OBTENÇÃO DE SISTEMAS DISPERSOS CONTENDO EXTRATO DAS FOLHAS DE Eugenia uniflora LINN E
AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES ANTI-Candida in vitro E in vivo
Eugenia uniflora Linn; Extratos secos; Sistemas dispersos; Anti-candida; in vivo.
Atualmente, tem sido observada intensa busca por novas terapias para suplantar problemas envolvendo a resistência a antimicrobianos. Desse modo, sabendo-se que a pesquisa sobre espécies vegetais que apresentam alto valor agregado pode fornecer informações interessantes para diversas doenças, o trabalho em questão investigou o potencial anti-candida de extrato de folha de Eugenia uniflora Linn (pitangueira) quando incorporado em sistemas dispersos. A abordagem iniciou-se com o estudo da proporção droga: solvente (5%, 10% e 15%) para o preparo dos extratos das folhas de Eugenia uniflora Linn. Após escolha da quantidade de droga seria utilizada para preparo dos extratos, procedeu-se com a avaliação dos adjuvantes de secagem (goma xantana, celulose microcristalina, dióxido de silício) por meio de planejamento de misturas, fixando-se em 15% a proporção máxima de cada adjuvante, tendo como variáveis de resposta as propriedades tecnológicas dos sistemas particulados obtidos e o teor de metabólitos majoritários. Em seguida, o extrato seco escolhido foi particionado com hexano e acetato de etila para obtenção das frações. O extrato e suas respectivas frações hexânica, aquosa e acetato de etila foram caracterizadas quimicamente por Cromatografia em Camada delgada (CCD) e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) quanto à presença dos principais marcadores da espécie. Simultaneamente, foram desenvolvidas pré-formulações de emulsões pelo método de homogeneização por ultraturrax para a escolha dos polímeros que seriam utilizados como estabilizantes a partir da avaliação das propriedades físico-quimicas das dispersões obtidas. Ademais, foi realizado planejamento fatorial 32 para definição dos parâmetros de preparo das emulsões, a fim de solucionar qual seria o tempo e a potência de homogeneização (5, 10 e 15 min/ 9.000, 14.500 e 30.000 RPM). Após estabelecer as condições de preparo, as emulsões foram incorporadas com 10 e 15% de extrato já otimizado (Extrato Seco por Aspersão, DSC 15% como adjuvante de secagem), prosseguindo-se com os estudos de estabilidade e avaliação de atividade anti-candidain vitro e in vivo, além de ensaio de toxicidade in vivo. A avaliação da proporção de droga:solvente demonstrou que, em menor concentração de droga, houve uma maior Eficiência de Extração de flavonoides e polifenóis, sendo eleita a proporção de 5% para preparo dos extratos. A avaliação do sistema adjuvante demonstrou que DSC a 15% levou à formação de pós com melhores propriedades tecnológicas. Ao se realizar fingerprints do extrato bruto e frações, evidenciou-se a presença dos marcadores miricitrina, ácido gálico e ácido elágico por CCD e por CLAE, sendo possível observar aumento de concentração desses metabólitos ao se realizar fracionamento com solventes de diferentes polaridades. A HPMC e a GXT foram os polímeros utilizados para compor a formulação. Os parâmetros de homogeneização escolhidos foram de 30.000 RPM em 15 min, a partir da análise das respostas do planejamento fatorial. A atividade in vitro revelou um CIM favorável, ou seja, igual ou abaixo de 500 µg/mL para todas as amostras avaliadas frente às três cepas de Candida spp utilizadas no ensaio. O ensaio de toxicidade revelou que as formulações não apresentaram quaisquer evidências de efeitos adversos ou sinais de clínicos de toxicidade dérmica. O ensaio de avaliação anti-candidain vivo das formulações se mostrou um sucesso, uma vez que, em até 7 dias, todos os camundongos apresentaram cura.