Banca de DEFESA: WENNY CAMILLA DOS SANTOS ADAN

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: WENNY CAMILLA DOS SANTOS ADAN
DATA : 16/05/2024
HORA: 13:00
LOCAL: Defesa remota
TÍTULO:

Produção e Caracterização de Proteínas Recombinantes Engenheiradas Computacionalmente
Contra Epítopos Virais


PALAVRAS-CHAVES:

Nanocorpo. VHH. SARS-CoV-2. ZIKV. DENV. Engenharia de proteínas.


PÁGINAS: 101
RESUMO:
Apenas no século XXI, ocorreram mais de dez grandes surtos virais, incluindo a
epidemia de arbovírus no Brasil (2015) e a pandemia de COVID-19, destacando a ne
cessidade de abordagens proativas para o desenvolvimento de moléculas com potencial
farmacêutico e biotecnológico. O presente trabalho é dedicado à validação experimental
de proteínas artificias engenheiradas computacionalmente contra epítopos na superfície
dos vírus SARSCoV-2 e zika. Atualmente, o processo de obtenção anticorpos é majori
tariamente dependente do uso de animais ou bibliotecas sintéticas. O uso de engenharia
computacional de proteínas têm sido bem sucedido em combinação com maturação de afi
nidade in vitro. Demonstramos na prática que a engenharia computacional de proteínas
foi capaz de projetar um nanocorpo artificial com especificidade por um epítopo específico.
O Nb-Ab.2 demonstrou capacidade de se ligar tanto ao RBD recombinante quanto à sua
proteína spike na superfície de VLPs de SARS-CoV-2, exibindo constantes de afinidade
na faixa de nanomolar (𝐾𝐷 de 9 nM e 𝐾𝐷𝑎𝑝𝑝 de 60 nM, respectivamente. O maior obstá-
culo enfrentado na caracterização desse Nb quimérico, foi a sua tendência à dimerização,
sugerindo que as CDRs engenheiradas diminuíram a sua estabilidade. Contornamos esse
problema através da inserção de umlinker de (G4S)3 entre os monômeros. Em adição,
essa abordagem abriu o caminho para a construção de Nbs com afinidade aprimorada por
avidez (bivalentes) ou com capacidade de reconhecer epítopos distintos (biespecíficos). No
capítulo 2 uma proteína artificial engenheirada contra a alça de fusão da proteína de
envelope do vírus zika foi produzida e caracterizada. A ZVPA3 foi capaz de neutralizar
in vitro o ZIKV (𝐸𝐶50 de 3,65 𝜇M), demonstrando também reatividade cruzada ao neu
tralizar DENV-I e DENV-II (𝐸𝐶50 de 0,87𝜇M e 0,98𝜇M, respectivamente). Os resultados
obtidos demonstram que a ZVPA3 é uma candidata em potencial para o desenvolvimento
de estratégias terapêutica ou profiláticas contra flavivírus. Esses resultados contribuem
com informações importantes para o processo de desenvolvimento computacional de pro
teínas artificiais contra alvos específicos.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - MARCELO HENRIQUE SANTOS PAIVA
Externa à Instituição - MARGARIDA FRAZÃO ARCHER
Externo à Instituição - NILSON IVO TONIN ZANCHIN
Presidente - 1208272 - ROBERTO DIAS LINS NETO
Interno - 1354207 - SEVERINO ALVES JUNIOR
Notícia cadastrada em: 08/05/2024 15:56
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