Banca de DEFESA: KLEWDMA DE FREITAS ARAUJO

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: KLEWDMA DE FREITAS ARAUJO
DATA : 12/12/2023
HORA: 09:00
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

ESTUDO IN VITRO DAS ATIVIDADES CITOTÓXICA E ANTI-LEISHMANIA DA FRAXETINA FRENTE ESPÉCIE DE Leishmania (L.) infantum E POTENCIAIS MECANISMOS MOLECULARES

PALAVRAS-CHAVES:

atividade antileishmania; atividade citotóxica; fraxetina; Leishmania infantum; proteômica

PÁGINAS: 125
RESUMO:

A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada que atinge milhares de pessoas ao redor do
mundo, principalmente as populações economicamente vulneráveis. Os tratamentos disponíveis
são limitados e a letalidade ainda é crescente, especialmente no Brasil com elevada ocorrência da
forma visceral da doença causada pela espécie Leishmania infantum, que também é responsável
pelo aparecimento de formas cutâneas (atípicas ou não ulceradas) em alguns países da América
Central. Logo, tem sido intensificada a busca por novos fitoterápicos com atividade
antileishmania e com baixa toxicidade através de estudos com metabólitos de plantas. A
fraxetina (6-metoxi-7,8-dihidroxicumarina) é uma cumarina simples (trissubstituída), que
apresenta atividades biológicas já estabelecidas, porém a atividade antileishmania ainda não foi
relatada. O principal objetivo deste trabalho foi estudar a atividade antileishmania da fraxetina
frente cepa de L. infantum e correlacionar com possíveis mecanismos moleculares. Formas
promastigotas de L. infantum (2 x 106 parasitas/mL) foram testadas com a fraxetina em
diferentes concentrações (0,195 a 100 μg/mL) para determinação da IC50 pelo método
colorimétrico do MTT. Anfotericina B foi utilizada como controle positivo e o DMSO como
controle negativo. Avaliou-se o efeito da fraxetina (50 μM) sobre a proliferação da linhagem de
células HeLa. A fraxetina apresentou IC50 de 6,25 μg/mL, com redução do crescimento dos
parasitos in vitro em função do tempo de cultivo e não foi citotóxica para as células HeLa.
Quanto à análise proteômica, a realização do estudo do perfil de proteínas acumuladas pelos
parasitos sob ação da fraxetina (IC50), foi realizada com a extração proteica de amostras tratadas
e não tratadas aplicadas em quintuplicata em um sistema de mini-gel de poliacrilamida (SDSPAGE)
e posteriormente coradas com azul de Coomassie. Em seguida esse gel foi cortado e
submetido a técnica de LC-MS/MS e como resultados, foi obtido um total de 1.565 proteínas,
destas 359 tiveram diferenças de expressão após o tratamento com a fraxetina, tendo-se
observado aumento de expressão em 144 proteínas e expressão reprimida em 215. Essas
proteínas foram analisadas por ontologia genética utilizando-se o programa Blast2GO e
classificadas em três níveis: componente celular, função molecular e processo biológico. A
fraxetina foi capaz de induzir importantes alterações com repercussões no metabolismo do
parasito, embora estudos subsequentes sejam necessários para que se possa considerá-la como
um potente candidato antileishmania

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1117892 - CLAUDIO GABRIEL RODRIGUES
Externa à Instituição - ERWELLY BARROS DE OLIVEIRA - UFPE
Externa à Instituição - FABIANA APARECIDA CAVALCANTE SILVA
Externo à Instituição - IRANILDO JOSE DA CRUZ FILHO - UFPE
Externo à Instituição - JANILSON JOSE DA SILVA JUNIOR - CUMN