Banca de DEFESA: FLAVIA EMANOELE DA SILVA SOARES

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: FLAVIA EMANOELE DA SILVA SOARES
DATA : 17/12/2025
HORA: 14:00
LOCAL: UFPE
TÍTULO:

AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DO HSA-MIR-30E-3P E SEU EFEITO SOBRE A MIGRAÇÃO CELULAR NO OSTEOSSARCOMA

PALAVRAS-CHAVES:

osteossarcoma; hsa-miR-30e-3p; migração celular; expressão gênica.

PÁGINAS: 76
RESUMO:

O osteossarcoma (OS) é o tumor ósseo maligno primário mais comum em crianças e adolescentes, caracterizado por alta agressividade, potencial metastático e resistência terapêutica. Como esses comportamentos estão intimamente relacionados a mecanismos moleculares complexos, os microRNAs (miRNAs) têm sido apontados como importantes reguladores desses processos, atuando no controle da proliferação, migração e apoptose celular. Entre eles, destaca-se o hsa-miR-30e-3p, cuja participação em mecanismos de supressão tumoral tem sido descrita em diferentes neoplasias. Diante disso, este estudo teve como objetivo investigar a expressão do hsa-miR-30e-3p e de genes associados à migração celular no osteossarcoma, por meio da análise de amostras séricas de pacientes e ensaios in vitro com linhagem tumoral e osteoblastos primários. Foram coletadas amostras de sangue periférico de 12 pacientes diagnosticados com OS, provenientes do setor de Onco-Ortopedia
do Hospital do Câncer de Pernambuco (HCP), e de 10 voluntários saudáveis utilizados como controle. As amostras foram obtidas mediante assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE), processadas, aliquotadas e armazenadas a −80 °C no Biorrepositório do Núcleo de Pesquisa em Inovação Terapêutica Suely Galdino, sob coordenação da Profa. Dra. Michelly C. Pereira. Para os experimentos in vitro, foram utilizadas células de osteossarcoma humano SaOs-2 e osteoblastos primários isolados de fêmures de camundongos Balb/c. Ambas as culturas foram mantidas em DMEM High Glucose (GibcoTM) suplementado com
10% de soro fetal bovino (FBS) e 1% de penicilina/estreptomicina, em atmosfera umidificada a 37 °C e 5% de CO2. Após atingirem cerca de 80% de confluência, procedeu-se à extração do RNA total, seguida pela síntese de cDNA e análise da expressão relativa do hsa-miR-30e-3p por reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR). Para avaliar o efeito funcional desse miRNA, foi realizado um ensaio de transfecção com o mimic do hsa-miR-30e-3p em células SaOs-2, utilizando o reagente LipofectamineTM 3000 (Invitrogen) nos intervalos de 24 h, 48 h, 72 h e 96 h para determinar o melhor tempo de indução. Os dados clínicos mostraram que 65% dos pacientes eram do sexo masculino, com idades entre 10 e 19 anos, e que 47% apresentavam metástase pulmonar. A análise de expressão revelou uma redução significativa dos níveis séricos de hsa-miR-30e-3p em pacientes com OS em comparação ao grupo controle (p < 0,0001). Em contrapartida, nas análises in vitro, observou-se aumento significativo da expressão nas células SaOs-2 em relação aos osteoblastos primários murinos (p = 0,0099). O tempo de 48 h após a transfecção foi o que apresentou maior indução da expressão do hsa-miR-30e-3p quando comparado ao grupo controle (p < 0,0001). A partir dessa condição, foi iniciado o ensaio de migração (scratch assay) com células transfectadas, visando avaliar se o hsa-miR-30e-3p exerce efeito funcional sobre a migração celular no OS. Os achados deste estudo indicam que o hsa-miR-30e-3p apresenta expressão diferencial entre pacientes com OS e indivíduos saudáveis, além de estar aumentado em células SaOs-2 em comparação a osteoblastos primários. Esperamos que resultados possam sugerir um possível papel funcional desse miRNA na biologia tumoral do OS, possivelmente associado à regulação de mecanismos de migração celular e progressão tumoral.

 

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 1132555 - ANTONIO MARCELO GONCALVES DE SOUZA - nullExterno ao Programa - 3407049 - AUVANI ANTUNES DA SILVA JUNIOR - nullPresidente - 2066960 - MOACYR JESUS BARRETO DE MELO REGO