Implementação do diagnóstico molecular para a esporotricose em um centro de referência
Sporothrix; Reação em Cadeia da Polimerase; Diagnóstico Rápido.
O diagnóstico padrão-ouro para esporotricose é o isolamento de Sporothrix sp. em meios de cultura, todavia, trata-se de um método demorado. Neste sentido, ensaios de Nested PCR têm se destacado como estratégia diagnóstica alternativa, devido à sua capacidade de amplificar fragmentos de DNA a partir de poucas UFC. Destaca-se, no entanto, que é necessário ensaios com validação técnica a partir da própria amostra biológica. Diante do exposto, o objetivo deste estudo é desenvolver um novo protocolo molecular de Nested PCR para a detecção e identificação rápida do Sporothrix sp. diretamente de amostras clínicas e avaliar a sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade comparando com as metodologias tradicionais. Para isso será realizado um estudo analítico experimental. O estudo será desenvolvido no serviço de Dermatologia do Hospital das Clínicas (HC/EBSERH/UFPE), com uma amostragem de 30 espécimes clínicos (fragmento de pele e secreção lacrimal) oriundos de pacientes com solicitação médica para diagnóstico micológico para esporotricose. Uma vez colhida a amostra clínica, esta será analisada por diagnóstico micológico, sequenciamento do gene da calmodulina e Nested PCR. Posteriormente, os resultados obtidos serão analisados para identificar se o novo protocolo oferece maior rapidez, sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade quando comparado com as metodologias tradicionais.