Banca de DEFESA: JESSIKA FERNANDA FERREIRA RIBEIRO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JESSIKA FERNANDA FERREIRA RIBEIRO
DATA : 20/08/2021
HORA: 08:30
LOCAL: Plataforma Google Meet
TÍTULO:

PLATAFORMAS IMUNOSSENSORAS ÓPTICAS E ELETROQUÍMICAS BASEADAS EM PONTOS QUÂNTICOS - APLICAÇÕES PARA A ZIKA

PALAVRAS-CHAVES:

Biossensores, Nanopartículas semicondutoras, Eletroquímica, Fluorescência, Arboviroses, Zika Vírus.

PÁGINAS: 147
RESUMO:

A Zika é uma arbovirose transmitida pelo mosquito Aedes aegypti, e foi declarada emergência de saúde pública global devido a sua alta capacidade de disseminação e tendência em deixar sequelas, como a microcefalia em recém-nascidos e a síndrome de Guillain-Barré em adultos. Por esses motivos, a detecção de biomarcadores do vírus ou anticorpos responsíveis à infecção é relevante para a tomada de decisões e implementação de medidas que visam o controle da doença, especialmente para gestantes, pois ainda não há vacina disponível. Os métodos de detecção disponíveis, no entanto, são ainda laboriosos e/ou tem sensibilidade insuficiente, por exemplo. Por isso, o desenvolvimento de metodologias novas e complementares se faz importante, e nesse contexto, tem crescido o interesse na utilização de nanopartículas. Dentre essas, os nanocristais fluorescentes de semicondutores, chamados de pontos quânticos (PQs), têm se destacado por exibir vantajosas propriedades físico-químicas, que podem ser exploradas tanto em plataformas sensoras ópticas como eletroquímicas, tais como alta fotoestabilidade, superfície ativa para conjugação e estrutura isotrópica. Assim, o objetivo desta tese visou o desenvolvimento de plataformas imunossensoras ópticas e eletroquímicas baseadas em PQs, e sua aplicação na detecção de anticorpos e proteínas virais da Zika. Para a plataforma óptica foram desenvolvidos conjugados de PQs ligados covalentemente à anticorpos secundários (anti-IgG) que foram aplicados na detecção de anticorpos IgG associados à proteína do envelope viral (PE) do Zika vírus (anti-PE-ZIKV). Para tanto, o fluoroimunoensaio foi primeiramente otimizado utilizando a detecção de IgG humano. A avaliação da eficiência da conjugação e os ensaios de detecção foram realizados por ensaio fluorescente em microplaca. Os conjugados foram preparados com sucesso e permaneceram funcionais por pelo menos quatro meses. Ademais, a associação dos conjugados com a PE-ZIKV levou a resultados promissores na detecção dos anticorpos anti-PE-ZIKV, em uma concentração pelo menos 100x menor que a esperada para a resposta imune. Já para montagem eletroquímica, inicialmente foi realizado um estudo sistemático para investigar o papel dos PQs nessas plataformas, que foram constituídas por eletrodos convencionais de carbono vítreo (ECV) modificados com polipirrol aminado (PPyam). Para tanto, as moléculas IgG e anti-IgG foram utilizadas como modelos. O estudo revelou que, somente quando os PQs foram imobilizados covalentemente na superfície, houve um aumento da área funcional do eletrodo, melhorando a imobilização de IgG e proporcionando uma efetiva detecção. Esse resultado enfatizou a importância dessa nanopartícula para desenvolvimento de plataformas eletroquímicas mais sensíveis. Por fim, foi realizada a transposição da plataforma anterior para um sistema baseado em eletrodos impressos de carbono (EIc)/PPyam e PQs, para imobilização de anti-PE-ZIKV e detecção de PE-ZIKV. A especificidade da plataforma foi avaliada utilizando-se PE-DENV III. Os resultados indicaram que a plataforma foi capaz de detectar a PE de forma sensível e específica (< 10 pM). Portanto, pode-se concluir que os PQs se apresentam como efetivas nanoferramentas para confeccionar plataformas imunossensoras ópticas e eletroquímicas para detecção de anticorpos e proteínas virais da Zika, com potencial de aplicação para outras arboviroses.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1542785 - ADRIANA FONTES
Externa à Instituição - CARINNA NUNES DE LIMA - UFPE
Externa à Instituição - CLAUDILENE RIBEIRO CHAVES - UFU
Interna - 3649895 - MARIA DANIELLY LIMA DE OLIVEIRA
Interno - 2364049 - PAULO EUZEBIO CABRAL FILHO