Banca de QUALIFICAÇÃO: JOAO VICTOR DE MELO GOMES

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOAO VICTOR DE MELO GOMES
DATA : 28/02/2023
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Avaliação in vitro de atividade antioxidante e imunomoduladora de derivados tiazolidínicos e perfil de expressão protéica das isoformas de PPAR em pacientes com esclerose sistêmica

PALAVRAS-CHAVES:

Esclerose sistêmica; tiazolinedionas; PPAR; Citocina; Superóxido.

PÁGINAS: 85
RESUMO:

Doenças crônicas possuem caráter inflamatório com produção de citocinas e possível
desregulação da fibrose com produção excessiva de espécies reativas do oxigênio (ROS), esses
fatores são imprescindíveis na manutenção dessas doenças. A partir desse contexto, a busca de
novos agentes terapêuticas para o tratamento como as tiazolidinedionas que possuem potencial
atividade imunomoduladora, reguladora da fibrose progressiva e redutora de ROS através da sua
atividade agonista ao PPARy, que pode estar hiporregulada em doenças como a esclerose
sistêmica. Logo, o trabalho possui o objetivo de avaliar as atividades imunomoduladora,
antifibrótica e antioxidante dos derivados tiazolidínicos LPSF/JB-3 e LPSF/JB-20, possíveis
agonistas do PPARy. A análise dos derivados in silico foram realizadas pela plataforma
SwissADME. A princípio foram recrutados 14 voluntários saudáveis para coleta de sangue total,
para obtenção de células mononucleadas do sangue periférico (PBMC), estimuladas com
fitohemaglutinina (PHA) e tratadas com LPSF/JB-3 50μM e LPSF/JB-20 50μM para coleta de
sobrenadante. Após triagem, foram incluídas amostras de 5 voluntários para dosagem das
citocinas IFNγ, IL-1β, IL-6 e IL-13 através de ELISA sanduíche. Em busca de compreender o
possível mecanismo de ação do LPSF/JB-3 e LPSF/JB-20 com PPARy, os derivados foram
combinados com coquetel de estímulo (dexametasona 1μM, insulina 10mg/mL e IBMX 500μM)
e submetidos a tratamento em pré-adipócitos (3T3-L1) para diferenciá-las em adipócitos
maduros e quantificar os lipídeos por coloração com Oil Red O. A resposta antioxidante in vitro
foi realizada de cultura de fibroblastos de pele saudável de um paciente do bloco de cirurgia
plástica do HC/UFPE, as células foram pré-tratadas com os derivados para então tratamento com
peróxido de hidrogênio (H202), marcação de ROS através do dihidroetídio. A análise in sílico
mostrou que ambos os compostos possuem absorção pelo trato gastrointestinal e não sofrem
efluxo pela glicoproteína P. Já o druglikeness mostrou que o LPSF/JB-3 e LPSF/JB-20 respeitam
a regra de Lipinski e exibem MLOGP estimado de 2,36 e 3,25, respectivamente. O
SwissTargetPrediction prevê que ambos compostos possuem probabilidade de ligação com
PPARy. O tratamento in vitro com LPSF/JB-20 [1082 ± 460,4pg/mL; **p= 0,0079] em
comparação com PHA [3690 ± 2165 pg/mL] reduziu os níveis de IFNy em sobrenadante de
PBMC. Após quantificação do Oil Red O, o LPSF/JB-3 10μM [112,5% ± 10,04 **p=0,0076],
LPSF/JB-20 10μM [146,1% ± 20,97; **p=0,0033] e 25μM [149,3% ±10,47; ***p= 0,0003]
apresentaram conteúdo lipídico (%) maior significativamente em comparação ao grupo somente
estímulo [89,08% ± 12,65]. E ao comparar LPSF/JB-3 10μM (p= 0,1664), 25μM (p= 0,4985),
50μM (p= 0,5864) e LPSF/JB-20 10μM (p= 0,0574) com o grupo rosiglitazona 10μM [112,5% ±
10,04] não foi observado diferença significativa. Porém, o LPSF/JB-20 25μM (**p= 0,0069) foi
demonstrado que esse grupo acumulou mais lipídeos que o grupo rosiglitazona. Na avaliação
antioxidante in vitro, ao comparar o grupo de células que foram tratadas apenas com H202 [14,39 ± 3,39] o LPSF/JB-3 25μM [8,63 ± 0,80; *p= 0,0463] teve redução da intensidade de fluorescência significativa. De acordo com os resultados obtidos, é sugerido que os derivados tiazolidínicos apresentaram atividade imunomoduladora e antioxidante com potencial atividade agonista ao PPARγ.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - AMANDA PINHEIRO DE BARROS ALBUQUERQUE - UFPE
Externo à Instituição - ERALDO FONSECA DOS SANTOS JUNIOR - UFPE
Externa à Instituição - SAYONARA MARIA CALADO GONCALVES - UFPE