Banca de DEFESA: GESSICA GOMES BARBOSA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: GESSICA GOMES BARBOSA
DATA : 29/03/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Anfiteatro do PPGCB
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA E BIOATIVIDADES DE SECREÇÕES CUTÂNEAS DE ANFÍBIOS (Rhinella crucifer e Lithobates palmipes) DE MATA ATLÂNTICA

PALAVRAS-CHAVES:

Anura. Bioatividade. Caracterização. Glândulas cutâneas. Glândula paratoide.

PÁGINAS: 109
RESUMO:

Anfíbios apresentam uma maior vulnerabilidade a infecções por microorganismos como consequência da sua pele muito permeável. Em vista disso, esse tegumento desenvolveu mecanismos de defesa antimicrobiana, incluindo um arsenal de substâncias produzidas por glândulas cutâneas. Esse trabalho objetivou realizar a caracterização bioquímica e avaliar bioatividades da secreção das glândulas cutâneas de duas espécies de anuros da Mata Atlântica, Rhinella crucifer e Lithobates palmipes. Coleta dos espécimes foram feitas na cidade de Gravatá (PE), Brasil. A extração da secreção se deu por eletroestimulação para as glândulas do corpo (para R. crucifer e L. palmipes) e compressão manual para nas glândulas paratoides presentes em R. crucifer. Ainda, R. crucifer foi avaliado quanto a sua morfologia glandular.  Asecreção cutânea das glândulas do corpo e as glândulas paratoides de R. crucifer foram analisadas por SDS-PAGE, RP-HPLC e espectrometria de massas, sendo feita comparação entre machos e fêmeas e indivíduos coletados em áreas com diferentes graus de perturbação antrópica. Foi também avaliada presença de tripsina, lectina, inibidores de tripsina, atividade hemolítica e efeitos sobre a cascata de coagulação existentes. Já para L. palmipes, as secreções cutâneas foram submetidas a RP-HPLC e peptídeos foram purificados e avaliados quanto às suas massas moleculares (MALDI-TOF). As frações foram avaliadas contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativa. Quand possível, a estrutura primária por determinada por degradação de Edman e a ferramenta BLAST foi empregada para avaliar similaridades com outros peptídeos de anfíbios. Os dados para R. crucifer mostraram que as secreções de glândulas do corpo e paratoides apresentaram concentração proteica com diferença significativa entre as áreas perturbadas e não perturbadas. O perfil eletroforético mostrou a presença de oito bandas proteicas na amostra das glândulas paratoides e seis bandas para a amostra das glândulas do corpo. Até o momento foram identificadas duas proteínas: uma catalase similar a encontrada em Glandirana rugosa e uma proteína ribossomal (fator de alongamento 1-alfa) similar a identificada em Xenopus laevis. Foi encontrada diferença entre na intensidade das bandas e picos entre machos e fêmeas e entre as diferentes localidades estudadas. As secreções de R. crucifer  não apresentaram atividade proteolítica para tripsina, atividade hemaglutinante ou atividade inibidora de tripsina. Ainda, apresentaram baixa atividade hemolítica, sendo maior grau de hemólise detectado de apenas 1,4%. Por outro lado, foi identificado efeito da secreção das glândulas do corpo sobre a cascata de coagulação sanguínea. As secreções de glândulas do corpo e paratoides foram capazes de inibir o crescimento de cepas de Enterococcus faecalis e Escherichia coli, com uma CMI de 0,2 mg/mL e 0,95 mg/mL, respectivamente. No entanto, não foi observado nenhum tipo de atividade contra os fungos testados. Para a secreção de L. palmipes, foram obtidas diversas frações cromatográficas, sendo 11 frações submetidas ao ensaio de atividade antimicrobiana, tendo se encontrado alta atividade nas frações 1 a 9; na fração 5 foi identificado um peptídeo antimicrobiana do grupo das temporinas. As outras duas frações avaliadas corresponderam a dois inibidores de proteases do tipo Bowman-Birk, apresentando entre eles diferença em apenas 1 aminoácido (posição nove da sequência), porém um deles sem e outro com moderada atividade antimicrobiana. Em conclusão, secreções de glândulas cutâneas de R. crucifer e L. palmipes coletados em Mata Atlântica são fontes de compostos bioativos de interesse biomédico, resultados que reforçam a importância da conservação dessas espécies e a utilidade de seus arsenais bioquímicos para a melhoria da qualidade de vida humana.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1960817 - THIAGO HENRIQUE NAPOLEAO
Interno - ***.833.854-** - EMMANUEL VIANA PONTUAL - UFPE
Interna - 1133984 - PATRICIA MARIA GUEDES PAIVA
Externa à Instituição - ANA PATRÍCIA SILVA DE OLIVEIRA
Externa à Instituição - POLLYANNA MICHELLE DA SILVA