Banca de DEFESA: WILSON DIAS DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : WILSON DIAS DE OLIVEIRA
DATA : 25/02/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO:

Avaliação da atividade antimicrobiana e citogenotóxica de análogos de Taumatinas-like de Feijão-Caupi [Vigna unguiculata (L.) WALP.]

PALAVRAS-CHAVES:

Antimicrobianos, bioinformática, citotóxico, micronúcleo, toxicidade. 

PÁGINAS: 80
RESUMO:

O uso desordenado de antibióticos tem aumentado e vem se tornando, nos últimos anos, um grande problema de acordo com a Organização Mundial da Saúde, gerando microrganismos resistentes aos medicamentos tradicionais. Em contrapartida a este problema de saúde pública, novos antibióticos com diferentes vias de ação têm sido pesquisados. Muitos destes antimicrobianos têm sido descobertos a partir da primeira linha de defesa de vegetais, onde os peptídeos antimicrobianos destacam-se como agentes promissores. Portanto, o objetivo do presente estudo foi desenvolver e avaliar pelo menos um peptídeo vegetal bioinspirado em thaumatin-like (TLPs) identificadas no feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] fornecendo conhecimentos sobre suas principais características funcionais e toxicidade. No intuito de encontrar novos compostos com atividade antimicrobiana, foram utilizadas como template sequências de TLP obtidas do transcriptoma do feijão caupi. A predição da atividade antimicrobiana e a identificação dessas regiões com atividade foi realizada no servidor CAMPr3 e a toxicidade, no Toxipred. O desenho racional do peptídeo foi conduzido com objetivo de manter a atividade antimicrobiana predita e minimizar a toxicidade dessa molécula. A modelagem tridimensional foi realizada por threading e a estabilidade do modelo foi avaliado pela simulação em dinâmica molecular (DM) pelo pacote GROMACS 2019.4. A síntese do peptídeo foi realizada comercialmente. Por fim, foram realizadas as análises da atividade antimicrobiana contra cepas bacterianas (Staphylococcus aureus ATCC-25923, Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853, Klebsiella pneumoniae ATCC-13883 e Acinetobacter baumannii ATCC-19606) e o potencial citotóxico e genotóxico foram avaliados através do ensaio de MTT (Brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2, 5- difeniltetrazólio) e teste do micronúcleo, utilizando cultura de células de fibroblastos de camundongo (células L929). Os resultados revelaram que o Peptídeo PVu_LTP_Seq1 apresentou potencial de 90% nas predições de atividade antimicrobiana e não apresentou toxicidade e alergenicidade predita, além disso, mostrou-se estável nas análises de desvio da raiz média quadrática (RMSD) e flutuação da raiz quadrática média (RMSF). O peptídeo desenvolvido conseguiu inibir o crescimento bacteriano das quatro cepas testadas, exibindo MIC (Concentração inibitória mínima) de 256 µg/mL (Staphylococcus aureus ATCC-25923), 256 µg/mL (Pseudomonas aeruginosa ATCC-27853), 128 µg/mL (Klebsiella pneumoniae ATCC-13883) e 32 µg/mL (Acinetobacter baumannii ATCC-19606).  PVu_LTP_Seq1 não apresentou danos a linhagem celular nos ensaios citotóxicos e genotóxicos realizados. Dessa forma, o presente trabalho desenvolveu um peptídeo com potencial antimicrobiano e livre de toxicidade nas concentrações e linhagem celular testada, fornecendo informações sobre suas principais características funcionais, ainda podendo ser aproveitado para o uso em terapias alternativas de interesse à saúde humana. 

 

 

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 1293690 - ANA CHRISTINA BRASILEIRO VIDAL
Interna - 1134670 - ANA MARIA BENKO ISEPPON
Externo à Instituição - CARLOS ANDRÉ DOS SANTOS SILVA