Banca de DEFESA: JOSE NOE DA SILVA JUNIOR

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOSE NOE DA SILVA JUNIOR
DATA : 27/07/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Sala de aula do iLIKA
TÍTULO:

Atividade tripanocida e imunomoduladora de proteínas obtidas de microrganismos fotossintetizantes

PALAVRAS-CHAVES:

microalgas, compostos bioativos, atividade anti-T.cruzi, modulação imunológica.

PÁGINAS: 70
RESUMO:

A doença de Chagas (DC), causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é uma enfermidade negligenciada que pode ser transmitida a seres humanos principalmente pela ação vetorial. No curso da infecção, o sistema imune desempenha um papel essencial no controle da infecção, mediante o recrutamento de células fagocíticas que estimulam o processo inflamatório, via citocinas do perfil Th1, enquanto citocinas do perfil Th2 controlam a inflamação, impedindo a progressão da doença e lesões teciduais. A terapia para DC é restrita ao uso dos medicamentos Benzonidazol (BZ) e Nifurtimox (NF), no entanto, ambas são tóxicas e pouco eficazes na fase crônica da doença. Neste contexto, as microalgas representam uma alternativa viável na terapia para DC, visto que são organismos de fácil cultivo e produzem compostos bioativos que induzem ação tripanocida e moduladora da resposta imune. Diante disso, o objetivo deste trabalho consistiu na avaliação da atividade anti-T.cruzi e imunomoduladora de compostos obtidos das microalgas Chlorella vulgaris e Tetradesmus obliquus. As microalgas foram cultivadas em meio enriquecido de sais, sob aeração constante e presença de CO2, sendo a biomassa obtida após a fase exponencial de crescimento por centrifugação. A biomassa liofilizada foi dissolvida em tampão Tris-HCl a 0,2 M e pH 7,2, sendo submetida ao processo de sonicação para obtenção do extrato aquoso. Foram determinados os índices de seletividade (ISe) dos extratos, através da razão entre a concentração citotóxica mínima (CC50) em células humanas, e concentração inibitória mínima (IC50) em formas tripomastigotas. Ambos os extratos, em suas concentrações inibitórias mínimas (IC50), foram avaliados quanto à modulação da resposta imune em células infectadas ou não com T. cruzi. Os ensaios demonstraram que o extrato de T. obliquus foi mais seletivo contra T. cruzi comparado ao de C. vulgaris (ISe = 16,8 e 8,9, respectivamente). Além disso, T. obliquus, na concentração de 15,08 μg/ml (IC50) também foi eficiente na modulação da resposta imune, mediante a expressão do fator de necrose tumoral (TNF) e da interleucina-10 (IL-10). Por outro lado, C. vulgaris, na concentração de 112,10 μg/ml (IC50), diminuiu os níveis de interferon (IFN), reduzindo, portanto, o processo inflamatório, e também estimulou a produção de TNF, que é essencial no controle da parasitemia. Posteriormente, o extrato de T. obliquus, sendo o mais seletivo contra T. cruzi, foi submetido ao fracionamento proteico mediante precipitação salina, com sulfato de amônio, em frações de 20 a 80%. A fração proteica de 40%, com maior inibição do parasita (89%), foi purificada a partir de cromatografia de troca iônica utilizando a coluna DEAE-Sephadex, sendo as absorbâncias avaliadas em 215, 260 e 280 nm. As frações adsorvidas e não adsorvidas obtidas pela cromatografia foram dialisadas em tampão Tris-HCl a 20 mM, por 24 h e avaliadas quanto à ação tripanocida e citotóxica em concentrações variando de 4,68 a 150 μg/ml. A fração não adsorvida foi eficaz contra T. cruzi, com IC50 = 58,7 μg/ml e também não apresentou toxicidade em células humanas em nenhuma concentração testada (CC50 > 150 μg/ml). Deste modo, extratos e proteínas obtidas de microalgas apresentaram dados promissores no que se refere a novos alvos terapêuticos para a DC, como baixa toxicidade, ação em concentrações mínimas e controle do processo inflamatório no curso da infecção.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - ***.147.764-** - ANA LUCIA FIGUEIREDO PORTO - UFRPE
Interno - 2214959 - FABRICIO OLIVEIRA SOUTO
Interno - 1133637 - JOSE LUIZ DE LIMA FILHO
Externo ao Programa - 2356344 - RANILSON DE SOUZA BEZERRA - nullExterna à Instituição - RAQUEL PEDROSA BEZERRA - UFRPE