AVALIAÇÃO DA POTENCIAL ATIVIDADE ANTIVIRAL DE UMA NANOEMULSÃO DE ÓLEO DE Copaifera sp (COPAÍBA) CONTRA O VÍRUS CHIKUNGUNYA
anotecnologia; arbovírus; óleo essencial
O vírus chikungunya (CHIKV) é um Alphavirus da família Togaviridae endêmico no Brasil. A arbovirose associada a ele, a febre chikungunya (FCHIK), é uma das mais recorrentes no mundo e amplamente conhecida pelo seu principal sintoma: a artralgia. O manejo de tratamento da doença é realizado com medicamentos voltados para a sintomatologia. Ainda não há medicamentos aprovados para uso na clínica, que sejam específicos para a contenção da evolução do vírus. Em contrapartida, o óleo de Copaíba é um oleoresina derivado da árvore Copaifera sp., característica dos biomas da Amazônia e cerrado. Esse óleo é amplamente utilizado na medicina popular com finalidade antimicrobiana, anti inflamatória e analgésica, além de estudos científicos que investigam outra propriedade, a de antiviral. Melhores formas de entrega para fármacos e bioativos são atrelados a nanotecnologia, sendo um desses métodos o desenvolvimento de nanoemulsões para fins de otimização. Dessa forma, o objetivo geral deste trabalho foi analisar as características de uma nanoemulsão de óleo de Copaíba e avaliar sua atividade antiviral in vitro contra o CHIKV. A metodologia do trabalho consistiu na realização do controle de qualidade das nanoformulações, avaliando seus parâmetros de tamanho, índice de polidispersão (PDI) e potencial zeta, e caracterização do óleo e nanoemulsão por CG-EM para determinação dos seus componentes. Além disso, realizou-se docking molecular com os componentes do óleo de Copaíba descritos em literatura e as proteínas estruturais (capsídeo, E1, E2 e E3) e não estruturais (nsP1-4) do CHIKV, Posteriormente, realizou-se ensaio de citotoxicidade da nanoemulsão de óleo de Copaíba em célula Vero CCL-81, e, por fim, avaliação da atividade antiviral por protocolo de pós infecção. As análises estatísticas foram realizadas no GraphPad Prism v.8.0.2 considerando p < 0,005. Os resultados apontaram uma conservação dos parâmetros de PDI e potencial zeta quando comparados com o estudo anterior desenvolvido no grupo de pesquisa. O parâmetro do tamanho apresentou variações, porém, após a padronização, comprovamos o efeito da sonicação na modificação deste parâmetro na nanoemulsão, e alcançou o tamanho de 216 nm. Em relação às caracterizações por CG-EM, foi demonstrado que o Cariofileno é o composto majoritário presente no óleo, e o processo de formulação o conserva também na NO. Os componentes β-Bisaboleno, β-Copaeno e α-Copaeno demonstraram promissoras interações in silico com as proteínas nsP3, spC e spP1,2 do CHIKV. Através do ensaio da citotoxicidade, além de demonstrar a ausência de interferência do tamanho da partícula e citotoxicidade, determinou-se o valor de 15 μg/ml como CC50. Além disso, no ensaio antiviral, por análise observacional, pode-se destacar a redução do título viral no grupo da nanoemulsão com o óleo (NO), contudo é necessário o aumento no n amostral. Nesse contexto, faz-se necessário retornar ao processo de caracterização da nanoemulsão para esclarecimentos mais aprofundados acerca da oscilação do parâmetro de tamanho e uma possível correlação com a atividade biológica.