Banca de DEFESA: EMANUELA PAZ ROSAS

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : EMANUELA PAZ ROSAS
DATA : 30/09/2021
HORA: 14:00
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO:

ASPECTOS MORFOFISIOLÓGICOS DE MASTÓCITOS NA DURA-MÁTER HUMANA: LIBERAÇÃO IN VITRO DE CGRP E ÓXIDO NÍTRICO SOB AÇÃO DO TOPIRAMATO

PALAVRAS-CHAVES:

Meninge; Mastócitos; Topiramato; Óxido nítrico; CGRP.

PÁGINAS: 100
RESUMO:

A dura-máter intracraniana humana é a meninge mais externa que recobre o cérebro e possui vasos sanguíneos, mastócitos e fibras nervosas que exercem um papel importante em processos neuroinflamatórios, como a migrânea. O topiramato é um medicamento profilático da migrânea, contudo sua ação na dura-máter, ainda é incerta. Neste contexto, objetivou-se avaliar os aspectos morfofisiológicos de mastócitos na dura-máter humana e a liberação in vitro de óxido nítrico (NO), de peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) e a degranulação de mastócitos sob ação do topiramato. Em uma primeira análise foram coletadas oito amostras de dura-máter intracraniana de cadáveres humanos. As amostras inteiras foram fixadas, e dois fragmentos de 1,5 cm² cada, foram cortados de quatro distintas áreas da convexidade da dura-máter, totalizando 64 fragmentos. Foram avaliados os parâmetros histomorfométricos: distância dos mastócitos aos vasos, densidade de mastócitos e porcentagem de mastócitos degranulados. Em outra análise, os espécimes de dura-máter obtida de cadáveres (n=4) foram lavadas com fluido intersticial sintético (SIF) a 25º C por 30 minutos. Posteriormente, foram divididas em fragmentos (n=7) que foram incubados por 15 minutos com SIF e em seguida por 30 minutos na presença ou não do topiramato em diferentes concentrações: 10-6 M, 10-8 M e 10-10 M. Após o tratamento, o meio de incubação foi trocado por uma solução de cloreto de potássio (KCl) a 60 mM por 30 minutos. O teor de CGRP e NO liberado foi quantificado pelo método de ELISA e Reação de Griess, respectivamente. Os fragmentos de dura-máter das duas análises foram transferidos para o formol tamponado a 10% e em seguida foi feito o processamento histológico. A degranulação dos mastócitos foi examinada por microscopia óptica. A primeira análise demonstrou um maior número de mastócitos próximos de vasos venosos foi encontrado na camada periosteal (17,01 ± 10,13) do que na camada meníngea (14,10 ± 6,95). Os mastócitos próximos ao seio sagital superior se apresentaram em maior quantidade juntos aos vasos venosos (16,71 ± 10,05) do que aos vasos arteriais (11,18 ± 7,52). A segunda análise mostrou que o tratamento com topiramato nas concentrações de 10-10M apresentou uma menor porcentagem de mastócitos degranulados por mm² (75,39% ± 0,27) quando comparado com controle positivo (KCl 60 mM) (100%). Desta forma, este estudo evidenciou que os mastócitos estão localizados próximos aos vasos venosos da camada periosteal e na região proximal do seio sagital superior. Além disso, sugere-se que o topiramato em uma menor concentração (10-10M) apresenta um efeito protetivo sobre a degranulação dos mastócitos.

MEMBROS DA BANCA:
Externa ao Programa - 2779450 - DANIELLA ARAUJO DE OLIVEIRA
Externa ao Programa - 1130527 - IVONE ANTONIA DE SOUZA
Presidente - 1132496 - MARCELO MORAES VALENCA
Externa ao Programa - 1210701 - PALOMA LYS DE MEDEIROS
Externa ao Programa - 3346571 - WYLLA TATIANA FERREIRA E SILVA