Banca de DEFESA: ALCIDES JAIRON LACERDA CINTRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ALCIDES JAIRON LACERDA CINTRA
DATA : 29/07/2021
HORA: 09:00
LOCAL: Plataforma google meet
TÍTULO:

 

Purificação de lectina de folhas de Bowdichia virgilioides, interação molecular e avaliação fitoquímica e biológica do extrato salino

PALAVRAS-CHAVES:

Bowdichia virgilioides. Lectina. Purificação. Interação Molecular. Extrato. Fitoquímica. Atividades Biológicas

PÁGINAS: 75
RESUMO:

As plantas são fontes naturais de muitas moléculas biologicamente ativas, como lectinas, que são proteínas ou glicoproteína capazes de reconhecer e se ligar a carboidratos ou glicoconjugados de maneira específica e reversível. E também é fonte de muitos outros metabólitos com alto potencial biotecnológico. Nesse sentido, o objetivo dessa tese foi purificar lectina de folhas de B. virgiliodes, analisar sua interação molecular, e avaliar seu extrato salino, quanto a composição química e atividades biológicas. Para purificação da lectina foi preparado extrato salino das folhas a 10% p/v NaCl 0,15 M (16 h em agitação, a 25°C), em seguida foi centrifugado, filtrado, e o sobrenadante foi dialisado e liofilizado (extrato salino). Posteriormente esse produto foi ressuspendido em água destilada e purificado em duas etapas de cromatografia de gel filtração, para obtenção da lectina. Após a purificação, foi realizado AH, inibição da AH por proteínas e carboidratos, e avaliação da interação lectina-proteína por espectroscopia UV-Vis, fluorescência e RMN, além de ensaio antioxidante, hemolítico e toxicidade em Allium cepa e Lactuca sativa. Com o extrato salino foi analisado a composição química por LC-MS e avaliado sua ação: antioxidante, antibacteriana, antifúngica, antibiofilme, citotóxica, hemolítica, anti-hemolítica, proteção solar, larvicida e proteolítica. Por fim, foi quantificado fenóis, proteínas, carboidratos (totais e redutores) e ácido hexurônico. Os resultados apresentam a purificação de lectina de folhas de B. virgilioides, BovLL. A qual apresentou interação com proteínas e carboidratos, em todas as técnicas testadas. No ensaio antioxidante, BovLL apresentou capacidade significativa de absorção do radical DPPH e essa capacidade foi intensificada após interação com carboidratos. Finalmente a lectina não apresentou toxicidade até 250 µg / mL. Nos ensaios com o extrato, foram identificados seis compostos majoritários e suas respectivas massas. O mesmo apresentou atividade antioxidante por DPPH, ABTS e FRAP. Atividade antibacteriana para Gram-positivas, S. pyogenes, S. aureus e E. faecalis (CMI e CMB: 250 e 500; 500 e 1000; e 1000 e 2000 µg / mL, respectivamente). Citotoxicidade em células cancerígenas (HT-29) a 125 µg / mL e não para células normais (L929) até 500 µg / mL. Não apresentou toxicidade em larvas de A. salina e A. aegypti até 250 µg / mL e 1000 µg / mL, respectivamente. Não foi hemolítico até 2000 µg / mL, e foi anti-hemolítico até 1,95 µg / mL. O espectro de absorção revelou pico máximo em 280 nm (UVB) e FPS de 25,24 a 2000 µg / mL. Também apresentou 80% (U / mg) de atividade proteolítica. Finalmente foi quantificado o conteúdo de proteínas, açúcares (totais e redutores), ácido hexurônico, e fenóis, respectivamente: 10 mg / mL, 62,85%, 17,0%, 19,18%, e 235,759 mg GAE / g (em 2000 µg / mL).Portanto, foi purificada a primeira lectina de folhas de B. virgilioides (BovLL), com interações e biologia estudadas. E também foi obtido o extrato salino, com seis compostos químicos identificados e diferentes atividades biológicas testadas.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1134040 - MARIA TEREZA DOS SANTOS CORREIA
Interno - 1960817 - THIAGO HENRIQUE NAPOLEAO
Interna - 1169175 - LUANA CASSANDRA BREITENBACH BARROSO COELHO
Externa à Instituição - THAMARA FIGUEIREDO PROCOPIO VASCONCELOS - UFPE
Externo à Instituição - LUIS CLAUDIO NASCIMENTO DA SILVA