ecossistema manguezal e usada na medicina popular para o tratamento de diarreia, feridas bucais e febre. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar a toxicidade e as atividades antioxidante e anti-inflamatória dos extratos hexânico (EHLr), acetato de etila (EALr) e etanólico (EELr) das folhas de L. racemosa na lesão pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo em camundongos. Os extratos foram preparados pelo método de maceração e foi determinado o teor de fenóis totais, flavonóis e protoantocianidinas. A atividade antioxidante da L. racemosa foi avaliada pelos métodos do fosfomolibdênio e do sequestro de radicais livres DPPH. A citotoxicidade dos extratos foi avaliada frente a célula mononuclear de sangue periférico (PBMC) e hemácias. Na avaliação in vivo, foi realizado o ensaio toxicológico não clínico agudo com o extrato mais ativo nos experimentos in vitro na dose de 2.000 mg/kg. Foi identificado um maior teor de fenóis totais no EELr quando comparado aos demais extratos, enquanto que as proantocianidinas foram indicadas em maior quantidade no EHLr. Na atividade antioxidante, EELr apresentou uma concentração necessária para inibir 50% do radical DPPH (CE50) de 636,7 ± 94,98 µg/mL, enquanto que os demais extratos nesse teste e no método do fosfomolibdênio não diferiram estatisticamente do controle ácido ascórbico. Na atividade citotóxica, os extratos apresentaram IC50 superior a 100 µg/mL. Na avaliação do potencial hemolítico, os extratos não foram capazes de induzir hemólise. A administração de 2.000 mg/kg do EELr não causou alterações comportamentais, nas massas corporais, nem no consumo de água e ração dos camundongos. A DL50 do extrato foi superior a 2000 mg/kg de massa corporal. A partir dos resultados obtidos nesse trabalho, pode-se concluir que os extratos brutos de L. racemosa apresentaram baixa toxicidade, in vitro e in vivo, além de potencial antioxidante provavelmente associado ao teor de fenóis totais, flavonóis e protocianidinas em sua composição.

O TDM afeta cerca de 350 milhões de pessoas e é a principais causa de incapacidade para o trabalho, segundo a Organização Mundial de Saúde. Recentes estudos têm relacionado o processo inflamatório e a disfunção do sistema serotoninérgico na TDM. Estudos clínicos têm indicado a correlação entre DM e TDM, e a resistência à insulina cerebral tem sido proposta como uma possível ligação entre a ação aumentada de glicocorticoides e os sintomas da depressão. Tanto na TDM como no DM, ocorre distúrbios cognitivos, redução da neurogênese e plasticidade sináptica. Drogas moduladoras da inflamação são potencialmente úteis e podem ser identificadas como novos medicamentos para adicionar efeitos benéficos aos tratamentos de eleição utilizados na depressão.
Recentemente, a metformina tem recebido atenção por sua capacidade em promover a neurogênese. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo avaliar a ação da metformina com o escitalopram sobre o metabolismo do triptofano, neuroplasticidade e sinalização da insulina e n depressão associado ao diabetes induzido por estreptozotocina. O estudo foi realizado com 80 camundongos isogênicos C57bl/6 machos. O diabetes foi induzido com uma dose única de STZ de 150mg/kg, administrada por injeção intraperitoneal após jejum noturno. O tratamento foi realizado através de gavagem intragástrica. No último dia de tratamento, os camundongos foram submetidos a testes comportamentais. Todos os animais foram anestesiados e sacrificados no 27o dia do experimento, onde foi retirado o as regiões do hipocampo, córtex pré-frontal e estriado do encéfalo para realização de imuno-histoquímica e imunofluorescência. No início do experimento, os animais não apresentaram diferença no peso e na glicemia. Os animais foram divididos em cinco grupos, apresentando diferenças significativas entre o peso e a glicemia, quando comparado antes e após a indução do DM. Os grupos que receberam o STZ apresentaram maior tempo de imobilidade quando comparados aos animais do grupo controle (p <0,05). A metformina reduziu o tempo de imobilidade quando comparada ao grupo controle (p <0,01), apresentando efeito antidepressivo semelhante ao escitalopram. No teste de campo aberto, os grupos que receberam o STZ atravessam menos o quadrante central e a periferia, quando comparados aos animais do grupo controle (p <0,05). No entanto, os tratamentos com metformina e escitalopram não foram capazes de reverter esses parâmetros. Observamos que os animais do grupo controle apresentam maior frequência de micção, quando comparados aos demais grupos (p <0,05), demonstrando comportamento menos ansioso quando comparados aos grupos diabéticos. As análises moleculares dos tecidos coletados estão em processamento, assim como um novo experimento comportamental, com previsão para término aindaneste semestre. Tais dados irão ajudar a entender melhor os resultados encontrados nos testes de comportamento.

As plantas interagem com uma série de microrganismos em seus habitats naturais. Membros benéficos do microbioma vegetal desempenham importantes papeis na sanidade, desenvolvimento e adaptabilidade das plantas, seja auxiliando no crescimento ou protegendo o hospedeiro vegetal contra a ação de estresses bióticos e abióticos. O Nordeste brasileiro contém uma ampla biodiversidade de plantas nativas e exóticas. Essa região semiárida compreende o Domínio das Caatingas, abrangendo uma vegetação adaptada às condições adversas resultantes do regime de chuvas desiguais. Dentre as espécies de plantas que se destacam em ambientes extremos do Nordeste está a Calotropis procera (Aiton) W. T. Aiton. Dotada de uma extrema capacidade de sobrevivência em ambientes desertos e áridos, no Brasil C. procera ocorre especialmente em condições salinas próximo a costa e em solos semiáridos da Caatinga. Diante do sucesso adaptativo dessa espécie frente a tais ecossistemas, o presente trabalho objetivou analisar o microbioma de C. procera em dois ambientes distintos (semiárido e litoral pernambucano) por meio da metagenômica, a fim de compreender a diversidade bem como o potencial de sua microbiota associado na adaptabilidade a ambientes adversos. Para tanto, foram realizadas amostragens em populações naturais de C. procera localizadas em área litorânea e semiárida nos municípios de Paulista e Petrolina, respectivamente. Foram obtidas amostras de raízes e rizosfera para análise molecular e de solo adjacente às plantas de C. procera para análises moleculares e químicas. A análise química dos solos coletados demonstrou que houve diferenças significativas para a maioria das propriedades químicas entre as amostras das duas áreas, com destaque para a presença de solos predominantemente ácidos e com maior teor de nutrientes no ambiente semiárido. As amostras de DNA total foram conduzidas ao sequenciamento metagenômico shotgun na plataforma HiSeq2500. Os dados gerados a partir do sequenciamento foram submetidos a análise de controle de qualidade e demonstraram ótima qualidade para o prosseguimento com as demais análises previstas para o estudo. A partir dos dados obtidos foi possível identificar o perfil taxonômico dos principais grupos bacterianos nas amostras sequenciadas. Pretende-se a partir dos dados do sequenciamento avaliar, além da composição, o potencial funcional do microbioma de C. procera em diferentes condições ambientais¸ visando ampliar o conhecimento da microbiota dessa espécie, ainda pouco explorada na literatura, e associar os dados com a sua sobrevivência diante ambientes extremos.

As leishmanioses são um complexo de doenças parasitárias causadas por protozoário do genero Leishmania, inseridas no grupo de doenças tropicais negligenciadas. Os principais medicamentos utilizados no tratamento das leishmanioses são antimoniais pentavalentes e anfotericina B. Contudo, esses medicamentos estão associados a sérios efeitos colaterais devido à toxicidade elevada. Portanto, é necessária a busca de novas drogas leishmanicidas. Nesse contexto, os produtos naturais são uma fonte de novas moléculas ativas. Neste trabalho, investigou-se a atividade antileishmania dos extratos hexânicos, acetato de etila, etanólicos e metanólicos de Ocotea fasciculata e Ocotea glomerata. A obtenção da IC50 (concentração da amostra teste que inibi 50% do crescimento dos parasitas em relação ao controle) foi realizada a partir do método colorimétrico do MTT (brometo de 3-metil [4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difeniltetrazólio). O MTT avalia a atividade metabólica das células com base na redução desse sal por desidrogenases, que resulta na produção de cristais de formazan intensamente corados no interior das células. A avaliação dos extratos mostrou que apenas a espécie O. fasciculata apresenta interessante potencial leishmanicida sobre formas promastigotas de L. amazonensis e infantum. Os três extratos mais ativos foram: o Extrato Etanólico Bruto, o extrato hexânico e o Extrato de Acetato de Etila, sendo este último o de maior eficácia. A partir de análises cromatográficas dos extratos, sugere-se que o ativo responsável por tal atividade esteja em maior concentração no extrato acetato de etila. Para identificação da substância ativa será necessário realizar, numa próxima etapa, processos de fracionamento, purificação, isolamento e caracterização.

A biodiversidade brasileira inclui uma gama de espécies vegetais que produzem moléculas com atividades antimicrobiana, antioxidante e fotoprotetora, entre outras. Essas propriedades estão diretamente relacionadas à presença de compostos bioativos, como metabólitos secundários, proteínas e polissacarídeos. Dentre as proteínas, destacam-se as lectinas, proteínas capazes de se ligar de forma seletiva e reversível a carboidratos, possuindo diversas atividades biológicas. O presente trabalho teve como objetivos avaliar atividades biológicas e a toxicidade de extratos salinos de folhas e caule de Portulaca elatior, bem como de uma lectina (PeLL) isolada de suas folhas. As folhas ou caules de P. elatior foram secos, triturados e homogeneizados em NaCl 0,15 M para obtenção dos extratos salinos, os quais foram submetidos à caracterização química por cromatografia em camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Os extratos salinos foram avaliados quanto à atividade antioxidante pelos métodos de sequestro dos radicais DPPH e ABTS⁺ e determinação de capacidade antioxidante total (CAT), sendo determinados os valores de CI₅₀ (concentração responsável pela redução de 50% da presença do agente oxidante). A atividade fotoprotetora dos extratos foi mensurada por meio da determinação do fator de proteção solar (FPS) in vitro. Por fim, o extrato de folhas, com atividades biológicas mais significativas, foi selecionado para os testes de toxicidade in vivo (toxicidade aguda oral e toxicidade dérmica; 1000 e 2000 mg/kg) e in vitro (atividade hemolítica; 7,81–1.000 µg/mL). Para purificação de PeLL, o extrato de folhas foi submetido à cromatografia em coluna de quitina. PeLL foi então submetida a avaliações de sua atividade hemaglutinante (AH) na presença de íons, carboidratos e diferentes valores de pH e temperatura. Foram determinados ainda ponto isoelétrico (pI), massa molecular e estabilidade frente a agentes desnaturantes (por análises fluorimétricas). Por fim, PeLL foi avaliada quanto à atividade antimicrobiana contra espécies de Pectobacterium e Candida, toxicidade oral aguda in vivo (5 e 10 mg/kg) e atividade hemolítica. Os resultados mostraram que os extratos de folhas e caules de P. elatior possuem em sua composição fenóis, flavonoides, açúcares redutores, terpenos e esteroides. Na atividade antioxidante, o extrato de folhas demonstrou maior eficácia em capturar os radicais livres ABTS⁺ (CI₅₀: 34,15 µg/mL) e DPPH (CI₅₀: 55,44 µg/mL), bem como maior CAT (CI₅₀: 413,3 µg/mL) quando comparado ao extrato de caule (CI₅₀ de 628,80, 2.499 e 9.475 µg/mL nos ensaios de ABTS⁺, DPPH e CAT, respectivamente). Isso também foi observado para a atividade fotoprotetora, com o extrato de folhas apresentando FPS > 6 nas concentrações de 50 e 100 µg/mL, enquanto o extrato de caule apresentou FPS < 6 em todas as concentrações testadas. Os ensaios de toxicidade in vivo e in vitro apontaram que o extrato de folhas não causou alterações letais nos parâmetros fisiológicos, hematológicos e bioquímicos dos camundongos, bem como apresentou baixa ação hemolítica. No que concerne à purificação de PeLL, a cromatografia do extrato de folhas em coluna de quitina resultoi em um único pico de proteínas adsorvidas e eluídas com ácido acético. PeLL apresentou AH específica de 744,2 (fator de purificação de 1.695 vezes), uma única banda polipeptídica em eletroforerse para proteínas nativas ácidas, pI 5,4 e massa molecular de 20 kDa. A lectina teve sua AH inibida por manose, galactose, Ca²⁺, Mg²⁺ e Mn²⁺. A AH de PeLL se manteve estável mesmo diante do aquecimento a 100 °C, embora tenham sido detectadas alterações conformacionais através das análises fluorimétricas das amostras após aquecimento. PeLL apresentou AH mais expressiva na faixa de pH ácido (3,0–6,0). A lectina apresentou concentração mínima inibitória (CMI) e concentração mínima bactericida (CMB) de 0,185 e 0,74 μg/mL, respectivamente, para todas as cepas de Pectobacterium avaliadas. Além disso, PeLL apresentou CMI e concentração mínima fungicida (CMF) de 1,48 μg/mL para C. albicans, C. tropicalis e C. krusei; e CMI e CMF de 0,74 e 2,96 μg/mL, respectivamente, para C. parapsilosis. Nenhuma atividade hemolítica in vitro ou sinais de toxicidade aguda in vivo em camundongos foram observados.

A invaginação basilar (IB) e a Malformação de Chiari tipo I (MCI) são malformações da junção craniovertebral (JCV) que acometem a base do crânio. Estas doenças podem estar isoladas ou associadas, em indivíduos assintomáticos ou com sintomas neurológicos progressivos.O forame magno (FM) é uma região de interesse no diagnóstico radiológico dessas doenças, além de ser um local de passagem de importantes estruturas neurovasculares e do líquido cerebrospinal. A morfometria do FM pode contribuir para elucidar lacunas na fisiopatologia dessas doenças e o respectivo papel dos espaços liquóricos. Este estudo teve como objetivo analisar as variações que ocorrem no FM na IB e MCI com e sem associação. Trata-se de um estudo com base em 258 RMs de adultos, tendo 102 controles selecionados de forma aleatória e doentes (IB=42; MCI=45 e MCI+IB=69) selecionados por conveniência. Os exames de imagem foram analisados no software de visualização Osirix versão 3.8.2. Foram realizadas mensurações lineares, angulares e de volume no FM e estruturas sintópicas. Utilizamos ANOVA univariada seguida do teste post-hoc de Tukey para avaliar a diferença entre médias das variáveis quantitativas entre os agrupamentos. O FM tem padrões morfológicos diferentes na IB e MCI, isoladas ou em associação, quando comparado ao grupo controle. Na IB e MCI+IB houve um aumento nas dimensões do FM em comprimento (p<0.001; p<0.001) e largura (p=0.048; p<0.001). A MCI não teve alterações nas dimensões do FM. Ainda nos grupos IB e MCI+IB foi observado uma acentuada obliquidade (p<0.001; p<0.001) e inclinação (p<0.001; p<0.001) do FM. O espaço liquórico foi reduzido em todos os doentes (p<0.001), porém com fatores causais diferentes, seja pela herniação das tonsilas na MCI e/ou inclinação do FM na IB. MCI (p<0.001) e MCI+IB (p<0.001) se associaram com redução do espaço liquórico da cisterna magna pela ocupação das tonsilas cerebelares. Por fim, uma análise parcial observou uma redução da fossa posterior e JCV apenas na MCI+IB (p=0.040). 

A primeira barreira entre os anfíbios e o ambiente é o tegumento, envolvido com funções como proteção mecânica, defesa contra patógenos, controle da passagem de água, respiração, percepção sensorial, coloração e camuflagem. Este tegumento é composto por epiderme e derme, onde há presença de glândulas na pele, uma característica comum entre todos os anfíbios. Algumas dessas glândulas são conhecidas como glândulas de veneno e secretam diferentes compostos bioativos. Leptodactylus vastus é uma rã endêmica do Brasil que ocupa diferentes biomas e pode ser encontrada em toda a região Nordeste brasileira. A presente tese como objetivo caracterizar o perfil proteico/peptídico da secreção de glândulas cutâneas de L. vastus (SLV), avaliar seu potencial como fonte de agentes citotóxicos contra células neoplásicas e sua atividade antimicrobiana contra bactérias e fungos patogênicos. A coleta de SLV foi realizada por meio de estimulação manual do tegumento com o animal imerso em um béquer contendo aproximadamente 60 mL de água Milli-Q. O material extraído (SLV) passou por processo de liofilização e foi estocado individualmente a -20º C. Para avaliar o perfil proteico de SLV, foram realizadas as seguintes etapas: dosagem de proteínas; determinação de atividade de tripsina, ensaio de hemaglutinação e teste de inibição de tripsina; e eletroforese em gel de poliacrilamida em condições desnaturantes (SDS-PAGE). As bandas observadas foram excisadas do gel, digeridas com tripsina e submetidas à análise por espectrometria de massas e as frações com maior intensidade de absorbância a 216 nm foram submetidas a espectrometria de massas. Também foi avaliada a atividade hemolítica de SLV sobre eritrócitos humanos tipo O+. A atividade antimicrobiana de SLV foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo contra cepas-padrão de Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis , Escherichia coli e Salmonella enterica serovar. Enteritidis, bem como cepas de Candida albicans,  Candida parapsilosis, Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii. As frações obtidas com o fracionamento cromatográfico de SLV na coluna de fase reversa foram avaliadas quanto à capacidade de inibir o crescimento de Staphylococcus aureus e Escherichia coli. SLV apresentou uma concentração de proteínas de 2,25 mg/mL. No perfil eletroforético, foi possível observar a presença de sete bandas polipeptídicas. A análise revelou similaridade das proteínas presentes nas bandas 3, 4 e 5 com a enzima metanotiol oxidase das espécies de rãs aquáticas Xenopus tropicalis e Xenopus laevis. Não foi detectada a presença de tripsina, lectinas (atividade hemaglutinante) e inibidores de tripsina em SLV. O perfil obtido no fracionamento cromatográfico de SLV revelou diversos picos de peptídeos, os quais foram submetidos à espectrometria de massas. Os espectros obtidos estão sendo analisados. SLV não apresentou atividade hemolítica nem atividade antibacteriana frente S. aureus, E. faecalis, E. coli e S. enteritidis. SLV também não foi capaz de inibir o crescimento das cepas de fungos testadas. Da mesma foram, nenhuma das frações contendo peptídeos de SLV exibiu atividade inibitória sobre as bactérias testadas. Os próximos passos incluem a análise dos picos correspondentes aos peptpídeos e a avaliação de citotoxicidade contra células tumorais e efeitos de SLV sobre a coagulação sanguínea.

Euphorbia hirta pertencente à família Euphorbiaceae, sendo utilizada para o tratamento de doenças respiratórias, gastrointestinais, inflamatórias e bacterianas. Este trabalho investigou a composição fitoquímica, as atividades antioxidante e a toxicidade in vivo de extrato salino de folhas e também isolou a lectina EhLL (do inglês E. hirtaleaf lectin). As folhas (10 g) foram adicionadas a solução salina tamponada de PBS 0,1 M contendo NaCl 0,15 M pH 7,5 em 28 °C a 4 h, a mistura foi filtrada, centrifugada obtida o extrato bruto e liofilizada. A caracterização fitoquímica foi feita por cromatografia de camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antioxidante foi avaliada pelos testes do DPPH e ABTS (31,25 - 1.000 µg/mL) e os resultados representados pela concentração de antioxidante que inibiu 50% dos radicais (IC50). O ensaio de toxicidade aguda usou camundongos albinos Swiss fêmeas administrados oralmente com dose única da infusão a 2000 mg/kg com posterior análise nas primeiras duas horas e durante 14 dias. Os animais foram avaliados quanto ao peso corporal, consumo de água e ração, parâmetros bioquímicos e hematológicos e histologia do fígado, baço e rins, coração e pulmão. A genotoxicidade e a mutagenicidade in vivo da infusão (2000 mg/kg) foi analisada através do ensaio cometa e teste do micronúcleo, respectivamente. A CCD detectou flavonoides, terpenos e esteroides, cumarinas e saponinas e a CLAE detectou ácido gálico e elágico. Foram obtidos valores de 107,3±0,7 µg EAT/mg para fenois totais, 22,9±0,4 µg ER/mg para flavonoides e. Atividade antioxidante (CI50 490,8±0.2 µg/mL e 569,6±0,5 µg/mL, nos testes do DPPH e ABTS, respectivamente). A dosagem apresentou alteração no peso ou o consumo de água e ração, bem como os parâmetros bioquímicos, hematológicos e histológicos nos animais tratados de modo satisfatório. Genotoxicidade e mutagenicidade não foram detectadas na dose de 2000 mg/kg. O extrato foi submetido a precipitação de proteínas utilizando sulfato de amônio 20-40% de saturação e cromatografia da fração precipitada (FP20-40%) em coluna de quitina. A atividade hemaglutinante (AH) foi monitorada ao longo do processo de purificação utilizando eritrócitos de coelho. O perfil eletroforético em condições desnaturantes e em condições nativas foi avaliado em gel de poliacrilamida contendo sulfato sódico de dodecila (SDS-PAGE). Os efeitos do pH, temperatura e íons sobre a AH foram determinados e o efeito de pH e temperatura na conformação. A atividade antimicrobiana contra fungos foi avaliada através da determinação da concentração mínima inibitória (CMI), mínima bactericida (CMB) e mínima fungicida (CMF). O extrato e FP20-40% apresentaram AH específica de 10,5 e 61,1, respectivamente. EhLL adsorveu na coluna de quitina e foi eluida com ácido acético 1,0 M com AH específica de 98,76. EhLL apresentou massa nativa de 90 kDa, sua AH foi detectada em valores de pH de 3,0 a 8,0, foi resistente ao aquecimento até 100°C durante 30 min e não foi estimulada pelos íons divalentes Mg2+, Mn2+ e Ca2+ a 20 mM. EhLL foi agente mostrou atividade antifúngica contra espécies de Candida com CMI e CMF de 3,125 µg/mL. O estudo revela que E. hirta é fonte de compostos fenólicos e agentes antioxidantes e possui EhLL, uma lectina ligadora de quitina, termoestável, ativa em ampla faixa de pH e com ação antibacteriana e antifúngica.

O câncer é uma ameaça crescente à saúde pública, sendo, portanto, uma das
principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo, além de ser
responsável por altos impactos sociais e econômicos. A busca por novos
compostos bioativos é motivada pela necessidade de se obter resultados
terapêuticos mais eficazes e que atuem de forma seletiva minimizando os efeitos
colaterais. Neste contexto, produtos obtidos de algas marinhas têm-se mostrado
uma fonte rica em substâncias bioativas com atividade biológica e potenciais
aplicações medicinais no tratamento de doenças degenerativas e tumores. Neste
trabalho o óleo obtido da macroalga marinha L. dendroidea foi submetido à
Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas. Em seguida, o
potencial antioxidante do óleo foi avaliado pelos métodos de DPPH, ABTS e
Fosfomolibdênio. Além disso, foi avaliada a atividade anticancerígena usando seis
linhagens de células tumorais humanas HeLa (Carcinoma cervical humano), NCI-
H292 (Carcinoma mucoepidermoide de pulmão), HL60 (Leucemia promielocítica
aguda), HCT-16 (câncer de cólon humano), K562 (Leucemia mielocítica crônica),
MCF-7(Adenocarcinoma de mama) e linhagens não cancerígenas, Vero (Epitelial
normal), e L929 (Fibroblastos de camundongos) usando o ensaio colorimétrico
MTT. Os compostos silfiperfolan-7-β-ol e (-) -7-epi-silfiperfolan-6 β-ol foram
identificados como sendo majoritários no óleo de L. dendroidea. Das metodologias
empregadas não foi possível verificar a capacidade do óleo em sequestrar os
radicais livres. A atividade citotóxica mostrou excelentes resultados para todas as
células cancerígenas, no entanto, a melhor atividade foi vista para a linhagem HL-
60 com valores de IC50 de 0,30 µg/mL. Os compostos majoritários do óleo de L.
dendroidea já foram descritos anteriormente e apresentaram atividades
antimicrobiana, antioxidante e inseticida, porém, este é o primeiro estudo na
literatura que relata as propriedades citotóxicas do óleo essencial dessa espécie
frente a células cancerígenas.

Jatropha curcas L. (ou pinhão-manso) é uma espécie de bom potencial para produção de biodiesel, principalmente em solos propensos a déficit hídrico. Mas, a espécie se mostra sensível à salinização dos solos, um fator abiótico que limita os cultivos. Na sinalização celular desencadeada por estímulos abióticos percebidos pelas plantas, a fosforilação de proteínas, pela ação das proteínas quinases, é papel central. O presente trabalho tem como objetivo analisar e caracterizar genes codificadores de proteínas quinases expressos em raízes de J. curcas após um estímulo salino (150 mM NaCl). Associadas ao genoma de J. curcas foram identificadas 1.303 potenciais quinases, de 20 diferentes grupos, e 110 famílias gênicas. O grupo mais bem representado
correspondeu a RLK-Pelle (859), com 66 % das quinases identificadas. A caracterização dos potenciais genes de J. curcas codificadores de quinases (JcPKs) evidenciou uma heterogeneidade estrutural presente no quinoma de J. curcas. Mais da metade das RLKs identificadas foram associadas com membranas, mostrando relação com a percepção de estímulos extracelulares, já os demais grupos ocupariam diferentes compartimentos. Nas regiões
promotoras de genes do grupo RLK-Pelle_LRR, os elementos cis-reguladores mais associados a fatores de transcrição (FTs) destacaram os FTs do tipo DOF e MIKC. Muitos dos prováveis FTs que regulariam a expressão dos genes quinases foram descritos em respostas a estresses abióticos. Uma análise comparativa das sequências JcPKs, com similares de outras espécies da mesma família (Euphorbiaceae), mostrou boa similaridade entre os ortólogos. A análise de expressão gênica in silico mostrou diferenças relevantes nas
respostas dos acessos estudados após o estímulo salino. O genótipo menos tolerante ao sal (Jc171) modulou mais a expressão gênica das quinases após o sal [257 transcritos diferencialmente expressos: 17 induzidos (UR), 240 reprimidos (DR)] do que o genótipo mais tolerante (Jc183), que modulou significativamente somente 20 transcritos (12 UR, 8 DR). Desta forma, o genótipo Jc171 foi mais informativo na caracterização dos termos de ontologia gênica associados a resposta salina. A predição das estruturas gênicas das quinases de J. curcas, bem como a resposta diferencial dos dois genótipos analisados fornecem uma melhor compreensão das JcPKs expressas após a percepção do sal, em face a um potencial estresse salino.

As leishmanioses é um complexo de doenças negligenciadas causadas por protozoários do gênero Leishmania, que representam um sério problema de saúde pública em toda América Latina e, particularmente, no Brasil. Tendo em vista a gravidade das Leishmanioses, a ausência de uma terapia eficaz de baixo custo, a toxidade das drogas comumente utilizadas e a presença de resistência do parasita ao tratamento, a busca por novas drogas ainda se faz necessária. A biodiversidade existente na flora brasileira e o seu potencial como fonte de moléculas bioativas proporciona à busca de formas alternativas de tratamento desta endemia. Neste trabalho investigou-se as atividades: leishmanicida, anticancerígena, antioxidante e avaliação insilico ADMET das amostras. O extrato metanólico do Felicium decipiens apresentou melhor atividade leishmanicida, seguido do óleo essencial da Eugenia pohliana, da dehydrogoniotalamina e do óleo essencial da Eugenia macrophylla. A atividade anticancerígena foi realiza frente às célula tumorais MCF-7 (adenocarcinoma de mama), NCI-H292 (adenocarcinoma de pulmão), HeLa  (carcinoma cervical humano), HL-60 ( Leucemia promielocítica aguda), K562 ( Leucemia mielocítica crônica), e células não tumorais, L929 ( fibroblasto de camundongo) e, células VERO ( células epiteliais), pelo método colorimétrico MTT. Dentre as amostras testadas a dehydrogoniotalamina apresentou melhor atividade anticancerígena, com uma IC50 de 9,64 µg/mL ( HeLa ). O potencial antioxidante das substâncias testadas foi avaliado pelo método DPPH e pelo método do fosfomolibdênio. A Dehydrogoniothalamina apresentou capacidade de sequestrar radicais livres em torno de 57,67 %, pelo método de DPPH. E os óleos essenciais da Eugenia pohliana e Verbesina macrophylla, mostraram capacidade antioxidante total bastante significativa, perfazendo 82,8 e 84,02%, respectivamente.Foi realizada a avaliação in silico ADMET dos compostos majoritários do óleo essencial da Eugenia pohliana e da Dehydrogoniothalamina, utilizando como alvo molecular a enzima essencial a síntese de lipídio da leishmania, a CYP51 ( lanosterol 14α-demetilase ). A avaliação in sílico de ADMET das amostras evidenciou que essas moléculas apresentam boas propriedades farmacocinéticas.

Os pontos quânticos (PQs) são nanocristais fluorescentes de semicondutores com propriedades ópticas singulares. Os quelatos de Gd(III) são utilizados como agentes contraste (ACs) na técnica de imagem por ressonância nuclear magnética (IRM). Combinando-se PQs a quelatos de Gd(III) é possível aliar a especificidade e a sensibilidade dos métodos baseados em fluorescência e proporcionar um sinal paramagnético otimizado para IRM. Assim, o objetivo dessa dissertação foi desenvolver uma nanoplataforma multimodal formada por PQs de CdTe carboxilados, quelatos do tipo DOTA-Gd(III) e a transferrina (Tf), uma vez que receptores de transferrina (RTfs) podem estar superexpressos em células de câncer, sendo então alvos interessantes para estudos sobre a biologia do câncer. Para tanto, os PQs foram conjugados de forma covalente com os ACs na proporção 1:30 (PQs:ACs), via etilenodiamina. Conjugou-se então covalentemente o nanossistema obtido com a Tf. As nanossondas foram caracterizadas por espectroscopias de absorção e emissão e relaxometria. A conjugação com a Tf foi analisada por ensaio fluorescente em microplaca (EFM). Para avaliar a efetividade do nanossistema multimodal e sua especificidade por RTfs, ensaios de marcação fluorescente com células HeLa foram também realizados. A nanossonda multimodal exibiu uma relaxividade longitudinal T1 nominal ca. 5× menor que a do quelato molecular (a 37 oC e 60 MHz) e manteve a fluorescência. Observou-se uma efetiva conjugação com a Tf, obtendo-se um sinal de fluorescência relativa de ca. 1.130% pelo EFM. Na citometria de fluxo observou-se uma marcação de ca. 88% das células HeLa, reduzida para ca. 39% após saturação prévia dos RTfs com Tf, sugerindo especificidade para o nanossistema. Uma captação celular eficiente foi observada pela microscopia de fluorescência. Portanto, a nanoplataforma multimodal óptica-magnética desenvolvida apresentou potencial para ser aplicada em estudos biológicos associados ao câncer tendo como alvo os RTfs.

A espécie vegetal Bauhinia monandraKurz., pertencente a família Fabaceae e amplamente distribuída no território brasileiro é conhecida popularmente como “pata de vaca” e utilizada principalmente na medicina pelo uso no tratamento de inflamação e Diabetes. Bactérias endofíticas podem promover inúmeras vantagens a suas plantas hospedeiras, como indução do crescimento e defesa contra agentes patogênicos. Lectinas são proteínas reconhecedoras e ligantes de carboidratos e promovem inúmeras atividades biológicas. E em alguns estudos foram demonstrados a capacidade de lectinas aglutinar células bacterianas endofíticas sem promover atividade antimicrobiana. Processos de caracterização de lectinas são fundamentais para definição de sua estrutura e função, sendo empregados métodos convencionais e diferenciados para este processo, como a técnica eletroquímica de Voltametria Cíclica. O objetivo do presente estudo foi avaliar a interação entre bactérias endofíticas e a lectina galactose específica BmoLL isolados de folhas de B. monandra com técnicas de aglutinação e eletroquímica como estrtégia de caracterização da lectina. Nos ensaios de aglutinação BmoLL  foi testada para três estírpes bacterianas Bacillus sp. , Burkholderia sp. e Enterobacter sp., onde a lectina promoveu  maior atividade aglutinante em células de Enterobacter sp. em títulos de 1.024¹. E em ensaios de inibição por galactose, ainda manteve atividade aglutinante para Enterobacter sp. em títulos de 8¹. Nos ensaios eletroquímicos com Voltametria cíclica, as diminuições das correntes de pico catódica e anódica de  BmoLL imobilizada em eletrodo de ouro na presenção de carboidratos redutores Glicose e Galactose, foi possível perceber a interação eletroquímica específica da lectina por galactose. Nos ensaios com as bactérias endofíticas, BmoLL imobilizada em eletrodo de Ouro promoveu interação com as três estípes endofíticas testadas, sendo detectado uma diminuição dos processos de oxidação e redução na interface eletrodo/solução a medida que aumentava a concentração de bactérias. Diante dos resultados foi possível perceber a possibilidade de caracterização eletroquímica da lectina BmoLL na interação com bactérias endofíticas.

A Síndrome Respiratória Aguda Grave coronavírus 2 (SARS-CoV-2) é responsável pela pandemia da doença do coronavírus-2019 (COVID-19), a qual levou à notificação de mais de 200 milhões de casos em todo o mundo. Desde então, a vigilância genômica tem sido uma ferramenta fundamental para rastrear a disseminação viral. Neste estudo fornecemos uma análise detalhada da dinâmica temporal de mutações e linhagens de SARS-CoV-2 durante a primeira onda da pandemia no estado de Pernambuco, Brasil. Para isso, realizamos a caracterização de 67 genomas de 22 municípios, os quais foram combinados com 293 sequências de Pernambuco disponíveis no GISAID. Detectamos um total de 962 SNPs em regiões codificantes, a maioria deles localizados na ORF1ab. Observamos padrões dinâmicos de mutações correlacionados a propagação de linhagens ao longo da primeira onda. Observamos a presença de mutações com frequências relativas constantes em Pernambuco durante todo o período de amostragem C241T, C3037T (F924F), C14408T (P4715L/P323L), A23403G (D614G), G28881A (R203K), G28882A (R203R) e G28883C (G204R). Foi detectada a circulação simultânea de 18 linhagens em Pernambuco, sendo as mais prevalentes B.1.1, B.1.1.28, B.1.1.33 e P.2, respectivamente. A rede de haplótipos e a análise filogenômica mostraram que as sequências se agruparam em 4 clados principais de acordo com a dinâmica evolutiva de SARS-CoV-2, tendo havido importações iniciais de linhagens, seguida por expansão e transmissão local de linhagens nacionais, contribuindo para o crescimento acelerado da epidemia regional. Esses resultados evidenciam elevados níveis de diversidade genômica em Pernambuco e destacam a importância de investigações contínuas em vigilância genômica para rastreamento de variantes virais.

A prospecção por novos padrões moleculares visando o tratamento de doenças causadas por microrganismos patogênicos tem aumentado nas últimas décadas, em decorrência do surgimento de cepas resistentes às terapias vigentes, mas também devido aos seus efeitos tóxicos. Bactérias e fungos apresentam vasto repertório de moléculas como as proteases, enzimas catalisadoras de ligações peptídicas, essenciais para infectividade e virulência. Estudos mostraram que compostos como aqueles oriundos de fontes biológicas, reduziram a infectividade e proteção de diversos microrganismos pela ação inibitória sobre proteases específicas. De posse dessas informações, os inibidores derivados de plantas podem ser pleiteados como potenciais fármacos para atenuar complicações clínicas provocadas por patógenos como Staphylococcuss aureus e Candida albicans. Ensaios in vitro revelaram a capacidade de um Inibidor de Tripsina de Enterolobium contortisiliquum (EcTI) em promover ação antivirulência contra esses patógenos oportunistas, dificultando a produção do pigmento estafiloxantina da S. aureus, que uma vez ausente torna a bactéria suscetível à defesa imunológica do hospedeiro. A capacidade de S. aureus em causar hemólise e de produzir biofilme também foi reduzida na presença desse composto natural. O EcTI ainda prejudicou a formação do biofilme de C. albicans, promovendo inclusive a quebra dessa barreira protetora. Diante desse cenário, esse estudo oportuniza discussões sobre os mecanismos virulentos relacionados às proteases e aos efeitos provocados por inibidores. Além disso, as atividades in vitro realizadas concedem o primeiro relato sobre os efeitos do EcTI na antivirulência contra S. aureus e C. albicans.

A osteoartrite (OA) é uma doença sem tratamento claro e eficaz que afeta mais de 237 milhões de pessoas no mundo. Devido a ineficácia dos tratamentos atuais, novas alternativas terapêutica mais eficazes e com menos efeitos colaterais tem sido necessárias. O condroitim sulfato (CS) é um polissacarídeo sulfatado (PS) bastante recomendado para o tratamento de pacientes com OA de joelho, apesar de sua eficácia terapêutica ainda não estar bem estabelecida. O condroitim sulfato fucosilado (CSF) é um PS extraído de organismos marinhos e que possui uma estrutura análoga ao CS de mamíferos, e que por apresentarem excelentes propriedade anti-inflamatórias, é um candidato promissor para o tratamento da OA. Devido ao potencial terapêutico desses PSs, este trabalho visou avaliar o efeito terapêutico do CS de traqueia bovina (CS-A), da cartilagem de tubarão (CS-C) e do CSF da parede corporal do pepino-do-mar Holothuria grisea em modelo in vivo de OA induzido por monoiodoacetato de sódio na articulação femoropatelar de camundongos C57BL/6. Após indução da OA, os camundongos foram divididos aleatoriamente em grupos (n = 5) de acordo com o tratamento oral diário durante 28 dias: (1) SHAM (falso operado, salina 0,9 % v.o.); (2) controle negativo (doente, salina 0,9% v.o); (3) CS-A (doente, 100mg/kg v.o); (4) CS-C (doente, 100mg/kg v.o) e (5) CSF (doente, 100mg/kg v.o). A eficácia dos tratamentos foi avaliada através da mensuração da alodinia (50% do limiar de nocicepção), atividade motora, migração de leucócitos, atividade anti-inflamatória (dosagem de IL-10), análise morfométrica e escore histopatológico OARSI. Durante 28 dias de experimentação, o CS-A (100 mg/kg), CS-C (100 mg/kg) e CSF (100 mg/kg) conseguiram induzir analgesia, aumentar a atividade motora e reduzir a migração de leucócitos de camundongos osteoartriticos de forma significativa em relação ao controle negativo (salina 0,9 %). Além disso, a morfometria revelou um aumento significativo da cartilagem sobre a tíbia para os animais tratado com CS-A e CSF, cujos resultados foram confirmados pela análise histopatológica OARSI, mostrando uma redução da gravidade da OA em relação ao controle negativo. Contudo, apenas CS-A (100 mg/kg) aumentou significativamente os níveis de IL-10, sugerindo que esta molécula possui uma atividade protetora contra a degeneração da cartilagem através da regulação da inflamação. Apesar de preliminares, os mecanismos envolvidos no tratamento com CSF precisam ser melhores investigados, visto que seu efeito protetor na OA foi semelhante ao apresentado para o CS-A.

O uso desordenado de antibióticos tem aumentado e vem se tornando, nos últimos anos, um grande problema de acordo com a Organização Mundial da Saúde, gerando microrganismos resistentes aos medicamentos tradicionais. Em contrapartida a este problema de saúde pública, novos antibióticos com diferentes vias de ação têm sido pesquisados. Muitos destes antimicrobianos têm sido descobertos a partir da primeira linha de defesa de vegetais, onde os peptídeos antimicrobianos destacam-se como agentes promissores. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver e avaliar pelo menos um peptídeo vegetal bioinspirado em thaumatin-like (TLPs) identificadas no feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] fornecendo conhecimentos sobre suas principais características funcionais e toxicidade. No intuito de encontrar novos compostos com atividade antimicrobiana, foram utilizadas como template sequências de TLP obtidas do transcriptoma do feijão caupi. A predição da atividade antimicrobiana e a identificação dessas regiões com atividade foi realizada no servidor CAMPr3 e a toxicidade, no Toxipred. O desenho racional do peptídeo foi conduzido com objetivo de manter a atividade antimicrobiana predita e minimizar a toxicidade dessa molécula. A modelagem tridimensional foi realizada por threading e a estabilidade do modelo foi avaliado pela simulação em dinâmica molecular (DM) pelo pacote GROMACS 2019.4. A síntese do peptídeo foi realizada comercialmente. Por fim, foram realizadas as análises da atividade antimicrobiana contra cepas bacterianas (Staphylococcus aureus ATCC-25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853, Klebsiella pneumoniae ATCC-13883 e Acinetobacter baumannii ATCC-19606) e o potencial citotóxico e genotóxico foram avaliados através do ensaio de MTT (Brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2, 5- difeniltetrazólio) e teste do micronúcleo, utilizando cultura de células de fibroblastos de camundongo (células L929). Os resultados revelaram que o Peptídeo PVu_LTP_Seq1 apresentou potencial de 90% nas predições de atividade antimicrobiana e não apresentou toxicidade e alergenicidade predita, além disso, mostrou-se estável nas análises de desvio da raiz média quadrática (RMSD) e flutuação da raiz quadrática média (RMSF). O peptídeo desenvolvido conseguiu inibir o crescimento bacteriano das quatro cepas testadas, exibindo MIC (Concentração inibitória mínima) de 256 µg/mL (Staphylococcus aureus ATCC-25923), 256 µg/mL (Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853), 128 µg/mL (Klebsiella pneumoniae ATCC-13883) e 32 µg/mL (Acinetobacter baumannii ATCC-19606).  PVu_LTP_Seq1 não apresentou danos a linhagem celular nos ensaios citotóxicos e genotóxicos realizados. Dessa forma, o presente trabalho desenvolveu um peptídeo com potencial antimicrobiano e livre de toxicidade nas concentrações e linhagem celular testada, fornecendo informações sobre suas principais características funcionais, ainda podendo ser aproveitado para o uso em terapias alternativas de interesse à saúde humana. 

A pandemia da COVID-19 há dois anos tem causado muitos transtornos mundiais em termos de saúde pública, economia e política. O número de casos e óbitos tem aumentado em oscilações denominadas ondas e mesmo após o processo de vacinação ter iniciado, ainda não existe um medicamento direcionado ao combate ao vírus. Este estudo visa fornecer mais conhecimento a respeito da patogênese da COVID-19, nos aspectos laboratoriais e clínicos, confrontando a evolução da doença em pacientes de Enfermaria e de UTI. Amostras biológicas de 85 pacientes foram coletadas para investigação hematológica, bioquímica, imunológica, microbiológica e clínica. Os resultados demonstraram que os principais sintomas apresentados pelos pacientes de Enfermaria e UTI foram dispineia (74,41% e 45,45%) e febre (55,17% e 27,27%). As principais comorbidades observadas foram hipertensão (34,48% e 70%) e obesidade (17,24 e 20%) dados para Enfermaria e UTI, respectivamente. Os exames de Tomografia computadorizada demonstraram a prevalência dos achados clássicos como as opacidades em vidro fosco. Além disso, os pacientes de UTI apresentaram os graus moderado e grave da doença como os mais prevalentes. Os principais fármacos utilizados na Enfermaria foram os anti-inflamatórios, antibióticos e anticoagulantes. Para a UTI, além dos descritos acima, destacaram-se os antirretrovirais e os ansiolíticos. Nos pacientes de UTI houve redução de hemácias, de hematócrito e de linfócitos (inclusive todas as sublinhagens T (CD3+, CD4+, CD8+ e CD19+), associada com aumento de neutrófilos, DHL, ferritina, D-Dímero, fibrinogênio e Proteína C reativa (PCR). Os microrganismos mais prevalentes foram Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, Enterococcus feacalis e Klebsiella pneumoniae. Os antibióticos Ampicilina-Sulbactam, Estreptomicina,Eritromicina, Oxaciclina, Rifampicina, Ceftriaxoma, Imipenem e Meropenem foram os menos responsivos nos testes de resistência antimicrobiana. Exames laboratoriais na COVID-19, são importantes ferramentas no diagnóstico da condição clínica do paciente. A interrelação entre dados hematológicos, bioquímicos e imunológicos, pode ser um fator preditivo da conduta médica e permanência do paciente na enfermaria ou UTI. Além disso, o longo tempo de internamento na UTI associado ao uso de dispositivos invasivos, também são fatores predisponentes para o favorecimento das coinfecções nosocomiais. Por fim, investigar e controlar as condições pré-clínicas, ou seja, possíveis comorbidades, parece ser essencial na prevenção do agravamento da doença.

O lúpus eritematoso sistêmico é uma doença autoimune crônica com períodos de exacerbação e remissão que pode afetar vários órgãos ou sistemas, levando a um amplo espectro de manifestações clínicas. Infecções bacterianas, virais e oportunistas são comuns no LES e representam a segunda causa de morte nesse grupo em países desenvolvidos, variando de 25% a 50% dos casos de mortalidade. Evidências sugerem que a Covid-19 tem um efeito sensível em causar danos aos órgãos e outras complicações em portadores de LES, representando um fator de risco significativo. Dessa forma, é crucial entender as interações biológicas e moleculares subjacentes entre o LES e a Covid-19, que ainda são poucos compreendidas. Logo, o objetivo deste trabalho foi identificar o perfil metabólico do LES, desde o seu delineamento imunológico até a sua associação genética, correlacionando os achados bioquímicos nesta condição com os encontrados na Covid-19. Assim, os resultados obtidos identificaram vias de interesse e que podem estar associadas com o processo inflamatório desencadeado pelas doenças, com destaque para duas vias imunológicas e uma via relacionada à terapêutica inicial do SARS-CoV-2.

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As folhas da Moringa oleifera possuem alto valor nutricional, sendo ricas em proteínas. As folhas são bastante utilizadas como remédio e na alimentação. No entanto, há necessidade de mais estudos sobre a segurança de uso de preparações de folhas. Este trabalho buscou realizar avaliação da toxicidade de preparações ricas em proteína das folhas de M. oleifera. A presença de metabólitos secundários e proteínas antinutricionais (inibidor de tripsina e lectina) foi investigada no extrato da folha (LE) e na fração rica em proteínas (PRF) de folhas de M. oleifera. LE e PRF também foram investigados quanto à citotoxicidade para linfócitos humanos, atividade hemolítica, toxicidade oral aguda em camundongos e genotoxicidade. Os flavonoides rutina e vixetina e inibidor de tripsina foram detectados em LE (0,12g%, 0,01g% e 55,38U/mg, respectivamente) e em PRF (0,04g%, 0,05g% e 87,89U/mg, respectivamente) enquanto as lectinas estavam presentes apenas em PRF (2,5 título^-1/proteína mg/mL). LE e PRF não foram tóxicas para os linfócitos e não mostraram ação hemolítica. Os animais tratados com LE e PRF (2.000 mg/kg) apresentaram mudança comportamental apenas na primeira hora após os tratamentos, sessando em seguida. Os parâmetros hematológicos foram semelhantes aos do grupo não tratado. Aumento significativo nos níveis séricos de alanina aminotransferase (ALT) e discreta infiltração leucocitária com vacuolização citoplasmática nos hepatócitos foram detectados apenas nos animais tratados com LE. As preparações não foram genotóxicas ou mutagênicas. PRF também foi investigada quanto à toxicidade oral subaguda em ratos, e marcadores hepáticos do estresse oxidativo. Os animais tratados com PRF nas concentrações de 20 mg/kg/dia, 40 mg/kg/dia e 80 mg/kg/dia não apresentaram alterações comportamentais. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos, assim como hemostasia e eletrólitos, foram semelhantes aos do grupo não tratado. Não foram observadas alteração histopatológicas no fígado, rins, baço, pulmão e coração. PRF não alterou os biomarcadores de estresse oxidativo: malondialdeído, carbonil e sufidrila, em relação ao grupo não tratado. No entanto, aumentou a atividade das enzimas antioxidantes superoxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa-S-transferase (GST) nas maiores concentrações (40 e 80 mg/kg/dia). PFR também modulou a concentração de moléculas antioxidantes não enzimáticas (glutationa e glutationa dissulfeto) em todas as concentrações testadas. Os estudos revelaram que as preparações proteicas testadas contem inibidor de tripsina, lectina e flavonoides. LE e PRF não foram citotóxicas, hemolíticas ou genotóxicas e não apresentaram toxicidade oral aguda. Adicionalmente, PRF não apresentou toxicidade subaguda e modulou a atividade de marcadores antioxidantes hepáticos.

Cryptococcus é um gênero de fungos leveduriformes que possuem como principal caracteristica fenotípica a presença de uma cápsula polissacarídica que envolve sua estrutura celular. Dentre as espécies desse gênero, Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são patógenos oportunistas capazes de causar a criptococose, doença infecciosa invasiva que atinge o sistema nervoso central, causando uma meningoencefalite fúngica com alta mortalidade. Biofilmes são comunidades microbianas que causam diversos problemas a saúde pública, tanto por sua alta capacidade de aderência aos tecidos vivos e dispositivos médicos, quanto por sua alta resistência a antibióticos usados na clinica medica. Lectinas são proteínas que se ligam reversivelmente a carboidratos, possuindo um amplo espectro de aplicações biológicas, incluindo ação antimicrobiana. As lectinas da sarcotesta de Punica granatum (PgTeL) e de folíololos de Calliandra surinamensis (CasuL) apresentaram potencial antimicrobiano e antibiofilme em estudos anteriores. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antifúngico e antibiofilme de PgTeL e CasuL contra Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii, bem como seu potencial de inibir e erradicar biofilmes multiespécie e multicepas de isolados de Staphylococcus aureus e Staphylococcus saprophyticus. CasuL não apresentou atividade antifúngica e nem antibiofilme frente às cepas de Cryptococcus, porém PgTeL apresentou atividade fungistática contra a cepa B3501 de C. neoformans (Sorotipo D), com uma concentração mínima inibitória de 172 μg/mL. PgTeL também foi capaz de inibir a formação de biofilme por B3501, reduzindo significativamente a biomassa e a atividade metabolica no biofilme. PgTeL também foi capaz de erradicar significativamente o biofilme pré-formado da cepa B3501. A ação fungistática e antibiofilme de PgTeL sobre B3501 puderam ser também observadas por microscopia eletrônica de varredura. PgTeL, contudo, não foi capaz de alterar o tamanho relativo da cápsula de B3501 de C. neoformans. Em relação aos biofilmes multiespécie e multicepas de Staphylococcus, CasuL isoladamente não apresentou capacidade de inibir a formação de biofilme por nenhuma das testadas; porém, quando em conjunto com o antibiótico ceftazidima, CasuL inibiu significativamente a formação de biofilme multicepa por S. aureus UFPEDA-670 + MRSA, e por S. aureus UFPEDA-670 + 8325-4. Os ensaios com PgTeL serão iniciados. Em conclusão, foram identificados até o momento o potencial antifúngico de PgTeL contra a cepa B3501 de C. neoformans sobre a replicação dessa levedura e a formação e manutenção de biofilmes, bem como o potencial de CasuL em conjunto com antibióticos em inibir a formação de biofilme multicepas de S. aureus.

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Dekkera bruxellensis é uma levedura com grande potencial industrial, sendo associada a eventos de contaminação no processo de produção de bioetanol e de vinho. No decorrer dos anos, vários estudos caracterizaram metabolicamente esta levedura e observaram fatores relacionados a esse papel como contaminante, bem como sua benéfica função em outros processos industriais, como é o caso da produção da cerveja Belga Lambic. Ao longo do curso evolutivo, essa levedura adquiriu características primordiais para seu estabelecimento e manutenção nas dornas de fermentação alcoólica, como por exemplo, a capacidade em produzir etanol mesmo em condições de aerobiose, a habilidade em suportar o elevado teor alcoólico do processo e a capacidade em assimilar o nitrato como fonte de nitrogênio, característica essencial quando é esgotado o aporte de amônia presente no caldo de cana-de-açucar. Apesar disso, outros aspectos do seu metabolismo necessitam de entendimento, como é o caso da produção de acetato pela levedura. Diante disso, o objetivo do presente trabalho foi investigar fatores associados à produção de acetato pela levedura D. bruxellensis, observando como essa disponibilidade iria influenciar na capacidade em produzir etanol pelo seu metabolismo. Além disso, identificar os mecanismos genéticos associados a esses eventos fisiológicos. Como resultados, foi mostrado que a presença do inibidor bioquímico de acetato, dissulfiram, retardou o crescimento da levedura em diversas condições respiro-fermentativas. Adicionalmente, análises genéticas e fisiológicas mostraram expressão aumentada de genes chaves do metabolismo respiro-fermentativo, depleção de acetato citosólico com a utilização do inibidor, aumento do fluxo metabólico para produção de etanol pela levedura, bem como a identificação do mecanismo de saída do acetato das mitocôndrias de D. bruxellensis.

O feijão-caupi destaca-se dentre as leguminosas de importância agrícola por ser uma excelente fonte proteica e apresentar relativa tolerância a condições adversas, incluindo o estresse salino. O presente trabalho teve por objetivo analisar os efeitos da superexpressão do gene VuWRKY21 do feijão-caupiem linhagens de Arabidopsis thaliana sob estresse salino, na ativação de genes alvos, visando à compreensão dos mecanismos de tolerância ao sal. Foram avaliados parâmetros fisiológicos, bioquímicos e proteínas e a expressão (qPCR) de um conjunto de genes relacionados ao estresse. Linhagens de Arabidopsis superexpressando o gene VuWRKY21 (L1, L2 e L3) e selvagem (WT), foram submetidas ao estresse salino (200 mM de NaCl) por 1, 2, 4 e 8 h. Os valores de atividade da SOD e de CAT e o acúmulo de proteínas totais foram maiores nas linhagens transgênicas quando comparados a WT, enquanto o conteúdo de H2O2 foi comparativamente menor. De modo geral, os genes AtP5CS1, AtRD29A e AtNHX1 apresentaram precocemente maiores níveis de expressão nas linhagens transgênicas quando comparados às plantas WT. Para os genes da via SOS, AtSOS3, foi upregulated em L1 e L3 (2 h) e em WT (1 e 4 h), enquanto AtSOS2 foi upregulated em L1 (2 h) e em WT (1 e 4 h). Os resultados indicam que a superexpressão do gene VuWRKY21 atua na regulação positiva de genes envolvidos nos mecanismos de tolerância ao estresse salino, presentes nas vias de sinalização e defesa, dependente e independente ABA.

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A enxaqueca, doença neurológica mais prevalente no mundo, é caracterizada por ataques de dor de cabeça unilateral e latejante, com sensibilidade visual, auditiva e ao movimento. Uma das principais causas de incapacidade em todo o mundo, a enxaqueca gera gastos sanitários anuais estimados em mais de US$ 20 bilhões. Várias moléculas estão envolvidas nos ataques de enxaqueca, gerando a ativação de algumas estruturas, particularmente da dura-máter. As moléculas que estão envolvidas nos ataques de enxaqueca podem estar circulando no LCR, dada sua circulação por todas as estruturas do sistema nervoso central. Com o surgimento do SARS-CoV-2 em 2019, notou-se sintomas compatíveis com a enxaqueca, levando a necessidade de investigar a presença do vírus no LCR. Com isso, objetivou-se mensurar as concentrações do CGRP, ocitocina e óxido nítrico e avaliar a expressão gênica de SARS-CoV-2 no LCR, além de otimizar protocolos comerciais de extração de RNA da dura-máter. Foram coletadas 76 amostras de LCR, de pacientes que iriam passar pela punção de lombar para procedimentos de rotina. Os grupos foram divididos em pacientes com enxaqueca, com covid-19 e do grupo controle, de ambos os sexos. As amostras foram coletadas no Hospital das Clinicas e no Laboratório Fernando Travassos. A quantificação das moléculas foi realizada através de Elisa, radioimunoensaio e quimiluminescência. Para realizar a otimização do protocolo de extração de RNA da dura-máter, as amostras foram obtidas de ratos Wistar e mantidas em dois estabilizadores diferentes. As amostras foram purificadas em quatro protocolos diferentes e o RNA foi avaliado quanto ao rendimento e pureza no NanoDrop 2000. O gene da beta-actina foi utilizado para analisar a expressão gênica. Houve diferença significativa na quantificação do oxido nítrico entre homens e mulheres com enxaqueca. Também foi significativamente diferente a comparação entre o grupo controle e os indivíduos com enxaqueca, em relação ao oxido nítrico. Com relação ao CGRP, houve diferença significativa na comparação entre homens e mulheres com enxaqueca. Na extração de RNA da dura-máter, a preservação do RNA foi semelhante em ambos os estabilizadores. O RNA purificado pelos protocolos baseados em membrana apresentou qualidade superior ao da purificação líquido-líquido. Este impacto foi observado na avaliação de três semanas usando RT-qPCR.

Microrganismos causadores de doenças zoonóticas, infecções humanas e síndromes alimentares, estão entre os principais alvos de estudos que utilizam a abordagem One health. A alta prevalência de cepas de Escherichia coli como agente colonizador ou patogênico no ambiente em geral e o impacto dessa espécie bacteriana na saúde humana, estão associados à importância desse microrganismo como biomarcador da disseminação da Resistência Antimicrobiana (RAM). Além disso, este microrganismo possui alta eficiência na regulação e aquisição de genes que codificam mecanismos de resistência aos antimicrobianos, principalmente sob a pressão seletiva desencadeada pelo uso de antimicrobianos, bem como alta prevalência de resistência aos betalactâmicos e polimixinas. O presente estudo apresentou duas abordagens: 1. revisão do estado-da-arte sobre a disseminação de cepas resistentes à polimixina em diferentes espécimes biológicos e a emergência do gene mcr no Brasil; e 2.  análise experimental que avaliou a dinâmica de dispersão de bactérias resistentes de E. coli no ambiente (amostras de leite bovino cru), na saúde humana (isolados clínicos de infecções hospitalares) e em animais (aves da espécie Caracara plancus), e caracterização do fenótipo e genótipo desses microrganismos. Neste estudo foram obtidos 188 isolados bacterianos provenientes de 87 swabs obtidos da cloaca de C. plancus e de 20 amostras de leite cru e 26 isolados clínicos de origem hospitalar. Os microrganismos foram obtidos dos estados da Bahia (amostras de C. plancus) e Paraíba (amostras de leite e isolados clínicos) durante os anos de 2019, 2021 e 2022. As bactérias foram caracterizadas quanto a fermentação de lactose e morfologia das colônias em meio MacConkey e identificadas molecularmente pela Matrix Assisted Laser Desorption Ionization - Time Of Flight (MALDI-TOF). Após esta triagem, colônias da espécie foram submetidas ao teste de disco-difusão em ágar, de acordo com o protocolo do Clinical Laboratory and Stanrd Institute (CLSI). Posteriormente foi realizada a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para detecção de 26 genes de betalactamases e do gene de resistência à colistina mediada por plásmideo. A Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus – PCR (ERIC-PCR) foi utilizada para determinar o perfil clonal dos isolados. Por fim, foram aplicados e comparados os métodos de coloração com Cristal Violenta (CV) e crescimento em meio vermelho-congo para analisar a capacidade de produção de biofilme. Como primeiro resultado, foram obtidos dois artigos de revisão contemplando os temas: “disseminação da resistência à polimixina no ambiente” e “bacilos Gram-Negativos carreando o gene mcr no Brasil”. Como resultados experimentais iniciais foram obtidos 104 microrganismos de C. plancus e 84 nas amostras de leite cru, nos quais E. coli representou 37.5% (n=39) e 13.4% (n=11), respectivamente. Entre as cepas de E. coli de aves 15.4% (6/39) foram produtoras de Betalactamases de Espectro Estendido (ESBL), em leite 36.3% (4/11) e nos isolados clínicos 23.1% (6/26). O gene blaCTX-M-1/2 foi o mais prevalente entre as amostras de diferentes origens, apresentando incidência de 18% (7/39), 18.1 (2/11) e 23.1% (6/26) nas amostras de C. plancus, leite cru e clínicas, respectivamente. É importante destacar que o estudo reporta o primeiro caso de E. coli portadora de bla_KPC com susceptibilidade aos carbapenéns em amostras de origem animal e do determinante genético bla_NDM em isolados do estado da Paraíba, Brasil. Não foram detectadas cepas portadoras do gene mcr-1 em nenhuma das amostras investigadas. A proporção de cepas produtora de biofilme foi semelhante entre os isolados clínicos (73.1%, n=19) e de aves (74.3%, n=39), no entanto apresentou incidência menor entre as cepas de leite cru (45.4%, n=5). O resultado da genotipagem demonstrou a disseminação de cepas portadoras de genes de resistência aos betalactâmicos em diferentes aves, em diferentes amostras de leite (provenientes de tanques distintos) e em diferentes pacientes no ambiente hospitalar. Este estudo identificou a dispersão de alguns determinantes de resistência em populações de E. coli nos estados da Bahia e Paraíba, e revelou a importância do monitoramento dessa bactéria na disseminação da RAM nos locais investigados. Os dados obtidos são preocupantes e demonstram a necessidade de pesquisas adicionais baseadas nessa perspectiva One Health para o enfrentamento a RAM, principalmente, relacionada à disseminação de cepas de E. coli produtoras de CTX-M em animais, alimentos e isolados clínicos humanos.

A identificação cromossômica via oligo-FISH tem permitido estudar cariótipos de plantas mediante pintura cromossômica, bem como identificar todos os cromossomos em um único experimento usando um código de barras. O presente trabalho visou compreender a diversidade cromossômica, macrossintenia e evolução cariotípica entre representantes dos cinco subgêneros de Vigna (Vigna, Haydonia, Plectrotropis, Lasiospron e Ceratotropis). Foram utilizadas oligo-sondas dos cromossomos 2 e 3 de Phaseolus vulgaris (Pv2 e Pv3) para pintura dos ortólogos em seis espécies de Vigna. Adicionalmente, mapas citogenéticos foram construídos para sete espécies, utilizando código de barras, desenvolvido com base no genoma de V. unguiculata. A pintura cromossômica foi eficiente para identificar os cromossomos 2 e 3 em todas as espécies, revelando apenas pequenas diferenças no padrão de pintura para cada subgênero, demonstrando conservação da macrossintenia. Entretanto, V. vexillata (Plectrotropis), apresentou adicionalmente marcas de Pv2 em três outros pares. O código de barras foi eficiente para a identificação de todos os cromossomos nas espécies analisadas, mostrando sintenia para os cromossomos 1, 7, 8, 9, 10 e 11. Observou-se inversão pericêntrica para o cromossomo 4, nas espécies analisadas com exceção de V.unguiculata subsp. sesquipedalis, bem como um sinal vermelho extra na região proximal do cromossomo 5 de V. aconitifolia e V. angularis. Na espécie V. vexillata, foram observadas quebras de sintenia envolvendo os cromossomos 2, 3, 5 e 6. A presente análise permitiu estabelecer padrões cariotípicos para cada subgênero, trazendo informações importantes para o entendimento da evolução cariotípica intragenérica, sugerindo V. vexillata como uma espécie cariotipicamente mais divergente.

O linfedema de membro inferior é uma doença que afeta milhares de pessoas em todo o mundo. Seu estabelecimento nos indivíduos afetados consiste no mau funcionamento do sistema linfático no processo de regulação e homeostase do líquido intersticial, o que causa o desequilíbrio de todo o sistema circulatório, promovendo o extravasamento e acúmulo nos tecidos superficiais dos membros inferiores. E suas complicações clínicas vão desde problemas bioquímicos até físicos, e os sintomas podem ser agravados pelo desenvolvimento de outras doenças oportunistas e comorbidades graves como hipertensão, diabetes, obesidade e depressão, potencializando o agravamento da doença. Com o comprometimento da deambulação e dificuldade para realizar atividades básicas do dia a dia, os afetados pela doença também sofrem com o isolamento social que é dificultado pelo comprometimento da qualidade de vida. A Terapia Complexa Descongestiva é um tipo de tratamento considerado padrão ouro pela Sociedade Internacional e Linfologia, para o tratamento de membros afetados pelo linfedema. Inicialmente utilizada em mulheres pós mastectomizadas acometidas com linfedema de membro superior, a terapia passou a ser adaptada para os membros inferiores, na intenção de promover uma melhora significativa na reabilitação de pacientes nessa condição. Como uma proposta de tratamento bastante difundida atualmente e que tem apresentado efeitos físicos significativos na qualidade de vida dos pacientes, a TCD está sendo proposta como alvo de avaliação dos seus efeitos bioquímicos e celulares, uma vez que os estudos associados à investigação dessa proposta de intervenção ainda são muito escassos na comunidade científica. Pensando na necessidade de intervenções terapêuticas economicamente acessíveis às pessoas afetadas pela doença, a Sociedade Internacional de Linfologia sugeriu em 2018, que a comunidade científica investigasse os aspectos celulares e moleculares promovidos pela TCD, nos pacientes afetados com a doença. Diante disso, esse estudo propôs uma investigação a fim de confirmar os efeitos e benefícios gerados pela TCD a nível celular e molecular em pacientes atendidos pelo SRNF/FIOCRUZ-PE. Foram feitas análises microbiológicas das lesões e feridas dos membros inferiores afetados, bem como a coleta e análise hematológica, bioquímica e celular (imunofenotipagem e dosagem de citocinas) antes, durante e após as 22 (vinte e duas) sessões da TCD em todos os pacientes incluídos no programa. Os resultados demonstraram que houve melhora na cicatrização das lesões ao longo da TCD e uma importante redução dos microrganismos isolados antes da terapia, que já não foram mais isolados ao final dela. Houve também redução importante da população de células TCD4+, acompanhados de resposta pró-inflamatórias, com o aumento de IFN-γ+. Além da redução do edema nos membros inferiores, a Terapia Complexa Descongestiva demonstrou melhora significativa das lesões e a redução da resposta inflamatória nos pacientes tratados.

A cana-de-açúcar (Saccharum spp.) é uma das plantas mais cultivadas no mundo devido ao seu elevado rendimento em biomassa e concentração de sacarose nos colmos, sendo o Brasil o maior produtor. Entretanto, diversos fatores bióticos afetam sua produtividade, entre eles a bactéria Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx), agente causal do raquitismo-da-soqueira (RSD). Portanto, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil proteômico caulinar diferencial de cana-de-açúcar (var. RB867515) infectada com Lxx. As proteínas totais dos colmos inoculados ou não com Lxx foram extraídas utilizando o método fenólico, quantificadas pelo método de Bradford e submetidas à eletroforese uni e bidimensional, seguindo-se a análise por espectrometria de massas. Um total de 76 proteínas diferencialmente acumuladas (DAPs) de ambos os tratamentos foram identificadas, presumivelmente, permitindo associá-las a diversos processos funcionais, tais como modificação de proteínas, resposta ao estresse, processamento de mRNA, biossíntese, desenvolvimento, metabolismo de nitrogênio, metabolismo de carboidratos, transporte e outros. Os dados proteômicos demonstraram um maior acúmulo de proteínas relacionadas à defesa nas plantas infectadas, incluindo uma proteína com domínio NB-ARC que está envolvida no reconhecimento de efetores do fitopatógeno e que desencadeia uma resposta hipersensitiva (HR) no hospedeiro. A infecção com Lxx promove o acúmulo de danos ao DNA, porém, algumas proteínas envolvidas na resposta a esses danos, tais como a PARP1 e a AGO10b são induzidas, e parecem integrar mecanismos de defesa ativados. Por outro lado, a indução da TPX2 e inibição da MAP3Kε1 na cana-de-açúcar em interação com Lxx sugerem que a presença da bactéria interfere no ciclo celular vegetal. Os resultados apresentados contribuem para o entendimento dos mecanismos moleculares envolvidos nesse patossistema e podem auxiliar os programas de melhoramento genético para resistência ao RSD.

O transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH) trouxe avanços significativos para o tratamento de certas patologias hematológicas, mais notadamente as leucemias e as síndromes mielodisplásicas, possibilitando desde a remissão de casos até a cura. Este procedimento tem como finalidade a substituição da hematopoiese do receptor a partir de células do doador, proporcionando uma medula óssea saudável que irá desenvolver células sanguíneas livres de células tumorais. Imediatamente após a realização do TCTH ocorre um quimerismo misto, isto é, coexistência de células sanguíneas características do doador e do receptor do transplante. Análises precoces dos padrões de quimerismo doador/receptor após o TCTH permitem avaliar o grau de sucesso do transplante. A análise quimérica pode ser realizada em amostras de sangue total ou medula óssea ou sangue, usualmente coletadas em tubo contendo ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA). O STR-PCR é considerada a técnica-ouro para seguimento para Quimerismo de Medula Óssea (QMO). O objeto principal do estudo foi validar metodologia técnico-científica para análise e seguimento do TCTH a partir da coleta de amostras sanguíneas em cartões FTA® e do uso de técnicas de PCR-STR e, em paralelo, desenvolver Plataforma de Análise do Quimerismo da Medula Óssea. Inicialmente, os cartões FTA® foram idealizados para coletar amostras biológicas de referência de criminosos por permitir que o DNA seja armazenado em temperatura ambiente por anos, sem comprometimento da sua qualidade. Foram confrontados os resultados do TCTH obtidos a partir da extração de DNA de amostras de sangue total coletadas em tubo contendo anticoagulante EDTA e da amplificação direta do DNA de discos circulares de Cartões FTA®. De acordo com os resultados obtidos, a partir de 12 dias após o TCTH, não houve diferença estatisticamente significativa entre as metodologias. Desta forma, a coleta de sangue total em cartões FTA® pode ser usada para análises de seguimento de Quimerismo de Medula Óssea A Plataforma de Análise e Cálculo de Quimerismo de Medula Óssea (KimerCalcBR), desenvolvida e validada no presente trabalho, contribui para a reduzir o tempo de entrega do exame genético quimérico e fornece cálculos quiméricos precisos, podendo servir como ferramenta diagnóstica auxiliar para tomada de decisões de condutas terapêuticas.

O mosquito Aedes aegypti é altamente antropofílico presente no ambiente domiciliar, sendo um dos principais vetores de arboviroses graves como dengue, chikungunya e zika. O controle desse vetor é baseado no uso de inseticidas formulados com substâncias de origem natural ou sintética que são utilizadas para diminuir a incidência de insetos em diferentes fases do seu ciclo de vida. Na literatura, os óleos essenciais e fungos entomopatogênicos são descritos como alternativas naturais para o controle do Ae. aegypti. Nesta Dissertação investigamos a susceptibilidade das larvas do Ae. aegypti a formulações contendo o OE da Eugenia brejoensis e conídios do Metarhizium anisopliae. A E. brejoensis é uma planta da Caatinga e seu OE foi caracterizado por GC/MS, apresentando o δ-cadinene (17,6%), E-caryophyllene (16,3%), Epi-α-muurolol (9,3%), bicyclogermacrene (8,1%), α-cadinol (7,3%) e Spathulenol (6,6%) como compostos majoritários. O OE apresenta LC50 de 200,4±0,4 ppm e LC90 662,6±0,5 ppm contra as larvas de Ae. aegypti. Todas as linhagens de M. anisopliae testadas apresentaram atividade larvicida nos mosquitos, com destaque para a Linhagem E6 com TL50 1,5 dias (Concentração 1X108). Já nos ensaios de atividade larvicida com formulações contento ambos o OE e o fungo (Eb+Ma) (100 ppm de OE da E. brejoensis e 1X106 de conídios de M.anisopliae) atingem TL50 1,5 dias. As formulações Eb+Ma apresentaram menores curvas de sobrevivência e tempo letal em relação aos dois componentes isoladamente.Portanto, propomos formulações Eb+Ma para o desenvolvimento de controle biológico integrado de larvas de Ae. aegypti.

O rio São Francisco corresponde a um dos mais importantes rios brasileiros, sendo a principal fonte hídrica da região Nordeste do Brasil. O uso indiscirminado de suas águas vem intensificando seu processo de degradação. No município de Paulo Afonso, Bahia, esta bacia hidrográfica desempenha funções importantes para a população local. Contudo, o crescimento populacional desordenado e a utilização inadequada desse ecossistema vêm impactando a qualidade da água e vida aquática. O presente estudo objetivou avaliar os parâmetros, físico-químicos,  microbiológicos e parasitológico deste rio no municipio de Paulo Afonso, Bahia e correlacionar os dados com a saúde públuca, bem como analisar trabalhos de revisão relacionados a temas voltados para o monitoramento de ambientes aquáticos impactados. Para isso, foram realizadas coletas de água em cinco pontos estratégicos denominados P1-P5. A determinação dos parâmetros físico-químicos e de metais foram realizadas por meio de equipamentos e kits específicos. Já a a presença de contaminantes emergentes foi determinada por meio da análise cromatógrafica por cromatografia líquida de alta eficiência. Para classificação e identificação bacteriana foram utilizadas a coloração de Gram e o método bioquímico automatizado, respectivamente. Este último também foi aplicado para identificação do perfil de suscetibilidade\resistência. Adicionalmente, as amostras foram avaliadas quanto a presença de coliformes totais, termotolerante e parasitas. Os resultados demontraram que a maioria dos pontos investigados apresentou os parâmetros físico-químicos em conformidade com a resolução nº 357/2005 do Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA) dos quais, apenas o P3 apresentou divergência para os valores  de amônia encontrado. Todos os metais investigados foram detectados na água, todavia, estes estavam dentro dos valores limítrofes. Em relação a análise cromatográfica não foi identificado nenhum dos contaminantes avalidos. Esta ausência pode ser devida a quantidades inferiores aos limites de detecção do equipamento. Já em relação a caracterização da microbiota local os resultados foram preocupantes. Foram identificadas tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas, classificadas em 15 gêneros, representando 54 isolados. O perfil de suscetibilidade\resistência, revelaram que 40% foram resistentes a ampicilina e 31% a amoxilina\ácido clavulânico. Para os demais antimicrobianos foram identificados percentuais distintos e menores. Dos pontos investigados o P1 e o P3 foram os mais contaminados, uma vez que apresentaram maior diversidade bacteriana e  resistencia aos fármacos testados. Coliformes totais estavam presentes nos cinco pontos com valores  iguais ou maiores que 6.600 NMP/100 mL. Já a análise parasitologica detectou parasitas nos pontos P1, P3 e P5, sendo estes as espécies: Endolimax nana (P1 e P3); Entamoeba coli (P5) e Tênia sp (P3). Os resultados aqui apresentados corresponde a uma alternativa viável para o monitoramento de ambiente aquático impactado. A presença e disseminação de bactérias patogênicas é um indicativo de que este ambiente apesar de apresentar condições fisico-quimicas em conformidades com a legislação, está albergando microrganismos patogênicos que representam risco à populção podendo contribuir com problemas futuros de saúde pública. Diante disso, é evidente que sem a tomada de medidas corretivas pleiteando a recuperação do rio e a conscientização da população do entorno, os riscos para a saúde, segurança e bem-estar dos que utilizam  esta agua tendem a crescer.

A seca e a salinidade estão entre os fatores de estresse que mais impactam o crescimento e o desenvolvimento das plantas, alterando a dinâmica dos ecossistemas naturais, a diversidade genética e diminuindo a produtividade agrícola. Além disso, os danos causados por esses estresses tendem a ser acentuados devido às mudanças climáticas globais. Tal cenário destaca a importância de estudos envolvendo espécies adaptadas a tais condições, como Cenostigma pyramidale e Stylosanthes scabra, com grande potencial na prospecção e análise de genes relacionados à tolerância a esses estresses. Proteínas semelhantes à taumatina (TLPs) são uma família de proteínas envolvidas no processo de desenvolvimento como também estão associadas à resposta da planta a estresses bióticos e abióticos. No presente estudo, nós identificamos, caracterizamos estruturalmente e verificamos o perfil transcricional de genes que codificam TLPs no transcriptoma dessas espécies em resposta a dois tipos de estresse: a) C. pyramidale sob imposição de salinidade (30 min, 2h e 11 dias após o estresse) e b) S. scabra 6, 24 e 48 horas após o estresse hídrico e após 6 horas de reidratação, inferindo sobre suas características estruturais, funcionais e padrões de expressão. A análise in silico permitiu a identificação de 100 TLPs, sendo 36 e 64 TLPs nos transcriptomas de C. pyramidale e S. scabra, respectivamente. As sequências candidatas (para ambas as espécies) mostraram similaridade estrutural significativa com as TLPs descritas em outras espécies. A análise de expressão (via PCR quantitativo) revelou tendências de expressão distintas para as duas espécies, bem como entre os tecidos avaliados (folha e raiz). No entanto, a superexpressão de algumas TLPs indicou uma associação com a tolerância de C. pyramidale à salinidade e a tolerância de S. scabra à restrição de água. As TLPs caracterizadas e diferencialmente expressas nas espécies estudadas representam candidatos promissores para uso biotecnológico e no melhoramento de plantas, visando a obtenção de plantas mais tolerantes à seca e salinidade.

Mussismilia harttii é uma espécie endêmica e o principal coral construtor de recifes no Nordeste do Brasil e suas populações estão atualmente classificadas como Em Perigo na lista vermelha brasileira. Portanto, é urgente priorizar os trabalhos de restauração com a espécie. Portanto, foi (1) avaliada a viabilidade do cultivo in situ de M. harttii utilizando duas versões de um berço de cultivo denominado FASTen, criado com tecnologia de impressão 3D e (2) avaliado o número de nubbins que podem ser obtidos de um pólipo doador. Os pólipos foram coletados do substrato marinho para evitar o uso de corais saudáveis. Foram realizados dois experimentos, cada uma com um N=10 por tratamento, devido às restrições da licença ambiental. No experimento 1, duas variantes do berço FASTen foram testadas, a primeira com uma superfície plana de fixação dos corais, e a segunda com colunas nas bordas.  No experimento 2, foram realizados três tratamentos: (TA) um pólipo correspondia a um nubbin, (TB) os pólipos foram divididos pela metade e (TC) cada pólipo foi dividido em três nubbins. Os pólipos foram produzidos utilizando um micro retífica, posteriormente, foram pesados, fixados nos berços e inseridos sobre a base de ancoragem fixada sobre uma mesa de cultivo. Com base nas métricas de produtividade dos dois experimentos, foi realizado uma análise de custo do berçário de corais. Após 150 dias de cultivo, foi demonstrado que os dispositivos impressos em 3D eram eficazes como substrato para o crescimento dos nubbins de Mussismismilia harttii. Foi observado um ganho de peso de 251% ou 9,75 ± 4,38 g para o berço liso e 192% ou 9,73 ± 4,14 g para o ornamentado. As taxas específicas de crescimento (SGR) e sobrevivência foram similares em ambos os tratamentos (p= 0,40726). No experimento 2, foi obtido um ganho de peso de 8,20 ± 0,95, 4,83 ± 1,76 e 4,44 ± 0,75 g, equivalente a um aumento de 82%, 92% e 106% para cada tratamento. Foi observada uma sobrevivência de 80% nos tratamentos A e B e 70% no tratamento C, e uma média SGR de 0,0039; 0,0042 e 0,0047 (dia-1) (p= 0,5667). Os custos mensais de produção de nubbins variaram entre 0,60 USD e 1,88 USD, destacando uma redução de custos através do aumento do tempo de produção e cultivo. O uso da tecnologia de impressão 3D permite o desenho de materiais leves e fáceis de manusear, bem como o uso de materiais biodegradáveis e biocompatíveis que favorecem o assentamento de corais. Os resultados de crescimento são encorajadores, e os pólipos estressados se recuperam com sucesso nas mesas de cultivo mesmo quando fragmentados em 3 partes, evidenciando a alta capacidade de regeneração da espécie, confirmando que o cultivo de corais com tecnologia 3D pode melhorar o desempenho da produção de nubbins de M. harttii em programas de restauração ambiental.

O Riacho Cavouco é um afluente de uma das principais bacias hidrográficas do estado de Pernambuco. Estudos anteriores mostram que este ambiente vem sofrendo impactos de origem antrópica, os quais tem contribuído para mudanças expressivas na qualidade da água e propagação de microrganismos. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo de vigilância no Riacho Cavouco por meio de dados atuais e retrospectivos das condições ambientais deste ecossistema, além de realizar uma análise da literatura, afim de gerar artigos de revisão relacionados ao tema. Para o aporte de dados atuais foi obtido coleta de água em pontos específicos do “Cavouco”. A determinação dos parâmetros físico-químicos e metais foram efetuadas por meio de equipamentos e kits específicos. Já a detecção de contaminantes emergentes foi realizada por meio de cromatografia líquida de alta eficiência e a análise da microbiota foi realizada por parâmetros morfológicos e moleculares (MALDI-TOF-MS e sequenciamento do gene 16S rRNA); além de parâmetros parasitológicos. Os resultados apontaram que a maioria dos pontos investigados estavam em não conformidade com a Resolução nº 357/2005 do CONAMA (Conselho Nacional do Meio Ambiente), principalmente os metais investigados, os quais estavam presentes em todos os pontos, com o Alumínio (Al) e o Ferro (Fe) apresentando valores acima dos limítrofes estabelecidos pela legislação. Os demais contaminantes (anilina, ácido benzoico, catecol, ácidos orgânicos voláteis, açúcares, álcoois, 2,4-diaminoanisol, 2,4-dinitroanisol e 2-metoxi-5-nitroanilina, não foram detectados pelas análises cromatográficas. Em relação a microbiota, foi verificado que o “Cavouco” apresenta uma alta diversidade bacteriana, representada por isolados Gram-positivos e Gram-negativos, alguns de origem ambiental e outros de origem clínica, com a presença de parasitas (Paramecium) apenas no ponto 2. O estudo realizou, também, uma análise restrospectiva e comparativa de dados obtidos a partir de 2013 até o presente momento (2021). Os resultados revelaram uma bioacumulação gradativa de metais e cargas orgânicas, além de uma significativa diversidade microbiana. Essa condição ambiental revela que este ambiente continua sofrendo impacto ambiental e, serve como um alerta para a gestão e a comunidade acadêmica e circunvizinha de que, medidas efetivas precisam ser tomadas para resgatar e conservar a qualidade da agua e vida deste ecossistema.

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