DESENVOLVIMENTO DE UM MODELO CELULAR DE COINFECÇÃO ENTRE Mycobacterium tuberculosis E SARS-COV-2 PARA AVALIAÇÃO DAS VIAS DE ATIVAÇÃO GÊNICA NA RESPOSTA IMUNE
Mycobacterium tuberculosis; SARS-CoV-2; coinfecção; modelos celulares; resposta imune; protocolos experimentais.
A tuberculose (TB), causada por Mycobacterium tuberculosis (Mtb), e a COVID-19, causada pelo SARS-CoV-2, representam importantes desafios para a saúde pública mundial. A sobreposição dessas doenças evidenciou que a coinfecção está associada ao agravamento do quadro clínico, maior risco de mortalidade e alterações na resposta imune do hospedeiro. Entretanto, os mecanismos responsáveis por essa interação permanecem pouco elucidados, principalmente em decorrência da escassez de modelos experimentais capazes de reproduzir, de forma padronizada, o microambiente pulmonar e as complexas interações entre esses patógenos. Nesse contexto, esta tese teve como objetivo desenvolver um modelo celular para o estudo da coinfecção entre Mtb e SARS-CoV-2. Inicialmente, são discutidos os principais mecanismos biológicos e imunológicos envolvidos na infecção por ambos os patógenos, bem como as potencialidades e limitações dos modelos celulares empregados na investigação da coinfecção, evidenciando a necessidade de estratégias experimentais mais representativas. Com base nessas lacunas, foi estabelecido um protocolo padronizado para a coinfecção de células epiteliais alveolares humanas (linhagem celular A549), contemplando procedimentos de cultivo celular, preparo dos inóculos, infecção, quantificação da carga bacteriana e viral e análises moleculares. A aplicação desse modelo permitiu caracterizar aspectos da resposta do hospedeiro durante a coinfecção, por meio da avaliação da expressão gênica e produção de citocinas inflamatórias envolvidas na imunidade inata. Em conjunto, os resultados obtidos demonstram a viabilidade e a reprodutibilidade do modelo experimental proposto, ampliando o conhecimento sobre os mecanismos imunológicos envolvidos na interação entre Mtb e SARS-CoV-2 e disponibilizando um modelo eficiente capaz de subsidiar futuras investigações sobre imunopatogênese de infecções respiratórias.