Banca de DEFESA: PALLOMA LIMA DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: PALLOMA LIMA DE OLIVEIRA
DATA : 29/08/2024
HORA: 13:30
LOCAL: Plataforma Google Meet
TÍTULO:

Avaliação de peptídeo anti-SARS-CoV-2: potencial biológico, cito- e genotóxico

PALAVRAS-CHAVES:

RAMP. SARS-CoV-2. Antimicrobiano. MTT. CBMN.

PÁGINAS: 117
RESUMO:

A pandemia do novo Coronavírus (COVID-19), causado pela Síndrome Respiratória Aguda Grave 2 (SARS-CoV-2), apresentou uma rápida disseminação em 2020, evidenciando a escassez de tratamentos eficazes destacou a necessidade de novos agentes terapêuticos. Nesse contexto, Peptídeos Antimicrobianos de Plantas (P-AMPs, Plant Antimicrobial Peptides) têm sido considerados potenciais candidatos, devido às suas propriedades físicas, químicas e biológicas associadas. Com foco na análise de atividade anti-SARS-Cov-2, o presente estudo visou avaliar o potencial antimicrobiano, bem como citotóxico e genotóxico de um AMP racionalmente modificado (RAMP) inspirado em uma α-hairpinina, identificada no transcriptoma de Cenostigma pyramidale (catingueira) (Cp_hp1), modificada e sintetizada. A atividade antibacteriana do RAMP foi investigada contra cepas de Staphylococcus aureus (ATCC 25923) (Gram positiva), Klebsiella pneumoniae (ATCC 13883) e Acinetobacter baumannii (ATCC 19606) (ambos, Gram negativas), por determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM). A atividade antifúngica foi avaliada contra Candida albicans (URM 5901), Candida glabrata (URM 4246), Cryptococcus neoformans (B3501) e Cryptococcus gattii (R265). Quanto à atividade anti-SARS-Cov-2, foi analisada a citotoxicidade e efeito antiviral pós-tratamento de sete concentrações seriadas do peptídeo (16 a 1024 µg/mL), mediante ensaio de MTT, método TCID50 e RT-qPCR utilizando o CC20, frente a células Vero (CCL81). Por fim, a cito- e genotoxicidade do Cp_hp1 foram investigadas mediante o teste de MTT (16 a 1024 µg/mL) e ensaio de Micronúcleo com Bloqueio de Citocinese (CBMN) (128; 256 e 512 µg/mL), respectivamente, ambos usando linhagem celular Vero (ATCC CRL-1586). O RAMP exibiu CIM para S. aureus, K. pneumoniae e A. baumannii nas concentrações de 256, 1024 e 256 µg/mL, respectivamente. Mostrou ação antifúngica contra C. albicans e C. glabrata, com ação inibitória e fungicida igual ou superior a 1024 µg/mL, bem como contra as cepas C. neoformans e C. gattii, com ação inibitória na concentração de 256 µg/mL e 64 µg/mL, respectivamente. Efeito fungicida foi notado para a concentração de 512 µg/mL para ambas as cepas de Cryptococcus. Os valores de CC50 (250,2 µg/mL), CC20 (84,31 µg/mL), IC50 (8,682 µg/mL) e índice de seletividade (28,80) indicaram que Cp_hp1 apresenta uma ação anti-SARS-CoV-2, mostrando efeito inibitório contra o SARS-CoV-2 (CC20 a CC20/4) quando adicionado pós-tratamento. A redução da infecção viral foi acompanhada pela diminuição dos níveis de cópias de RNA, sugerindo que o mecanismo de inibição do SARS-Cov-2 pelo peptídeo ocorre na etapa de replicação. Adicionalmente, observou-se ausência de cito- e de genotoxicidade para as concentrações testadas igual ou menor que 256 µg/mL. Em suma, os dados demonstram que o Cp_hp1 apresenta atividade anti-SARS-Cov-2 e evidenciam potencial antibacteriano e antifúngico frente às cepas estudadas. Esses resultados, associados à ausência de cito- e genotoxicidade para o AMP estudado, sugerem um potencial promissor para este RAMP como novo agente terapêutico de amplo espectro.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1293690 - ANA CHRISTINA BRASILEIRO VIDAL
Externa à Instituição - FLAVIA FIGUEIRA ABURJAILE - UFMG
Interna - 2380850 - MARIA BETANIA MELO DE OLIVEIRA
Externa ao Programa - 2247580 - MICHELLY CRISTINY PEREIRA - nullExterna ao Programa - 1372392 - NEIDE SANTOS - null