UTILIZAÇÃO DA TÉCNICA DE DNA RECOMBINANTE EM PROCARIOTOS PARA BIODEGRADAÇÃO DE HIDROCARBONETOS POLICÍCLICOS AROMÁTICOS
Processos de biorremediação, recombinação genética, engenharia metabólica.
Devido ao aumento do uso produtos derivados do petróleo, compostos aromáticos como benzeno, tolueno, etilbenzeno, xileno (BTEX) e outros hidrocarbonetos poliaromáticos (HPAs) se tornam um risco cada vez mais elevado, podendo causar graves danos ambientais e também a saúde humana principalmente por suas características de bioacumulação e biomagnificação, com isso o presente estudo tem o objetivo de construir cepas de Escherichia coli por meio da técnica de DNA recombinante capazes de aprimorar e otimizar a degradação destes compostos aromáticos. Nesta técnica será realizada a inserção de dois genes nos vetores pET28a de E. coli, o todC2 responsável por inserir duas hidroxilas nos carbonos 1 e 2 do anel aromático do tolueno, e o xylE capaz de sintetizar a proteína catechol 2,3 dioxygenase que por sua vez é capaz de quebrar o anel aromático da molécula. Após montagem das células recombinantes, elas serão expostas a diferentes concentrações dos poluentes e posteriormente será realizada análise quantitativa e qualitativa por meio de cromatografia líquida, bem como comparação com Pseudomonas aeroginosa,¸espécie capaz de degradar BTEX e duas espécies de bactérias Citrobacter freundii e Enterobacter ludwig isoladas da Estação de Tratamento de Esgoto Multifabril, localizada na cidade de Jaboatão dos Guararapes/PE. As análises comparativas tem como objetivo verificar capacidade das cepas recombinantes de realizar a degradação dos compostos e checar sua eficiência perante as outras espécies bacterianas.