Banca de DEFESA: EMANUELA PAZ ROSAS

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
STUDENT : EMANUELA PAZ ROSAS
DATE: 30/09/2021
TIME: 14:00
LOCAL: Videoconferência
TITLE:

ASPECTOS MORFOFISIOLÓGICOS DE MASTÓCITOS NA DURA-MÁTER HUMANA: LIBERAÇÃO IN VITRO DE CGRP E ÓXIDO NÍTRICO SOB AÇÃO DO TOPIRAMATO

KEY WORDS:

Transtornos de enxaqueca, Peptídeo relacionado ao gene da calcitonina, Óxido nítrico, Mastócitos, Dura-máter, Topiramato.

PAGES: 100
BIG AREA: Ciências Biológicas
AREA: Fisiologia
SUMMARY:

A liberação in vitro do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), de fragmentos de dura-máter, tem sido avaliada visando entender a fisiopatogenia da enxaqueca. Estudos prévios demonstraram que fragmentos de dura-máter de ratos liberaram quantidades significativas de CGRP e que mastócitos presentes nas proximidades dos vasos sanguíneos da dura-máter parecem exercer um papel importante na deflagração do processo inflamatório na crise da enxaqueca. A histamina, o CGRP e o óxido nítrico, são moléculas envolvidas na vasodilatação associada a dor de cabeça da enxaqueca. Diversos fármacos são utilizados na profilaxia da enxaqueca, entre eles o topiramato tem se destacado por sua eficácia. Neste contexto, objetivou-se avaliar a liberação do CGRP, do óxido nítrico e a degranulação dos mastócitos de dura-máter de humanos na presença ou não do topiramato. A dura-máter obtida de necropsias foi lavada com fluido intersticial sintético (SIF) a 25º C por 30 minutos. Essa dura-máter foi dividida em fragmentos que foram incubados por 15 minutos com SIF e posteriormente por 30 minutos na presença ou não do topiramato em diferentes concentrações: 10^-6 M, 10^-8 M e 10^-10 M. Após o tratamento, o meio de incubação foi trocado por uma solução de cloreto de potássio (KCl) a 60 mM para provocar liberação de CGRP, óxido nítrico e degranulação dos mastócitos por 30 minutos, depois os fragmentos de dura-máter foram transferidos para o Carnoy e em seguida processados (desidratados, diafanizados e parafinizados). Após emblocamento, o material foi cortado (5 e 10 µm) em micrótomo e levados a estufa por 20 minutos para adesão. Posteriormente, os cortes de dura-máter foram desparafinizados, corados (Azul toluidina) ou marcados por triptase (Imuno-histoquímicos) e montados. O teor de CGRP e óxido nítrico liberado no sobrenadante foi quantificado pelo método de ELISA, e a degranulação dos mastócitos foi examinada por microscopia óptica. Os resultados mostraram que o tratamento com topiramato nas concentrações de 10^-8 M e 10^-10 M apresentaram uma redução na porcentagem de mastócitos degranulados por mm² quando comparado com controle positivo. Quando foi analisado uma comparação entre o controle (negativo) com todos os tratamentos de topiramato, houve uma redução significativa na porcentagem de mastócitos degranulados por mm² na concentração 10^-8M. Sugere-se que o topiramato nas concentrações mais baixas parece ter efeito indireto sobre a degranulação dos mastócitos.

BANKING MEMBERS:
Externa ao Programa - 2779450 - DANIELLA ARAUJO DE OLIVEIRA
Externa ao Programa - 1130527 - IVONE ANTONIA DE SOUZA
Presidente - 1132496 - MARCELO MORAES VALENCA
Externa ao Programa - 1210701 - PALOMA LYS DE MEDEIROS
Externa ao Programa - 3346571 - WYLLA TATIANA FERREIRA E SILVA