Atividades biológicas in vitro e In vivo de preparações de folhas de Cissus Verticillata
Extrato; inibidor de tripsina; toxicidade; anti-inflamatório;
imunomodulação
Cissus verticillata subsp. verticillata é uma trepadeira com propriedade anti
inflamatória. A tese descreve: 1) produção e caracterização do extrato proteico de folhas
de C. verticillata subsp. verticillata (CvLE); 2) isolamento e caracterização do inibidor
de tripsina (CvLTI); 3) avaliação in vitro de CvLE e CvLTI quanto as atividades
citotóxica sobre células mononucleares de sangue periférico (PBMC), hemolítica com
eritrócitos humanos e imunomoduladora sobre PBMC; 4) avaliação in vivo da atividade
antiinflamatória de CvLE (50,100 e 200 mg/kg i.p) nos modelos de peritonite e edema
de pata induzidos por carragenina e 5) avaliação in vivo (CEUA/UFPE nº 0059/2023) de
toxicidade aguda e genotoxicidade de CvLE (2000 mg/kg) e CvLTI (1 e 5 mg/kg).
Metabólitos secundários não foram detectados em CvLE enquanto três bandas de 44,7
kDa, 37,8 kDa e 14,3 kDa foram visualizadas em SDS-PAGE. CvLTI (14,3 kDa) foi
estável em pH ácido e temperatura elevada, tem ponto isoelétrico 5,3 e homologia com
endoquitinase. O inibidor (100 μg/mL) apresentou baixa toxicidade (7%) frente a
PBMCs e atividade hemolítica (EC50 = 33 μg /mL). CvLE e CvLTI estimularam a
liberação das citocinas anti-inflamatórias IL-4 e IL-10. CvLE em todas as doses testadas
foi anti-inflamatório reduzindo a migração de leucócitos para a cavidade peritoneal (41
a 51%), a atividade da mieloperoxidase (14%), óxido nítrico (40 a 55%) e os níveis de
IL-6, IL-17, TNF-α e IFN-y. O nível de IL-4 aumentou na dose de 200 mg/kg e o de
IFN-y diminuiu nas doses de 100 e 200 mg/kg. No modelo de edema de pata induzido
por carragenina, CvLE em todas as doses diminuiu o volume do edema e reduziu a
atividade da mieloperoxidase (28 a 42%) e os níveis de óxido nítrico (48 a 65%) e de
IL-2, IL-6, IFN-y e TNF-α. A dose de 200 mg/kg aumentou IL-4 e as doses de 50 e 100
mg/kg reduziram o extravasamento proteico no edema em 25% e 37%, respectivamente.
CvLE em todas as doses reduziu a espessura do edema na epiderme de 14,8 ± 2,6% a
26,0,2 ± 0,9%, enquanto que a espessura da derme diminuiu (28,6 ± 2,6%) nos animais
tratados com 200 mg/kg. CvLE e CvLTI não promoveram sinais de toxicidade, morte e
alteração no consumo de água e ração e peso corporal. A arquitetura dos órgãos nos
animais tratados com CvLE foi normal enquanto alterações histológicas no fígado e rins
foram observadas naqueles tratados com CvLTI (1 mg/kg). CvLE (200 mg/kg)
aumentou eritrócitos (RBC) enquanto CvLTI 1 mg/kg diminuiu o número de VCM e
leucócitos e na dose de 5 mg/kg diminuiu o número de eritrócitos, hematócrito, HCM e
leucócitos. CvLE (200 mg/kg) aumentou triglicerídeos e CvLTI (5 mg/kg) diminuiu
alanina aminotransferase. CvLE e CvLTI não foram genotóxicos ou mutagenicos.