Banca de DEFESA: LÉONY SOARES DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LÉONY SOARES DE OLIVEIRA
DATA : 20/08/2026
HORA: 09:00
LOCAL: Auditório do Departamento de Bioquímica
TÍTULO:

ELABORAÇÃO E OTIMIZAÇÃO DE NANODISPOSITIVOS MINIATURIZADOS APLICADOS AO DIAGNÓSTICO ULTRASSENSÍVEL DE ONCOMARCADORES DE INTERESSE NA LEUCEMIA

PALAVRAS-CHAVES:

Genossensor; ISFET; polipirrol; pontos quânticos de grafeno; eletrodos impressos.

 

PÁGINAS: 259
RESUMO:

Biossensores e microdispositivos, como biochips são capazes de detectar alvos
moleculares, em tempo real de múltiplos analitos com elevada sensibilidade. No
oncodiagnóstico, essas ferramentas são atrativas devido à sua resposta rápida,
estruturação simples, baixo custo e uso de pequeno volume de amostra. Além disso,

polímeros e nanomateriais são integrados aos biochips, conferindo propriedades físico-
químicas únicas e aprimorando o desempenho bioanalítico e a biocompatibilidade. A

leucemia é um câncer hematológico iniciado na medula óssea que leva à falência da
hematopoiese. No contexto da população infantojuvenil, essa neoplasia assume grande
importância por ser o câncer mais comum e de maior mortalidade. O diagnóstico atual
baseia-se na combinação de vários testes, e a confirmação final prioriza testes moleculares
e de citogenética, que apresentam limitações, como elevado custo, complexidade e tempo
laboratorial. Nesse contexto, o presente estudo descreve o desenvolvimento e a validação
de diferentes estratégias automontadas com rápida detecção baseadas em biochips,
sistemas de microeletrônica e eletrodos impressos para a detecção de leucemia
linfoblástica aguda (LLA) infantil e leucemia promielocítica aguda (LPA). Os oncogenes
quiméricos mais frequentes, como ETV6::RUNX1 e TCF3::PBX1, associados às
translocações t(12;21)(p13;q22) e t(1;19)(q23;p13.3), foram os principais alvos assim
como oncogenes agressivos KMT2A-AFF1 e TCF3-HLF, ligados a t(4;11)(q21;q23) e
t(17;19)(q22;p13.3). Para o diagnóstico da LPA, o oncogene PML-RARα, resultante da
t(15;17), foi rastreado. Os biochips foram fabricados por meio de técnicas simples de
manufatura aditiva e consistem em um sistema eletroquímico de três eletrodos em
superfície miniaturizada e flexível. Todas as etapas de fabricação e os ensaios de
bioatividade foram caracterizados por voltametria cíclica (VC), voltametria de pulso
diferencial (DPV) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE). Também foram
empregadas as técnicas de microscopia eletrônica de varredura e de microscopia
eletrônica de força atômica. Durante as etapas de construção e os ensaios de

biorreconhecimento, foram observadas alterações eletroquímicas características da
detecção, incluindo diminuição das correntes de pico anódicas e aumento da impedância
dos sistemas. Através dos diferentes biochips desenvolvidos se alcançou limites de

detecção (LOD) que variam de 9 a 29 cópias dos oncogenes, utilizando detecção label-
free em 15 minutos. Na segunda estratégia foi utilizado um genossensor ISFET

(Transistor de Efeito de Campo Sensível a Íons) baseado em microeletrônica e transdução
pelas técnicas de potenciometria e EIE. Este sistema foi validado como Lab-on-a-chip
(LOC), sendo denominado como LOC-ISFET, devido a sua configuração miniaturizada
desde do microchip com quatro canais ao sistema de transdução Impedimétrica com
leituras simultâneas. O sistema LOC ISFET obteve um LOD de 5,19 pg/μL para o
oncogene ETV6::RUNX1 e de 8,43 pg/μL para o oncogene MLL::AF4. Na avaliação de
amostras de cDNA se obteve uma a quantificação com acurácia semelhante a
determinação por NanoDrop. Na terceira estratégia foi aplicado o método de dupla
transdução, eletroquímica e óptica, em substrato de eletrodos de ouro de impressos
(SPEAu) comerciais. As técnicas de caracterização principal e validação da resposta
foram a EIE e microscopia de fluorescência aplicadas a identificação oncogene de fusão
PML::RARα. O LOD obtido foi de 0,091 ng/μL, com um tempo total de detecção de
quinze minutos. A integração da transdução eletroquímica e óptica forneceu uma detecção
precisa e clinicamente relevante para o diagnóstico molecular da APL. Portanto, as
diferentes estratégias biossensoras desenvolvidas neste estudo apresentam características
promissoras para o diagnóstico de oncogenes clinicamente relevantes na leucemia. Além
de serem compatíveis como ferramentas point-of-care com rápida detecção e
quantificação de oncogenes de fusão. Além disso, este trabalho descreve oncogenes não
relatados anteriormente na literatura previa a publicação dos produtos desta tese de
doutorado.

 

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - KAREN YASMIM PEREIRA DOS SANTOS AVELINO - UFPE
Externo ao Programa - 1810494 - KLEBER GONCALVES BEZERRA ALVES - nullPresidente - 3649895 - MARIA DANIELLY LIMA DE OLIVEIRA
Interna - 2247580 - MICHELLY CRISTINY PEREIRA
Interno - 2066960 - MOACYR JESUS BARRETO DE MELO REGO