A inatividade física acelera o processo natural da perda de força e de massa muscular, situação que pode culminar em sarcopenia, tornando necessário estabelecer estratégias de mitigação deste processo. O treinamento resistido (TR) é uma estratégia de baixo custo e alta eficácia na promoção de aumento da força e da massa muscular, considerando a relação dose-resposta entre o volume de TR e a hipertrofia muscular promovida pelo treinamento. A presente dissertação teve por objetivo analisar os efeitos do volume de TR sobre adaptações funcionais e marcadores séricos de adaptação ao TR em camundongos Swiss albino adultos saudáveis. O modelo utilizado para TR foi o de subida na escada inclinada, com progressão semanal da carga de treinamento, garantindo o caráter progressivo do programa de TR. A força muscular foi analisada antes do início do programa de TR e após 4 semanas de treino, através do teste de capacidade máxima de carregamento, que consiste na realização de 1 série (1 subida na escada) com o máximo de sobrecarga por uma distância predeterminada de 0,7 m. A carga de treinamento foi correspondente a 75% da capacidade máxima de carregamento para todos os grupos treinados. Os animais foram divididos em 4 grupos: Controle, G1S = executou 1 série (subida), G2S executou 2 séries e o grupo G4S executou 4 séries por sessão de TR. Foram realizadas 3 sessões semanais, durante 4 semanas. O volume foi calculado a partir da estimativa do trabalho mecânico produzido ao longo da sessão. Todos os 3 grupos treinados tiveram seus valores de força máxima aumentados, porém apenas os grupos G2S (88%) e G4S (128%) apresentaram aumento significativo quando comparados ao grupo controle. Dentre os grupos treinados, apenas o grupo G4S apresentou aumento significativo (61%) em relação G1S para a força muscular, enquanto o grupo G2S não apresentou diferenças significativas em relação aos outros grupos treinados. Para além da força, os níveis séricos de interleucina 6 e de óxido nítrico foram proporcionais ao volume de TR administrado. Estes resultados indicam que o volume de treinamento é determinante para as adaptações fisiológicas e funcionais de camundongos machos adultos saudáveis, dando indícios da relação dose-resposta com a força muscular e com marcadores séricos de adaptação após 4 semanas de TR progressivo. 

As lectinas isoladas a partir de plantas do gênero Bauhinia demonstraram variadas atividades, como por exemplo atividade anticâncer, inseticida, e também antifúngica. Bauhinia monandra é uma planta ornamental usada na medicina popular como hipoglicemiante e da qual também foram isoladas lectinas. O objetivo deste trabalho foi descrever a atividade antifúngica da lectina de folhas de Bauhinia monandra, BmoLL, bem como sua ação no tratamento de biofilme formado por leveduras. O método utilizado seguiu as condições descritas no documento do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2008). Para o ensaio de biofilme as leveduras foram cultivadas em YPD a 37°C overnight; em seguida foram suspensas e ajustadas para concentração de 10⁶ células/mL. Após o período de 48 h de crescimento do biofilme, o conteúdo dos poços foi transferido para uma nova placa e os poços da mesma foram preenchidos com 180 µL da solução contendo a lectina BmoLL diluída em RPMI 1640. Após 18 h de ação, a leitura foi realizada com comprimento de onda 540 nm. Para a análise, o teste de comparações múltiplas de Tukey foi realizado para todas as médias obtidas com o nível de significância de 5%. A BmoLL apresentou potencial inibitório do crescimento das leveduras em concentrações que variaram de 246 a 492 μg/mL e também foi capaz de inibir a continuação da formação e aumento do biofilme de Candida parapsilosis na concentração de 492 μg/mL.

A melatonina (MLT) é um hormônio sintetizado a partir do triptofano. Seus efeitos benéficos são bem descritos em algumas doenças neurológicas. Neste estudo, ratos Wistar machos receberam, do 7º ao 27º dia pós-natal (DPN), em dias alternados, solução salina (grupo controle), ou 10 mg/kg/dia ou 40 mg/kg/dia de MLT (grupos MLT-10 e MLT-40), ou nenhum tratamento (grupo intacto). Entre DPN30 e DPN34 os animais foram testados no aparelho de campo aberto (CA), primeiro para ansiedade (DPN30) e depois para tarefas de memória de reconhecimento de objetos: de posição espacial - RP (DPN31) e reconhecimento de formas - RF (DPN32). Em DPN34, foram testados no labirinto em cruz elevado (LCE). Do DPN36 a 42, registrou-se o fenômeno eletrofisiológico conhecido como depressão alastrante cortical (DAC). O tratamento com MLT não alterou o peso corporal e a glicemia dos animais, mas na menor das duas doses que utilizamos teve um impacto significante, positivo, sobre os testes comportamentais indicativos de ansiedade e memória de reconhecimento de objetos. A dose mais baixa de MLT (10 mg/kg/dia) desacelerou significantemente a DAC (2,86 ± 0,14 mm/min) em comparação com os grupos controle (3,31 ± 0,09 mm/min e 3,25 ± 0,10 mm/min; grupo intacto e veículo, respectivamente). No entanto, a dose mais alta (40 mg/kg/dia) acelerou a DAC (3,96 ± 0,16 mm/min; p <0,01). Nossos achados indicam que a administração de MLT, durante o desenvolvimento cerebral, pode atuar como antioxidante quando administrado em baixas doses, mas como pró-oxidante quando administrado em altas doses, no que se refere a parâmetros comportamentais sugestivos de ansiedade e memória e também a parâmetros eletrofisiológicos (DAC), dando-nos oportunidade para discutir possíveis implicações clínicas para tais efeitos.

A lectina de folhas de Bauhinia monandra (BmoLL) foi previamente purificada por fracionamento com sulfato de amônio (F 0-60%) seguido por cromatografia de afinidade com gel de Guar. Para o estudo de BmoLL foi desenvolvido um anticorpo policlonal em coelho contra esta lectina; IgG anti-BmoLL foi purificada do antissoro em coluna Proteína A-Sepharose CL-4B. Em teste de imunodifusão dupla ocorreu precipitações de IgG anti-BmoLL com a BmoLL e extratos de outros tecidos de B. monandra com atividade de lectina previamente detectada. O IgG anti-BmoLL foi imobilizado na superfície do eletrodo de ouro para caracterização eletroquímica e piezoelétrica da interação anticorpo-BmoLL. Um imunossensor eletroquímico realizado com IgG anti-BmoLL e superfície eletrodo de ouro estimou a ligação BmoLL e seu potencial eletroquímico. Um imunossensor piezoelétrico também foi realizado com base em uma microbalança de cristal de quartzo (QCM) com uma superfície de ouro onde o IgG anti-BmoLL foi imobilizado para caracterizar o reconhecimento de BmoLL. O sistema eletroquímico foi sensível para avaliar interações anti-BmoLL IgG com diferentes concentrações de BmoLL. O imunossensor piezoelétrico com análise de injeção de fluxo (FIA) revelou uma diminuição de frequência (15 kHz) após a interação de BmoLL (454 μg/ml) com IgG anti-BmoLL (0,11mg/mL) indicando especificidade de anticorpos de antígeno. Em seguida, o ensaio piezoelétrico foi uma ferramenta potente para detecção de reconhecimento de anticorpos de antígeno. O potencial eletroquímico e piezoelétrica da interação anticorpo- BmoLL foi obtido para avaliar a ligação da galactose e IgG anti- BmoLL. Esses resultados revelam que a IgG anti-BmoLL não provocou nenhuma alteração na ligação de galactose pela BmoLL, indicando que ela purificada não tem afinidade pelos sítios de ligação de carboidrato de BmoLL. A manufatura de uma matriz com ligação cruzada da goma da sementa da Leucaena leucocephala (cross-linked matrix of Leucaena leucocephala seed gum, CLLSG), mostrou-se eficiente na purificação da BmoLL. A confecção da matriz foi simples, eficiente e de baixo custo na purificação comparado com as gomas comerciais. Sementes que tem na sua composição abundância de galactomananas possui um alto potencial de confecção de matrizes cromatográficas para purificação de lectinas que tenham afinidade a galactose. A BmoLL purificada teve ação citotóxica em uma relação de dose dependente, principalmente no tempo de 24h, tanto nas células de macrófagos J774A.1 e sarcoma-180 (S-180), pesquisas com outras linhagens de células são necessários para aprofundar o entendimento do mecanismo de ação da citotoxicidade das lectinas. Caramujos Biomphalaria glabrata são o principal vetor de esquistossomose no Brasil e a busca por moluscicidas naturais interrompendo o ciclo evolutivo do parasita é necessário. As plantas do gênero Bauhinia são amplamente encontradas em continentes endêmicos para a doença. Análise fotoquímica do extrato e fração das folhas de B. monandra revelou derivados cinâmicos, flavonóides e saponinas; concentração de proteína (21,2 mg/mL) e AHE (96,6) confirmou a presença de lectina. Na concentração de 100 μg/mL, o extrato obteve 88,7% de inviabilidade enquanto a 200 μg/mL, 100% de embriões inviáveis. Para os caramujos adultos, a concentração de 4000 μg/mL obteve 90% de mortalidade, porém de forma acumulativa ao longo de 96h. Na avaliação da ecotoxicidade, o extrato demonstrou alta mortalidade mesmo nas menores concentrações. Em conclusão, sugere-se que o extrato salino de B. monandra possa ser utilizado como alternativa no controle populacional do vetor, porém de forma pontual em localidades com alta endemicidade devido seu impacto no ambiente.

A resistência bacteriana a antibióticos é uma das principais ameaças atuais à saúde
pública. Para lidar com esse problema pesquisadores procuram alternativas ao uso
extensivo de antibióticos. O uso de profilático de probióticos, que são microrganismos
benéficos introduzidos na alimentação e que tem a capacidade de produzir antibióticos
naturais chamados de bacteriocinas, se apresenta como a principal possibilidade. A
descobrta e caracterização de novas cepas probióticas e de substâncias tipo bacteriocina
constintuem a vanguarda da luta contra patógenos bacterianos multirresistentes. Essas
abordagens tendem a ser seguras e ecologicamente corretas, por não gerarem resídeuos
tóxicos. Dado esse contexto, uma das principais formas de impulsionar a descoberta e
uso de novas bacteriocinas e novos probióticos é estudar a biologia de bactérias isoladas
dos mais diversos ambientes. O objetivo desta tese foi sumarizar as informações mais
importantes disponíveis na literatura científica sobre becteriocinas, explorar o potencial
probióticos de cepas endofíticas do genero baciilus, isoladas das folhas da planta
Borreria verticillata, além de isolar e caracterizar substâncias tipo bacteriocinas
produzidas por essas cepas. A revisão de literatura apresenta diferentes atividades
biológicas desempenhadas pelas bacteriocinas mostrando que podem ser usadas
isoladamente ou em consórrco com outras drogas no tratamento de patologias. Vinte e
seis isolados endofíticos foram avaliados quanto à capacidade de produzir substâncias
antimicrobianas. Dentre eles a cepa BE 349 se destacou por apresentar atividade
significativamente maior contra Staphylococcus aureus, e foi identificada como sendo
B. amyloliquefaciens pelo sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. Foram então
estudados seu potencial uso como probióticos e as características da bacteriocina
parcialmente purificada com precipitação em sulfato de amônio a 80%. BE 349 se
mostrou resistente a condições adversas encontradas no trato gastrointestinal,
apresentou um perfil gregário e hidrofóbico, que contribuía para a colonização da
mucosa intestinal, cresceu em presença de sais biliares e diferentes faixas de pH, e
apresentou atividade antimicrobiana e antioxidante. A bacteriocina parcialmente
purificada apresentou atividade contra isolados clínicos de S. aureus meticilina
resistentes (MRSA), manteve a atividade em diferentes faixas de pH e temperatura e
resistiu a ação de proteases. A bacteriocina também apresentou forte ação inibitória na
formação de biofilme por cepas de MRSA, e ação bacteriostática na concetração de 1/2
MIC e bactericida na concentração correspondente ao MIC. Esses resultados mostram o
potencial uso da BE 349 como cepa probiótica para uso em seres humanos ou animais, e
o potencial terapêutico que a bacteriocina produzida pela BE 349 apresenta no
tratamento a infecções por cepas de MRSA.

O Alzheimer (DA) e Parkinson (DP) estão entre as doenças neurodegenerativas mais prevalentes e incapacitantes na população mundial. Estudos mostram que o dano neuronal progressivo subjacente à DA e DP está associado a processos envolvendo estresse oxidativo, neuroinflamação e neurodegeneração. Infelizmente o tratamento atual ainda é paliativo por ser incapaz de impedir e reverter a sua evolução. A neurocinina substância P (SP), o ligante endógeno dos receptores neurocinérgicos NK₁ (RNK₁), é um neuropeptídeo biologicamente ativo envolvido na neuromodulação. No entanto, a SP-RNK₁ vêm sendo apontados estar envolvidos em vários processos fisiopatológicos. No presente estudo, investigamos a possível participação dos RNK₁ para SP nas alterações comportamentais (cognitivos e motores) e bioquímicas (marcadores de estresse oxidativo, neuroinflamação e apoptose neuronal) em modelos animais de DA e DP. Para isso, ratos Wistar adultos machos receberam por via intracerebroventricular (i.c.v.) a neutotoxina estreptozotocina (ETZ), para indução do modelo animal de DA, sendo investigados os efeitos do tratamento com o antagonista dos RNK₁ L-733,060 nas alterações cognitivas e bioquímicas induzidas pela ETZ. Em outros grupos experimentais, investigamos os efeitos do tratamento intra-estriatal ou intra-nigral com o antagonista dos RNK₁ L-733,060 nas alterações motoras e bioquímicas em um modelo de parkinsonismo induzido pela administração sistêmica de haloperidol ou de hemiparkinsonismo induzido pela infusão unilateral intra-estriatal da neurotoxina 6-OHDA. Nossos resultados mostraram que o tratamento i.c.v. com L-733,060 aboliu o prejuízo cognitivo induzido pela ETZ em ratos avaliados no teste da esquiva inibitória e de reconhecimento de objetos. Nenhum dos tratamentos alterou as atividades exploratória e motora no CA e RR, respectivamente. A ETZ reduziu a atividade da CAT e aumentou os níveis de TBARS no córtex e hipocampo, assim como reduziu a SOD e aumentou o conteúdo de NOx no córtex. Essas alterações foram abolidas pelo tratamento repetido com L-733,060. Embora a ETZ per se não tenha modificado os indicadores de apoptose e neuroinflamação/neurodegeneração, o tratamento com L-733,060 aumentou o imunoconteúdo da CASP-3 concomitantemente com uma redução da BAX no grupo que recebeu a neurotoxina. No modelo experimental de parkinsonismo farmacológico, nossos resultados mostraram que o tratamento intraestrial, mas não intranigral, com L-733,060 diminui a catalepsia induzida pelo haloperidol. No modelo de hemiparkinsonismo induzido pela 6-OHDA, o tratamento com L-733,060 reverteu o prejuízo motor no teste do campo aberto, da roda giratória e no teste de rotações contralaterais induzida por apomorfina. A 6-OHDA reduziu a CAT e SOD no estriado e substância nigra, efeito que foi revertido pelo L-733,060. O antagonista dos RNK₁ per se aumentou a atividade da CAT e SOD e reduziu o conteúdo de NOx no estriado e substância nigra. A 6-OHDA reduziu o imunoconteúdo de tirosina-hidroxilase (TH), porém este efeito não foi revertido pelo L-733,060. Os demais indicadores de apoptose e neuroinflamação não foram alterados. No modelo experimental de DA esporádica, nossos resultados sugerem que os RNK₁ para SP estão envolvidos nas alterações mnemônicas induzidas pela ETZ e que o antagonista dos RNK₁ exerce efeito neuroprotetor envolvendo atividade antioxidante e antiapoptótica. Nos modelos experimentais de DP, nossos resultados sugerem o envolvimento dos receptores RNK₁ nas alterações motoras e oxidativas induzidas pelo haloperidol ou pela neurotoxina 6-OHDA. 

As lectinas são proteínas que reconhecem e se ligam a carboidratos de forma especifica e reversível. As atividades biológicas desempenhadas pelas lectinas acontecem devido a sua interação com glicanos presentes nas superfícies celulares de diversos organismos. As folhas de Schinus terebinthifolia Raddi. contêm uma lectina denominada de SteLL que apresenta atividades biológicas, tais como antimicrobiana, antitumoral, antinociceptiva, citotóxica, imunomoduladora e inseticida. Esta dissertação teve como objetivo investigar os efeitos de SteLL na viabilidade de linhagens tumorais leucêmicas (K562- leucemia mielóide crônica; JURKAT- leucemia linfoblástica aguda) e células tronco mesenquimais (CTMs), assim como, investigar os efeitos imunomoduladores sobre as CTMs. Além disso, determinar a atividade antinociceptiva de SteLL em modelos experimentais de nocicepção aguda periférica e central em camundongos. As CTMs foram isoladas de cordão umbilical humano e a citotoxicidade de SteLL (0,048-100 μg/mL) foi avaliada pelo ensaio de MTT. Culturas de CTMs tradadas com SteLL (50 μg/mL) foram investigadas quanto à produção de citocinas e ocorrência de apoptose e/ou necrose. Culturas de K562 e de JURKAT foram tratadas com SteLL (12,5–100 μg/mL) e a ocorrência de apoptose e necrose foi analisada em ambas as linhagens tumorais. Para a avaliação do efeito antinociceptivo periférico, os animais receberam os tratamentos (PBS, controle negativo; indometacina 20 mg/kg; morfina 10 mg/kg e SteLL 1, 5 e 10 mg/kg) por via intraperitoneal, e o número de contorções foi determinado no teste de contorções induzidas por ácido acético. No teste de formalina, o tempo que cada animal gastou lambendo a pata foi registrado nos primeiros 5 minutos (primeira fase -neurogênica) e no período de 15 a 30 minutos (segunda fase - inflamatória) após a injeção de formalina na região subplantar na pata. A investigação do envolvimento do domínio de reconhecimento de carboidratos (DRC) e dos receptores da via opioide na ação antinociceptiva da lectina foram avaliados. Para a avaliação da antinocicepção central, o teste de imersão da cauda foi realizado, sendo os animais tratados (PBS, controle negativo; morfina 10 mg/kg e SteLL 1, 5 e 10 mg/kg) e avaliados quanto aos períodos de latência para retirada da cauda 30, 60, 90 e 120 minutos após os tratamentos. SteLL não alterou a viabilidade de CTMs em nenhuma das concentrações, não induziu apoptose e necrose e não afetou a liberação das citocinas. SteLL (12.5, 25 e 50 μg/mL) exerceu efeito citotóxico em K562 por indução de apoptose em 92.3%, 92.3% e 97.7% das células, porém não foi citotóxica para JURKAT em nenhuma concentração. SteLL (1, 5 e 10 mg/kg) reduziu as contorções induzidas por ácido acético de maneira dose dependente em 84%, 90% e 100%. No teste de formalina, SteLL (1, 5 e 10 mg/kg) reduziu o tempo de lambida da pata em 49%, 48% e 51% na primeira fase. Na segunda fase, SteLL (1 e 10 mg/kg) reduziu em 83% e 81%. Esse efeito foi revertido pela administração da lectina incubada com glicoconjugado especifico (ovoalbumina) e pelo antagonista não seletivo dos receptores opioides (naloxona). No teste de imersão de cauda, SteLL (1, 5 e 10 mg/kg) reduziu a percepção do estímulo térmico, mesmo duas horas após o tratamento. Em conclusão, SteLL não afeta a viabilidade de CTMs, porém não apresenta efeito imunomodulador sobre elas. Entretanto, apresentou importante efeito citotóxico contra a linhagem leucêmica K562 e demonstrou ação analgésica periférica e central, e o efeito antinociceptivo periférico envolve o DRC e os receptores opioides.

A ciclo-oxigenase 2 (COX-2) é uma enzima importante na regulação do fluxo sanguíneo renal, contudo ela apresenta efeitos pró-fibróticos em situações de lesão renal. A fibrose é um fenômeno que envolve a ativação do sistema renina-angiotensina (SRA) e a NADPH oxidase. Apesar de ser conhecida a interrelação do SRA e da COX-2 no tecido renal, ainda é pouco conhecido se os efeitos protetores da inibição da COX-2 sobre a fibrose renal envolvem a modulação do SRA e da NADPH oxidase. Dessa forma, foi investigado os efeitos do inibidor da COX-2 celecoxibe sobre as alterações renais induzidas pela obstrução ureteral unilateral (OUU), analisando o impacto sobre componentes do SRA e atividade da NADPH oxidase. A OUU foi realizada em ratos machos Wistar (120 dias), enquanto que o grupo Sham foi submetido a uma simulação cirúrgica do procedimento. Após a cirurgia, parte dos animais submetidos a OUU recebeu um tratamento diário por sete dias com celecoxibe (10 mg/kg ou 100 mg/kg, via gavagem; n=8 cada). Os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da UFPE (nº 115/2019). Após 24 horas da OUU, foi observada uma elevação de cerca de 50% nos níveis séricos de ureia (P<0,001) e de três vezes nos níveis séricos de creatinina (P<0.01). Após 7 dias da cirurgia, não foram observadas alterações no peso corpóreo, consumo dietético e consumo hídrico entre os grupos experimentais. Por outro lado, os níveis séricos de creatinina e ureia permaneceram mais elevados (P<0,05) nos grupos submetidos a OUU, com exceção dos ratos tratados com a menor dose do celecoxibe, que apresentaram ureia sérica menor do que o grupo sem tratamento. A OUU também elevou a proteinúria, o que foi prevenido por ambas doses de celecoxibe. O rim obstruído apresentou maior deposição de colágeno no glomérulo e região tubulointersticial, em conjunto com elevação da atividade da NADPH oxidase e do conteúdo de RNAm para AT1aR. No rim contralateral, só foi observado aumento da atividade da NADPH oxidase e da deposição de colágeno no glomérulo, enquanto os níveis de RNAm para AT1aR não foram alterados. No rim obstruído, o tratamento com celecoxibe atenuou a deposição de colágeno glomerular apenas na maior utilizada, enquanto que o efeito na região tubulointerstiticial foi observado para ambas doses. Além disso, o tratamento com celecoxibe preveniu a elevação da atividade da NADPH oxidase em ambos os rins, bem preveniu a elevação do RNAm para AT1R no rim obstruído. Em resumo, os dados indicam que o celecoxibe apresenta efeitos antifibróticos que podem envolver inibição da ativação da NADPH oxidase e da via AT1R do SRA. Esse conhecimento pré-clínico pode fomentar estudos posteriores para o redirecionamento terapêutico do celecoxibe para o tratamento da DRC.

O câncer é um grupo extenso de doenças que apresentam em comum o crescimento desordenado de células anormais que são capazes de se difundir para tecidos e órgãos adjacentes e, de acordo com a Organização Mundial de Saúde, espera-se um aumento de 49,7% nos casos de câncer até o ano de 2040. Atualmente, a terapia antitumoral enfrenta diversos desafios devido ao surgimento de resistência do tumor ao fármaco, bem como diversos efeitos colaterais indesejados, tornando urgente a busca por novos compostos mais ativos e seletivos. Nesse contexto, a Reação Morita-Baylis-Hillman se mostrou promissora enquanto fonte de moléculas com atividade biológica, entre as quais, já é descrito que adutos derivados de isatina apresentaram citotoxicidade diante células leucêmicas e de carcinoma de pulmão. Neste trabalho buscamos identificar a atividade citotóxica de 21 adutos derivados de isatina frente a seis linhagens tumorais (MCF-7, HEP-2, HepG2, HL60, K562 e NCI H292), nos quais os 8 mais promissores foram testados em células mononucleares do sangue periférico (CMSP). As CI50s determinadas pelo método do MTT após 72h para células tumorais dos adutos mais citotóxicos variaram entre 0,044uM e 29,25uM enquanto que em CMSP variou entre 2,75uM e 19,25 uM. Após a determinação do índice de seletividade, optou-se por dar continuidade aos experimentos com os dois adutos mais ativos e seletivos na linhagem tumoral de leucemia mieloide crônica, K562. São eles: MBH 6 e MBH 9. Foi realizado o teste de exclusão por azul de tripan, no qual foi constatado que, apesar de mais ativo após 72 h, o aduto MBH 9 apresenta uma resposta mais tardia quando comparada ao aduto MBH 6, que já este demonstrou a citotoxicidade significativa a partir das primeiras 24h. Essa afirmação é respaldada através das alterações morfológicas analisadas que constatam indicativos de condensação de cromatina nas células testadas com 16μM do aduto MBH 6 já nas primeiras 24h de tratamento que se intensificaram com 48h e 72h de tratamento para MBH6 e MBH9.  Foram realizados ensaios em citometria, nos quais foi possível observar significativa fragmentação de DNA (p<0,05) em todas as concentrações de ambos adutos testados, bem como uma redução da proliferação celular na fase S/G2/M do ciclo celular (p<0,05). Por fim, foram realizados ensaios de Western Blot que possibilitou a observação de  uma redução significativa (p<0,05) das proteínas anti-apoptóticas MCL-1 e BCL-XL nas células K562 tratadas por 24h com o aduto MBH 9 nas concentrações de 6μM e 12μM e uma diminuição significativa (p<0,05) da Caspase-3 não-fosforilada na concentração de 12μM do MBH 9, bem como uma tendência ao aumento da proteína pró-apoptótica PAR-4, sugerindo que estes adutos são capazes de induzir apoptose em K562. 

A Síndrome Metabólica (SMet) é uma doença multifatorial caracterizada pelo agrupamento de diversos agravos cardiovasculares e metabólicos. O prejuízo em diversas vias de sinalização correlaciona-se com o agravamento da síndrome, incluindo o sistema renina angiotensina aldosterona. Diante disso, objetivou-se, investigar os efeitos do antagonismo do receptor AT1 com o losartan nas alterações cardíacas funcionais, estruturais e moleculares em ratos com síndrome metabólica dietética. Utilizou-se ratos Wistar machos com 8 semanas de idade, randomizados em: 1- Grupo controle (CT), que recebeu dieta padrão para roedor; 2- Grupo obeso (HFD), que recebeu dieta “high fat” (58,4% kcal lipídios) por 16 semanas; 3- Grupo Controle+Losartan (CT+LOS), que recebeu dieta padrão para roedor e intervenção farmacológica com losartan (15mg.Kg^-1/dia, via oral-gavagem); e 4- Grupo Obeso+Losartan (HFD+LOS), o qual recebeu dieta ”high fat” durante 16 semanas e intervenção farmacológica com losartan (15mg.Kg^-1/dia, via oral-gavagem) durante as 8 semanas finais da intervenção dietética. Parâmetros metabólicos (lipídico, glicêmico) e cardíacos (tamanho dos cardiomiócitos; deposição lipídica e de colágeno; atividade REDOX; expressão gênica e avaliação funcional) foram avaliados. Comitê de Ética para Uso de Animais da UFPE (Processo: 0012/2019). Os resultados demonstram ganho de peso corporal e maior índice de adiposidade no grupo HFD em relação ao CT, bem como aumento da pressão arterial sistêmica, indução de resistência à insulina e intolerância à glicose após consumo de HFD. A intervenção farmacológica no grupo HFD+LOS melhorou a sensibilidade à insulina e tolerância à glicose, bem como normalizou a pressão arterial. O peso cardíaco foi reduzido nos grupos tratados (CT+LOS; HFD+LOS) em comparação aos não tratados (CT; HFD). A deposição lipídica cardíaca não foi diferente entre os grupos, porém, houve incremento da deposição de colágeno no grupo HFD em relação ao CT. Curiosamente, o grupo HFD+LOS apresentou diminuição significativa da deposição do colágeno tanto intersticial quanto perivascular em relação ao HFD. Na avaliação REDOX cardíaca a atividade enzimática da superóxido dismutase, catalase e arginase não diferiram entre os grupos. Entretanto observou-se aumento significativo dos níveis de nitrito no grupo HFD em relação ao CT, os quais normalizaram após tratamento com losartan, sugerindo participação da forma induzida da óxido nítrico sintase (iNOS) na geração de espécies reativas. A expressão gênica relativa para ANF, BNP, AT₁R e ECA foi reduzida no grupo HFD em relação ao CT. Entretanto, o losartan reverteu as alterações gênicas nos dois últimos. Em suma, demostrou-se que o consumo crônico de dieta “high fat” induziu distúrbios cardiometabólicos que caracterizam a SMet em ratos e tais agravos parecem ser mediados pela ação da angiotensina II via receptor AT1.

As plantas são fontes naturais de muitas moléculas biologicamente ativas, como lectinas, que são proteínas ou glicoproteína capazes de reconhecer e se ligar a carboidratos ou glicoconjugados de maneira específica e reversível. E também é fonte de muitos outros metabólitos com alto potencial biotecnológico. Nesse sentido, o objetivo dessa tese foi purificar lectina de folhas de B. virgiliodes, analisar sua interação molecular, e avaliar seu extrato salino, quanto a composição química e atividades biológicas. Para purificação da lectina foi preparado extrato salino das folhas a 10% p/v NaCl 0,15 M (16 h em agitação, a 25°C), em seguida foi centrifugado, filtrado, e o sobrenadante foi dialisado e liofilizado (extrato salino). Posteriormente esse produto foi ressuspendido em água destilada e purificado em duas etapas de cromatografia de gel filtração, para obtenção da lectina. Após a purificação, foi realizado AH, inibição da AH por proteínas e carboidratos, e avaliação da interação lectina-proteína por espectroscopia UV-Vis, fluorescência e RMN, além de ensaio antioxidante, hemolítico e toxicidade em Allium cepa e Lactuca sativa. Com o extrato salino foi analisado a composição química por LC-MS e avaliado sua ação: antioxidante, antibacteriana, antifúngica, antibiofilme, citotóxica, hemolítica, anti-hemolítica, proteção solar, larvicida e proteolítica. Por fim, foi quantificado fenóis, proteínas, carboidratos (totais e redutores) e ácido hexurônico. Os resultados apresentam a purificação de lectina de folhas de B. virgilioides, BovLL. A qual apresentou interação com proteínas e carboidratos, em todas as técnicas testadas. No ensaio antioxidante, BovLL apresentou capacidade significativa de absorção do radical DPPH e essa capacidade foi intensificada após interação com carboidratos. Finalmente a lectina não apresentou toxicidade até 250 µg / mL. Nos ensaios com o extrato, foram identificados seis compostos majoritários e suas respectivas massas. O mesmo apresentou atividade antioxidante por DPPH, ABTS e FRAP. Atividade antibacteriana para Gram-positivas, S. pyogenes, S. aureus e E. faecalis (CMI e CMB: 250 e 500; 500 e 1000; e 1000 e 2000 µg / mL, respectivamente). Citotoxicidade em células cancerígenas (HT-29) a 125 µg / mL e não para células normais (L929) até 500 µg / mL. Não apresentou toxicidade em larvas de A. salina e A. aegypti até 250 µg / mL e 1000 µg / mL, respectivamente. Não foi hemolítico até 2000 µg / mL, e foi anti-hemolítico até 1,95 µg / mL. O espectro de absorção revelou pico máximo em 280 nm (UVB) e FPS de 25,24 a 2000 µg / mL. Também apresentou 80% (U / mg) de atividade proteolítica. Finalmente foi quantificado o conteúdo de proteínas, açúcares (totais e redutores), ácido hexurônico, e fenóis, respectivamente: 10 mg / mL, 62,85%, 17,0%, 19,18%, e 235,759 mg GAE / g (em 2000 µg / mL).Portanto, foi purificada a primeira lectina de folhas de B. virgilioides (BovLL), com interações e biologia estudadas. E também foi obtido o extrato salino, com seis compostos químicos identificados e diferentes atividades biológicas testadas.

Atualmente doenças infecciosas e agentes estressores ainda representam uma importante causa de morbidade e mortalidade entre seres humanos, especialmente nos países em desenvolvimento como o Brasil. Atingimos um ponto crítico em que novas drogas não estão sendo desenvolvidos no ritmo necessário para conter esta capacidade natural dos patógenos de adquirir resistência e defender-se contra os antibióticos. E também é necessário o desenvolvimento de novas soluções para reduzir os efeitos deletérios do envelhecimento e, portanto prolongar o tempo de vida saudável. Diante disso o objetivo deste trabalho identificar e caracterizar metabólicos secundário de folhas da Buchenavia tetraphylla e Myrcia hirtiflora com ação antimicrobiana e antioxidante. As folhas de Buchenavia tetraphylla e Myrcia hirtiflora foram coletadas em Buíque-PE, foram secas e moídas, e foram realizada uma extração com solventes orgânicos para obtenção de extrato bruto. O fracionamento do extrato de melhor atividade foi realizado por cromatografia em colina aberta Sephadex LH-20. Para a determinação da atividade antimicrobiana foi utilizado o método de micro diluição, onde foi determinado a concentração mínima Inibitória (CMI) e a Mínima Microbicida (CMM) contra as linhagens de Candida albicans e Staphylococcus aureus. Os valores do CMI e CMM foram satisfatório para todas a linhagens testadas. Para a determinação da atividade antioxidante foi utilizado várias metodologias, como: DPPH, ABTS, Dosagem de compostos fenólicos e flavonóides. Onde os valores encontrados também foram satisfatórios. Ambas atividades foram testado em organismos vivos para avaliação in vivo, que neste caso foi utilizado o modelo Tenebrio molitor onde foi apresentado resultados bastantes satisfatórios. Assim, com esses dados estimular novas pesquisas sobre aspectos farmacológicos e citotóxicos dos extratos/frações da Buchenavia tetraphylla e Myrcia hirtiflora a fim de apoiar a sua aplicação como agente antimicrobiano e antioxidante.

Avaliação da toxicidade oral aguda, de doses repetidas e do potencial antidiabético, anti hiperlipemiante e antioxidante do extrato hidroalcoólico das folhas de Bauhinia cheilantha Bong. 

Bauhinia cheilantha (Lauraceae), conhecida popularmente como pata-de-vaca e mororó, é amplamente utilizada no tratamento do diabetes mellitus (DM) na medicina popular. No entanto, as informações sobre a toxidade oral aguda e de doses repetidas, assim como o uso terapêutico no tratamento do diabetes mellitus(DM) ainda são escassas. O objetivo desse trabalho foi elaborar uma revisão sistemática da literatura sobre o uso medicinal das espécies do gênero Bauhinia no tratamento do DM, assim como caracterizar quimicamente, avaliar a toxidade aguda e de doses repetidas por 28 dias, atividade antidiabética, antihiperlipemiante e antioxidante do extrato hidroalcoólico das folhas de Bauhinia cheilantha (HaEBcl) em ratos. A revisão sistemática foi realizada utilizando as bases de dados PubMed, Web of Science, Science direct, SCIELO, Google Scholar e PROSPERO. A estratégia de inclusão foi estabelecida com SYRCLE protocol guideline e avaliados com base ao risco de viés. Experimentalmente, o HaEBcl foi avaliado quimicamente através da cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) e atividade antioxidante in vitro. A toxidade oral aguda foi avaliada em camundongos fêmeas (n=3 por grupo) tratados com dose única de 300 ou 2.000 mg / kg. A toxicidade oral de doses repetidas por 28 dias foi avaliada em camundongos fêmeas (n=5 por grupo) e machos (n=5 por grupo) tratados com as doses de 300, 1.000 ou 2.000 mg / kg por 28 dias consecutivos. Foram avaliados os níveis séricos dos marcadores de função hepática (transaminases hepáticas) e renais (ureia e creatinina), assim como o perfil hematológico e a histologia hepática e renal. Ratos Wistar machos (200±10g) foram tratados com uma dose única de estreptozotocina (STZ, 40mg/kg). Após a confirmação do DM, os animais foram tratados por via oral durante 28 dias com o HaEBcl (150 e 300mg/kg). Foram avaliados parâmetros metabólicos como ganho de massa corporal, ingestão hídrica e alimentar, volume urinário, assim como glicemia pós-prandial, massa do fígado, músculo esquelético e tecido adiposo branco, perfil lipêmico plasmático, transaminases hepáticas, ureia, creatinina e atividade enzimática da superóxido dismutase e catalase hepática e níveis de glutationa reduzia e oxidada no fígado. A revisão sistemática da literatura mostrou o efeito antihiperglicemiante e antidiabético em espécies do gênero Bauhinia em roedores.  O HaEBcl é rico principalmente em flavonoides (quercetina e afzelina), glicosídeo de kaempferol e glicosídeo de quercetina e apresentou atividade antioxidante in vitro. O HaEBcl não exibiu toxidade oral aguda, assim como de doses repetidas de 28 dias nas doses avaliadas. O tratamento com HaEBcl melhorou o ganho ponderal e reduziu a polifagia na maior dose, sem alterações na polidpsia e poliúria. O HaEBcl reduziu a hiperglicemia em 20 e 40% na menor dose e 30% e 70% no 21º e 28º dias de tratamento, respectivamente, assim como os níveis de hemoglobina glicada (40%) na maior dose. Além disso, os animais tratados com o HaEBcl tiveram melhora na dislipidemia e a hepatoxidade induzida pelo DM na maior dose. Além disso, o HaEBcl atenuou o estresse oxidativo hepático, melhorou os níveis de glicogênio   e no estresse oxidativo hepático. Deste modo, o HaEBcl não é tóxico oralmente, assim como tem ações antidiabética e antihiperglicemiantes claras, além de efeitos hepatoprotetores e antioxidantes in vivo.