Banca de DEFESA: SAMARA SOUSA DE PINHO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: SAMARA SOUSA DE PINHO
DATA : 29/07/2024
HORA: 14:00
LOCAL: Sala 1 do Departamento de Genética/UFPE
TÍTULO:

DESENVOLVIMENTO DE SISTEMA DE CARREAMENTO BASEADO EM PARTÍCULAS DE B-GLUCANOS PARA VACINAS DE DNA UTILIZANDO ANTÍGENOS DO Trypanosoma cruzi

PALAVRAS-CHAVES:

Doença de Chagas; Vacinas de DNA; Sistemas de entrega; β-glucanos; Encapsulamento

PÁGINAS: 90
RESUMO:

A Doença de Chagas (DC) é uma doença infecciosa associada a cardiomiopatias e outros distúrbios graves, afetando coração e trato digestivo. Atualmente as opções terapêuticas são drogas tripanocidas. Entretanto, o uso desses fármacos está associado a efeitos colaterais e apresentam eficácia limitada nos estágios crônicos da doença. Nesse contexto, estratégias alternativas para o tratamento da DC são essenciais. Abordagens promissoras como as imunoterapias têm sido propostas para diversas doenças infecciosas e crônicas visando aumentar a capacidade do sistema imunológico de combater doenças. As vacinas de DNA, são um tipo de abordagem imunoterápica que oferecem benefícios em termos de segurança, custo e especificidade. No entanto, há desafios em relação à apresentação para o sistema imunológico. Uma das estratégias para superar esses desafios é o uso de veículos de entrega de DNA, como os baseados em leveduras. Estes incluem partículas derivadas da parede celular de levedura (YS), que mostraram eficácia na entrega intracelular de DNA e expressão gênica. As YS oferecem várias vantagens, incluindo capacidade de carga de DNA, biodisponibilidade oral e direcionamento específico a receptores de células apresentadoras de antígeno. Desse modo, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver uma plataforma de delivery para vacinas de DNA voltadas para cardiomiopatia chagásica crônica, baseada na utilização de YS Pichia Pastoris GS115. Para isso, foram construídos dois vetores de expressão com os genes TcG2 e TcG4 clonados no vetor pVAXque foram inseridos nas cápsulas obtidas pela extração da parede celular de leveduras Pichia pastoris, a partir de tratamentos de lavagens com componentes ácidos e alcalinos, associado a tratamentos térmicos. A partir das YS obtidas as construções foram inseridas em seu interior utilizando polímeros iônicos polietilenoimina (PEI) 2% e Cloreto de sódio (NaCl) 5%. O acompanhamento do processo de formação dessas partículas foi feito por meio de microscopia e sua eficiência de encapsulação (EE) avaliada com diferentes concentrações de DNA (50, 250 e 500ng) e observando a estabilidade em diferentes temperaturas (8°C, TA e 65°C).  Os ensaios de caracterização realizados, evidenciaram que as YS formuladas apresentam características morfológicas similares as leveduras integras, conseguindo preservar a estrutura da parede celular. Além disso, ensaios de EE demonstraram que o sistema com PEI 2% exibiram uma incorporação de 80% nas diferentes concentrações de DNA e o sistema com NaCl 5% de 76% de eficiência. Na avaliação de termoestabilidade ocorreram baixas perdas de carca útil variando de 0-2,1 ng/ µl em todas as temperaturas propostas, exceto no sistema com PEI 2% (65°C) que não conseguiu manter o DNA no interior das YS extravasando 76% do DNA inserido. Contudo, os resultados obtidos demonstraram EE em ambos os protocolos empregados, demonstrando a utilização de YS obtidas de Pichia Pastoris GS115 como uma plataforma de delivery para vacinas de DNA interessante a ser explorada. Para tanto, se fazem necessárias avaliações tanto in vitro quanto in vivo para verificar o potencial destas cápsulas como carreadores vacinais. 

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - FERNANDA CRISTINA BEZERRA LEITE - UFRPE
Presidente - 2364049 - PAULO EUZEBIO CABRAL FILHO
Externo ao Programa - 2067264 - WILL DE BARROS PITA - null