Banca de QUALIFICAÇÃO: MARIA DA CONCEIÇÃO VIANA INVENÇÃO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARIA DA CONCEIÇÃO VIANA INVENÇÃO
DATA : 31/07/2024
LOCAL: Anfiteatro do PPGCB
TÍTULO:

DESENVOLVIMENTO DE ESTRATÉGIA VACINAL TERAPÊUTICA BASEADA EM VACINAS DE ÁCIDOS NUCLEICOS CONTENDO O GENE E5 DO PAPILOMAVÍRUS HUMANO TIPO 16 CARREADAS POR LEVEDURA PARA O TRATAMENTO DO CÂNCER DE COLO DE ÚTERO

PALAVRAS-CHAVES:

Câncer cervical. Imunoterapia. HPV. Pichia pastoris. Ácidos nucleicos. Adjuvante.

PÁGINAS: 80
RESUMO:

A infecção prolongada do Papilomavírus Humano (HPV) tem relação com o câncer de colo do útero, considerado o quarto câncer que mais afeta mulheres no mundo, provocando aproximadamente 350.000 mortes em 2022. A maioria desses casos estão associados a infecção pelo genótipo de alto risco oncogênico HPV16. As terapias atuais são pouco eficazes e muito invasivas, assim há a necessidade de investir em novas alternativas de tratamentos, como estratégias de imunoterapias. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver uma estratégia vacinal terapêutica baseada em DNA para o câncer de colo do útero contendo o oncogene E5 tipo selvagem (wildtype - wt) do HPV carreado por cápsulas de levedura Pichia pastoris. O oncogene foi obtido a partir do genoma do HPV16, clonado no vetor pBR322, utilizando PCR convencional. Em seguida esse gene foi digerido e ligado ao vetor de expressão pVAX1 formando o clone pVAX-E5wt que foi confirmado por digestão enzimática e sequenciamento. Posteriormente, para obtenção das cápsulas, leveduras da espécie P. pastoris passaram por tratamentos para remoção dos componentes intracelulares, fornecendo uma estrutura capsular a qual a vacina de DNA construída foi inserida. Para visualização da incorporação da vacina, o DNA foi marcado para visualização através de microscopia de fluorescência. Os amplicons de E5wt foram obtidos, purificados e ligados ao vetor de expressão pVAX1 formando os clones pVAX-E5wt que foram inseridos nas cápsulas de levedura. A microscopia de fluorescência confirmou a internalização de pVAX-E5wt ao comparar com o controle, cápsula vazia, através da marcação do DNA por 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). Assim, foi o obtida uma vacina terapêutica de DNA com um oncogene associado a lesões pré-cancerosas, E5 wt, carreada por cápsula de levedura que é considerada um vetor com propriedades adjuvantes naturais viabilizando a apresentação às células TCD8+ de resposta antitumoral. Diante da estratégia vacinal obtida posteriormente será avaliado in vitro e in vivo o seu potencial de estímulo à citotoxicidade e redução da progressão tumoral.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - FERNANDA CRISTINA BEZERRA LEITE - UFRPE
Externa à Instituição - ISABELLE FREIRE TABOSA VIANA - Fiocruz - PE
Presidente - 1721037 - JACINTO DA COSTA SILVA NETO