Banca de QUALIFICAÇÃO: DANIEL CHARLES DOS SANTOS MACEDO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: DANIEL CHARLES DOS SANTOS MACEDO
DATA : 01/09/2023
LOCAL: VIDEOCONFERÊNCIA
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIBACTERIANA DE LIPOSSOMAS CONTENDO ÁCIDO ÚSNICO E REVESTIDO COM FUCANA FRENTE À Klebsiella pneumoniae E AVALIAÇÃO DA NANOTOXICIDADE UTILIZANDO O MODELO ALTERNATIVO IN VIVO Caenorhabditis elegans

PALAVRAS-CHAVES:

Klebsiella pneumoniae; nanotecnologia; toxicidade; Caenorhabditis elegans.

PÁGINAS: 102
RESUMO:

Dentre os agentes etiológicos da pneumonia, destaca-se a Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), bactéria gram-negativa, produtora de biofilme e resistente a beta-lactâmicos e carbapenêmicos. Ativos antimicrobianos têm sido explorados, a exemplo do ácido úsnico (AU), o qual possui ampla atividade antibacteriana. No entanto, o AU apresenta baixa solubilidade em água, cardiotoxicidade e hepatotoxicidade, limitando sua utilização na forma livre. Assim, a encapsulação deste fármaco em nanocarreadores, como os lipossomas, por exemplo, pode reduzir sua toxicidade. Ademais, a inserção de moléculas na superfície dos lipossomas, como a fucana (Fuc), favorece o direcionamento dos nanocarreadores para o sítio de infecção da pneumonia. Apesar das vantagens da nanotecnologia, a avaliação da toxicidade in vivo dos nanossistemas é de suma importância, uma vez que comprova a segurança das formulações. Assim, modelos in vivo alternativos têm sido propostos, como por exemplo, o Caenorhabditis elegans (C. elegans). Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ingestão e a toxicidade de lipossomas contendo ácido úsnico e revestidos com fucana (AU-Lipo-Fuc), utilizando como modelo in vivo C. elegans. AU-Lipo-Fuc foram obtidos pelo método de hidratação do filme lipídico e caracterizados através de tamanho médio de vesículas (TP), índice de polidispersão (PDI), potencial zeta (ζ) e eficiência de encapsulação (EE%). A fim de avaliar a ingestão das formulações, 100 vermes no estágio L4 foram expostos aos lipossomas marcados com rodamina-B (Lipo-Rod) e analisados por microscopia de fluorescência. Para avaliação da toxicidade, vermes L4 foram expostos a diferentes concentrações de lipossomas contendo AU (Lipo-AU), AU-Lipo-Fuc (1; 2; 3; 4 e 5 μg/mL), e concentrações equivalentes de Lipo e lipossomas revestidos com fucana (Lipo-Fuc) (1,8; 3,6; 5,4; 7,2; 9 μM), durante 24 h e em seguida determinados os parâmetros CL50, batimento faríngeo, ovo-produção e ovo-posição dos vermes. O tamanho dos Lipo-AU, Lipo-Fuc e AU-Lipo-Fuc (120,9 ± 0,8; 241,2 ± 41,1 e 1441,6 ± 341,4 nm, respectivamente) foi maior que Lipo (104,8 ± 0,9 nm). Todas as formulações apresentaram PDI abaixo de 1 e aquelas contendo AU apresentaram EE% > 97%. Após 24h, a fluorescência mostrou que Lipo-Rod estiveram distribuídos através do tubo intestinal dos vermes, evidenciando a efetiva ingestão do nanocarreador. Após 24 h de exposição, houve 100% de sobrevivência, sem alteração do batimento faríngeo, resultados que evidenciam ausência de nanotoxicidade das formulações. Além disso, os resultados de ovo-produção e ovo-posição revelam, respectivamente, que as diferentes formulações não alteraram a biossíntese de vitelogenina, responsável pela produção de ovos pelo verme, nem provocaram a senescência do sistema reprodutor, uma vez que não houve a formação de “worm bags”, termo que designa a retenção dos ovos no útero do verme. Análises de sobrevivência, desenvolvimento, comportamento e reprodução do C. elegans são parâmetros sensíveis para avaliar a toxicidade causada por nanossistemas. Assim, os resultados aqui expressos evidenciam, preliminarmente, a segurança in vivo de AU-Lipo-Fuc para possível tratamento de infecções provocadas pela K. pneumoniae.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ANA MARIA QUEIJEIRO LOPEZ - UFAL
Presidente - 2199290 - BEATE SAEGESSER SANTOS
Externo ao Programa - 1547195 - CRISTIANO APARECIDO CHAGAS - null