Desenvolvimento e caracterização de biossensores eletroquímicos para identificação de Candidozyma auris
Infecções fúngicas, diagnóstico, genossensor, polímero condutor, PANI.
A espécie fúngica Candidozyma auris (anteriormente Candida auris) é classificada como um patógeno de risco crítico, ocupando posição de destaque na lista de prioridades da Organização Mundial da Saúde para o direcionamento de iniciativas de pesquisa em saúde pública relacionadas a fungos. A identificação precisa e rápida de C. auris representa um desafio devido às limitações dos métodos convencionais disponíveis. Nesse contexto, os biossensores eletroquímicos destacam-se como uma alternativa promissora, apresentando capacidade de detecção rápida de patógenos, robustez, elevada seletividade e sensibilidade, bem como a possibilidade de aplicação in loco. Assim, este trabalho teve como objetivo desenvolver e caracterizar um biossensor eletroquímico para a detecção de C. auris. Para tal, foram utilizados sistemas de eletrodos impressos de carbono, empregando as técnicas eletroquímicas de Voltametria Cíclica (VC) e Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIE) para a caracterização e leitura dos resultados. Estudos de otimização da modificação superficial foram conduzidos, estabelecendo-se a eletropolimerização da polianilina (PANI) a 4 mM como condição ideal para a formação de uma superfície uniforme e com boa condutividade (Ipa = 87,43 ± 2,07 µA; Rct = 2,3 ± 1,25 kΩ). Em seguida, visando à ancoragem da sonda aminada para C. auris, a superfície modificada com PANI foi ativada com o agente de reticulação glutaraldeído a 1% (v/v), diluído em perclorato de tetrabutilamônio a 50 mM (Ipa = 59,33 ± 6,4 µA; Rct = 6,77 ± 0,60 kΩ). Posteriormente, a sonda foi imobilizada no eletrodo de trabalho modificado (Ipa = 15,83 ± 0,4 µA; Rct = 30,65 ± 2,33 kΩ), estabelecendo ligações covalentes com os grupos funcionais do glutaraldeído. O biossensor desenvolvido demonstrou elevada especificidade, diferenciando o alvo complementar do não complementar, mesmo em altas concentrações (10 µM), com valores de resistência à transferência de carga (Rct) de 269 ± 98,99 kΩ e 58,5 ± 4,24 kΩ, respectivamente. Em conjunto, os achados indicam que a plataforma desenvolvida apresenta especificidade, simplicidade de fabricação e possibilidade de aplicação in loco. Entretanto, aprimoramentos na reprodutibilidade dos resultados e na ampliação do limite de detecção ainda se fazem necessários para sua aplicação em contextos diagnósticos mais abrangentes.