CONSTRUÇÃO DE GENOSSENSORES ELETROQUÍMICOS BASEADOS EM POLÍMERO CONDUTOR E NANOESTRUTURAS PARA A DETECÇÃO DOS ONCOGENES QUIMÉRICOS TCF3- PBX1 E ETV6-RUNX1.
Leucemia Linfoblástica Aguda; Biossensor Eletroquímico; TCF3-PBX1; ETV6-RUNX1.
A leucemia linfoblástica aguda (LLA) apresenta maior incidência em meio a população infantojuvenil. A identificação de biomarcadores específicos, como os oncogenes de fusão TCF3-PBX1 (t(1:19)) e ETV6-RUNX1 (t(12:21)), são de relevância clínica. Estes oncogenes fornecem informações valiosas sobre as características moleculares da doença, fornecendo melhores previsões quanto ao prognóstico e ao risco de recidiva. Neste estudo foram desenvolvidos genossensores eletroquímicos baseados em filmes de polipirrol (PPy) e nanotubos de carbono de paredes múltiplas (MWCNTs). Para a construção da plataforma de sensoriamento, foi utilizada superfície flexível de óxido de índio e estanho (ITO) para o diagnóstico das oncoproteínas de interesse. Quanto ao receptor biológico, foram utilizadas sondas de DNA aminadas altamente específicas para os analitos. A caracterização da superfície de trabalho ocorreu através da aplicação das técnicas de Microscopia de Força Atômica (AFM), Voltametria Cíclica (VC) e Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIE). A aplicação da técnica de AFM evidenciou as características heterogêneas da superfície em decorrência da deposição dos diversos nanomateriais utilizados, sendo os picos mais elevados obtidos após sua exposição a amostras positivas. O genossensor (t(1;19)) B-LLA exibiu variação da corrente de pico anódica (Δi (%)) de 358,0 enquanto o genossensor (t(12;21)) B-LLA apresentou Δi (%) de 293,0 quando expostos a amostras clínicas com concentrações da ordem de 100 pg.µL⁻¹. Esses sinais eletroquímicos produzidos são indicativos da formação de uma superfície de trabalho mais resistiva e do processo de reconhecimento bioespecífico. Foram encontrados os seguintes valores para o limite de detecção (LOD) do genossensor (t(1;19)) B-LLA e (t(12;21)) B-LLA: 0,77 pg.µL⁻¹ e 0,54 pg.µL⁻¹, respectivamente. Enquanto o limite de quantificação encontrado foi de 2,34 pg.µL⁻¹ e 1,63 pg.µL⁻¹, respectivamente. Os ensaios de biorreconhecimento realizados demonstraram que o biodispositivo desenvolvido apresenta elevada sensibilidade, especificidade e seletividade, reiterando seu potencial em termos de rapidez e precisão diagnóstica.