MODELOS DE PELE IMUNOCOMPETENTE PARA ESTUDOS COM Leishmania amazonensis: DESENVOLVIMENTO, TESTAGEM E VALIDAÇÃO
Modelos tridimensionais; Interação parasito-hospedeiro; Leishmaniose cutânea.
Modelos de pele humana in vitro constituem plataformas promissoras para o estudo da leishmaniose cutânea por reproduzirem, de forma mais fiel, a arquitetura e a complexidade celular do tecido humano, permitindo a investigação controlada da interação parasito-hospedeiro em sistemas tridimensionais. Contudo, ainda são escassos modelos imunocompetentes capazes de integrar aspectos estruturais, celulares e imunológicos da infecção por Leishmania. Assim, este trabalho teve como objetivo desenvolver, testar e validar dois modelos de pele humana imunocompetentes, um equivalente de pele baseado em scaffold de fibroína e colágeno tipo I e um modelo de esferoide multicelular, para estudos com Leishmania amazonensis. Ambos os modelos apresentaram boa viabilidade celular e permitiram o estabelecimento da infecção, confirmada pela detecção de kDNA parasitário por qPCR, embora não tenha sido observada produção de óxido nítrico. O modelo equivalente de pele apresentou remodelamento mecânico após a infecção, enquanto os esferoides exibiram elevada compactação celular, organização periférica e núcleo central necrótico. Nos ensaios de atividade leishmanicida realizados com esferoides infectados, observou-se redução progressiva da carga parasitária conforme o aumento da concentração do tratamento, com queda de aproximadamente uma ordem de grandeza no número de genomas parasitários por esferoide nas maiores concentrações testadas, demonstrando a sensibilidade e aplicabilidade do modelo para avaliação de estratégias terapêuticas. Em conjunto, os resultados indicam que os modelos desenvolvidos são viáveis, reprodutíveis e adequados como plataformas in vitro para o estudo da leishmaniose cutânea e triagem de compostos leishmanicidas.