Banca de DEFESA: MARIA ISABELA DE ANDRADE PEREIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : MARIA ISABELA DE ANDRADE PEREIRA
DATA : 17/09/2021
HORA: 08:30
LOCAL: Plataforma Google Meet
TÍTULO:

DESENVOLVIMENTO DE NANOSSONDAS BIFUNCIONAIS BASEADAS EM PONTOS QUÂNTICOS PARA APLICAÇÕES NO ESTUDO DA BIOLOGIA DO CÂNCER

PALAVRAS-CHAVES:

fluorescência; ressonância magnética; D-glicosamina; quelato de gadolínio; células.

PÁGINAS: 170
RESUMO:

O câncer é uma doença multifatorial, por essa razão há uma busca contínua por tecnologias capazes de contribuir para uma compreensão mais aprofundada dos mecanismos biológicos envolvidos em cada fase dessa doença e, consequentemente, diagnosticá-la e tratá-la de forma aprimorada. As singulares propriedades ópticas dos pontos quânticos (PQs) os tornam valiosas ferramentas para o estudo das interações biológicas associadas à carcinogênese, especialmente se combinados com moléculas aptas a conferir novas funcionalidades e especificidades a esses nanocristais fluorescentes. Assim, dentro desse contexto, esta tese teve como objetivo geral o desenvolvimento de nanossondas bifuncionais constituídas por PQs e quelatos de Gd(III), bem como PQs e D-glicosamina (D-GN), para aplicações no estudo da biologia do câncer. Os quelatos de Gd(III) quando conjugados aos PQs, originam nanossondas óptico-magnéticas que aliam vantagens das técnicas baseadas em fluorescência com as da imagem por ressonância magnética (IRM), favorecendo estudos mais amplos e complementares de processos biológicos. Já a associação de PQs à derivados de glicose, como a D-GN, gera gliconanopartículas hábeis à investigação da captação desse carboidrato em nível celular, o que é de particular interesse para diagnóstico e terapia devido ao metabolismo glicolítico alterado desse carboidrato por células de câncer. Assim, para desenvolver a nanossonda óptico-magnética, inicialmente preparou-se quelatos de DOTA-Gd(III) carboxilados, os quais incorporaram eficientemente o íon paramagnético (97%) e apresentaram estabilidade quanto à transmetalação na presença do íon endógeno, Zn(II). Os quelatos de DOTA-Gd(III) foram conjugados covalentemente aos PQs carboxilados via etilenodiamina. Os nanossistemas apresentaram alta fluorescência, e as técnicas de espectroscopias de correlação por fluorescência (FCS) e de emissão óptica com plasma indutivamente acoplado (ICP-OES) confirmaram a conjugação, com rendimento de ca. 75%. Ademais, a nanossonda apresentou elevada relaxividade, ca. 5× [por Gd(III)] e 100× [por PQ] superior a do quelato DOTA-Gd(III) molecular. As gliconanopartículas, altamente fluorescentes, foram preparadas através da conjugação covalente dos PQs à D-GN, a qual foi confirmada por FCS e por uma nova metodologia prática, rápida, reproduzível e quantitativa, também desenvolvida nesse trabalho, baseada na afinidade da glicose pela Concanavalina A, imobilizada em leveduras de Candida albicans. Por essa metodologia proposta, cerca de 98% das leveduras foram marcadas pelo conjugado PQs-D-GN, reduzindo para 34% ao inibir os sítios da lectina com manopiranosídeo, confirmando a especificidade da interação biológica. Ambas nanossondas foram avaliadas com células HeLa (adenocarcinoma cervical). Os resultados indicaram que os conjugados PQs-DOTA-Gd(III) marcaram eficientemente as células por microscopia de fluorescência, produziram imagem com contraste brilhante na IRM e não induziram citotoxicidade significativa. Os conjugados PQs-D-GN foram captados eficientemente (96,6%) por células HeLa, apresentando um padrão de marcação vesicular intracelular com áreas densamente marcadas próximas ao núcleo. Assim, as nanossondas bifuncionais desenvolvidas apresentaram-se como potenciais e estratégicas ferramentas para aplicação em uma variedade de estudos relacionados à biologia do câncer.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1542785 - ADRIANA FONTES
Externa à Instituição - CASSIA REGINA ALBUQUERQUE DA CUNHA - OUTRA
Externa ao Programa - 3884967 - DIJANAH COTA MACHADO
Interna - 1169175 - LUANA CASSANDRA BREITENBACH BARROSO COELHO
Interno - 2364049 - PAULO EUZEBIO CABRAL FILHO