Banca de QUALIFICAÇÃO: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA GONÇALVES

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA GONÇALVES
DATA : 13/12/2023
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Investigação dos efeitos imunomodulador e antifibrótico da dexametasona em células de pacientes com esclerose sistêmica e em modelo experimental da doença

PALAVRAS-CHAVES:

autoimunidade; esclerodermia; fibrose; tratamento.

PÁGINAS: 100
RESUMO:

A Esclerose Sistêmica (ES) é uma doença autoimune do tecido conjuntivo, caracterizada por alterações vasculares, desregulação imunológica e fibrose da pele e órgãos internos. Os glicocorticoides são utilizados no tratamento da ES, devido ao efeito anti-inflamatório e imunossupressor. No entanto, dos poucos estudos realizados, os resultados obtidos sobre sua atividade frente a doença são controversos. Assim, o trabalho tem como objetivo avaliar a possível atividade imunomoduladora e antifibrótica da Dexametasona (Dexa) ex vivo em células de pacientes com esclerose sistêmica e in vivo em modelo experimental da ES. A ES experimental foi induzida em camundongos Balb/c, através de injeções intradérmicas de ácido hipocloroso (HOCl) e os animais tratados receberam injeções intraperitoneais de Dexa (1mg/Kg). Durante as seis semanas do ensaio, o espessamento da pele do dorso raspado dos camundongos foi avaliado usando um paquímetro digital e expresso em milímetros (mm). Após esse período, os animais foram sacrificados e retirou-se o baço, pulmões e pele. Esplenócitos e macrófagos isolados do baço foram incubados (3x106 /poço) em placa de 24 poços em meio RPMI 1640, suplementado com 10% de Soro Bovino Fetal e estimulados com 5μg/mL de concanavalina A e 100 ng/mL de lipopolissacárideo, respectivamente, por 48 horas a 37° C e 5% de CO2. Após esse tempo, os sobrenadantes da cultura foram recuperados para dosagens de citocinas por ELISA. O RNA da pele e pulmão foram extraídos usando Trizol e a síntese de cDNA foi realizada utilizando o Kit High-Capacity cDNA Reverse Transcription. Em seguida, a expressão gênica de Col1a1, Tgf-β1 e Acta2 foi avaliada por RT-qPCR e a expressão gênica relativa foi calculada por 2 −ΔΔCT. Os resultados foram analisados no software GraphPad Prism, versão 8.0 (San Diego, CA). In vitro, a produção de IL-4 foi significativamente menor no sobrenadante de cultura de esplenócitos dos camundongos ES+Dexa em comparação ao grupo de camundongos ES (p=0,001). E ocorreu aumento significativo de IL-6 no sobrenadante de cultura de macrófagos dos camundongos ES+Dexa em comparação aos camundongos ES (p=0,008). Os camundongos ES apresentaram espessamento dérmico significativamente maior que o animais do grupo controle (PBS) (p<0,0001). A Dexa reduziu significativamente a espessura da pele dos camundongos ES + Dexa em comparação aos camundongos ES (p<0,0001). Foi observado aumento significativo da expressão gênica de Col1a1 (p=0,006) e Tgfβ1(p=0,005) na pele e de Tgfβ1 (p=0,0001) nos pulmões dos camundongos ES em comparação ao grupo controle. Verificou-se redução significativa na expressão de Col1a1 (p=0,002), Tgfβ1 (p<0,0001) e Acta2 (p<0,0001) na pele e de Tgfβ1 (p=0,005) nos pulmões do grupo de camundongos ES + Dexa quando comparado aos camundongos ES. Não ocorreu alteração significativa na expressão gênica de Col1a1 e Acta2 no pulmão dos grupos avaliados. Diante do exposto, sugere-se um perfil imunomodulador da dexametasona frente a produção de IL-4 e antifibrótico ao reduzir espessura dérmica e expressão de genes envolvidos na fibrose de pele e pulmão.

MEMBROS DA BANCA:
Externa ao Programa - 3445538 - ANDREA TAVARES DANTAS - nullExterna à Instituição - ERIKA DA SILVA BEZERRA DE MENEZES - UFRPE
Presidente - 2181686 - MARIA CAROLINA ACCIOLY BRELAZ DE CASTRO