Banca de QUALIFICAÇÃO: MARTON KAIQUE DE ANDRADE CAVALCANTE

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARTON KAIQUE DE ANDRADE CAVALCANTE
DATA : 22/09/2023
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

AVALIAÇÃO IN VITRO DE CÉLULAS NATURAL KILLER, T E DE UM ESFERÓIDE DÉRMICO NA LEISHMANIOSE CUTÂNEA

PALAVRAS-CHAVES:

Leishmaniose, in vitro

PÁGINAS: 100
RESUMO:

A Leishmaniose Cutânea (LC) é um grave problema de saúde pública
mundial, sendo no Brasil as regiões norte e nordeste as que apresentam mais
casos da doença. A doença caracteriza-se pelo surgimento de lesões que pode
variar de uma a centenas, sendo 90% dos pacientes portadores de lesões com
aspecto nódulo-crostoso. O curso da infecção na LC está estritamente ligado a
resposta imune do hospedeiro, entretanto, ainda existem diversas lacunas sobre
qual o tipo de resposta imune é necessário. Dentre as diversas células que
compõem o sistema imune destaque é dado as células natural killer (NK),
conhecidas pela sua capacidade de matar células infectadas, modificadas e
autorreativas, sem a necessidade de apresentação prévia. Além disso, essas

células são conhecidas pela alta produção de citocinas, como interferon-γ (IFN-
γ), auxiliando assim no recrutamento de outras células, bem como na sua

ativação. Os linfócitos T fazem parte da resposta imune adaptativa e são
responsáveis pela resposta imune celular. Embora haja diversos avanços nos
estudos in vitro para o estudo da LC, o mesmo apresenta diversas limitações,
como a não semelhança com o ambiente in vivo. Pensando nisso, as culturas
3D tem sido fortemente recomendadas para estudos, visto que há uma
mimetização da geometria, ambientação e sinalização entre as células. Porém,
até o momento, não se tem relatos da utilização desta técnica para estudos na
LC. Diante disso, o presente trabalha tem como objetivo avaliar as células
Natural Killer e T em pacientes com lesão ativa da leishmaniose cutânea e
desenvolver e testar um modelo de esferóide dermo-epidérmico
imunocompetente em 3D para estudos com a Leishmania spp. Fizeram parte do
estudo trinta pacientes, sendo 23 pacientes com a forma ativa da doença,
denominados antes do tratamento (AT) e 7 pacientes com cura clínica,
denominados pós-tratamento (PT). Além disso, tivemos um terceiro grupo
composto por indivíduos saudáveis, denominado controle (CT), formado por 17
pessoas. Foram realizados estudos de imunofenotipagem e dosagem de
citocinas a partir de sobrenadante de cultura das células mononucleares do
sangue periférico (PBMCs). Já nos estudos em 3D, fibroblastos e macrófagos

murinos foram cultivados e para a formação dos esferóides, foi utilizada a técnica
de magnetização. Os esferóides formados foram avaliados quanto a sua
formação/compactação e através de análises histológicas. Na avaliação célular,
observamos uma menor percentual de células NK e de células NKT DN nos
pacientes com lesão ativa, enquanto, as células NKT CD4+ apresentaram um
maior percentual nesta população. Não foi observada diferença significativa no
percentual dos linfócitos T CD4+, CD8+ e DN Além disso, observamos uma
maior expressão de PD-1, Granzima b, TIGIT e CLTA-4 tanto nas células NK,

quanto nos linfócitos T dos pacientes. Também foi observada a produção de IL-
2, IL-4. IL-6, IL-10, IL-17, INF e TNF nos pacientes após estimulação com

antígeno de L. braziliensis. Nos esferóides, observamos sua formação e
compactação após 24 horas de cultivo. Além disso, observamos que a proporção
8 fibroblastos: 1macrófago apresentaram melhor compactação e por isso foi
escolhido para os demais experimentos. O entendimento da resposta imune na
LC é fundamental para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e
vacinais. Além disso, o desenvolvimento de modelos in vitro que se assemelhem
aos eventos que ocorrem no in vivo podem contribuir para o entendimento da
doença.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - PATRÍCIA SANTOS LOPES - UNIFESP
Externa à Instituição - PATRÍCIA XANDER BATISTA - UNIFESP
Externa à Instituição - FABIANA OLIVEIRA DOS SANTOS GOMES - UNICAP