Banca de QUALIFICAÇÃO: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA PEREIRA ROCHA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: MARIA EDUARDA DE OLIVEIRA PEREIRA ROCHA
DATA : 23/04/2025
LOCAL: Videochamada
TÍTULO:

CARACTERIZAÇÃO DA INTERAÇÃO DE HELICASES DO TIPO DEAD-BOX DE LEISHMANIA INFANTUM COM COMPLEXOS DO TIPO eIF4F DE INICIAÇÃO DA TRADUÇÃO

PALAVRAS-CHAVES:

Tripanosomatídeos; RNA helicase; complexo EIF4F; regulação gênica; imunoprecipitação; espectrometria de massas.

PÁGINAS: 71
RESUMO:

Os protozoários dos gêneros Leishmania e Trypanosoma, da família Trypanosomatidae, são responsáveis por doenças negligenciadas de grande impacto global. Nesses parasitas, a regulação da expressão gênica ocorre majoritariamente em nível pós-transcricional, especialmente na fase de iniciação da tradução, que envolve complexos do tipo eIF4F. Entre eles, destacam-se os complexos formados por EIF4E4/EIF4G3 e EIF4E3/EIF4G4. O primeiro está associado à RNA helicase EIF4AI, enquanto outras helicases, como HEL67, mostra-se associada ao complexo EIF4E3/EIF4G4. Este estudo tem como objetivo investigar a associação das helicases EIF4AI e HEL67 com o complexo LiEIF4E3/LiEIF4G4 em Leishmania infantum, além de identificar novos parceiros funcionais que contribuam para o entendimento da regulação da tradução nesse organismo. As helicases de interesse foram amplificadas por PCR e clonadas nos vetores pSP-BT1-YneoαIR (para expressão em Leishmania) e nos vetores pET21d e pGEX4T3 (para expressão em Escherichia coli). Em seguida, as proteínas foram superexpressas em L. infantum como fusões ao epítopo HA, permitindo a realização de imunoprecipitação (IP) seguida de espectrometria de massas para identificação de complexos. Os resultados demonstraram expressão das helicases por até 48 horas após indução. As proteínas foram detectadas na fração solúvel dos lisados celulares, viabilizando as análises posteriores de IP e espectrometria.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ANNA JESSICA DUARTE SILVA - UFPE
Externo à Instituição - EDEN RIBEIRO FREIRE - Fiocruz - PE
Interna - 2304977 - JAQUELINE DE AZEVEDO SILVA