Banca de DEFESA: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA PEREIRA ROCHA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA PEREIRA ROCHA
DATA : 27/11/2025
HORA: 09:00
LOCAL: Departamento de Genética
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO DA INTERAÇÃO DE HELICASES DO TIPO DEAD-BOX DE Leishmania infantum COM DOIS COMPLEXOS DO TIPO eIF4F DE INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO

PALAVRAS-CHAVES:

Tripanosomatídeos; RNA helicase; complexo EIF4F; regulação gênica; imunoprecipitação; espectrometria de massas

PÁGINAS: 93
RESUMO:

Os protozoários dos gêneros Leishmania e Trypanosoma, da família Trypanosomatidae, são responsáveis por doenças negligenciadas de grande impacto global. Esses parasitas também apresentam peculiaridades em seus mecanismos moleculares que os diferenciam de outros eucariotos, especialmente no controle da expressão gênica. Neles, a regulação da expressão gênica ocorre majoritariamente em nível pós-transcricional, especialmente na fase de iniciação da tradução, que envolve complexos do tipo eIF4F. Entre eles, destacam-se os complexos formados por EIF4E4/EIF4G3 e EIF4E3/EIF4G4. Já se sabe que o primeiro também está associado à RNA helicase EIF4AI, enquanto esta e outras helicases, como a DED1-1/HEL67, podem estar associadas ao complexo EIF4E3/EIF4G4. Este estudo teve como objetivo investigar a associação das helicases EIF4AI e DED1-1/HEL67 com o complexo EIF4E3/EIF4G4 em Leishmania infantum, além de identificar novos parceiros funcionais que contribuam para o entendimento do modo de ação destas proteínas. Genes codificando estas helicases foram amplificados por PCR e clonados no vetor pSP-BT1-YneoαIR para transfecção em Leishmania. Em seguida, as proteínas foram superexpressas em L. infantum como fusões ao epítopo HA, permitindo a realização de imunoprecipitação (IP) seguida de espectrometria de massas para identificação de parceiros proteicos. Os resultados indicam que as RNA helicases analisadas são expressas durante a fase exponencial de crescimento de L. infantum e localizam-se predominantemente na fração citoplasmática solúvel. A análise dos polipeptídeos coprecipitados revelou a presença de diferentes fatores de iniciação da tradução e outras proteínas associadas diferencialmente com as helicases investigadas. O EIF4AI apresentou um perfil enriquecido em proteínas ribossomais, de choque térmico, chaperonas e chaperoninas, mas não mostrou uma clara associação com outros fatores de tradução, além do EIF4G4. Por sua vez, a DED1-1/HEL67 coprecipitou com inúmeras proteínas ligadas ou não a tradução, incluindo o próprio EIF4AI, indicando uma possível cooperação entre as duas helicases. Também coprecipitou com o EIF4G4 e com outro homólogo de eIF4G, o EIF4G1, sugerindo uma associação com múltiplos complexos do tipo eIF4F, mas não com o EIF4E4/EIF4G3. Esses achados reforçam a existência de funções complementares e especializadas dessas helicases na regulação da tradução e no metabolismo de RNAs, contribuindo para o entendimento da regulação traducional em L. infantum e oferecendo novas perspectivas para a identificação de alvos terapêuticos.·

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ANNA JESSICA DUARTE SILVA
Externo à Instituição - IGOR VASCONCELOS ROCHA - Fiocruz - PE
Interna - 2304977 - JAQUELINE DE AZEVEDO SILVA