Banca de QUALIFICAÇÃO: JAINALDO ALVES DA COSTA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JAINALDO ALVES DA COSTA
DATA : 29/09/2021
LOCAL: videoconferência
TÍTULO:

ATIVIDADES BIOLÓGICAS DE PREPARAÇÕES PROTEICAS DE FOLHAS DE Euphorbia hirta L.

PALAVRAS-CHAVES:

Palavras-chave: Euphorbia hirta. Fitoquimico. Lectina. Antimicrobiano. Candida. Toxicidade.

PÁGINAS: 80
RESUMO:

Euphorbia hirta pertencente à família Euphorbiaceae, sendo utilizada para o tratamento de doenças respiratórias, gastrointestinais, inflamatórias e bacterianas. Este trabalho investigou a composição fitoquímica, as atividades antioxidante e a toxicidade in vivo de extrato salino de folhas e também isolou a lectina EhLL (do inglês E. hirtaleaf lectin). As folhas (10 g) foram adicionadas a solução salina tamponada de PBS 0,1 M contendo NaCl 0,15 M pH 7,5 em 28 °C a 4 h, a mistura foi filtrada, centrifugada obtida o extrato bruto e liofilizada. A caracterização fitoquímica foi feita por cromatografia de camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A atividade antioxidante foi avaliada pelos testes do DPPH e ABTS (31,25 - 1.000 µg/mL) e os resultados representados pela concentração de antioxidante que inibiu 50% dos radicais (IC50). O ensaio de toxicidade aguda usou camundongos albinos Swiss fêmeas administrados oralmente com dose única da infusão a 2000 mg/kg com posterior análise nas primeiras duas horas e durante 14 dias. Os animais foram avaliados quanto ao peso corporal, consumo de água e ração, parâmetros bioquímicos e hematológicos e histologia do fígado, baço e rins, coração e pulmão. A genotoxicidade e a mutagenicidade in vivo da infusão (2000 mg/kg) foi analisada através do ensaio cometa e teste do micronúcleo, respectivamente. A CCD detectou flavonoides, terpenos e esteroides, cumarinas e saponinas e a CLAE detectou ácido gálico e elágico. Foram obtidos valores de 107,3±0,7 µg EAT/mg para fenois totais, 22,9±0,4 µg ER/mg para flavonoides e. Atividade antioxidante (CI50 490,8±0.2 µg/mL e 569,6±0,5 µg/mL, nos testes do DPPH e ABTS, respectivamente). A dosagem apresentou alteração no peso ou o consumo de água e ração, bem como os parâmetros bioquímicos, hematológicos e histológicos nos animais tratados de modo satisfatório. Genotoxicidade e mutagenicidade não foram detectadas na dose de 2000 mg/kg. O extrato foi submetido a precipitação de proteínas utilizando sulfato de amônio 20-40% de saturação e cromatografia da fração precipitada (FP20-40%) em coluna de quitina. A atividade hemaglutinante (AH) foi monitorada ao longo do processo de purificação utilizando eritrócitos de coelho. O perfil eletroforético em condições desnaturantes e em condições nativas foi avaliado em gel de poliacrilamida contendo sulfato sódico de dodecila (SDS-PAGE). Os efeitos do pH, temperatura e íons sobre a AH foram determinados e o efeito de pH e temperatura na conformação. A atividade antimicrobiana contra fungos foi avaliada através da determinação da concentração mínima inibitória (CMI), mínima bactericida (CMB) e mínima fungicida (CMF). O extrato e FP20-40% apresentaram AH específica de 10,5 e 61,1, respectivamente. EhLL adsorveu na coluna de quitina e foi eluida com ácido acético 1,0 M com AH específica de 98,76. EhLL apresentou massa nativa de 90 kDa, sua AH foi detectada em valores de pH de 3,0 a 8,0, foi resistente ao aquecimento até 100°C durante 30 min e não foi estimulada pelos íons divalentes Mg2+, Mn2+ e Ca2+ a 20 mM. EhLL foi agente mostrou atividade antifúngica contra espécies de Candida com CMI e CMF de 3,125 µg/mL. O estudo revela que E. hirta é fonte de compostos fenólicos e agentes antioxidantes e possui EhLL, uma lectina ligadora de quitina, termoestável, ativa em ampla faixa de pH e com ação antibacteriana e antifúngica.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - POLLYANNA MICHELLE DA SILVA
Externo ao Programa - 1715306 - ROBERTO ARAUJO SA
Presidente - 1960817 - THIAGO HENRIQUE NAPOLEAO