Banca de QUALIFICAÇÃO: LUIS AFONSO SILVEIRA FARIAS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LUIS AFONSO SILVEIRA FARIAS
DATA : 14/11/2025
LOCAL: Google Meet
TÍTULO:

Atividades biológicas in vitro e In vivo de preparações de folhas de Cissus Verticillata

PALAVRAS-CHAVES:

Cissus sicyoides; Plantas medicinais;

PÁGINAS: 110
RESUMO:

Cissus verticillata subsp. verticillata, também conhecida como Cissus sicyoides L. é uma trepadeira que possui propriedades anti-inflamatória e hipoglicemiante. A tese descreve: 1) a produção e análise fitoquímica do extrato proteico de folhas de Cissus verticillata subsp. verticillata (CvLE); 2) o isolamento do inibidor de tripsina (CvLTI) por cromatografia em coluna de tripsina-agarose; 3) aavaliação por eletroforese em gel de poliacrilamida em condições desnaturantes (SDS-PAGE)deCvLE e CvLTI; 4) a caracterização de CvLTI por eletroforese bidimensional, espectroscopia de massa e estabilidade em diferentes valores de temperatura (30-100 °C) e pH (2,0- 10,0); 5) a avaliação in vitro de CvLE e CvLTI quanto as atividades citotóxica sobre células mononucleares de sangue periférico (PBMC), hemolítica com eritrócitos humanos e imunomodulatória sobre PBMC; 6) a avaliação in vivo da atividade antiinflamatória de CvLE (doses intraperitoneais de 50,100 e 200 mg/kg) nos modelos de peritonite e edema de pata induzidos por carragenina e 7) a avaliação in vivo de toxicidade aguda e genotoxicidade de CvLE (dose única oral de 2000 mg/kg) e CvLTI (intraperitoneal nas doses de 1,5 e 10 mg/kg). Camundongos suíços (Mus musculus), machos e fêmeas foram utilizados (CEUA/UFPE protocolo nº 0059/2023. Metabólitos secundários não foram detectados em CvLE por cromatografia em camada delgada enquanto três bandas com aproximadamente 44,7 kDa, 37,8 kDa e 14,3 kDa foram visualizadas em SDS-PAGE. CvLTI (14,3 kDa) apresentou atividade inibitória de tripsina específica de 5.208 U/mg, foi estável a pH ácido e temperatura elevada, tem ponto isoelétrico 5,3, mostrou homologia com endoquitinase encontrada nas folhas de Vitis vinífera, apresentou uma baixa toxicidade (7%) frente a PBMCs na concentração de 100 μg/mL e atividade hemolítica (EC50 = 33 μg /mL). CvLE e CvLTI foram imunomodulares estimulando a liberação das citocinas anti-inflamatórias IL-4, IL-6 e IL-10. CvLE em todas as doses foi ainti-inflamatório in vivo reduzindo a migração de leucócitos para a cavidade peritoneal (41 a 51%), a atividade da mieloperoxidase (14%), óxido nítrico (40 a 55%) e os níveis de IL-6, IL-17, TNF-α e IFN-y. O nível de IL-4 aumentou na dose de 200 mg/kg e o de IFN-y diminuíu nas doses de 100 e 200 mg/kg. No modelo de edema de pata induzido por carragenina, CvLE em todas as doses diminuiu o volume do edema de modo similar ao controle positivo dexametasona, reduziu a atividade da mieloperoxidase (28 a 42%) e os níveis de óxido nítrico (48 a 65%) e de IL-2, IL-6, IFN-y e TNF-alfa (pró-inflamatórios). A dose de 200 mg/kg aumentou IL-4 (anti-inflamatório)e as doses de 50 e 100 mg/kg reduziram o extravasamento proteico no edema em 25% e 37%, respectivamente. A análise morfométrica da pata mostrou que CvLE nas doses de 50,100 e 200 mg/kg reduziram a espessura do edema na epiderme em 23,3 ± 1,4%, 23,3 ± 2,8%, 26,0,2 ± 0,9% e 14,8 ± 26% respectivamente, enquanto que a espessura da derme diminuiu (28,6 ± 2,6%) nos animais tratados com 200 mg/kg. CvLE em dose única (2000 mg/kg per os) e CvLTI (1, 5 e 10 mg/kg, i.p.) não causaram sinais de toxicidade, morte e alteração no consumo de água e ração e no peso corporal. A análise histopatológica revelou arquitetura dos órgãos normal nos animais tratados com CvLE (2000 mg/kg) enquanto os rins dos animais tratados com CvLTI 10 mg/kg apresentaram estrutura nefrótica com variação do espaço de Bowman e pontos de reatividade do epitélio tubular e aqueles tratados com CvLTI 1 mg/kg apresentaram fígado com infiltrados perisinusoidal e rins com estrutura nefrótica e pontos de reatividade do epitélio tubular. CvLE (200 mg/kg) e CvLTI (10 mg/kg) não alteraram os parâmetros hematológicos dos animais enquanto CvLTI a dose de 1 diminuiu o número de VCM e leucócitos e a de 5 mg/kg diminuiu o número de eritrócitos, hematócrito, HCM e leucócitos. Os parâmetros bioquímicos não foram alterados nos animais tratados com CvLE (2000 mg/kg) e CvLTI (10 mg/kg) enquanto foi detectada diminuição de alanina aminotransferase na dose de 5 mg/kg e de colesterol e HDL na dose de 1 mg/Kg. CvLE e CvLTI não foram genotóxicos ou mutagenicos desde que o ensaio cometa revelou a presença de nucleoides da classe 0 (células não danificadas) e 1 (pouco dano celular) e o ensaio de micronúcleo revelou ausência de aumento na contagem de eritrócitos policromáticos micronucleados.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1133984 - PATRICIA MARIA GUEDES PAIVA
Externo ao Programa - ***.904.514-** - ROBSON RAION DE VASCONCELOS ALVES - UFPE
Interno - 1960817 - THIAGO HENRIQUE NAPOLEAO