Banca de DEFESA: ANA LIVIA FERNANDES SANTOS

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ANA LIVIA FERNANDES SANTOS
DATA : 30/04/2025
HORA: 14:00
LOCAL: Audiório do Departamento de Biofísica e Radiobiologia
TÍTULO:

NANOSSONDA BASEADA EM PONTOS QUÂNTICOS PARA ESTUDO DO PERFIL DE INTERAÇÃO DO ÁCIDO HIALURÔNICO COM CÉLULAS DE CÂNCER

PALAVRAS-CHAVES:

CD44;Fluorescência; Ligação Dativa; Nanopartícula

PÁGINAS: 68
RESUMO:

O ácido hialurônico (AH) é um glicosaminoglicano predominantemente internalizado pelas células pelo receptor CD44. Da interação AH-CD44 são ativadas vias de sinalização responsáveis pela progressão tumoral e, dessa forma, a superexpressão de CD44 tem sido associada à proliferação, migração e potencial metastático de células de câncer. Nesse contexto, nanossondas fluorescentes baseadas em AH e pontos quânticos (PQs) podem contribuir para desvendar processos biológicos e aprofundar o entendimento da biologia do câncer. Os PQs são nanocristais de semicondutores com propriedades físico-químicas únicas, incluindo fluorescência com alta fotoestabilidade e superfície ativa para conjugação com biomoléculas. Assim, nesta dissertação objetivou-se desenvolver uma nova nanossonda fluorescente baseada em PQs e AH e investigar sua interação com células de câncer. Para tanto, o AH foi funcionalizado com grupos tiol a partir da conjugação com a cisteamina, formando o composto AH-SH, que foi caracterizado por análises de potencial Zeta (ζ), espectroscopia de absorção no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e ensaio de Ellman. Os PQs de CdTe carboxilados, sintetizados em meio aquoso, foram conjugados ao AH-S, por uma abordagem prática e direta envolvendo ligação dativa, originando a nanossonda PQs-AH, que foi caracterizada por espectroscopias de absorção e emissão, análises de potencial ζ, FTIR, eletroforese em gel de agarose e espectroscopia de correlação por fluorescência (FCS). O potencial ζ do AH-SH apresentou um valor de ca. 20 mV (em módulo) menor que do AH. O ensaio de Ellman indicou que houve conjugação de aproximadamente 50% dos grupos carboxílicos do AH com a cisteamina e no FTIR foram observadas as assinaturas moleculares do AH no composto AH-SH com uma atenuação da banda amida I. A conjugação dos PQs com AH-SH foi confirmada: (i) pela diminuição do valor do potencial ζ em cerca de 32 mV (em módulo) e presença dos modos vibracionais dos PQs e AH no FTIR, (ii) pelo padrão diferencial de migração visualizado na eletroforese e (iii) pelo aumento do diâmetro hidrodinâmico em ca. 12 nm observado no FCS. Houve uma diminuição da intensidade de florescência dos PQs após a conjugação, mas o nanossistema continuou altamente e visualmente fluorescente. Em seguida, a interação da nanossonda com células de adenocarcinoma cervical (HeLa) e mamário (MCF-7) foi estudada por técnicas fluorescentes. Foi observada uma intensa marcação das células HeLa em 30 min de incubação, com um padrão puntiforme e localização predominantemente citoplasmática, correspondendo a aproximadamente 88% de células positivamente marcadas na citometria de fluxo. Por outro lado, foi visualizada uma baixa marcação das células MCF-7, concentrada na membrana plasmática, possivelmente associada a uma baixa quantidade de receptores CD44 funcionais. Esse padrão diferencial de marcação observado sugere que a nanossonda apresentou interação via receptor CD44. Portanto, os resultados indicam que foi desenvolvida uma nanoferramenta promissora para aplicação em estudos de biologia do câncer, podendo contribuir para uma compreensão mais aprofundada da progressão da doença, metástase e modificações celulares após intervenções terapêuticas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1542785 - ADRIANA FONTES
Externa à Instituição - MARIA ISABELA DE ANDRADE PEREIRA
Externo à Instituição - WESLLEY FELIX DE OLIVEIRA - UFPE