Banca de DEFESA: CAMILA MARINHO DA SILVA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: CAMILA MARINHO DA SILVA
DATA : 25/02/2025
HORA: 09:00
LOCAL: VideoconferEncia
TÍTULO:

Avaliação das atividades citotóxica, genotóxica e imunomoduladora de um peptídeo racionalmente modificado, bioinspirado em uma α-hairpinina de Cenostigma pyramidale (Tul.) Gagnon & G.P.Lewis.

PALAVRAS-CHAVES:

Peptídeos sintéticos; Design racional; Citogenotoxicidade; Macrófagos; Expressão Gênica

PÁGINAS: 75
RESUMO:

 Os peptídeos antimicrobianos (AMPs) têm se mostrado uma alternativa terapêutica promissora para a indústria farmacêutica no combate de doenças altamente infecciosas. Contudo, peptídeos naturais podem apresentar limitações devido à sua quantidade restrita e, em alguns casos, à citotoxicidade para células normais. Para superar as limitações, têm sido desenvolvidos peptídeos racionalmente modificados (RAMPs), bioinspirados em sequências de AMPs de plantas. No entanto, para serem utilizados como alternativa terapêutica, precisam passar por testes de segurança in vitro para determinar concentrações seguras para o uso. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade citotóxica e genotóxica de um RAMP bioinspirado em um AMP vegetal do tipo α-hairpinina de Cenostigma piramidale (Cp_hp1), bem como avaliar a expressão relativa de genes pró-inflamatórios (TNF-α, IL1-β e IL6) em células normais de macrófagos estimuladas por LPS em tratamento simultâneo de 6 h com o RAMP. Para o presente estudo foi escolhida a linhagem normal de macrófagos RAW 264.7. A atividade citotóxica foi avaliada pelo teste de MTT (24 h). Das sete concentrações seriadas do RAMP testadas (16 a 1024 μg/mL), apenas a mais alta demonstrou atividade citotóxica para RAW 264.7, com viabilidade celular de 65,6%. Posteriormente, para a avaliação da genotoxicidade (24 h), foi realizado o Teste de Micronúcleo com Bloqueio de Citocinese (CBMN) para três concentrações (128, 256 e 512 μg/mL). Destas, apenas a concentração de 512 μg/mL demostrou genotoxicidade para a referida linhagem bem como efeito de citostase.  A avaliação da expressão relativa, por sua vez, foi realizada em três concentrações (64, 128 e 256 μg/mL). Destas, apenas a concentração de 128 μg/mL do RAMP apresentou redução de TNF-α após a exposição das células ao LPS. Nos demais tratamentos, no entanto, foram expressos níveis similares ou maiores de TNF-α, IL1-β e IL6 comparado ao controle com LPS isolado. A concentração de 64 μg/mL na presença do LPS foi considerada similar ao tratamento com LPS, enquanto 256 μg/mL com LPS foi responsável pelo aumento significativo de IL1-β e IL6. Assim, foi observada ausência de citotoxicidade para Cp_hp1 para concentrações até 512 μg/mL, de genotoxicidade até 256 μg/mL, e não houve atividade pró-inflamatória até 128 μg/mL, concentração na qual o tratamento foi responsável por uma diminuição significativa de TNF-α nessa linhagem celular. Portanto, são necessárias outras análises para validar o potencial do RAMP para futura intervenção terapêutica visando à atividade imunomoduladora.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - DÉBORA ELIENAI DE OLIVEIRA MIRANDA
Externa ao Programa - 1257300 - JACIANA DOS SANTOS AGUIAR - nullInterna - 1372392 - NEIDE SANTOS