Desenvolvimento e Validação de Métodos Analíticos Cromatográficos para Quantificação de Compostos Aromáticos em Estudos de Biorremediação
cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), detector de arranjo de diodo (DAD), amina aromática, nitroaromático, precisão, exatidão
Aminas aromáticas e compostos nitroaromáticos são importantes agentes de contaminação ambiental, destacando-se sua resistência à degradação e os seus efeitos deletérios provocados nos sistemas ecológicos contaminados. A anilina é uma amina aromática que pode ser encontrada nos resíduos das cadeias de produção das indústrias têxteis e das indústrias de fabricação de polímeros, plásticos, borrachas, pesticidas e produtos farmacêuticos. Aerobiamente a anilina pode ser degradada formando catecol como composto intermediário e anaerobiamente a degradação da anilina envolve a formação dos ácidos 4-aminobenzoico e benzoico como subprodutos. O 2,4-dinitroanisol (DNAN) é um composto nitroaromático, potencialmente poluente, proveniente da indústria de munições. O DNAN é reduzido a aminas aromáticas como o 2,4-diaminoanisol (DAAN) por consórcios anaeróbios. Inicialmente o DNAN é reduzido a 2-metóxi-5-nitroanilina (MENA) ou 4-metóxi-3-nitroanilina (iMENA), dependendo da posição do grupo nitro reduzido e então é reduzido a DAAN. Assim, os compostos catecol, ácido benzoico, ácido 4-aminobenzoico e MENA, iMENA e DAAN são indicadores da degradação da anilina e DNAN, portanto sua identificação e quantificação são importantes em estudos de remediação de áreas contaminadas com estes compostos. Neste trabalho foram desenvolvidos e validados métodos analíticos, utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (do inglês: High Performance Liquid Chromatography – HPLC), para identificação e quantificação da anilina, catecol, ácido benzoico e ácido 4-aminobenzoico e do DNAN, MENA, iMENA e DAAN em amostras ambientais de biorreatores para estudos de biorremediação. Os resultados preliminares mostraram que os métodos da anilina, catecol, ácido benzoico e ácido 4-aminobenzoico foram seletivos, devido a inexistência de picos interferentes, que foi evidenciada pela comparação dos cromatogramas e comprovada pelos espectros de UV-visível. O método do catecol e ácidos benzoico e 4-aminobenzoico apresentou efeito matriz, evidenciado por uma pequena supressão do sinal analítico. Portanto, a quantificação destes compostos deve ser feita utilizando uma curva de calibração elaborada em matriz. As curvas analíticas foram lineares, com coeficiente de correlação acima de 0,99. O teste da ANOVA e os gráficos dos resíduos mostram que os modelos não apresentaram falta de ajuste. Os métodos foram sensíveis, apresentando limites de quantificação de 0,0064 mg/L; 0,144 mg/L; 0,170 mg/L e 0,020 mg/L para a anilina, catecol e ácidos benzoico e 4-aminobenzoico, respectivamente. Os métodos também foram precisos, apresentando baixos valores de coeficiente de variação, tanto intra quanto inter-dias. E exatos, comprovados pelos altos valores de recuperação. A estabilidade das soluções e das amostras contendo os padrões de anilina, catecol e ácidos benzoico e 4-aminobenzoico precisam ser avaliados em intervalo de tempo menor, tenho em vista que em 5 dias os coeficientes de variação ultrapassaram os 15% aceitáveis.