DESENVOLVIMENTO DE GENOSSENSORES BASEADOS EM PLATAFORMAS POLIMÉRICAS NANOESTRUTURADAS PARA O DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS NEGLIGENCIADAS
Genossensor; Eletroquímica; Diagnóstico; Schistosoma mansoni.
As doenças tropicais negligenciadas representam importante problema de saúde pública, onde o diagnóstico precoce ainda enfrenta limitações relacionadas à sensibilidade, especificidade e infraestrutura laboratorial. Nesse contexto, os genossensores eletroquímicos surgem como alternativa promissora para o diagnóstico baseado na detecção de DNA. Dessa forma o presente trabalho tem como objetivo desenvolver e avaliar genossensores eletroquímicos baseados em plataformas poliméricas nanoestruturadas para o diagnóstico de doenças negligenciadas. Foram desenvolvidas duas plataformas sensoras; uma em eletrodo convencional de ouro (PPy-AuNUs-Cys_Sonda_BSA) e outra em eletrodo flexível de óxido de índio dopado com estanho (ITO) (Au_PTAA_PAMAM_Sonda_BSA). As plataformas foram caracterizadas por microscopia de força atômica (AFM) e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). As propriedades eletroquímicas foram investigadas por voltametria cíclica (VC) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE). Para a plataforma PPy-AuNUs-Cys_Sonda_BSA, a detecção do DNA genômico de Schistosoma mansoni, foi obtida faixa linear de 0,05 a 500 pg mL⁻¹, com limite de detecção (LOD) de 1,58 pg mL⁻¹ e limite de quantificação (LOQ) de 4,06 pg mL⁻¹ (R² = 0,99). Observou-se grau de recobrimento superficial de 61%, indicando formação eficiente da camada biológica. Foram realizados testes em amostras de urina, plasma e líquido cefalorraquidiano (LCR), bem como ensaios de seletividade frente a interferentes e controle negativo, onde demonstraram um bom desempenho para aplicação diagnóstica. Os eletrodos flexíveis baseados em ITO foram avaliados após exposição a diferentes concentrações de DNA alvo (0,0065 a 65 pg·μL⁻¹) e a amostras de urina (10 fg·μL⁻¹; 1 pg·μL⁻¹; 10 pg·μL⁻¹; 100 pg·μL⁻¹; 1 ng·μL⁻¹). Estudos adicionais envolvendo a detecção de Trypanosoma cruzi serão realizados em etapa subsequente do trabalho.